当归多糖对K562细胞增殖抑制及定向红系细胞分化的实验研究

目的:研究当归多糖(Angelica polysaccharide,APS)对人红白血病细胞株(K562)增殖抑制及定向红系细胞分化的影响。方法:采用细胞体外培养技术、MTT法、台盼蓝拒染法与流式细胞术检测APS对K562细胞增殖的影响。光镜观察细胞形态变化;联苯胺染色与分光光度法检测经APS诱导后K562细胞向红系分化的特征和血红蛋白含量的变化。结果:APS对K562细胞的增殖有明显的抑制作用,抑制强度与APS的剂量和作用时间密切相关;经APS诱导后K562细胞的联苯胺染色阳性率增高,合成血红蛋白的量提高。结论:APS在体外对K562细胞有明显的增殖抑制及诱导其向红系细胞分化的作用。

白细胞介素－1对粒系细胞和红系细胞的正负调节作用

应用重组人白细胞介素－１β（γｈＩＬ－１β）对小鼠骨髓和外周血粒系细胞与红系细胞作用的研究表明：ＩＬ－１单剂量腹腔注射后ｄ７红系造血细胞明显减少，网织红细胞在ｄ８显著下降。５～１０万Ｕ·ｋｇ－１剂量范围内ＩＬ－１促进粒系细胞的增殖和分化成熟。应用流式细胞仪对骨髓细胞周期分析显示骨髓大体积细胞在注射ＩＬ－１后ｄ３Ｓ期细胞明显增多。我们的结果表明ＩＬ－１抑制红系造血细胞的分化增殖，在适当的剂量范围内促进粒系细胞的增殖和分化成熟。其作用的分子基础是诱导造血细胞的细胞周期变化。

一种具有刺激红系细胞集落生成的螺旋藻（Spirulina platensis）蛋白

从螺旋藻体中通过ＤＥＡＥ纤维素层析、硫酸铵分部沉淀和葡聚糖Ｇ７５凝胶过滤得到一种具有离体情况下刺激红系细胞集落生成的功能蛋白质．ＳＤＳ—ＰＡＧＥ测分子量为１５０００道尔顿，等电点为４．８，含有藻蓝胆素．该蛋白命名为螺旋藻１５０００蛋白（Ｓｐｉｒｕｌｉａｐｌａｔｅｎｓｉｓ１５０００，ＳＰ—１５０００）．

四君子汤对机体红系细胞造血功能的补益作用

红细胞生成素(EPO)能特异性刺激骨髓红系细胞的分化增殖和成熟。血清 EPO 来源于肾脏。脾条件培养液(SCM)中含有刺激红系祖细胞分化增殖的生长因子。本研究观察四君子汤对正常小鼠、正常和血虚大鼠血清 EPO 水平,及其 SCM 中红细胞生成素样(EPO 样)生长因子产生的影响,探讨该方剂对红系细胞造血功能的补益作用机理。材料和方法1 动物 IcR 小鼠随机分组,对照组10只,体重(30.56±0.94)g;实验组10只,体重(30.32±0.78)g。Wistar 大鼠随机分组,正常对照组8只,体重(218.00±8.45)g;血虚模型对照组8只,体重(162.50±12.54)g,实验组8只,体重(164.50±22.68)g。

边缘型维生素A缺乏对大鼠红系细胞膜N糖链的影响

为研究边缘型维生素Ａ缺乏（ＭＶＡＤ）对大鼠红系细胞膜Ｎ连接型糖链（Ｎ糖链）的影响，采用系列凝集素柱层析法，并配合外切糖苷酶，研究ＭＶＡＤ对红系细胞分化过程中细胞膜Ｎ糖链的影响，结果显示，ＭＶＡＤ引起大鼠红系细胞膜Ｎ糖链合成减少，复杂型糖链下降，高甘露糖型及杂合型糖链上升；天线数无变化；复杂型糖链中不含分叉型Ｎ乙酰氨基葡萄糖（Ｂ－Ｇｎ）及核心岩藻糖（Ｃ－Ｆｕｃ）组分下降，含Ｂ－Ｇｎ或Ｃ－Ｆｕｃ或同时含Ｂ－Ｇｎ和Ｃ－Ｆｕｃ组分增加，提示ＭＶＡＤ减少Ｎ糖链合成，阻碍糖链向成熟方向转化，使Ｎ糖链趋于较不成熟和分化较差，是细胞分化障碍的标志，它可能与细胞受体功能有关。

