2015-2021年CHINET儿童患者分离的肠杆菌目细菌耐药性变迁

目的了解2015-2021年CHINET儿童患者分离的肠杆菌目细菌的分布及耐药性变迁。方法采用纸片扩散法或商品化药敏试验自动测试仪器法按照CHINET技术方案进行药敏试验,并采用CLSI 2021年版标准判断结果。结果2015-2021年共收到儿童患者分离的肠杆菌目细菌81681株,占儿童革兰阴性杆菌的50.1%,其中大肠埃希菌、克雷伯菌属和肠杆菌属是最常见的细菌;菌株主要分离自尿液标本(29.3%)和呼吸道标本(27.7%)。儿童大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和奇异变形杆菌的ESBL检出率分别为48.8%~57.6%、49.3%~66.7%和23.1%~33.8%。儿童碳青霉烯类耐药肠杆菌目细菌的检出率为5.7%~9.5%,呈下降趋势,其中碳青霉烯类耐药克雷伯菌属、碳青霉烯类耐药肠杆菌属和碳青霉烯类耐药大肠埃希菌的检出率分别为14.1%~22.6%、7.1%~15.7%和2.0%~3.4%。肠杆菌目细菌对环丙沙星的耐药率高于左氧氟沙星;对阿米卡星、多黏菌素B和替加环素仍具有较好的敏感性。沙门菌属对氨苄西林耐药率>70%,而对头孢曲松耐药率<30%。结论儿童患者分离的肠杆菌目部分细菌(如大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌)对常见抗菌药物耐药率呈下降趋势,但需加强细菌耐药性的持续监测,以预防和控制耐药菌的广泛播散。

医院获得性耐碳青霉烯类肠杆菌目细菌血流感染危险因素

目的分析医院获得性耐碳青霉烯类肠杆菌目细菌(CRE)血流感染的特点及影响因素。方法采用回顾性巢式病例对照研究方法,选取2020年1月—2022年12月某三级综合医院发生医院获得性CRE血流感染的56例病例为CRE组,按1∶1选择同期56例碳青霉烯类敏感肠菌目细菌(CSE)血流感染患者为CSE组,分析感染菌株和科室分布,并通过单因素和多因素logistic回归分析CRE血流感染的相关因素。结果CRE血流感染科室分布以重症监护病房(ICU,23例,41.07%)和血液科(17例,30.36%)为主;感染菌株主要为肺炎克雷伯菌(32例,57.14%)和大肠埃希菌(16例,28.57%)。单因素分析结果显示,恶性肿瘤、60 d内住院史、感染前入住ICU>48 h、机械通气、留置中央静脉导管、使用二联及以上抗菌药物、抗菌药物使用时间≥10 d均与CRE血流感染有关(均P<0.05)。多因素logistic回归分析发现,感染前入住ICU>48 h、感染前抗菌药物使用时间≥10 d是医院获得性CRE血流感染的独立危险因素(P<0.05)。结论临床尤其是ICU应关注患者的流行病学史,尽早识别CRE血流感染高危因素的患者,同时合理使用抗菌药物,规范有创操作,以减少医院获得性CRE血流感染的发生。

