大黄素甲醚对神经细胞缺氧性损伤保护作用的实验研究

目的:研究大黄素甲醚对缺氧引起的PC12神经细胞损伤的保护作用。方法:培养PC12细胞,建立神经细胞缺氧损伤模型,观察组细胞在缺氧损伤前采用大黄素甲醚进行预处理。MTT检测PC12细胞增殖活性,光学显微镜观察PC12细胞形态学、测定上清液中乳酸脱氢酶(LDH)含量、荧光免疫组化法测定c-fos蛋白表达、RT-PCR检测nNOS、iNOS mRNA表达。结果:细胞形态学研究提示大黄素甲醚明显提高PC12细胞的抗缺氧活性。大黄素甲醚处理后,细胞存活率明显提高,上清液LDH水平明显下降,c-fos表达明显降低(P<0.05)。RT-PCR结果分析显示nNOS mRNA在缺氧早期表达,iNOS mRNA主要在缺氧中晚期表达。结论:大黄素甲醚能减轻缺氧所致的神经元损伤,对神经元起保护作用。

miRNA调控Toll样受体4参与神经系统缺血缺氧性损伤的研究进展

脑缺血又称为缺血性脑中风,是一种突发的脑血液循环障碍性疾病,临床上以猝然昏扑、不省人事或突然发生口眼歪斜、半身不遂、舌强言蹇、智力障碍为主要特征。脑缺血的主要病理生理改变包括兴奋性神经毒性、酸中毒、电解质失衡、炎症反应以及血脑屏障破坏等。

红花注射液对缺血缺氧性损伤的兔海马CA1神经元nNOS表达的影响

目的研究红花注射液(SY)对控制性降压(CH)诱导的缺血缺氧性损伤兔海马CA1神经元nNOS表达的影响。方法构建缺血缺氧性脑损伤动物模型,SY组在降压前30min静脉注射红花注射液2mL/kg(1mL含SY1.6mg)。nNOS免疫组化染色观察CA1神经元形态学改变,Westernblotting检测nNOS蛋白的表达水平。结果SY组nNOS免疫组化染色的光密度值显著低于CH组(P<0.05),其nNOS蛋白表达水平也明显低于CH组,但高于Normal组(P<0.05)。结论红花注射液显著减轻CH诱导的兔海马缺血缺氧性损伤,可能是通过抑制nNOS蛋白表达起作用的。

尼莫地平对皮质神经元缺糖缺氧性损伤的保护作用

目的：探讨尼莫地平对缺糖缺氧培养的小鼠大脑皮质神经元的保护作用。方法：新生1～2 d小鼠的大脑皮质神经元原代培养8 d,用含连二亚硫酸钠的无糖Earle′s液模拟体内缺血性损伤,检测乳酸脱氢酶（LDH）的漏出量,细胞生存率（MTT法）及细胞超氧化物歧化酶的活性,观察尼莫地平对神经元缺糖缺氧损伤的保护作用。结果：1.经缺糖缺氧培养后,细胞培养液中的乳酸脱氢酶（LDH）漏出增多,细胞超氧化物酶（SOD）活性和细胞生存率显著降低（P〈0.05）;2.尼莫地平组LDH的漏出低于缺氧缺糖组,SOD活性及细胞生存率明显提高（P〈0.05）。结论：尼莫地平对小鼠大脑皮质神经元缺糖缺氧性损伤具有一定的保护作用。

补阳还五汤对神经干细胞缺氧性损伤保护作用的实验研究

目的:观察补阳还五汤载药血清对神经干细胞缺氧性损伤的保护作用。方法:从孕11.5d(E11.5d)大鼠获得神经干细胞,经无血清培养基悬浮培养并传代,对所获细胞的自我增殖、自我更新及其多分化潜能进行检测。取传3代神经干细胞,添加不同浓度的药物血清,在5%O2三气培养箱中培养120h。通过MTT法检测神经干细胞的增殖情况。用兔抗人神经元特异性烯醇化酶(NSE)和兔抗人胶质纤维酸性蛋白(GFAP)免疫细胞化学染色观察神经干细胞的分化情况。结果:药物血清组神经干细胞MTT检测的OD值显著增高,NSE和GFAP阳性细胞的比例明显升高。结论:补阳还五汤药物血清对神经干细胞缺氧性损伤具有明显的保护作用,并可促进缺氧性神经干细胞的分化。