人参皂甙对中分子物质骨髓红系细胞毒性作用的影响

目的探讨人参皂甙对中分子物质 (MiddleMolecularSubstance,MMS)抑制骨髓红系细胞增殖 ,破坏红系细胞结构作用的影响。方法在正常骨髓红系细胞体外培养体系中加入MMSⅢ ,建立病理模型 ,分别加入人参皂甙、红细胞生成素 (Epo)、Epo+人参皂甙 ,观察不同处理方式对细胞DNA合成及细胞形态的影响。结果无Epo存在的情况下 ,人参皂甙对受MMSⅢ抑制的骨髓红系细胞3H TdR掺入量无明显增加 ;有Epo存在的条件下 ,人参皂甙可显著增加受MMSⅢ抑制的骨髓红系细胞3H TdR掺入量 (P <0 .0 1 ) ;人参皂甙对MMSⅢ导致的骨髓红系细胞肿胀和溶解有明显缓解作用。

人胚胎干细胞来源红系细胞膜蛋白表达的研究

目的探讨人胚胎干细胞(h ESCs)来源红系细胞在发育过程中其膜蛋白,包括膜表型分子、膜骨架蛋白和跨膜蛋白的表达情况。方法 h ESCs与小鼠主动脉-性腺-中肾(m AGM-S3)基质细胞共培养产生造血干祖细胞(CD34+CD45+)和GPA+细胞,挑取共培养12 d的细胞,同时磁珠分选人脐血中的CD34^+细胞,在多种特定细胞因子SCF、IL-6、IL-3、FLT3-L、TPO、EPO等诱导下,分别进行集落培养12-14 d产生红系爆发式集落形成单位(BFU-E),运用流式细胞术(FACs)、qRT-PCR和免疫荧光染色等方法检测并比较hESCs和人脐血CD34^+细胞2种来源的红系细胞膜蛋白的表达情况,并以后者作为对照组。结果 hESCs来源BFU-E的膜蛋白的表达趋势与对照组相近:其膜骨架蛋白和跨膜蛋白的基因,如SPTA、SPTB、ANK1、EPB41等基因转录水平都在逐渐增强,而一些膜蛋白如黏附分子CD49d、CD29、CD71等的表达逐渐降低,CD47基本不表达;带3蛋白(Band 3)表达量较高且与成体型血红蛋白β-globin的表达呈正相关。结论在hESCs向红系诱导生成过程中,一些膜表型分子表达在逐渐降低,而膜蛋白表达逐渐增强。

纯红系细胞白血病(FAB分型的AML-M6b)——附1例报告

纯红系细胞白血病过去称为急性红血病、DiGuglielmo综合征早期型。本病少见,约占急性白血病的0.8%,近年来这一亚型白血病在概念和诊断标准上都有了一些新的变化。现报道我们发现的一例病例,并就该病当前的进展作一讨论。1病例报告患者男,47岁,纳差伴乏力半个月。查体:贫血貌,肝、脾和浅表淋巴结未触及肿大;血常规检查血红蛋白62g/L、红细胞2.17×1012/L、MCV 89.2fl、MCH28.6pg、MCHC 320g/L、白细胞6.0×109/L、幼粒细胞2%。有核红细胞34个/100个白细胞,血小板52×109/L;骨髓涂片:有核红细胞异常增生,幼红细胞占有核细胞的88.5%。

红系细胞——基因表达调控的一种有用材料

细胞分化及分化过程中基因表达调控研究是当代生物学、医学研究的课题之一.红系细胞作为这项研究中最常用的材料,已引起研究人员的日益重视.《红系细胞—基因表达调控的一种有用材料》就这方面的研究情况作了介绍.