青海省碳青霉烯类耐药肠杆菌目细菌的分子流行病学分析

目的通过研究2022年7月至2023年5月青海省5家医院分离的碳青霉烯类耐药肠杆菌目细菌(CRE)的分布、基因型及耐药性,为临床CRE感染的治疗、院内感染防控,以及抗菌药物制订和评价提供数据支持。方法采用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱仪进行细菌鉴定,采用VITEKⅡcompact进行细菌药敏试验,采用碳青霉烯酶抑制剂增强试验进行产酶表型鉴定,采用聚合酶链反应检测碳青霉烯酶基因(blaKPC、blaNDM、blaIMP、blaVIM和blaOXA-48)。对分离出的优势菌株进行多位点序列分型(MLST)和同源性分析。结果共分离出59株CRE,其中50株分离自临床标本,9株分离自患者所处的环境;59株CRE中阴沟肠杆菌23株,肺炎克雷伯菌22株,大肠埃希菌7株,产酸克雷伯菌5株,弗氏柠檬酸杆菌和布氏柠檬酸杆菌各1株。CRE主要分离于重症监护病房、烧伤科、肝胆科。标本来源主要为伤口分泌物、痰液、血液。59株CRE对酶抑制剂复合制剂、头孢菌素类、氨曲南及碳青霉烯类等抗菌药物均具有较高的耐药率(87.5%~100.0%),对阿米卡星和替加环素的耐药率相对较低,分别为30.4%和15.5%。最常见的碳青霉烯酶基因型是blaNDM(59.32%,35/59),其次是blaKPC(32.20%,19/59),肺炎克雷伯菌中blaKPC-2检出率最高(72.73%,16/22),阴沟肠杆菌中blaNDM-1检出率最高(69.57%,16/23)。MLST结果显示,肺炎克雷伯菌ST分型主要为ST11型(68.18%,15/22),阴沟肠杆菌ST分型主要为ST97型(26.09%,6/23),9株从患者所处环境中分离出的CRE与临床菌株的ST型一致。结论青海省5家医院分离的CRE耐药率普遍较高,主要以阴沟肠杆菌和肺炎克雷伯菌为主,碳青霉烯酶基因以blaNDM和blaKPC为主,耐药问题严重,临床应加强CRE的筛查及控制,预防其在院内传播。

免疫层析技术在肠杆菌目细菌产碳青霉烯酶快速检测中的应用

目的比较两种免疫层析技术在快速检测碳青霉烯类耐药肠杆菌目细菌(CRE)产碳青霉烯酶中的应用价值。方法收集390株临床分离的肠杆菌目细菌,以聚合酶链反应(PCR)方法作为金标准,采用两种免疫层析法同步进行CRE菌株的碳青霉烯酶基因型检测。结果采用碳青霉烯酶的表型检测390株临床分离肠杆菌目细菌,213株为CRE菌株,177株为碳青霉烯类敏感肠杆菌目细菌(CSE)菌株。经PCR基因型检测,213株CRE菌株中,207株产碳青霉烯酶,6株CRE菌株碳青霉烯类耐药机制不明确;207株产碳青霉烯酶菌株中,119株产KPC酶、71株产NDM酶、9株产IMP酶、7株产OXA-48-like酶和1株复合酶(KPC酶+NDM酶)。同步采用两种免疫层析法(丹娜DMK和NG-Test®CARBA5)进行检测,检测与PCR结果符合率均为100%。两种免疫层析法检测5种碳青霉烯酶的灵敏度均为100%(95%CI:97.7%~100%),特异度均为100%(95%CI:97.4%~100%)。结论免疫层析法操作简便、快速,可应用于检测临床分离的碳青霉烯类耐药菌株产碳青霉烯酶的分型。

头孢他啶/阿维巴坦单用或与氨曲南联用对碳青霉烯类耐药肠杆菌目细菌的体内、外抗菌活性的比较

目的了解头孢他啶/阿维巴坦(CZA)单用或与氨曲南(ATM)联合用药对耐碳青霉烯类肠杆菌目细菌(CRE)的体内、外抗菌活性,为临床抗感染治疗提供依据。方法采用微量肉汤稀释法对某院2018-2022年临床分离的52株非重复CRE进行CZA及ATM最低抑菌浓度(MIC)测定,采用棋盘稀释法进行联合药敏试验。时间-杀菌曲线和大蜡螟感染模型检测CZA单用或与ATM联合使用的杀菌效果。结果23株产KPC酶的CRE菌株中91.3%(21株)对CZA的MIC≤4μg/mL,8.7%(2株)的菌株对CZA的MIC≥128μg/mL。产NDM、IMP、KPC+IMP、KPC+NDM等酶型的29株CRE对CZA的MIC值均≥128μg/mL。31株CZA耐药的菌株中93.5%(29株)的CZA与ATM联合FIC值<0.5,6.5%(2株)的FIC在0~1。时间-杀菌曲线表明CZA对产KPC酶的菌株具有杀菌效果,CZA联合ATM对耐CZA菌株有杀菌效果。与单药组相比,CZA联合ATM处理组CRE感染大蜡螟生存率显著提高(中位生存时间120 h,P=0.001)。结论CZA对产KPC酶的细菌有较好的抗菌作用。CZA与ATM联用对CZA耐药的菌株具有协同抑菌作用。

