发酵降低大豆组织蛋白豆腥味的复合菌株筛选

采用顶空固相微萃取-气相色谱-质谱联用技术并结合风味活度值和感官评价,比较了生香酵母、活性干酵母、植物乳杆菌和肉葡萄球菌对大豆组织蛋白(textured soybean protein,TSP)豆腥味的降低效果,筛选出可有效降低豆腥味的2种菌株,并研究其复配质量比和添加方式。结果表明,4种菌对大豆组织蛋白豆腥味均有一定的消减效果,其中活性干酵母的降腥效果最明显,其发酵TSP中豆腥味物质含量减少了70%;肉葡萄球菌的增香作用最大,其发酵TSP中良好风味物质的含量增加了865.41%。选择活性干酵母作为降腥菌、肉葡萄球菌作为增香菌,二者复配适宜的的质量比为10∶1,添加方式为先加肉葡萄球菌于20℃发酵12 h后加活性干酵母于该温度下发酵20 h。

谷氨酰胺转氨酶对无麸质高水分组织蛋白品质的影响

为了提高无麸质高水分组织蛋白的品质特性,本研究将不同梯度含量的谷氨酰胺转氨酶加入大米蛋白与玉米醇溶蛋白混料中进行挤压实验以进行品质改善,并对组织蛋白进行理化特性的测定与分析。高水分组织蛋白中水分的主要存在形式是不易流动水,低场核磁共振结果表明,谷氨酰胺转氨酶的添加可以促进产品中的结合水转换为不易流动水;随着酶添加量增加,储能模量与损耗模量增大,蛋白结构更趋于稳定。组织蛋白的持水性能与持油性能得到改善,硬度及咀嚼性显著增高(P<0.05),组织化度呈现先增高后降低的趋势,且酶质量分数为0.5%时,产品组织化度达到最大值1.58。谷氨酰胺转氨酶可以显著影响高水分组织蛋白的品质,添加质量分数0.2%~0.5%的谷氨酰胺转氨酶能促进产品形成丰富的纤维结构,使产品具有更好的品质。

组织蛋白酶L对脊髓损伤后小胶质细胞极化的影响研究

目的从小鼠小胶质细胞在脊髓损伤前后的表型变化入手,寻找通过调控小胶质细胞极化从而影响脊髓功能的基因。方法利用基因表达综合数据库(gene expression omnibus,GEO)的GSE172167数据集,分析小鼠在脊髓损伤前后的脊髓组织单细胞测序数据,采用主成分分析(principal component analysis,PCA)和一致流形近似与投影t-分布随机邻域嵌入(t-distributed stochastic neighbor embedding,t-SNE)降维,获得10个亚群细胞,并筛选出脊髓损伤后小胶质细胞中高表达的差异基因。2023年2月至2023年4月采用BV2细胞和C57BL/6小鼠进行前瞻性研究,验证组织蛋白酶L(cathepsin-L,CTSL)的功能和作用机制。首先将BV2细胞分为7组:对照组,脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)组,白细胞介素(interleukin,IL)-4组,阴性对照(NC)-shRNA组,敲低(sh)-CTSL组,NC-过表达(OE)组,OE-CTSL组。动物模型分为5组:假手术(sham)组,脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)组,sh-CTSL组,OE-CTSL组,空白组。实时荧光定量聚合酶链反应(quantitative polymerase chain reaction,qPCR)和蛋白质印迹法(western blot,WB)检测CTSL的mRNA和蛋白水平,qPCR检测肿瘤坏死因子(tumour necrosis factor,TNF)-α和IL-1β。流式细胞术检测M1型小胶质细胞(CD86+/CD80+)和M2型小胶质细胞(CD163+/CD206+)占比比例。免疫荧光染色检测小鼠脊髓组织中诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)阳性细胞数和Arg-1阳性细胞数。另外,评估5组小鼠在0、1、2、3、4周的运动神经功能(basso-beattie-bresnahan,BBB)评分。结果体外细胞实验中,对照组M1型小胶质细胞比例、IL-1β、TNF-α和M2型小胶质细胞比例均低于LPS组;LPS组M1型小胶质细胞比例、IL-1β和TNF-α高于IL-4组,而M2型小胶质细胞比例则低于IL-4组;sh-CTSL组M1型小胶质细胞比例、IL-1β和TNF-α均低于LPS组和NC-shRNA组,而M2型小胶质细胞比例则高于这两组;OE-CTSL组M1型小胶质细胞比例、IL-1β和TNF-α均高于IL-4组和NC-OE组,而M2型小胶质细胞比例则低于这两组;体内动物实验中,术后3、4周时,sh-CTSL组BBB评分高于SCI组和空白组,OE-CTSL组BBB评分则低于这两组。在脊髓组织中,sham组的M1型小胶质细胞比例、iNOS阳性细胞数、IL-1β、TNF-α、M2型小胶质细胞比例和Arg-1阳性细胞数均低于SCI组和空白组;OE-CTSL组中,M1型小胶质细胞比例、iNOS阳性细胞数、IL-1β、TNF-α高于SCI组和空白组,而M2型小胶质细胞比例和Arg-1阳性细胞数低于SCI组和空白组。sh-CTSL脊髓组织中的M1型小胶质细胞比例、iNOS阳性细胞数、IL-1β和TNF-α低于SCI组和空白组,而M2型小胶质细胞比例和Arg-1阳性细胞数高于SCI组和空白组。以上所有差异均有统计学意义(P<0.05)。结论sh-CTSL能够促进小鼠脊髓M1型小胶质细胞转化为M2型,减轻炎症反应,促进小鼠脊髓损伤修复。