地塞米松诱导红系细胞凋亡的观察

以ＦＶＡ病毒诱导ＢＡＬＢ／ｃ小鼠脾细胞形成的红系细胞（ｅｒｙｔｈｒｏｉｄｃｅｌ）为研究对象，在红系细胞凋亡抑制剂——红细胞生成素（ＥＰＯ）存在情况下，观察了地塞米松（Ｄｅｘ）对上述细胞凋亡的诱导作用。结果表明，在一定浓度范围内，随着Ｄｅｘ作用时间的延长，细胞逐步凋亡并出现特有的ＤＮＡ梯形（ＤＮＡｌａｄｄｅｒ），而且其ＤＮＡ断裂程度与Ｄｅｘ的作用浓度呈正相关。透射电镜的结果证实，经最适浓度（５×１０－５ｍｏｌ／Ｌ）Ｄｅｘ处理后，红系细胞出现核固缩，染色质凝聚，核周隙扩大，核破裂，胞浆近膜处出现空泡以及细胞破碎等程度不同的细胞凋亡特征。说明Ｄｅｘ可拮抗ＥＰＯ的作用。

白细胞减少伴骨髓粒系及红系细胞巨幼样改变不典型巨幼贫血一例

巨幼红细胞贫血（简称巨幼贫）是由于叶酸和／或维生素B12缺乏，细胞DNA合成障碍引起骨髓和外周血细胞异常的一种大细胞性贫血，其临床表现不典型、无特异性。尤其老年人，多伴有高血压、糖尿病、冠心病等疾病，起病隐匿，

三才注射液对小鼠红系细胞的影响

目的 :探讨三才封髓丹对小鼠红系细胞造血的作用机理。方法 :通过应用三才注射液对贫血及正常小鼠外周血的Hb、RBC、网织红细胞 (Ret)、红系分裂指数、骨髓有核细胞(BMC)进行测定及采用红系造血祖细胞 (burstformingunit erythroid ,BFU E ;colonyformingunit erythroid ,CFU E)的培养方法 ,观察三才封髓丹的造血作用。 结果 :三才封髓丹能促进贫血小鼠的Hb、RBC、Ret、红系分裂指数、BMC的增加 ,在脾细胞或腹腔巨噬细胞条件下 ,能促进BFU E及CFU E的增殖。结论 :三才封髓丹可能是通过激活红系造血调控因子而促进造血功能。

红系细胞发育相关miR-196b的靶基因预测及意义

目的预测红系细胞发育相关miR-196b的靶基因,并探讨其作用机制。方法应用miRbase数据库查找多物种已知的miR-196b成熟序列,比对后分析其在多物种间的保守性。应用miRanda、miRDB、Targetscan7.1、PITA和miRWalk数据库对miR-196b的靶基因进行预测,筛选重复率较高的靶基因。应用Cytoscape3.3.0和KEGG对重复率较高的靶基因进行GO分类富集分析和信号通路富集分析。查阅文献,再次筛选与红系细胞发育相关的靶基因,采用Targetscan7.1和RNA22分析其与miR-196b的结合情况。结果 22个物种具有miR-196b成熟序列,序列比对发现miR-196b在多物种间高度保守。靶基因预测结果显示,共得到5 004个miR-196b的靶基因,其中重复率较高的靶基因有302个。GO分类富集分析结果显示,miR-196b靶基因在生物学过程显著富集于发育过程、细胞过程和定位等,在分子功能显著富集于蛋白结合和物质转运等,在细胞组分显著富集于细胞突起和细胞器膜等(P均<0.05)。结合信号通路富集分析结果,筛选出43个与红系细胞发育相关miR-196b的靶基因,其信号通路富集于Ras信号通路、c AMP信号通路和PI3K-Akt信号通路等(P均<0.05)。结合文献,最终筛选出与红系细胞发育相关的miR-196b靶基因有5个,分别为GATA1、Cdkn1b、Pld1、Cdh1和Ntrk2,其中GATA1、Cdkn1b和Cdh1可与miR-196b直接结合。结论红系细胞发育相关miR-196b的靶基因可能为GATA1、Cdkn1b、Pld1、Cdh1和Ntrk2;miR-196b可能通过对上述靶基因的直接或间接作用激活相应信号通路,在红系细胞的发育过程中发挥生物学作用。

