不育症精液生精细胞凋亡率检测

目的了解精液中生精细胞的状况和生精细胞凋亡率与不育症的关系,并作为评估睾丸功能的指标。方法293例精液标本用瑞-姬染色,油镜下进行生精细胞形态学及凋亡率检出与分析。并采用DNA缺口原位末端标记技术(TUNEL)染色进行对照,确认瑞-姬染色对生精细胞凋亡鉴别的可行性。结果在293例精液中,有生精细胞者273例占93.1%;无生精细胞者20例占6.9%。生精细胞凋亡率随精子数量减少而增加,以无精子症者最高,比生育组高5.8倍(P<0.001)。显示瑞-姬染色的可行性与优越性。结论睾丸生精障碍与生精细胞过度凋亡密切相关,可在精液中检出脱落生精细胞,根据精液生精细胞凋亡率可作为评估睾丸功能的指标之一。

益坤宁对围绝经期大鼠卵巢细胞凋亡率及caspase-3表达的影响

目的:研究中药益坤宁(yikunning,YKN)对围绝经期大鼠卵巢细胞凋亡率及凋亡相关基因caspase-3基因表达的影响,探讨益坤宁治疗围绝经期综合征的作用机理。方法:选用30只自然衰老的围绝经期雌性大鼠,随机分为中药益坤宁实验组、围绝经期对照组和利维爱(livial)对照组,另选10只青年雌性大鼠作为青年对照组。连续灌胃处理4周后,采用原位脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记(TUNEL)法检测大鼠卵巢细胞凋亡率,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白印迹(Western blot)检测大鼠卵巢中caspase-3 mRNA和蛋白表达。结果:益坤宁组大鼠卵巢细胞凋亡率显著低于围绝经期对照组(P<0.01);益坤宁组大鼠卵巢中caspase-3 mRNA和蛋白表达低于围绝经期对照组,高于青年对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:中药益坤宁通过降低围绝经期大鼠卵巢细胞凋亡率,下调卵巢中凋亡相关基因caspase-3的表达,从而延缓卵巢衰老,这可能是其治疗围绝经期综合征的分子机制之一。

细胞凋亡率检测方法的探索

目的探索可用于全面准确评价细胞凋亡率的检测技术。方法选取地塞米松诱导胸腺细胞凋亡模型,用流式细胞术及DNA琼脂糖凝胶电泳等方法对处于不同凋亡阶段的胸腺细胞凋亡率进行检测分析。结果流式细胞分析对于早期凋亡胸腺细胞的检测不仅具有高度灵敏性,而且可有效区分凋亡与坏死细胞,但对于凋亡晚期细胞膜严重受损乃至破碎的细胞,单纯流式细胞仪检测不能有效反映真实凋亡率;借助琼脂糖凝胶电泳法可检测破碎后释放到胸腺组织或培养基内的DNA碎片;当凋亡严重导致大量细胞破碎降解时,对样本进行细胞计数比较亦有重要参考价值。结论为全面和准确地评估细胞凋亡率,需选择多种检测方法结合分析,细胞学及寡核苷酸片段检测技术是一个相当不错的选择。

毫米波对白血病细胞结构、活力及细胞凋亡率的影响

毫米波辐射损伤白血病细胞的结构 ,使细胞活力显著下降 .低功率密度的毫米波有明显的诱导白血病细胞凋亡的效应 ,该效应具有明显的功率窗和时间窗 ;高功率密度的毫米波产生热效应 .