大豆组织蛋白发酵产品的体外消化特性

为探究发酵对大豆组织蛋白产品消化特性的影响,采用乳酸菌对大豆组织蛋白产品进行发酵,研究发酵产品的体外模拟消化行为。体外模拟消化结果表明,在整个消化过程中,发酵产品的蛋白水解度、多肽和氨基酸含量均高于未发酵产品。在肠相发酵结束时,大豆组织蛋白发酵产品蛋白质水解度提高了7.85%,多肽和氨基酸含量分别增加了17.76%和4.74%。观察胃肠消化后发酵产品的蛋白降解情况,发现其在20~35 kDa附近的条带明显减弱,并且在11~17 kDa的条带丰度增加,同时,尺寸排阻色谱结果表明,发酵产品经过胃肠消化后,产生了更多分子量低于10000 Da的物质。综上所述,发酵在一定程度上改变了大豆组织蛋白的蛋白结构,提高了胃肠消化率,使其更易于消化吸收。

高水分大豆组织蛋白的品质特性及营养功能研究进展

从理化性质、微观形貌、质构特性、感官性质以及营养组分和体外消化情况方面对高水分大豆组织蛋白的品质特性和营养功能进行详细阐述,旨在促进高水分大豆组织蛋白的品质改善,为高品质的植物肉产品生产提供理论依据。

蠋蝽组织蛋白酶基因鉴定及表达特征分析

组织蛋白酶在昆虫的消化、发育与变态中起重要作用,是捕食性蝽唾液(毒液)中普遍存在的成分,但其生理功能尚不清楚。本文利用同源比对的方法从蠋蝽Arma custos基因组中鉴定出组织蛋白酶基因,使用生物信息学软件分析其序列特征和进化关系,采用RT-PCR技术分析它们在成虫不同组织中的表达特征。结果表明,蠋蝽基因组中有37个组织蛋白酶基因,根据结构域分为组织蛋白酶B(AcCAB1-4)、组织蛋白酶D(AcCAD1-13)和组织蛋白酶L(AcCAL1-20)。多序列比对及结构域预测结果表明,组织蛋白酶B和组织蛋白酶L均含有Peptidase_C1结构域、保守的酶催化位点(谷氨酰胺、半胱氨酸、组氨酸和天冬酰胺)以及1个由半胱氨酸残基(C)和组氨酸残基(H)构成的催化二联体,而组织蛋白酶D中存在保守Asp结构域和2个保守的酶催化位点(天冬氨酸)。RT-PCR结果显示,除AcCAL7和AcCAB2外,其余33个组织蛋白酶基因均在肠道中表达,且绝大多数表现特异性或高表达。AcCAL2、AcCAL5-7、AcCAL9等20个组织蛋白酶基因在唾液腺中表达,且AcCAL2仅在主腺后叶和副腺表达,AcCAL7仅在主腺前叶表达,AcCAD13仅在主腺后叶表达,AcCAB2仅在主腺前叶和主腺后叶表达。这些结果表明,多数组织蛋白酶基因在蠋蝽口外消化和肠道消化中发挥消化功能。

