化学合成DFV-紫杉烷类化合物对未分化甲状腺癌细胞的抗肿瘤作用研究

目的探索化学合成DFV-紫杉烷类化合物对未分化甲状腺癌细胞的抗肿瘤作用及可能机制。方法噻唑蓝(MTT)实验测定DFV-紫杉烷类化合物对肿瘤细胞增殖及细胞活性的影响;紫外分光光度计测定新型紫杉烷类化合物处理后肿瘤细胞的存活情况;克隆形成实验评价新型紫杉烷类化合物对肿瘤细胞增殖能力的敏感性;结晶紫染色计数存活克隆数;流式细胞仪检测新型紫杉烷类化合物对肿瘤细胞周期分布的影响。结果甲状腺癌细胞系8505C和8305C经四种不同的DFV-紫杉烷类化合物处理后,IC_(50)在0.5~5.5 nmol·L^(-1)之间;不同药物处理后,甲状腺癌细胞的增殖能力显著降低(P<0.001);不同浓度的DFV-紫杉烷类化合物可不同程度地抑制甲状腺癌细胞的克隆形成能力(P<0.001);DFV-紫杉烷类化合物可诱导甲状腺癌细胞G_(2)/M期周期阻滞(P<0.001),从而抑制甲状腺癌细胞的生长。结论四种化学合成DFV-紫杉烷类化合物对未分化甲状腺癌细胞具有生长抑制和抗肿瘤作用。

液-质联用研究红豆杉提取物中紫杉烷类化合物

建立了一套利用反相高效液相色谱和大气压化学电离质谱联用技术分析红豆杉提取物中微量紫杉烷类化合物的方法。通过研究已知的10种紫杉烷类化合物的保留时间、质谱特征,初步建立了一个紫杉烷类化合物的数据库,利用这些数据可快速鉴定红豆杉提取物中已知的紫杉烷类化合物,并能够对未知化合物做一定程度的结构分析。这种研究方法同样对其他天然产物特别是微量成分结构分析具有指导作用。

三种红豆杉属植物中紫杉烷类化合物含量的检测与分析

优化色谱条件,利用高效液相对天然生长的南方红豆杉、中国红豆杉和东北红豆杉枝条中的3种紫杉烷类物质含量进行了检测和分析。结果表明:3种红豆杉中,紫杉烷类化合物总含量的高低依次为:东北红豆杉为0.427mg·g-1、南方红豆杉为0.396mg·g-1、中国红豆杉为0.350mg·g-1;紫杉醇含量的高低依次为:南方红豆杉为0.153mg·g-1、东北红豆杉为0.142mg·g-1、中国红豆杉为0.0102mg·g-1。该方法把3种紫杉烷类化合物:10-脱乙酰巴卡亭III(10-deacetyl-baccatinIII)、巴卡亭III(baccatinIII)和紫杉醇(Taxol)置于同一色谱条件下检测,以比较不同种类紫杉烷类化合物的含量,为红豆杉资源的开发和利用奠定了基础。

东北红豆杉中三种紫杉烷类化合物体外抗癌活性研究

目的:通过观察东北红豆杉中三种紫杉烷二萜类化合物2,9-diacetyl-5-cinnamoyl-phototaxicinⅡ(1)、5-acetyltaxuspineW(2)及10-acetyltaxuspineB(3)对人乳腺癌细胞生长的影响,探讨这三种紫杉烷类化合物的抗癌作用及各化合物结构与活性之间的构效关系。方法:以人乳腺癌细胞为研究对象,采用MTT法检测3种紫杉烷类化合物对乳腺癌细胞生长的抑制率。结果:上述三个化合物对乳腺癌细胞均有不同程度的抑制作用,其中2,9-diacetyl-5-cinnamoyl-phototaxicinⅡ(1)及10-acetyltaxuspineB(3)的作用优于5-acetyltaxuspineW(2);前两者有效浓度范围是20μmol/L-100μmol/L,后者的有效浓度为60μmol/L-100μmol/L。结论:从东北红豆杉中得到的三种紫杉烷类化合物2,9-diacetyl-5-cinnamoyl-phototaxicinⅡ(1)、5-acetyltaxuspineW(2)及10-acetyltaxuspineB(3)对人乳腺癌细胞具有较强的体外抗肿瘤活性,侧链肉桂酰基可能是有效基团之一。