同一创面不同病程糖尿病足创面组织细胞凋亡率、Bcl-2、Bax及肿瘤坏死因子α的相关性

背景:研究发现,难愈性溃疡创面不易愈合与细胞凋亡失衡和炎症失调有关,以往的研究均在不同个体的某一类型组织取样研究,研究结果数据间可能存在个体差异的影响,且无同一糖尿病足创面不同病程组织的细胞凋亡率、Bcl-2、Bax、肿瘤坏死因子α表达水平之间相关性研究报道。目的:分析糖尿病足不同病程创面组织细胞凋亡率、Bcl-2、Bax和肿瘤坏死因子α表达水平间的关系及作用机制。方法:重庆医科大学附属第二医院急诊科收治的15例Wagner 2,3级糖尿病足患者,选择典型的糖尿病足创面,采用“4C”法将局部感染控制后的创面组织区分为坏死、过渡和正常组织后分别采集标本,测定细胞凋亡率、Bcl-2、Bax、Bax/Bcl-2和肿瘤坏死因子α,并对结果进行统计分析。研究经重庆医科大学附属第二医院伦理委员会批准,编号:(2019)329号,所有患者均签署了知情同意书。结果与结论:①糖尿病足创面正常、过渡、坏死组织的细胞凋亡率分别为(16.67±2.48)%、(43.68±2.22)%和(72.12±4.53)%,差异有显著性意义(P<0.01);②坏死、过渡和正常组织间Bcl-2、Bax、肿瘤坏死因子α表达水平和Bax/Bcl-2差异有显著性意义(P<0.01),Bcl-2表达:坏死组织<过渡组织<正常组织,Bax、肿瘤坏死因子α表达及Bax/Bcl-2:坏死组织>过渡组织>正常组织;③Bcl-2、Bax、Bax/Bcl-2、肿瘤坏死因子α和细胞凋亡率间呈曲线关系,曲线回归分析结果显示,糖尿病足创面内肿瘤坏死因子α与Bax、Bax/Bcl-2、细胞凋亡率呈高度正相关,与Bcl-2呈高度负相关;④从结果可得出,细胞凋亡机制与炎症反应参与了糖尿病足创面病理过程,其作用机制可能与下调Bcl-2表达,上调Bax和肿瘤坏死因子α表达,提高Bax/Bcl-2水平,引起组织细胞凋亡率增大有关。

活血、破血药对动脉粥样硬化大鼠Bcl-2、Bax蛋白表达及细胞凋亡率的影响

目的:探讨活血药(当归、川芎)、破血药(三棱、莪术)对动脉粥样硬化(AS)大鼠主动脉内膜B细胞白血病-淋巴瘤-2(Bcell leukemia-lymphoma-2,Bcl-2)、B细胞白血病-淋巴瘤-2相关蛋白基因(Bcl-2-associated X proteingene,Bax)表达及细胞凋亡率的影响。方法:将60只雄性Wistar大鼠随机分为5组,即空白组、模型组、活血药(当归、川芎)组、破血药(三棱、莪术)组、他汀组,每组12只。先采用高脂喂饲复制AS大鼠模型,造模成功后,灌胃给药,连续4周。实验结束时检测Bcl-2、Bax蛋白表达及细胞凋亡率。结果:他汀组、破血药组Bcl-2表达明显高于模型组(P<0.01);他汀组与破血药组组间比较,差异无显著性意义(P>0.05);破血药组Bcl-2表达高于活血药组(P<0.05)。空白组、他汀组、活血药组、破血药组Bax表达明显低于模型组(P<0.01,P<0.05),空白组、他汀组、破血药组组间比较,差异无显著性意义(P>0.05),破血药组Bax表达低于活血药组(P<0.05)。空白组、他汀组、破血药组凋亡率明显低于模型组(P<0.01);破血药组凋亡率低于活血药组(P<0.05)。结论:破血药三棱、莪术通过上调Bcl-2的表达,下调Bax的表达,起到抑制细胞凋亡的作用,此作用优于活血药当归、川芎。

猪囊尾蚴感染仔猪淋巴细胞凋亡率的变化

猪囊尾蚴之所以能够在宿主体内寄生,可能与宿主的免疫力降低有关.为了探讨猪囊尾蚴病的发病机制,本文研究了猪囊尾蚴发育过程中宿主淋巴细胞凋亡率的变化.