组织蛋白酶与骨密度的因果关系:双向孟德尔随机化分析

背景:既往研究表明,中老年人体内组织蛋白酶K水平可通过影响骨密度来干预骨质疏松的发生和发展,但组织蛋白酶家族与其他人群骨密度之间是否存在因果关系仍未知。目的:探讨组织蛋白酶与骨密度的因果关系。方法:从IEU Open GWAS数据库提取与8种组织蛋白酶相关的遗传位点作为工具变量,以5个年龄段人群的骨密度作为结局。通过双向孟德尔随机化分析,评估组织蛋白酶与骨密度的因果关系。使用Cochran’s Q检验评估遗传工具变量的异质性,使用MR-Egger截距检验评估多效性,使用留一法评估作为工具变量的单核苷酸多态性对暴露和结局因果关系影响的敏感性。结果与结论:①正向孟德尔随机化的逆方差加权法结果显示,组织蛋白酶H与>45岁且≤60岁人群的骨密度呈负相关[OR(95%CI)=0.965(0.94-0.99),P=0.04],组织蛋白酶Z与>30岁且≤45岁人群的骨密度呈负相关[OR(95%CI)=1.06(1.00-1.11),P=0.03];②敏感性分析结果显示因果关系稳定,MR-Egger截距分析未检测到潜在的水平多效性;③反向孟德尔随机化结果显示,骨密度对组织蛋白酶无显著反向作用;④上述结果证实,组织蛋白酶对部分年龄段人群骨密度会造成影响,可能会增加骨质疏松症的发病风险,应给予更多关注。

非小细胞肺癌患者组织MutS同种组织蛋白2、O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶表达分析

目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC)患者癌组织MutS同种组织蛋白2(MSH2)、O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(MGMT)表达情况及与临床病理参数、预后的关系。方法2021年7月至2022年7月我院收治的96例NSCLC患者,取其手术切除的NSCLC组织标本(NSCLC组)及距癌边缘3 cm处的癌旁正常组织(对照组)。检测两组MSH2和MGMT的表达水平,分析MSH2和MGMT表达水平与患者临床病理参数及预后的关系。结果与对照组比较,NSCLC组MSH2和MGMT阳性率更低(P<0.05);MSH2阳性与患者分化程度有关(P<0.05);MGMT阳性与患者吸烟史和分化程度有关(P<0.05);与MSH2和MGMT阴性患者比较,阳性患者1年生存率均更高(P<0.05)。结论MSH2和MGMT均在NSCLC组织中存在较低表达,其表达水平与临床病理参数、预后密切相关。

组织蛋白酶D在急性ST段抬高型心肌梗死后心血管事件中的作用

目的探讨全血组织蛋白酶D(CTSD)表达量在急性ST段抬高型心肌梗死(STEMI)患者心肌损伤及经皮冠状动脉介入术(PCI)后6个月心血管事件中的作用。方法选取2022年11月至2023年7月沈阳医学院附属第二医院心血管内科收治的96例STEMI患者作为STEMI组,另选20例同期住院的冠状动脉造影正常患者作为对照组。2组均抽取冠状动脉血,采用实时定量PCR检测动脉血CTSD的相对表达水平,并进行比较。再根据CTSD表达量三分位数将STEMI组分为低、中、高CTSD组,随访PCI治疗后6个月内主要不良心血管事件(MACE)。结果STEMI组动脉全血CTSD表达量[1.31(1.03~1.75)]高于对照组[1.02(0.67~1.48)],差异有统计学意义(P<0.05)。低、中、高CTSD组患者血小板计数、肌钙蛋白T、N末端B型利尿钠肽、高密度脂蛋白胆固醇比较,差异有统计学意义(P<0.05)。低、中、高CTSD组间MACE发生率呈递减趋势,低CTSD组MACE发生率(65%)高于高CTSD组(10%,P<0.05)。受试者操作特征(ROC)曲线分析CTSD预测STEMI患者PCI治疗后6个月内MACE的截断值为1.214,灵敏度为75.0%,特异度为70.8%,ROC曲线下面积为0.765(95%CI:0.658~0.872,P<0.001)。结论STEMI患者全血CTSD表达异常。CTSD可能成为判断STEMI预后的指标及防治STEMI的药物靶点。

