老黄酶和甲酸脱氢酶催化柠檬醛不对称还原生成香茅醛的条件优化

源自酿酒酵母的老黄酶基因oye2和源自假丝酵母的甲酸脱氢酶基因fdhcb分别成功地在大肠杆菌BL21(DE3)中过量表达。重组表达的老黄酶OYE2和甲酸脱氢酶FDHCB经NiNTA亲和层析获得相应的纯酶。以这两种纯酶构建不对称还原柠檬醛生成香茅醛的催化体系,并优化了其反应条件。优化后的反应体系含有25 mmol/L柠檬醛,100 mmol/L甲酸钠,0.42mg/m L老黄酶OYE2,0.2 U/m L甲酸脱氢酶FDHCB,0.5 mmol/L NAD^+以及50 mmol/L PIPES缓冲液(pH 7.0)。在pH 7.0和30℃下反应10 h,香茅醛得率达92.0%,与没有甲酸脱氢酶辅助辅酶循环时的得率(9.8%)相比,香茅醛得率提高了约9.4倍。

氧化葡萄糖酸杆菌老黄酶Go的酶学性质鉴定

从氧化葡萄糖酸杆菌(Gluconobacter oxydans)H24中克隆出老黄酶Go的基因,通过构建重组表达质粒,在大肠杆菌BL21中诱导表达可溶性的蛋白,使用离子交换柱(Hi Trap DEAE FF)对重组酶进行纯化,并对其酶学性质进行表征。结果表明:老黄酶Go的温度和p H耐受性都较好,在40℃条件下,12 h后能保持40%的活性;在p H10的条件下,12 h后能保持40%的活性;Go的底物谱十分广泛,对酰亚胺类、α,β-不饱和醛酮、萜类都有一定的活性。老黄酶Go有良好的有机溶剂耐受性,在体积分数20%的乙酸丁酯中可以保持90%左右的活性,但是金属离子对其影响较大,除Mg^(2+)和K^+外,所选的其他离子对Go都有着不同程度的抑制作用。最后,在催化性质的实验中发现,Go对柠檬醛的转化率有60%,并且其对映体过量值(e.e.)可以达到99%。

一头拉车不松套的“老黄牛”——记长安县剧团创始人王正秦

王正秦,1920年生于西安市北郊草滩镇农村。家境贫寒,12岁时(1932年)入秦中社学戏,起名王生秦。秦中社是西安早期戏班之一,社长就是著名演员刘毓中之父刘立杰(艺名“木匠红”)。入社后他师从著名武生刘顺林(长安南埝头人),启蒙戏是《长坂坡》,后又学《罗通扫北》、

“老黄牛”半个世纪的深情──记方厚枢的编刊生涯

“老黄牛”半个世纪的深情──记方厚枢的编刊生涯马桂林方厚枢先生走入编刊园地是非常偶然的。１９５１年在南京＂商务＂Ｊ作时，他看到中国图书发行公司总处驻沪办事处编印的《新书快讯》上有不少错字、漏字等问题，编排内容也有不妥之处，就写了一篇文章提出意见，寄给...

“老黄牛”的贬值

“老黄牛”的贬值嘤鸣从４０年代到８０年代初，“老黄牛”历来是倍受称颂的形象。它勤劳踏实，不计报酬，不图名利，是个实干家，人们总是把忠厚老实、兢兢业业工作的人称为“老黄牛”。再追溯上去，中国文化革命主将鲁迅也钦佩它的富于献身的美德，吃的是草；挤出来的是...

辛勤耕耘在成教大地上的“老黄牛”──记渠口镇成人学校校长杨济青

辛勤耕耘在成教大地上的“老黄牛”──记渠口镇成人学校校长杨济青赵长久，绳玺在香河县渠口镇，提起镇成人学校校长杨济青，人们无不交口称赞，夸他是科技的播种人。老杨年近花甲，但仍精力充沛，一双粗壮有力的大手，有一股使不完的劲，象一个典型的庄稼汉。就是他在自...

脱贫路上的“老黄牛”──记全国文化战线先进工作者建平县图书馆王书友

脱贫路上的“老黄牛”──记全国文化战线先进工作者建平县图书馆王书友姜兆臣（中国文化报驻辽宁记者站）康尔平（辽宁省文化厅图书馆处）辽宁省建平县十年九旱，是全国有名的贫困县之一。然而，在这块贫瘠的土地上，却有一位默默耕耘的“老黄牛”，用图书架起脱贫的金桥...