原位检测细胞凋亡率及增殖率对骨髓增生异常综合征的诊断意义

观察原位检测骨髓细胞凋亡率及增殖细胞核抗原 (PCNA)表达率在MDS临床鉴别、疗效观察及向白血病转化中的诊断作用。采用原位末端转移酶介导标记 (TUNEL)法和免疫组化ABC法对 60例MDS ,30例AML ,2 1例CAA ,1 6例溶血性贫血 ,1 5例巨幼细胞性贫血以及 30例正常对照进行检测 ,统计凋亡细胞阳性率及PCNA表达率。结果发现 ,骨髓有核细胞凋亡率及PCNA表达率在各类疾病的表达有显著差异 ,低增生MDS可与其他疾病相鉴别 ,MDS转化的白血病与原发白血病的骨髓有核细胞凋亡率及PCNA表达率无差异 ,临床治疗对MDS组 ,CAA组 ,AML组骨髓有核细胞凋亡率及PCNA表达率有显著影响。结论 :原位检测骨髓有核细胞凋亡率及PCNA阳性表达率可作为MDS临床诊断、鉴别诊断的有效方法 ,临床治疗对凋亡率及PCNA表达率有明显影响 ,可作为疗效判断指标之一。

灵芝对大鼠脑缺血再灌注后神经细胞凋亡率及线粒体跨膜电位的影响

目的探讨灵芝对大鼠脑缺血再灌注后神经细胞凋亡率及线粒体跨膜电位的影响。方法采用线栓阻断大脑中动脉闭塞法(MCAO)建立大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型。动物随机分为假手术组(Sham)、脑缺血再灌注组(I/R)、灵芝组(GA);于再灌注后3 h、12 h、24 h、48 h处死动物取材,流式细胞仪检测脑细胞凋亡率和线粒体跨膜电位。结果 (1)IR组和GA组与sham组比较,脑细胞凋亡率明显增高(P<0.01);再灌注3 hGA组与IR组比较,脑细胞凋亡率没有明显差异(P>0.05);再灌注12 h、24 h、48 hGA组与IR组比较,脑细胞凋亡率降低,有明显差异(P<0.01)。(2)IR组脑细胞线粒体跨膜电位在再灌注3 h、12 h、48 h较sham组显著下降(P<0.05),其中3 h值最低,其后逐渐升高,至48 h又出现后续性降低;GA组细胞线粒体跨膜电位在再灌注3 h较sham显著下降(P<0.01);GA组线粒体跨膜电位在再灌注12 h、48 h较IR组显著升高(P<0.05)。结论急性局灶性脑缺血再灌注后大鼠脑细胞凋亡率升高,线粒体跨膜电位显著降低,灵芝具有降低凋亡发生率、改善脑组织细胞线粒体跨膜电位水平的作用。

职业接触苯并[a]芘对焦炉工人胆碱能系统及淋巴细胞凋亡率的影响

苯并[a]芘具有明确的致癌性,近年来研究表明其具有神经毒性。Mendola等[1]研究发现环境污染物（包括苯并[a]芘）引起神经发育、认知和行为功能下降。焦化生产过程产生大量逸散物和煤焦油,其主要成分是多环芳烃类混合物（PAHs）,PAHs与焦炉工肺癌之间存在因果关系,在PAHs职业暴露等级评定中以苯并[a]芘当量浓度来精确描述PAHs的接触特性。因此,检测作业环境中苯并[a]芘浓度可以代表焦炉作业环境中多环芳烃类混合物的外暴露程度。