肿瘤相关巨噬细胞内Notch⁃1通过抑制组织蛋白酶S过表达影响非小细胞肺癌腺癌侵袭转移的机制研究

目的探讨Notch-1在合并及未合并肝转移非小细胞肺癌腺癌患者肿瘤相关巨噬细胞内的表达情况,并通过体外细胞培养分析其对癌细胞侵袭转移的影响及相关机制。方法收集2021年1月至2022年12月收治的64例非小细胞肺癌腺癌患者标本,并分为未合并肝转移组32例和合并肝转移组32例,利用流式分选法分离CD68+肿瘤相关巨噬细胞,应用Western blot法检测2组CD68+肿瘤相关巨噬细胞Notch-1及相关蛋白表达水平。采用体外培养人单核/巨噬细胞THP-1细胞分别感染Notch-1 NC(阴性对照)和shRNA慢病毒载体后与人非小细胞肺癌A549共培养,应用Western blot法检测THP-1细胞相关蛋白表达情况,Transwell实验及划痕实验检测共培养体系中A549细胞迁移及侵袭能力。结果与未合并肝转移组比较,合并肝转移组CD68+肿瘤相关巨噬细胞内Notch-1表达水平显著降低,并伴随精氨酸酶-1及组织蛋白酶S表达水平显著增高(P<0.05)。与Notch-1 NC组比较,Notch-1 shRNA组THP-1细胞Notch-1表达水平显著降低,并伴随组织蛋白酶S表达水平升高(P<0.05)。与感染Notch-1 shRNA的THP-1细胞共培养后抑制表达Notch-1的A549细胞侵袭和迁移细胞数目明显增多,且细胞划痕距离明显减小(P<0.05)。结论肿瘤相关巨噬细胞内Notch-1蛋白表达具有抑制非小细胞肺癌腺癌细胞侵袭及转移的作用。

桃蚜组织蛋白酶基因CTSB-16D和CTSB-348的克隆、表达谱及对不同环境胁迫的响应

为了探索组织蛋白酶基因CTSB-16D和CTSB-348在桃蚜Myzus persicae(Sulzer)响应高低温和UV-B胁迫中的作用,通过RT-PCR技术克隆了桃蚜CTSB-16D和CTSB-348基因,利用生物信息学方法分析了它们的序列特征;采用实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,RT-qPCR)技术检测了2个基因在桃蚜不同发育阶段的相对表达量及经高温、低温和UV-B胁迫不同时长的无翅成虫中的相对表达量。克隆获得了桃蚜CTSB-16D(GenBank登录号:MZ962352)和CTSB-348(GenBank登录号:MZ962353)基因,序列长度分别为1 096 bp和1 101 bp,开放阅读框(ORF)分别为1 017 bp和1 023 bp,分别编码338个和340个氨基酸,蛋白相对分子量为38.14 kD和37.52 kD,等电点(pI)为5.46和5.99。系统发育分析表明,桃蚜CTSB-16D和CTSB-348均与豌豆蚜Acyrthosiphon pisum(XP_003246386.1、NP_001119608.1) CTSB亲缘关系最近。RT-qPCR分析表明,CTSB-16D和CTSB-348在桃蚜不同发育阶段均有表达,分别在1龄若虫和无翅成虫中的表达量最高。高、低温和UV-B胁迫对CTSB-16D和CTSB-348基因的表达具有明显的诱导作用,且表达量均随时间的延长呈先上升后下降的趋势;4℃胁迫下,CTSB-16D和CTSB-348表达量均在90 min时达到峰值;36℃胁迫下,CTSB-16D和CTSB-348表达量均在30 min时达到峰值;UV-B胁迫下,CTSB-16D和CTSB-348表达量分别在60 min和120 min时达峰值。桃蚜CTSB-16D和CTSB-348基因在不同发育阶段差异表达,且响应温度和UV-B的胁迫,推测两个基因参与桃蚜的生长发育并在桃蚜响应环境胁迫中发挥了重要作用。