PI3K/Akt信号通路调节红系细胞生成的研究进展

磷脂酰肌醇3-激酶（phosphoinositide 3-kinase,PI3K）家族是一类特异性催化磷酯酰肌醇脂物质的激酶,具有丝氨酸/苏氨酸激酶的活性,也具有磷脂酞肌醇激酶的活性,广泛存在于细胞中,通过激素受体、跨膜酪氨酸激酶受体和各种细胞因子应答各种细胞内、外信息,并调控细胞生长、增殖、分化、凋亡等。

沙利度胺对人红系细胞γ珠蛋白基因表达的作用及相关机制研究

目的:研究沙利度胺对人红系细胞γ珠蛋白基因表达的作用及相关调控机制。方法:采用一步液体培养法培养人红系细胞,以不同浓度沙利度胺(50 μmol/L、100 μmol/L、200 μmol/L、300 μmol/L)、100 μmol/L羟基脲(阳性对照)分别作用于人红系细胞24 h、48 h、72 h、96 h,并设无任何干预的人红系细胞为空白对照组。采用实时荧光定量PCR(qPCR)法检测γ珠蛋白基因及转录因子BCL11A、KLF1、KLF2、GATA1基因的表达水平,Western blotting法检测γ珠蛋白的表达量。结果:作用于人红系细胞72 h后,100 μmol/L、200 μmol/L、300 μmol/L沙利度胺组γ珠蛋白基因相对表达量高于空白对照组,200 μmol/L、300 μmol/L沙利度胺组及阳性对照组γ珠蛋白表达量明显高于空白对照组(均 P <0.05);与空白对照组比较,200 μmol/L沙利度胺组BCL11A、KLF1基因表达明显下降,阳性对照组BCL11A基因表达下降,KLF2基因表达升高( P <0.05)。结论:沙利度胺能诱导体外人红系细胞γ珠蛋白基因表达,增加γ珠蛋白的生成,BCL11A、KLF1的下调可能是沙利度胺诱导γ珠蛋白基因表达的作用机制之一。

哺乳类红系细胞终末分化的调控

红系细胞终末分化是指红系定向前体细胞按一定程序逐步分化为成熟红细胞的过程。本文就调控该过程的有关因素(包括细胞因子和转录因子)及其作用进行综述。

利用转录组学数据研究健康人骨髓红系细胞基因表达的差异

目的分析骨髓红系细胞的转录组数据,筛选出差异表达基因并对功能基因进行挖掘和分析,以期为红细胞成熟分化的分子机制提供理论依据。方法从TCGA数据库下载骨髓红系细胞转录组测序数据,对测序数据进行de novo拼接和功能注释;筛选出差异表达基因及在COG、GO、KEGG数据库中进行比对注释;基于Swiss-Prot功能注释结果,分析骨髓红系细胞分化成熟相关基因的功能及表达量变化。结果骨髓原红细胞和幼红细胞转录组样本中,共有5273个差异表达基因注释到Swiss-Prot数据库上,1993个差异表达基因具有详细的COG分类功能注释,5161个差异表达基因在GO数据库具有功能注释,2001个差异表达基因被注释到286条KEGG Pathway中。在筛选差异表达基因中,SDC2、LGALS2、MAFB、HMOX1在骨髓红系细胞中表达升高,ST6GAL2、CD34、FREM1、PKLR在骨髓红系细胞中表达降低。结论本研究提供了全面的骨髓红系细胞转录组信息,筛选出了一批在骨髓红系细胞分化成熟过程中具有重要功能的基因序列,如MAFB、HMOX1、PKLR、CD34等,为骨髓红系细胞分化成熟的调控机制研究提供了参考数据。