解毒通络保肾法对高糖刺激下小鼠足细胞PI3K/Akt信号通路活化相关因子ILK、Akt及足细胞凋亡率的影响

目的探讨解毒通络保肾法对高糖刺激下小鼠足细胞损伤的保护作用。方法体外培养小鼠足细胞,随机分为A组(正常糖组)、B组(高糖组)、C组:高糖+低剂量解毒通络保肾血清组、D组:高糖+中剂量解毒通络保肾血清组、E组:高糖+高剂量解毒通络保肾血清组。用酶联免疫吸附试验检测各组整合素连接激酶(ILK)及蛋白激酶B(Akt)的表达。流式细胞仪检测足细胞凋亡率。结果与A组相比,B、C、D、E组ILK表达均显著增加(P<0. 05,P<0. 01),与B组相比,C、D、E组ILK表达均降低,但只有D、E组差异有统计学意义(P<0. 05,P<0. 01);与A组比较,B、C、D、E组Akt表达均显著降低(P<0. 05,P<0. 01),而与B组对比,C、D、E组Akt表达增加,但只有E组差异有统计学意义(P<0. 05)。与A组相比,B、C、D、E组细胞凋亡率均显著增加(P<0. 01),与B组相比,C、D、E组细胞凋亡率显著降低(均P<0. 01),与C组相比,D、E组凋亡率显著降低(均P<0. 01)。结论解毒通络保肾散可以保护高糖刺激下小鼠肾足细胞,降低细胞凋亡率,其保护机制可能是通过阻断ILK介导的磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)/Akt信号通路。

慢性阻塞性肺疾病患者外周血中性粒细胞凋亡率的动态变化(英文)

背景:慢性阻塞性肺疾病是以气道、肺实质和肺血管的慢性炎症为特征,这些炎症细胞数量增加和活性改变的机制目前还不十分清楚。目的:探讨慢性阻塞性肺疾病患者外周血中性粒细胞凋亡特点及其与慢性阻塞性肺疾病发生发展的关系,以期为慢性阻塞性肺疾病患者的早期干预和功能监测提供参考方向。设计:以慢性阻塞性肺疾病患者为观察对象,健康人群为对照组的观察对比研究。单位:一所军医大学医院的呼吸内科。对象:观察对象为2003-02/12因慢性阻塞性肺疾病急性发作在第三军医大学大坪医院野战外科研究所呼吸内科住院的慢性阻塞性肺疾病患者,同期同类住院患者98例,采用随机数字表法随机选择18例患者作为慢性阻塞性肺疾病组,其中男12例,女6例,年龄48～70岁,平均(56±7)岁。对照组14例,为来本院查体的健康成年人,其中男10例,女4例,年龄50～70岁,平均(59±8)岁。方法:用密度梯度离心法分离外周血中性粒细胞,利用流式细胞仪和原位末端标记技术观察外周血中中性粒细胞凋亡的动态变化。主要观察指标:各组外周血中性粒细胞凋亡率比较。结果:流式细胞分析显示,缓解期慢性阻塞性肺疾病患者凋亡早期中性粒细胞的比率为(8.5±1.3)%,明显低于正常对照组(12.5±1.8)%(t=6.25,P<0.01),急性加重期(5.1±0.6)

脂联素对胰岛素抵抗小鼠心肌细胞凋亡率的影响

目的观察野生型小鼠和脂联素基因敲除(APN^(-/-))小鼠胰岛素抵抗状态对心肌细胞凋亡率的影响及脂联素干预作用。方法选择雄性野生小鼠16只和雄性APN^(-/-)小鼠24只,分5组,每组8只,分别为对照组(con)、胰岛素抵抗组(IR)、基因敲除组(KO)、基因敲除+胰岛素抵抗组(KIR)、基因敲除+胰岛素抵抗+脂联素干预组(APN)。高脂饲料诱导小鼠胰岛素抵抗模型。测空腹血糖(FPG)和空腹胰岛素(FINS)水平,计算胰岛素抵抗指数(HOME-IR),采用FITC-PI凋亡试剂盒测心肌细胞凋亡率。结果 (1)与con组比较,IR、KO组小鼠FINS、HOME-IR值以及心肌细胞凋亡率均升高(P均<0.05)。(2)与KO组相比,KIR组体重、FINS、HOME-IR值以及心肌细胞凋亡率均明显升高(P均<0.05)。(3)与KIR组相比,APN组小鼠FPG、FINS、HOME值及心肌细胞凋亡率降低(P<0.05)。结论胰岛素抵抗小鼠心肌细胞凋亡率升高,脂联素干预可以改善胰岛素抵抗,降低心肌细胞凋亡率。