中国大鲵组织蛋白酶D基因克隆及其表达特征分析

【目的】明确组织蛋白酶D基因(CTSD)在中国大鲵不同组织中的表达模式及其免疫防御功能,为深入探究大鲵抵抗病原入侵的作用机理提供理论依据。【方法】通过RACE克隆中国大鲵CTSD基因cDNA序列,采用ProtParam、SignalP-5.0、TMHMM 2.0、CELLO、NetPhos 3.1及NetNGlyc 1.0等在线软件进行生物信息学分析,并通过实时荧光定量PCR检测健康中国大鲵不同组织及嗜水气单胞菌感染后的CTSD基因表达情况。【结果】中国大鲵CTSD基因cDNA序列全长1992bp,包括1197bp的开放阅读框(ORF)、136bp的5’端非编码区(5’-UTR)和659bp的3’端非编码区(3’-UTR),共编码398个氨基酸残基。中国大鲵CTSD蛋白相对分子量为43 kD,理论等电点(pI)为6.07,属于酸性稳定疏水性蛋白,主要定位于溶酶体,具有跨膜结构和信号肽,包含1个典型的天冬氨酸蛋白酶结构域和2个天冬氨酸蛋白酶活性位点,以及3个N-糖基化位点(131Asn、222Asn和249Asn)和33个潜在的磷酸化位点。中国大鲵CTSD氨基酸序列与东北小鲵CTSD氨基酸序列的相似性最高,达88.68%;基于CTSD氨基酸序列相似性构建的系统发育进化树也显示中国大鲵与东北小鲵的亲缘关系最近。CTSD基因在健康中国大鲵的肺脏、肌肉、皮肤、肾脏、肝脏、脾脏、心脏、胃、脑和肠道等10个组织中均有表达,且以肺脏、肌肉、肠道和脾脏中的相对表达量较高;嗜水气单胞菌感染后72 h,中国大鲵肾脏和肝脏中的CTSD基因相对表达量极显著升高(P<0.01,下同),分别是对照组的13.88和35.67倍;脾脏和皮肤中的CTSD基因相对表达量显著升高(P<0.05),分别是对照组的5.43和1.74倍;肌肉中的CTSD基因相对表达量则在感染后12 h极显著升高至最高值,是对照组的42.96倍。【结论】中国大鲵CTSD氨基酸序列具有高度的保守性,包含1个典型的天冬氨酸蛋白酶结构域和2个天冬氨酸蛋白酶活性位点;CTSD基因呈组成性表达,可能在中国大鲵抗病原菌入侵的免疫反应中发挥作用。

血清组织蛋白酶L联合ABCD^(3)-I评分对TIA患者短期脑梗死的预测价值研究

目的研究以年龄、血压、临床特征、症状持续时间、糖尿病、双重TIA和影像(age,blood pressure,clinical features,duration,diabetes,double transient ischemic attack,image;ABCD^(3)-I)评分联合血清组织蛋白酶L(cathepsin L,CatL)水平预测TIA患者短期发生脑梗死的价值。方法回顾性连续收集2019年10月—2022年6月西北大学第一医院收治的TIA患者资料,根据发病后90 d是否发生急性脑梗死分为脑梗死组和对照组。比较两组患者的ABCD^(3)-I评分、血清CatL水平及其他临床资料的差异,采用多因素logistic回归分析TI A患者90 d发生脑梗死的独立危险因素,采用ROC曲线分析ABCD^(3)-I评分、血清CatL水平对TIA患者短期发生脑梗死的预测价值。结果共纳入115例TIA患者,脑梗死组22例,对照组93例。脑梗死组的ABCD^(3)-I评分[7.0(6.0~7.0)分vs.5.0(4.5~6.0)分,P<0.001]、血清CatL水平[(6.1±0.9)μg/L vs.(4.8±0.9)μg/L,P<0.001]及LDL-C水平[(3.6±0.5)mmol/L vs.(3.4±0.6)mmol/L,P=0.039]均高于对照组。多因素l ogi sti c回归分析显示,ABCD^(3)-I评分高(OR 4.843,95%CI 2.301~10.193,P<0.001)、血清CatL水平升高(OR 2.099,95%CI 1.332~3.308,P=0.001)是TIA患者发生急性脑梗死的独立危险因素。ROC曲线分析显示,ABCD^(3)-I评分、血清CatL水平预测TIA患者发生急性脑梗死的AUC值分别为0.829(95%CI 0.749~0.909)和0.867(95%CI 0.796~0.938),对应截断值分别为7.0分和5.3μg/L,两者联合预测的AUC值提升至0.911(95%CI 0.848~0.974)。结论ABCD^(3)-I评分联合血清CatL水平对TIA患者短期发生急性脑梗死具有较好的预测价值。