可敬的老黄牛──孙述尧

可敬的老黄牛──孙述尧每个人都有自己的人生舞台，通渭县二中教师孙述尧，选择了三尺讲台。在这个平凡的岗位上，他不计名利，不畏辛劳，象老黄牛一样默默奉献。３７年没有请过一天事假，没有缺过一节课，带了３５个班，教了三千多名学生。他多次受到表彰奖励，１９９３...

人事工作的老黄牛——记原娄底地区人事局局长罗云汉

说罗云汉是人事工作的老黄牛,一点也不夸张。且不说他1960年就开始在组织部门从事干部工作,至今已36年,就从他1984年任娄底地区人事局长算起,也有了13年的历史。在湖南省,他是任职时间最长的人事局长,在全国人事系统,他也是少有的资深局长。更难能可贵的是,这么多年来他始终如一,热情不减,意志不衰,在人事战线上奋力开拓、辛勤耕耘。因此,当去年他被评为全国人事系统先进工作者时,人们都说他当之无愧。如今,他虽然已退居二线,但他仍然心系人事工作,他的翩翩身影仍然活跃在广大基层。

晒黄泥的老黄

天刚蒙蒙亮,老黄就睡不着了。他睁开眼睛,望着天花板上的吊扇不紧不慢地旋转着。老伴说过,风扇不能开最高档,转得快容易坏。虽然老伴去世两年了,但他家的电扇无论什么时候都是这样不紧不慢地摇着。天气实在太热了,老黄摸了摸后背,背心全湿了,凉席上都有一个人形的湿印子。再睡肯定睡不着,老黄索性起床。他轻轻地推开大门,一阵凉风吹了过来,老黄顿时感觉到全身三百六十万个毛孔都张开了,那个舒服劲别提有多爽。他望了望天空,天上有几颗星星在闪烁着,显得那么空旷遥远。

乐意在算盘和帐簿里终生耕耘的“老黄牛”——记中国工商银行汉川县支行老会计黄发生

他,名叫黄发生,人称“老黄牛”。他说:“俯首甘为孺子牛”,乐意接受这个外号。他是工商银行汉川县马口办事处的主管会计,平生以算盘为友,帐本为伴,在银行默默无闻地干了38年。他参加银行工作时不满18岁,可如今已是满头白发了。在这漫长的38年中,一批又一批的人先后走上了各种领导岗位,他一点也不嫉妒;不少人因嫌会计这个工作烦琐,又无“实惠”而“跳槽”,钻了“热门”行业或“热门”工种,他也不眼红,在个别人因“爬”不上去而烦恼时,他却神态安祥地“爬格子”、“记码子”、“拨珠子”,

不能亏待老黄牛

对理头苦干、只讲奉献、不计较报酬的同志,人们形象地称之为“老黄牛”。这个比喻是非常贴切的,用鲁迅先生的话说,就是吃的是草,挤出的是奶和血。 在现实生活中,确实有一些工作勤勤恳恳、认认真真,只知奉献,不讲条件的“老黄牛”,他们是国家和民族的精英,社会的宝贵财富,“四化大厦”的支柱和栋梁。但令人遗憾的是,有些单位和部门的领导对“老黄牛”使用特别多,关心却不够。

老黄和库尔班家两代的友情

在农二师二十九团园九连,人们只要一提起老党员黄金贵和栏杆乡结拜村的老库尔班家两代人的友情,都会赞不绝口。今年80岁的退休老党员黄金贵,与栏杆乡结拜村的老库尔班家有着30多年的两代人的感情。从上世纪70年代初的一天说起,老库尔班抱着满脸都是黄水疮不停哭闹的大女儿,来到连队找医生看病,老黄见了,仔细询问病情。

赞“老黄牛”

赞“老黄牛”□曹中伟鞭策不语老黄牛，只讲奉献冬到秋，不为名利甘负重，卷海生涯无所求。市场大潮新思维，广征博采真迹留，勤奋耕耘兰台业，利在当代功千秋。赞“老黄牛”@曹中伟...

怀念“老黄”牛

老黄是我家的一头牛,它来我家的时候,还是头蹦跳不安的牛犊,那时的我,大约十岁左右。一开始,我叫它小黄,因为它通体发黄的皮毛,像十足的赤金,又像在阳光下烁烁闪光的缎子。

与老黄下祺的快乐生活

“棋品如人品”,是我与老黄下棋时经常挂在嘴边的话。老黄是我的棋友,算起来我们在掉。棋盘上廝杀酣战有二十多年了。他原是我的一位同学的同事,又是邻居,也兼棋友。我是通过同学认识的老黄。他今年已有六+多岁,其貌不扬,谢顶,头上没有几根毛发了,同学的妻子常取笑他“黄没毛”,他嘿嘿一笑,并不生气,有时还自得其乐。