流式细胞术检测石见穿多糖诱导的肝癌细胞凋亡率

目的探讨石见穿多糖抑制肝癌细胞SMMC-7721增殖的机制。方法利用流式细胞仪Annexin V-FITC/PI法检测经不同浓度石见穿多糖作用的SMMC-7721肝癌细胞的凋亡率。结果石见穿多糖各浓度组平均细胞凋亡率为(7.87±1.860)%、(13.63±2.87)%、(21.05±2.68)%,显著高于对照组(0.67±0.28)%。结论石见穿多糖能够诱导肝癌细胞SMMC-7721凋亡,且凋亡率随着石见穿多糖浓度的增加而增高。

心脑通络液对脑梗塞大鼠脑组织细胞凋亡率的影响

目的:探讨心脑通络液对局灶性脑缺血大鼠脑组织细胞凋亡率的影响。方法:采用线栓法复制局灶性脑缺血大鼠模型,以步长脑心通为阳性对照药,于造模成功48h后观察心脑通络液对局灶性脑缺血大鼠脑组织细胞凋亡率的影响。结果:与模型组比较,心脑通络液各剂量组脑组织细胞凋亡率均有不同程度降低,差异有统计学意义(P<0.01或P<0.05),以高剂量组降低最为显著,高、低剂量组与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01或P<0.05)。结论:心脑通络液可抑制局灶性脑缺血大鼠急性期细胞凋亡率。

内源性一氧化氮提高TRAIL诱导的细胞凋亡率

目的探讨内源性一氧化氮在TRAIL诱导的细胞凋亡中的作用,以期了解许多肿瘤组织表达诱导性一氧化氮合成酶的分子和细胞学机制。方法用短暂转染、稳定转染方法在人胚胎肾细胞HEK293中进行重组质粒载体转染,并对可诱导表达一氧化氮合成酶NOS2载体筛选稳定可被诱导的细胞克隆。一氧化氮表达通过ponastrone A试剂进行诱导表达实现。Caspase活性通过相应试剂盒进行检测,并用流式细胞仪检测细胞凋亡情况。结果成功构建了稳定可诱导表达一氧化氮合成酶的细胞克隆;内源性一氧化氮可提高TRAIL诱导的细胞凋亡率,与凋亡相关的caspase-8激酶活性亦显增加。结论内源性一氧化氮可提高由TRAIL诱导的细胞凋亡率。*

“滋水涵木”法对去势雌兔雌激素及脾细胞凋亡率的影响

目的探讨"滋水涵木"对去势雌兔雌激素及脾细胞凋亡率的影响。方法选用雌性大耳白兔36只,随机分为假手术、去势模型、中药治疗、西药对照4组。切除卵巢建立家兔卵巢功能衰退模型,采用滋水涵木立法的补肾复方干预。连续给药12W后,放射免疫法检测雌二醇(E2)水平;流式细胞仪检测脾细胞凋亡率。结果模型组E2水平降低,脾细胞凋亡率升高,与假手术组比较,差异有统计学意义(P<0.05);中药组和对照组E2水平升高,脾细胞凋亡率降低,与模型组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论滋水涵木法可以调整去势雌兔E2水平,逆转去势雌兔脾细胞凋亡。

接骨续筋口服液对家兔桡骨骨痂中OPG及破骨细胞凋亡率的影响

目的:观察接骨续筋口服液对家兔桡骨骨痂中骨保护素(Osteoprotegerin,OPG)产生及破骨细胞凋亡率的影响。方法:由安医大动物实验中心提供68只健康8个月龄的新西兰大白兔,雌雄皆用,根据该实验的要求采取随机数字表法随机分成五组,每组平均12只,考虑到死亡,预留8只备用,按照药物以及剂量的不同分为五组,造模术后分别予接骨续筋口服液低、中、高剂量、云南白药干预、空白对照模型组不予任何干预,分别造模术后1W、2W、4W采集标本,检验,获得数据,进行统计分析。结果:在骨折造模术后1W,2W,4W接骨续筋口服液高剂量组骨痂中OPG的数值分别为230.79±4.96、304.80±9.41、275.75±5.07,相同时间点与其他各组组间比较,免疫组化总数目高于其他各组(P<0.05);不同时间点组内比较2W高于1W、4W(P<0.01);高剂量组接骨续筋口服液破骨细胞凋亡率分别为23.58±1.43、59.19±4.073、14.19±1.55,相同时间点与其他各组组间比较,接骨续筋口服液高剂量组凋亡率明显高于其余各组,不同时间点组内比较2W高于1W、4W。结论:高剂量接骨续筋口服液在骨折愈合实验中具有明显升高骨痂中OPG的作用,并使破骨细胞使凋亡速度加快,减少骨折断端骨痂中破骨细胞数量,促进骨折愈合。