正常新生大鼠及缺血缺氧性损伤后脑组织铁的组织化学改变

目的 应用大鼠HIE模型了解正常情况下及缺血缺氧损伤后脑组织铁的组织化学改变。方法 实验分正常对照组和HIE组。正常对照组分别于 8d ,10d ,14d ,2 1d龄处死 (每时间点 3只 ) ,HIE组分别于 7d龄大鼠 (HIE)模型制成后观察 12h ,2 4h ,3d ,7d ,14d处死 (每时间点 3只 )。各组脑组织切片 ,进行铁Perl’s染色和光镜观察。结果 正常大鼠脑组织铁染色阳性细胞较少且主要见于扣带及胼胝体、脑室周围、内囊及外囊的尖部。形态学上铁染色阳性细胞主要与少突神经胶质细胞和小神经胶质细胞相似。HIE组缺血缺氧损伤后 12h脑组织铁染色情况与正常对照组无明显差异。缺血缺氧损伤后随时间推移铁染色逐渐增强 ,1周时为甚 ,以皮质、内囊及海马回处最明显 ,铁染色阳性神经胶质的增多程度大于铁染色阳性细胞的增多程度 ,有明显的傍血管现象。结论 铁染色可作为判断脑组织缺血缺氧中晚期损伤程度的指标之一。

缺氧预适应减轻乳鼠心肌细胞缺氧性损伤

目的 探讨缺氧预适应对缺氧 复氧损伤的乳鼠心肌细胞的保护作用。方法 第 2代心肌细胞随机分为对照组 (C组 )、缺氧 复氧组 (A R组 )和缺氧预适应组 (AP组 ) ,每组均缺氧 2h ,复氧 4 8h。取复氧心肌细胞 ,用电镜观察细胞超微结构变化、MTT法测定细胞生存情况、流式细胞仪测定细胞凋亡率、免疫组化染色检测HSP70 表达。结果 (1 )AP组细胞超微结构改变不明显 ,未见凋亡细胞 ;A R组可见凋亡细胞。 (2 )各时点AP组的细胞存活数显著低于C组 (P <0 0 5 ) ;显著高于A R组 (P <0 0 1 ) ;且随复氧时间延长有增加趋势。 (3)各时点AP组的细胞凋亡率显著高于C组 ;显著低于A R组 (P <0 0 1 ) ;随复氧时间延长 ,AP组细胞凋亡率有下降趋势 ,A R组则逐渐升高。(4 )各时点AP组HSP70 表达显著高于其余各组 (P <0 0 1 ) ;AP组HSP70 表达从 1h处开始增加 ,2 4h处表达最强 (P <0 0 1 )。结论 (1 )A R对心肌细胞确有损伤作用。 (2 )AP对A R损伤能产生早期和延迟保护作用。 (3)HSP70

枸杞糖肽对心肌细胞缺氧性损伤的保护作用

目的观察枸杞糖肽对心肌细胞缺氧性损伤的保护作用,建立心肌细胞缺氧损伤病理模型。方法从细胞形态学、细胞存活率、心肌细胞乳酸脱氢酶(LDH)外漏释放及细胞凋亡等方面,观察枸杞糖肽对缺氧损伤心肌细胞的保护作用。结果枸杞糖肽能明显抑制缺氧所致的心肌细胞死亡(P<0.05,P<0.01)、细胞内LDH的漏出(P<0.05,P<0.01),并能降低缺氧诱导的心肌细胞凋亡。结论枸杞糖肽对心肌细胞缺氧性损伤具有明显的保护作用。