东北红豆杉愈伤组织中紫杉烷类化合物的分离与鉴定

目的明确东北红豆杉(Taxus cuspidata)愈伤组织中的化学成分,为开发可持续利用的红豆杉资源提供理论依据。方法采用硅胶柱色谱、制备型高效液相色谱等手段对愈伤组织的正己烷和乙酸乙酯提取物进行分离和纯化;根据化合物的理化性质和波谱数据并结合相关文献对化合物结构进行鉴定。结果从东北红豆杉愈伤组织中分离得到11个紫杉烷类化合物,分别鉴定为tax-uyunnanine C(1)、2α,5α,10β-triacetoxy-14β-propionyloxy-4(20),11-taxadiene(2)、2α,5α,10β-tri-acetoxy-14β-isobutyryloxy-4(20),11-taxadiene(3)、2α,5α,10β-triacetoxy-14β-(2′-methyl)butyrylo-xy-4(20),11-taxadiene(4)、云南红豆杉甲素(yunnanxane,5)、紫杉醇(paclitaxel,6)、taxol C(7)、baccatin VI(8)、1β-deoxybaccatin VI(9)、taxayuntin C(10)、baccatin I(11)。结论化合物9、11为首次从东北红豆杉愈伤组织中分离得到,化合物1-4、8-10尚未在东北红豆杉中发现。

云南红豆杉中的非紫杉烷类化合物

从怒江产云南红豆杉 Taxus yunnanensis中分得 5个非紫杉烷类化合物 :3β- hydroxy- 5 α,8α- epidioxyergosta-6 ,2 2 diene( ) ,β-谷甾醇 (β- sitosterol, ) ,pluviatilol( ) ,α- conidendrin( )和 secoisolariciresinol( )。其中 是首次从红豆杉科植物中得到。我们利用核磁共振波谱与质谱等技术确定了它们的结构。

紫杉烷类化合物研究进展

综述了近年来紫杉烷类在植物化学和药物化学方面的研究进展。着重介绍新的紫杉烷类天然化学成分的分离及其半合成衍生物。

云南红豆杉中紫杉醇和四种紫杉烷类化合物含量

云南红豆杉中紫杉醇和四种紫杉烷类化合物含量项伟张宏杰阮德春孙汉董（云南省林业科学院，昆明６５０２０４）（中国科学院昆明植物研究所，昆明６５０２０４）Ｃｏｎｔｅｎｔｓｏｆｔａｘｏｌａｎｄｏｔｈｅｒ４ｔａｘａｎｅｄｉｔｅｒｐｅｎｏｉｄｓｉｎＴａｘｕｓｙｕ...

7-木糖紫杉烷类化合物合成紫杉醇的新工艺研究

以7-木糖-10-去乙酰基紫杉烷类化合物为原料,通过氧化还原、乙酰化、去乙酰化的三步反应得到含有紫杉醇的混合物;通过柱分离和重结晶分离提纯,得到高纯度紫杉醇.合成的紫杉醇经高效液相色谱(HPLC)、核磁共振氢谱(1H-NMR)、核磁共振碳谱(13 C-NMR)和高分辨质谱(HRMS)等进行了表征和分析确认.此合成工艺路线拓展了化学半合成紫杉醇的原料来源,降低了紫杉醇的生产成本,拓展了紫杉醇的原料来源.