肠杆菌目细菌碳青霉烯酶检测的研究进展

近年来,细菌耐药已经成为公共卫生的一项重大挑战,其中碳青霉烯类耐药肠杆菌目细菌(carbapenem-resistant Enterobacteriaceae,CRE)对抗生素的耐药形势尤为严峻。CRE的主要耐药机制是碳青霉烯酶的产生,不同菌株携带的耐药基因不同,产生的碳青霉烯酶也不同,因此,碳青霉烯酶和耐药基因的早期检测对于控制耐药菌的传播起到重要作用。目前对于碳青霉烯酶的表型检测方法有改良Hodge实验、改良碳青霉烯灭活试验、Carba NP试验、免疫学技术、质谱技术,对于耐药基因型的检测方法有实时荧光定量PCR技术、微阵列技术、等温扩增技术、测序技术,这些方法在碳青霉烯酶的检测中均具有广泛应用。了解各检测技术的优缺点对于在实际应用中选择最适检测方法是非常重要的。本文主要对CRE碳青霉烯酶检测方法的研究进展和各方法的优缺点进行综述,为CRE的检测、预防以及院内感染控制提供数据支持。

两株携带bla_(NDM)基因肠杆菌目细菌的分子流行病学特征研究

目的:了解平顶山某医院两株携带bla_(NDM)基因肠杆菌目细菌临床分离株的分子流行病学特征,为该类病原菌的院内感染预防与控制提供理论依据。方法:收集2022年1~12月临床分离的耐碳青霉烯类肠杆菌目细菌(CRE)。先通过聚合酶链反应(PCR)筛选携带bla_(NDM)基因的CRE菌株,再对菌株携带的其他耐药基因[包括碳青霉烯酶、超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)和喹诺酮类耐药相关基因]进行扩增,并测序确认,通过多位点序列分型(MLST)的方法分析相同种属菌株间的亲缘关系。结果:收集的CRE中有2株检测到携带bla_(NDM)基因,其中1株为携带bla_(NDM)-1的弗氏柠檬酸杆菌,另1株为携带bla_(NDM)-5的大肠埃希菌。这两株菌同时携带多个耐药基因,表现为多重耐药。MLST结果显示,产NDM-1型金属酶的弗氏柠檬酸杆菌为ST85型,产NDM-5型金属酶的大肠埃希菌为ST736型,均不是常见流行克隆类型。采用bla_(NDM)探针进行Southern杂交的结果显示,bla_(NDM)-1基因定位于一个~54kb的质粒上,bla_(NDM)-5基因定位于一个~104kb的质粒上,两个携带bla_(NDM)基因的质粒均不能发生接合。结论:首次在平顶山地区报道携带bla_(NDM)基因的CRE菌株;两株菌均同时携带多个耐药基因;bla_(NDM)基因均位于质粒且都与插入序列(IS)移动元件相关,建议进一步加强院感监测及防控,防止耐药菌株的传播和流行。