阿尔茨海默病中载脂蛋白E基因型依赖性脑组织蛋白质组特征

目的 探讨阿尔茨海默病(AD)患者脑组织蛋白组是否存在载脂蛋白E(ApoE)基因型依赖性特异性改变。方法 利用2020年宗教团体研究和记忆与老龄化项目尸检脑组织,根据阿尔茨海默病登记协会联盟病理学诊断标准和布拉克分期系统纳入阿尔茨海默病患者和正常对照的背外侧前额皮质的蛋白组学数据,分析不同ApoE基因型携带者的脑内蛋白表达特征。对各组差异表达蛋白再进行基因本体、京都基因与基因组百科全书和Reactome通路富集分析,并进一步对目标蛋白进行受试者操作特征曲线分析,评估所选蛋白对不同ApoE基因型携带者发生AD的预测准确性。结果本研究共纳入93例尸检背外侧前额皮质脑组织。串联质谱标签蛋白组结果显示ApoE4基因型携带者AD与对照组比较,共有22种蛋白质的表达差异有统计学意义,ApoE3基因型携带者AD与对照组比较,共有53种蛋白质的表达差异有统计学意义。不同ApoE基因型携带者的AD患者均表现出细胞黏附分子和氮代谢的改变,但是各自又有其独特的变化特征,ApoE4携带者还表现出胆固醇代谢改变,而ApoE3携带者有补体和凝血级联反应的改变。ApoE4携带者显著变化的22种蛋白的曲线下面积为1,可很好地预测发生AD的风险。结论 不同ApoE基因型患者在AD发病过程中的作用机制有所不同,AD患者可能需要根据其ApoE基因型进行个体化精准治疗。

血清组织蛋白酶S、颗粒蛋白前体及趋化因子配体12对慢性阻塞性肺疾病急性加重的预测价值

目的探讨血清组织蛋白酶S(CTSS)、颗粒蛋白前体(PGRN)及趋化因子配体12(CXCL12)对慢性阻塞性肺疾病(COPD)急性加重的预测价值。方法选择2020年1月至2023年2月铜陵市立医院收治的202例COPD患者为研究对象,根据是否发生急性加重分为急性加重组(n=64)和非急性加重组(n=138),收集2组患者的血清CTSS、PGRN、CXCL12水平及年龄、性别、体质量指数(BMI)、病程、吸烟史、第一秒呼气容积占预计值百分比(FEV1%)、稳定期慢性阻塞性肺疾病评估测试(CAT)评分等临床资料。采用单因素分析比较2组患者各指标的差异,多因素logistic回归分析COPD患者发生急性加重的独立危险因素,Pearson相关分析血清CTSS、PGRN及CXCL12水平与FEV1%和CAT评分的相关性,相对危险度分析不同水平CTSS、PGRN及CXCL12对COPD患者急性加重的影响,受试者操作特征(ROC)曲线评估血清CTSS、PGRN及CXCL12水平对COPD患者急性加重的预测效能。结果单因素分析结果显示,2组患者的年龄、性别、BMI、病程比较差异无统计学意义(P>0.05);2组患者吸烟者占比、FEV1%、CAT评分及血清CTSS、PGRN、CXCL12水平比较差异有统计学意义(P<0.05)。多因素logistic回归分析结果显示,血清CTSS、PGRN及CXCL12水平升高是COPD患者急性加重的危险因素(P<0.05)。不同FEV1%、CAT评分患者血清CTSS、PGRN、CXCL12水平比较差异有统计学意义(P<0.05)。相关性分析显示,血清CTSS、PGRN、CXCL12水平与FEV1%呈负相关,与CAT评分呈正相关(P<0.05)。危险度分析显示,血清CTSS、PGRN、CXCL12高水平COPD患者急性加重的风险分别是低水平患者的2.089倍(95%置信区间:1.341~3.253)、2.294倍(95%置信区间:1.363~3.862)、2.359倍(95%置信区间:1.459~3.815)。ROC曲线分析显示,血清CTSS、PGRN、CXCL12水平单独预测COPD患者急性加重风险的曲线下面积分别为0.780、0.811、0.775,三者联合预测COPD患者急性加重风险的曲线下面积为0.923。结论血清CTSS、PGRN及CXCL12水平是COPD急性加重的危险因素,血清CTSS、PGRN及CXCL12水平异常升高会显著增加COPD急性加重风险,血清CTSS、PGRN及CXCL12水平联合预测COPD急性加重风险的效能较优。