红豆杉紫杉烷类化合物超临界二氧化碳萃取及其抑瘤作用研究

目的:确定探讨超临界二氧化碳萃取(SFE)红豆杉紫杉烷类化合物的最佳工艺条件及抑瘤作用。方法:采用SFE技术提取东北红豆杉紫杉烷类化合物,通过正交实验考察最佳萃取工艺条件,用HPLC测定萃取物中紫杉烷类化合物的含量。并研究紫杉烷类化合物对荷瘤小鼠肿瘤的抑制作用。结果:最佳工艺条件是:萃取温度45℃、萃取时间60min、萃取压力25MPa、乙醇流速0.4ml/min,在此条件下得东北红豆杉紫杉烷类化合物浓度为72.32?g/ml。紫杉烷类化合物能明显抑制小鼠S180生长。结论:采用SFE法提取东北红豆杉紫杉烷类化合物是可行的,东北红豆杉紫杉烷类化合物对小鼠S180有明显抑制作用。

HPLC法对5种红豆杉属植物中紫杉烷类化合物成分的分析

采用快速真空液相层析法(VLC)富集红豆杉属植物中5种主要紫杉烷类化合物,回收率在95%以上。5种红豆杉植物中紫杉烷类化合物含量测定结果显示:加拿大红豆杉(树皮)中10-DABⅢ和9-羟基-13-乙酰基巴卡亭Ⅲ含量较高;东北红豆杉(树皮)中7-木糖紫杉醇和三尖杉宁碱含量较高;而紫杉醇含量在东北红豆杉(树皮)中最高,曼地亚(枝叶,搁置一年)次之;本文首次发现矮紫杉中含有4种紫杉烷类化合物。

东北红豆杉(Taxus cuspidata)中四种紫杉烷类化合物抑制妇科肿瘤细胞增殖活性研究及其作用机制的初步探讨

通过四唑盐(MTT)比色法检测东北红豆杉中四种紫杉烷类化合物对人子宫颈癌细胞、人子宫内膜癌细胞、人卵巢透明癌细胞和人卵巢囊腺癌细胞增殖的影响,不仅探讨了这些化合物作用的构效关系,还初步探讨了其抑制肿瘤细胞增殖的作用机制。结果发现9,10-去乙酰紫杉宁对人子宫颈癌细胞、人子宫内膜癌细胞和人卵巢囊腺癌细胞的增殖均有明显的抑制作用,与紫杉宁和1β-羟基紫杉宁即使在100μmol/L的高浓度下,对五种妇科肿瘤细胞的增殖不显示抑制活性;流式细胞学检查发现9,10-去乙酰紫杉宁作用后的HeLa细胞出现凋亡现象。因此推测:1.C-9,10位的羟基和C-5位的肉桂酰基侧链是该类化合物抑制肿瘤细胞增殖所必需的;2.9,10-去乙酰紫杉宁有可能是通过诱导肿瘤细胞凋亡来实现其抑制HeLa细胞的增殖作用。

新型紫杉烷类化合物Lx2-32c的抗肿瘤作用及机制研究

目的：研究新型紫杉烷类化合物Lx2-32c的抗肿瘤作用及作用机制。方法：体外微管蛋白聚合试验采用比浊法、肿瘤细胞增殖试验采用MTT法、肿瘤细胞周期分析采用流式细胞术、细胞内P53蛋白表达采用Western blot分析法、细胞内α-tubulin的形态观察采用免疫荧光法；体内药效学采用人体肿瘤细胞裸鼠异体移植瘤模型。结果：Lx2-32c在体外对多种人体肿瘤细胞均具有较强的抗增殖活性；在体内明显抑制人胃癌BGC-823、人卵巢癌A2780及人肺腺癌A549肿瘤的生长。作用强度较同剂量的紫杉醇为强。作用机制研究表明，Lx2-32c在体外能明显促进微管蛋白的聚合；使人胃癌细胞（BGC-803、BGC-823）及卵巢癌细胞（A2780）阻滞于有丝分裂期（G2／M），并使细胞出现明显的凋亡形态改变；诱导A2780细胞内P53蛋白表达呈剂量依赖性增高；促进肿瘤细胞α-tubulin聚合并形成稳定的微管束。结论：新型紫杉烷类化合物Lx2-32c在体内外均具有较强的抗肿瘤作用，其机制与促进微管聚合形成稳定的微管束，从而使肿瘤细胞阻滞于G2／M期，并通过P53途径诱导肿瘤细胞凋亡有关。