全国碳青霉烯类耐药肠杆菌目细菌(除外肺炎克雷伯菌)对抗菌药物的敏感性、耐药机制和分子特征

目的了解全国临床分离碳青霉烯类耐药肠杆菌目细菌(carbapenem-resistant Enterobacterales,CRE)(除外肺炎克雷伯菌)对抗菌药物的敏感性、耐药机制和分子特征。方法收集全国31个省、直辖市和自治区151所医疗机构2021年1—6月临床分离的CRE(除外肺炎克雷伯菌),按区域分别运送至三个中心实验室。中心实验室按照统一的实验方案进行菌种复核鉴定,肉汤微量稀释法测定CRE对抗菌药物的敏感性,所有菌株进行全基因组测序分析菌株产生的碳青霉烯酶基因和多位点序列分型(multilocus sequence typing,MLST)。结果共收集CRE菌株946株,其中大肠埃希菌、阴沟肠杆菌和其他肠杆菌目细菌分别占41.1%(389/946)、34.4%(325/946)和24.5%(232/946)。药敏试验结果显示,大肠埃希菌、阴沟肠杆菌及其他肠杆菌目细菌对氨曲南-阿维巴坦、阿米卡星、黏菌素、多黏菌素B和替加环素均高度敏感,敏感率范围为87.1%~95.5%。全基因组测序显示bla_(NDM-5)(71.7%,279/389)和bla_(NDM-1)(64.3%,209/325)分别是大肠埃希菌和阴沟肠杆菌中主要流行的碳青霉烯酶基因类型。弗劳地枸橼酸杆菌和产气克雷伯菌中均以bla_(NDM-1)为主,分别占73.8%(31/42)和57.8%(37/64);产酸克雷伯菌中,bla_(KPC-2)和bla_(NDM-1)分别占30.4%(14/46)和26.1%(12/46)。MLST分型及地域分布显示大肠埃希菌共存在87种分型,主要以ST410(22.1%,86/389)和ST167(10.5%,41/389)型为主,前者主要分布在福建、河北、湖南、内蒙古、云南等地,后者主要分布在北京、海南、河南、辽宁、青海等地;阴沟肠杆菌共存在54种分型,主要以ST171(17.8%,58/325)和ST78(7.1%,23/325)型菌株为主,前者分布在安徽、河北、黑龙江、河南等地,后者多见于湖北、广西、贵州等地区。结论产碳青霉烯酶是中国临床分离肠杆菌目细菌对碳青霉烯类药物耐药最主要的机制。中国不同省市分离的菌株克隆型存在较大差异。

重症监护病房患者耐碳青霉烯类肠杆菌目细菌肠道定植的病原学及危险因素

目的分析重症监护病房(ICU)患者发生肠道耐碳青霉烯类肠杆菌目细菌(CRE)定植的危险因素和病原学特点。方法将常州某三级医院2023年3—12月进行肠道CRE筛查的392例ICU患者按筛查结果分为定植组(n=42)和非定植组(n=350),收集患者的年龄、性别、基础疾病、恶性肿瘤、放射治疗、化学治疗、最后一次筛查前感染、抗菌药物使用及侵入性操作等临床资料,进行危险因素和病原学分析。结果42例CRE筛查阳性患者检出CRE 44株,其中主要为肺炎克雷伯菌(占65.91%),其次为大肠埃希菌(15.91%)、阴沟肠杆菌(13.64%);定植组患者从入ICU到肠道CRE筛查阳性的平均时间为14 d;长期使用碳青霉烯类抗生素(OR=1.47,95%CI:1.31~1.65),机械通气(OR=1.14,95%CI:1.06~1.22),存在肠杆菌目细菌感染(OR=10.10,95%CI:3.28~32.09)是肠道CRE定植的独立危险因素。碳青霉烯类抗生素使用≥15 d(χ^(2)=167.52,P<0.001)和机械通气≥15 d(χ^(2)=101.03,P<0.001)的患者肠道CRE定植风险更高。结论临床应提高病原学送检,及时进行抗肠杆菌目细菌感染治疗;慎重选择碳青霉烯类抗生素,缩短疗程;并积极评估机械通气指征,及时撤机。