血清组织蛋白酶S、血小板反应蛋白-1与急性心肌梗死患者经皮冠脉介入术后心力衰竭的关系

目的分析血清组织蛋白酶S(Cat S)、血小板反应蛋白-1(TSP-1)与急性心肌梗死(AMI)患者经皮冠脉介入术(PCI)后心力衰竭(HF)发生的关系及其预测价值。方法收集2021年1月至2022年11月期间在阜外华中心血管病医院实施PCI治疗的100例AMI患者为研究对象,将其中PCI后1年内并发HF的28例患者作为HF组(病例组),未并发HF的72例患者为非HF组(对照组)。收集患者一般资料及患者入院时血清Cat S、TSP-1、血脂四项、心肌损伤标志物等实验室指标数据,比较两组一般资料及实验室指标的差异,构建logistic回归模型检验血清Cat S、TSP-1与AMI患者PCI后并发HF的关系,并绘制受试者操作特征(ROC)曲线检验血清Cat S、TSP-1对AMI患者PCI后HF发生的预测价值。结果单因素分析中,HF组患者住院期间使用利尿剂占比高于非HF组,入院时心肌肌钙蛋白I(cTnI)、肌酸激酶同工酶-MB(CK-MB)水平高于非HF组,左心室射血分数(LVEF)低于非HF组,差异有统计学意义(P<0.05);HF组患者入院时的血清Cat S、TSP-1水平均高于非HF组,差异有统计学意义(P<0.05)。多因素logistic回归分析结果显示,血清Cat S、TSP-1水平升高仍然与AMI患者PCI后HF有关系(P<0.05);同时发现cTnI、CK-MB、LVEF是AMI患者PCI后HF发生的影响因素(P<0.05)。血清Cat S、TSP-1水平单独及二者并联联合预测AMI患者PCI后发生HF的ROC曲线下面积均>0.7,均有一定预测效能,且联合预测的ROC曲线下面积值最高。结论血清Cat S、TSP-1异常高表达可增加AMI患者PCI后HF风险,PCI术前检测血清CatS、TSP-1水平对AMI患者PCI后发生HF具有预测作用。

难治性癫痫儿童血浆激肽释放酶、组织蛋白酶B的表达及其临床意义

目的:探讨难治性癫痫儿童血浆激肽释放酶(KLK)、组织蛋白酶B(catB)表达及其临床意义.方法:选取2017年3月至2019年3月河南中医药大学第五临床医学院收治的难治性癫痫患儿43例为研究对象,纳入研究组.选择同期在本院治疗的治疗有效癫痫患儿,同期在本院体检的健康儿童作为对照,分别纳入治疗有效组(n=35)及对照组(n=50).①对3组受试儿血浆KLK、catB,白细胞介素(IL)-6、IL-8、肿瘤坏死因子(TNF)-α水平分别进行统计学分析.②分析研究组患儿血浆KLK、catB水平,分别与其血浆IL-8、IL-6、TNF-α水平的相关关系.③受试者工作特征(ROC)曲线的曲线下面积(AUC),对难治性癫痫的诊断截断值、诊断灵敏度及特异度.④采取多因素非条件Logistic回归分析难治性癫痫临床诊断的独立影响因素.结果:①研究组患儿血浆KLK、catB、IL-6、IL-8、TNF-α水平,均显著高于对照组、治疗有效组,并且差异均有统计学意义(P<0.05).②研究组患儿血浆KLK、catB水平与其IL-6、IL-8、TNF-α水平,均呈正相关关系(r=0.625、0.628、0.657,0.634、0.619、0.664,P<0.05).③血浆KLK、catB水平ROC曲线的AUC分别为0.889、0.856,对难治性癫痫的诊断截断值分别为3.99 U/mL、3.66 U/mL,二者单独诊断难治性癫痫的灵敏度分别为72.10%、72.10%,特异度分别为92.00%、94.00%;二者联合诊断的AUC为0.950,灵敏度为86.00%,特异度为90.70%.④血浆KLK高表达(OR=2.652,95%CI:1.668~4.218,P<0.05),以及catB高表达(OR=2.635,95%CI:1.704~4.075,P<0.05),均是导致患儿发生难治性癫痫的独立危险因素.结论:难治性癫痫儿童血浆KLK、catB水平高表达,对难治性癫痫患儿的临床诊断具有重要参考价值.