天然紫杉烷类化合物的氢谱及若干结构的修改建议

本文对已经报道的天然紫杉烷类化合物按照一种新的方法进行分类，并在此基础上研究了这类化合物的氢谱。研究发现Ｉ类骨架和Ⅱ类骨架的化合物在氢谱上有明显的区别，而且有些Ⅱ类骨架的化合物被误定为Ｉ类骨架。根据氢谱的研究对误定的一些化合物提出修改的建议，这些修改建议得到了碳谱的支持。

不同红豆杉属植物中7种紫杉烷类化合物的HPLC检测与分析

开发一种高效、可同时测定7种紫杉烷类化合物含量的高效液相色谱(HPLC)检测方法,对3种红豆杉属植物中7种紫杉烷类化合物的含量进行比较分析。HPLC检测条件为:色谱柱为HiQsil C_(18)色谱柱;流动相为乙腈(A)-水(B);梯度洗脱程序为①0~10 min,30%A,②10~12 min,30%~45%A,③12~25 min,45%A,④25~30 min,42%~45%A,⑤30~40 min,30%~42%A;检测波长为227 nm。对各紫杉烷类化合物成分质量分数和峰面积进行线性回归,并考察不同添加量下7种紫杉烷类化合物的加样回收率。结果表明,东北红豆杉、南方红豆杉、曼地亚红豆杉树皮中紫杉醇含量分别为0.234、0.043、0.167 mg/g,三尖杉宁碱含量分别为0.092、0.034、0.053 mg/g,10-去乙酰基巴卡亭含量分别为0.376、0.158、0.063 mg/g,10-去乙酰基紫杉醇含量分别为0.157、0.113、0.126 mg/g,巴卡亭Ⅲ含量分别为0.395、0.116、0.074 mg/g,7-表-10-去乙酰基紫杉醇含量分别为0.053、0.027、0.033 mg/g,7-木糖-10-去乙酰基紫杉醇量分别为0.266、0.564、0.315 mg/g。东北红豆杉中紫杉烷类化合物含量最多,其次是南方红豆杉,在曼地亚红豆杉中含量最低。7种紫杉烷类化合物在所测定的线性范围内均具有良好的线性关系,加样回收率试验结果表明该方法回收率较高。应用建立的HPLC分析方法可同时测定红豆杉属植物中7种紫杉烷类化合物的含量,该研究为红豆杉属植物的质量控制、种源选育及资源开发提供了依据。

云南红豆杉中紫杉烷类化合物的提取工艺优化

以云南红豆杉树皮为原料,采用纤维素酶法提取其中的紫杉烷类化合物。以酶处理时间、酶用量、酶处理温度、料液比为考察因素,以紫杉烷类化合物得率为考核指标,通过单因素实验和正交实验对提取工艺进行了优化。结果表明,最佳工艺条件为:酶处理时间1.0h、酶用量0.6%、酶处理温度45℃、料液比1∶16(g∶mL),在此条件下,紫杉烷类化合物的得率为0.898%。该提取工艺操作简单,提取条件温和、稳定。

紫杉烷类化合物Lx2-32c对乳腺癌耐药细胞生长抑制作用的研究

紫杉醇在临床治疗中取得了令人瞩目的成功，但其耐药现象的出现，极大限制了其临床应用，并最终导致化疗失败。本研究旨在考察一种新型紫杉烷类衍生物Lx2—32c对乳腺癌耐药细胞的生长抑制作用，