辅酶Q10联合参麦注射液对胎粪致新生儿窒息后脑缺氧性损伤患儿血清酶的影响

目的探讨辅酶Q10联合参麦注射液对胎粪致新生儿窒息后脑缺氧性损伤后血清酶的影响。方法选取天津医科大学静海临床学院胎粪致新生儿窒息后脑缺氧性损伤患儿64例,随机分为2组,各32例,对照组予以维持充足的通换气及循环功能及常规药物治疗;研究组在常规治疗基础上予以辅酶Q10联合参麦注射液治疗,共治疗7d为一疗程,测定血清酶、心肌损伤标志物、氧化应激及炎症相关因子等指标,同时对比临床疗效及并发症。结果与治疗前比较,2组治疗后肌酸激酶同工酶(creatine kinase isoenzyme,CK-MB)、天门冬氨酸氨基转移酶(aspartic transaminase,AST)、乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)、肌酸激酶(creatine kinase,CK)及α-羟丁酸脱氢酶(αhydroxybutyric dehydrogenase,α-HBDH)含量降低,心肌营养因子-1(myocardial nutritional factor-1,CT-1)、心肌肌钙蛋白I(cardiac troponin I,CTn I)及肌红蛋白(myoglobin,Mb)含量降低,超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、丙二醛(malonaldehyde,MDA)含量降低,谷胱甘肽过氧化酶(glutathion peroxidase,GSH-Px)含量升高,脂联素(adiponectin,APN)、胰岛素样生长因子-1(insulin-like growth factor,IGF-1)含量升高,瘦素(leptin)含量降低(P<0.05);与对照组比较,研究组治疗后CK-MB、AST、LDH、CK及α-HBDH含量较低,CT-1、CTn I及Mb含量较低,SOD、MDA含量较低,GSH-Px含量较高,APN、IGF-1含量较高,Leptin含量较低(P<0.05);在临床疗效上,对照组总有效率65.63%与研究组总有效率87.50%对比,差异有统计学意义(P<0.05)。结论辅酶Q10联合参麦注射液对胎粪致新生儿窒息后脑缺氧性损伤疗效确切,降低血清酶及心肌损伤,安全性高。

解偶联蛋白在脑缺血缺氧性损伤中的作用

线粒体解偶联蛋白(uncoupling proteins,UCPs)是线粒体载体蛋白家族的一个亚族,位于线粒体内膜,可以将线粒体内膜外的质子转运回基质,降低线粒体的跨膜质子电动势,形成质子漏,使氧化磷酸化解偶联,ATP生成减少。目前共发现有5个成员,UCP1仅存在于棕色脂肪组织,主要参与机体非震颤产热;UCP2,UCP4和UCP5(又名脑线粒体膜载体蛋白1)在脑组织中表达较多。近年来UCPs在脑缺血缺氧性损伤中的病理生理作用研究较多,但也颇多争议。有人认为UCPs通过解偶联作用加重能量衰竭,进一步促进脑缺血缺氧损伤;也有人认为UCPs通过调节线粒体膜电位,抑制活性氧簇生成,维持线粒体内钙稳态,从而起到对神经系统的保护作用。

黄芪百合颗粒对亚硝酸钠中毒致缺氧性损伤小鼠的保护作用

目的观察黄芪百合颗粒对亚硝酸钠致缺氧性损伤小鼠的保护作用。方法 72只小鼠随机分为空白组,阳性对照组,模型组,黄芪百合颗粒低、中、高剂量组(1.75、3.5、7 mg/kg),各实验组小鼠灌胃给予相应药物30 d。末次给药1 h后,各组(除空白组外)小鼠腹腔注射亚硝酸钠(100 mg/kg),1 h后采血,比色法测定高铁血红蛋白(Met Hb)含有量,ELISA法测定硫代巴比妥酸反应物(TBARS)含有量,HE染色观察小肠病理学变化,免疫组织化学法检查脑组织中脑红蛋白(Ngb)表达。结果与空白组比较,模型组Met Hb、TBARS含有量显著提高(P<0.01),小肠黏膜上皮大量脱落,炎细胞浸润数量、Ngb表达显著增加(P<0.01);与模型组比较,黄芪百合颗粒各剂量组和阳性对照组Met Hb、TBARS含有量显著降低(P<0.05,P<0.01),小肠黏膜上皮少量脱落,炎细胞浸润数量显著减少(P<0.05,P<0.01),Ngb表达显著增加(P<0.01),胞浆、胞核均可见棕黄色颗粒状免疫反应阳性产物。结论黄芪百合颗粒可通过降低Met Hb含有量、抑制膜脂过氧化水平、改善小肠病理程度、提高Ngb表达来显示对亚硝酸钠致缺氧性损伤小鼠的保护作用。