老年缺血性脑卒中患者血清PTX3、组织蛋白酶S及炎症因子水平变化和临床意义

目的探讨老年缺血性脑卒中患者血清正五聚蛋白(PTX)3、组织蛋白酶S及炎症因子水平变化和临床意义。方法选取老年缺血性脑卒中患者90例为缺血性脑卒中组,收集同年龄段健康老年人30例为健康对照组。采集空腹肘静脉血,离心收集血清,放射免疫分析法检测PTX3含量,酶联免疫吸附试验检测组织蛋白酶S、肿瘤坏死因子(TNF)-α、C反应蛋白(CRP)、白细胞介素(IL)-1β、淀粉样蛋白(SA)A含量。患者入院时均进行美国国立卫生院脑卒中量表(NIHSS)评分,分为轻度神经功能缺损(<4分)、中度神经功能缺损(4~15分)、重度神经功能缺损(>15分)。结果缺血性脑卒中组血清PTX3、组织蛋白酶S、血清TNF-α、CRP、IL-1β、SAA水平明显高于健康对照组(P<0.01)。神经功能重度缺损患者血清PTX3、组织蛋白酶S水平明显高于中度和轻度损伤者,神经功能中度缺损患者明显高于轻度损伤者(P<0.05)。神经功能重度缺损患者血清TNF-α、CRP、IL-1β、SAA水平明显高于中度和轻度损伤者,神经功能中度缺损明显高于轻度损伤者(P<0.05)。Pearson相关性分析显示,血清PTX3、组织蛋白酶S、TNF-α、CRP、IL-1β、SAA与缺血性脑卒中患者NIHSS评分呈正相关(P<0.01)。受试者工作特征(ROC)曲线分析显示,血清PTX3、组织蛋白酶S、TNF-α、CRP、IL-1β、SAA单独和联合检测对缺血性脑卒中患者神经功能缺损程度具有较高的评估价值(P<0.05);其中联合检测的评估价值最高,特异度、阳性预测值明显高于各指标单独检测。结论老年缺血性脑卒中患者血清PTX3、组织蛋白酶S、TNF-α、CRP、IL-1β、SAA水平升高,且与神经功能缺损程度密切相关,联合检测具有较高的评估价值。

基于组织蛋白酶催化的不冻液冻结中华管鞭虾中肌原纤维蛋白氧化分析

对比分析利用不冻液(-18℃和-30℃)冻结后冻藏与直接置于冰箱(-18℃和-30℃)冻结后冻藏的中华管鞭虾肌原纤维蛋白氧化指标变化以及组织蛋白酶B、H、L活性变化,通过肌原纤维微结构观察,分析酶活性对肌原纤维蛋白水解产生的作用,并探讨其与肌组织结构的相关性。结果表明:采用-18℃和-30℃不冻液冻结的中华管鞭虾的盐溶性蛋白含量(92.7 mg/g和97.8 mg/g)均明显高于-18℃和-30℃冰箱缓冻组(72.40 mg/g和77.90 mg/g);-30℃不冻液组的表面疏水性最低(400.6μg);两种冻结方式下-30℃组Ca^(2+)-ATPase活性均高于-18℃组;总巯基含量变化趋势与Ca^(2+)-ATPase活性变化趋势一致。冻藏前期(0~60 d),低温不冻液冻藏能较好地抑制中华管鞭虾组织蛋白酶活性,使其蛋白结构保持良好;冻藏后期(60~120 d),其对于酶活性的抑制作用减弱。综合以上结果,在一定冻藏期内,不冻液冻结比冰箱冻结能够更好减弱冻藏过程中中华管鞭虾的肌原纤维蛋白的氧化和组织蛋白酶活性,且不冻液的冻结温度越低,冻结速率越高,组织蛋白酶活性越弱,肌原纤维蛋白氧化越少,越有利于肌原纤维蛋白结构的保持。

单味中药及其有效成分组织蛋白酶K抑制剂研究进展

组织蛋白酶K(Cathepsin K,CTSK)属于半胱氨酸蛋白酶,是抗骨质疏松药物研发的重要靶点,在破骨细胞中特异性高表达,对降解骨胶原基质至关重要。与临床常用的抑制骨吸收药物相比,CTSK抑制剂具有在不影响骨形成的情况下有效减少骨吸收的优点。迄今为止,CTSK抑制剂的研发均因安全性不足而失败,原因是对皮肤和血管系统等非骨组织造成副作用。传统中药富含抑制骨吸收的活性物质,一些文献表明中药来源的CTSK抑制剂抗骨质疏松作用明显,且没有明显的不良反应。笔者拟综述近10年中药来源的CTSK抑制剂的研究进展,资料主要来源于中国知网、万方和Web of Science数据库,为开发中药CTSK抑制剂和治疗CTSK相关疾病提供参考。