不同产地人参对免疫抑制小鼠血清TNF-α含量及脾细胞凋亡率的影响

目的:研究辽宁、吉林及朝鲜人参在免疫调节作用方面的药效差异。方法:检测三地人参对免疫抑制小鼠血清中TNF-α含量及脾细胞凋亡率的影响。结果:与正常空白对照组相比,免疫模型组的TNF-α含量明显下降(P<0.05);三地人参治疗组与正常空白对照组比较,TNF-α含量均无明显差异(P>0.05);三地人参治疗组之间相互比较,TNF-α含量均无明显差异(P>0.05)。与正常空白对照组相比,免疫模型组脾细胞凋亡率显著升高(P<0.005);三地人参治疗组与正常空白对照组比较,脾细胞凋亡率均无明显差异(P>0.05);三地人参治疗组与免疫模型组比较,免疫辽参治疗组脾细胞凋亡率明显低于免疫模型组(P<0.05);三地人参治疗组之间相互比较,脾细胞凋亡率均无明显差异(P>0.05)。结论:辽宁,吉林,朝鲜人参对免疫抑制小鼠均可促进TNF-α产生,抑制脾细胞凋亡,改善小鼠的免疫抑制状态,并且三地人参的免疫调节作用无明显差异。

腹腔镜手术对子宫颈癌细胞凋亡率以及Survivin、Bax表达的影响

目的探讨腹腔镜手术对子宫颈癌细胞的细胞凋亡率以及Survivin、Bax 表达的影响。方法 选择2015 年3 月至2016 年3 月本院妇产科收治的子宫颈癌患者80 例,根据手术方法不同随机分为两组,各40 例,宫颈癌腹腔镜组采用腹腔镜子宫全切术加盆腔淋巴结清扫术,宫颈癌开腹组采用开腹子宫全切术。同时选取子宫良性病变患者40 例,行腹腔镜下全子宫切除术。采用流式细胞技术测定三组患者宫颈组织术前、术后细胞凋亡率的变化,采用免疫组化法测定三组患者宫颈组织术前、术后Survivin、Bax 表达的变化,并进行对比。结果 两组子宫颈癌细胞术前的细胞凋亡率均为(6.08±0.15)%,宫颈癌腹腔镜组术后细胞凋亡率为(27.08±0.56)%,宫颈癌开腹组术后细胞凋亡率为(7.18±0.21)%,宫颈癌腹腔镜组术前、术后细胞凋亡率比较差异有统计学意义(P < 0.01);子宫良性病变组子宫颈细胞凋亡率由术前的(12.78±0.46)%变为术后的(13.02±0.63)%,变化不明显(P > 0.05)。宫颈癌腹腔镜组术后Survivin、Bax 表达率为20%、80%,相较于术前有明显改变,差异有统计学意义(P < 0.01);宫颈癌开腹组术后Survivin、Bax 表达率为45%、40%,相比于术前无明显改变,差异无统计学意义(P >0.05);子宫良性病变组腹腔镜手术后Survivin、Bax 表达率为40%、45%,术前、术后比较差异无统计学意义(P > 0.05)。结论 子宫颈癌的腹腔镜手术具有提高癌细胞凋亡率的优点,其机制可能与癌细胞术后Survivin、Bax 表达改变有关,此方法应该得到更深入的研究与推广。