相应于人白介素-1β的163-171小肽对粒系和红系细胞的作用

相应于人白介素－1β分子163－171小肽（100μg／kg，ip）单次给药能引起骨髓系细胞的轻度增加，但对骨髓红系细胞、外周血网织红细胞以及骨髓粒系细胞与红系细胞的比值（M／E）无影响．这一作用不同于IL－1β促进粒系细胞增殖及抑制红系细胞增殖的作用，提示163－171小肽比IL－1可能具有更好的应用价值．

透明质酸水凝胶三维培养促进人胚胎干细胞向红系细胞诱导分化

目的探讨采用透明质酸材料的三维培养方法将人胚胎干细胞(h ESCs)来源造血干/祖细胞向红系细胞诱导分化的效果。方法将hESCs与小鼠主动脉-性腺-中肾基质细胞(AGM-S3)共培养(37℃、5%CO_2)12 d的细胞(1.0×10~6)分别种植进海藻酸钠水凝胶、胶原蛋白水凝胶、透明质酸水凝胶内,并以悬浮法培养h ESCs作对照。以流式细胞仪检测细胞表面抗原表达,比较不同材料建立的三维培养的优劣,优化红系诱导分化的三维培养体系。结果海藻酸钠组内细胞培养10 d的GPA^+细胞为2.3%,GPA^+CD36+细胞仅为0.9%而悬浮培养分别为15.8%和6.1%。胶原蛋白组内细胞培养10 d的GPA^+细胞为11.1%,GPA^+CD36+细胞为5.2%,而悬浮培养分别为35.7%和27.7%。透明质酸组内红系细胞GPA^+细胞量和比率分别为2.06×105个和19.6%,而悬浮培养的红系细胞GPA^+细胞量和比率分别为1.62×10~5个和15.7%,透明质酸组是悬浮培养的1.27倍,其中悬浮培养GPA^+CD36-为9.7%,而透明质酸水凝胶为GPA^+CD36-为13.1%。结论与悬浮培养相比,海藻酸钠水凝胶和胶原蛋白水凝胶未表现出明显的扩增红系细胞的效果。透明质酸凝胶建立的三维培养方法利于红系细胞生长,该培养方法诱导分化hESCs得到的红系细胞成熟度提高。

低剂量羟基脲和丁酸钠联合应用对人红系细胞珠蛋白基因表达的影响

目的探讨低剂量羟基脲和丁酸钠联合应用对人红系细胞7种珠蛋白基因(ζ,α,ε,Gγ,Aγ,δ,β)mRNA表达的影响。方法以二步液体培养法培养的人红系祖细胞为体外模型,用台盼蓝拒染活细胞计数观察HU、丁酸钠单独或联合用药后对细胞生长的抑制作用;用RT-PCR比较用药前后7种珠蛋白基因mRNA的变化。结果低剂量联药组的细胞生长抑制率(26.44%)小于羟基脲和丁酸钠常规剂量单药组的抑制率(28.56%和38.80%)(P<0.05)。与未用药组(0.653±0.092和0.515±0.048)相比,联药组Gγ-和Aγ-mRNA的表达分别上调为1.203±0.018和0.915±0.088,差异有显著性(P<0.05);与羟基脲(1.305±0.016和0.956±0.029)、丁酸钠(1.193±0.070和0.883±0.012)常规剂量单药组之间的差异无显著性(P>0.05)。不同浓度药物对ζ,α,ε,δ和β-mRNA的诱导作用与各自未用药组之间的差异无显著性(P>0.05)。结论羟基脲和丁酸钠低剂量联合用药可上调红系细胞γ-珠蛋白基因的表达,尤其增加Gγ-mRNA的转录,且减轻了对细胞生长的抑制,而对ζ,α,ε,δ和β-珠蛋白基因无明显诱导作用。