缺氧诱导因子1α与脑缺血缺氧性损伤

缺氧诱导因子1α(HIF-1α)是近年来研究较多的一种转录调节因子,其在常氧状态下降解,低氧状态下稳定,并从细胞质向细胞核转移,参与对低氧的多种生理应答,通过泛素蛋白酶体系统降解,在缺氧神经细胞培养及脑缺血缺氧损伤模型中表达增加,不同药物干预及高压氧预处理对其表达变化影响不同,产生神经保护或者损伤作用,通过研究其表达特点,为临床缺血缺氧性脑损伤的治疗提供新的思路。

小檗碱对培养心肌细胞缺氧性损伤的保护作用

应用体外培养心肌细胞技术,发现小剂量(10μg/ml)盐酸小檗碱对缺氧性损害心肌细胞的搏动、乳酸脱氢酶释放、细胞存活率、细胞超微结构均有较明显的保护作用,而大剂量(30μg/ml)盐酸小碱则可加重缺氧引起的心肌细胞损害。本文讨论了小剂量盐酸小檗碱提高心肌细胞耐缺氧能力及对心肌缺氧性损伤具有保护作用的肌理。

EMT/ICU体温冷却系统在缺血缺氧性损伤中的应用

WElkins公司宣布EMT／ICU体温冷却系统已获得FDA批准。该系统为一套完整方案，可提供重症监护到恢复期全过程的头部冷却。该产品最初用于美国军队，电池动力系统通过带颈托的冷却头罩可以将患者体温保持在30～37℃。

肾小管缺氧性损伤和其后修复机制的研究进展

临床众多疾病可以引起肾小管缺氧性损伤 ,人们通过对其损伤及修复机制的探讨 ,研究发现了一些有效的防治措施 。

早期电针长强穴对缺血缺氧性脑损伤大鼠海马CA1区神经元损伤及细胞自噬的影响

目的从自噬途径探讨早期电针长强穴对缺血缺氧性脑损伤(HIBD)新生大鼠海马CA1区神经元细胞损伤修复及神经功能改善的作用机制。方法将69只7日龄新生SD大鼠,采用随机数字表法分成空白组12只、假手术组12只和造模组45只;造模组随机数字表法分成模型组、电针组和三甲基腺嘌呤(3-MA)+电针组各15只,采用改良Rice Vannucci法制备HIBD模型,3-MA+电针组在造模前尾静脉注射3-MA,制备模型成功后每组采用随机数字表法选取12只进入实验。空白组不予任何处理,假手术组仅分离左侧颈总动脉,不予结扎,缝合消毒,不做缺氧处理。造模后6 h开始干预,连续干预3 d。电针组和3-MA+电针组进行电针长强穴干预,其他组别模拟固定。干预后比较5组大鼠体质量及倾斜板转头时间,Zea Longa法比较5组大鼠的神经功能缺损评分,免疫组织化学法检测5组大鼠海马CA1区神经元中神经元特异性核蛋白(NeuN)表达水平,透射电子显微镜观察5组大鼠海马CA1区神经元结构及自噬小体情况,Western blot法检测5组大鼠海马CA1区微管相关蛋白1轻链3-Ⅱ(LC3-Ⅱ)蛋白表达量。结果与空白组比较,假手术组大鼠干预后转头时间、体质量、神经功能缺损评分、海马CA1区NeuN含量、LC3-Ⅱ蛋白表达量差异无统计学意义(P>0.05);与空白组比较,模型组大鼠干预后转头时间、神经功能缺损评分、海马CA1区NeuN含量、LC3-Ⅱ蛋白表达量均升高(P<0.05),体质量降低(P<0.05);与模型组比较,电针组和3-MA+电针组大鼠干预后转头时间、神经功能缺损评分、海马CA1区NeuN含量、LC3-Ⅱ蛋白表达水平降低(P<0.05),体质量升高(P<0.05)。透射电子显微镜观察发现,干预后空白组和假手术组大鼠海马区神经元细胞结构基本完整,未发现自噬小体形成;模型组大鼠海马区神经元细胞结构被破坏,部分呈空泡样,可见自噬小体及溶酶体形成;电针组海马区神经元细胞结构较模型组改善,可见少量自噬小体及溶酶体;3-MA+电针组海马区神经元细胞结构相对完整,仅见个别自噬小体。结论早期电针长强穴可降低大鼠海马CA1区神经元中的NeuN含量及LC3-Ⅱ蛋白表达,抑制海马CA1区损伤后的神经元自噬,减轻脑损伤,从而改善HIBD大鼠神经功能。