耐碳青霉烯类肠杆菌目细菌定植情况与临床感染特征及危险因素分析

目的分析耐碳青霉烯类肠杆菌目细菌(CRE)定植情况和临床感染特征,并筛选其危险因素。方法将2021年1月—2023年1月医院收治的129例CRE定植的患者纳入定植组,统计CRE菌种鉴定结果与科室分布情况。根据药敏试验结果分析CRE定植患者对常用抗菌药物的敏感性。另取同期在医院就诊的80例感染碳青霉烯类敏感肠杆菌目细菌(CSE)的患者设为对照组,比较定植组、对照组的临床资料,采用多因素Logistic回归分析筛选CRE定植的危险因素。结果129例CRE定植患者共分离129株CRE,以肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌最为常见,占比分别为47.29%、18.60%;129株CRE主要分布于重症医学科、泌尿外科、胸外科,分别占比22.48%、16.28%、15.50%;129株常见CRE对哌拉西林/他唑巴坦、美罗培南等抗菌药物的耐药率较高,对替加环素、多黏菌素敏感性较高。定植组使用抗菌药物时间>2周、气管插管、留置导管、使用激素患者占比以及免疫抑制剂使用率高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);2组性别、年龄、高血压、抗真菌药物使用情况、长期卧床、血红蛋白、体质量指数比较,差异无统计学意义(P>0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示,使用抗菌药物时间>2周(95%CI:1.289~5.407)、气管插管(95%CI:1.065~5.006)、留置导管(95%CI:1.020~5.129)、使用激素类药物(95%CI:1.387~5.789)、使用免疫抑制剂(95%CI:1.249~5.492)是CRE定植的危险因素(OR>1,P<0.05)。结论临床定植的CRE以肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌最为常见,主要分布于重症医学科、泌尿外科、胸外科;CRE定植与使用抗菌药物时间>2周、气管插管、留置导管、使用激素类药物、使用免疫抑制剂等因素有关,临床应加强对易感患者的防护。

重症监护病房患者碳青霉烯耐药肠杆菌目细菌感染研究进展

碳青霉烯耐药肠杆菌目细菌(CRE)作为医院感染的重要病原菌,是医院感染防控的重点,也是全球性公共卫生问题。在医院所有病区中,重症监护病房(ICU) CRE定植和感染情况尤为严重。文章对ICU中CRE定植和感染相关研究进行回顾,梳理全球范围内ICU患者CRE感染特征、感染部位、危险因素等,为CRE医院感染的监测、预防、控制提供参考。

美国感染病学会关于产超广谱β-内酰胺酶肠杆菌目细菌(ESBL-E)、耐碳青霉烯类肠杆菌目细菌(CRE)、难治性耐药铜绿假单胞菌(DTR-PA)、产AmpCβ-内酰胺酶肠杆菌目细菌(AmpC-E)、耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌(CRAB)和嗜麦芽窄食单胞菌的抗感染治疗指引(2022版)摘要

美国感染病学会(IDSA)致力于为抗微生物药物耐药性感染的治疗提供最新指引。两份指引文件分别针对产超广谱β-内酰胺酶肠杆菌目细菌(ESBL-E)、耐碳青霉烯类肠杆菌目细菌(CRE)、难治性耐药铜绿假单胞菌(DTR-PA)和产AmpCβ-内酰胺酶肠杆菌目细菌(AmpC-E)、耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌(CRAB)和嗜麦芽窄食单胞菌感染的治疗提供指导建议。与之前的指南比,已发表的关于AmpC-E、CRAB和嗜麦芽窄食单胞菌感染最佳治疗的数据相对较少,因此指引文件是基于临床经验、专家意见和对现有文献的回顾而提供的“指引”。在全球范围内,由于耐药菌的流行病学和特定抗感染药物的可获得性存在地区差异,指引文件主要侧重于美国的抗感染治疗,适用于成人和儿童。对于抗微生物药物耐药性感染的治疗,建议咨询感染病专家。此指引将每年更新。最新版本于2022年3月7日发布于https://www.idsociety.org/practice-guideline/amr-guidance/和2022年3月31日发布于https://www.idsociety.org/practice-guideline/amr-guidance-2.0/。

山东省聊城地区耐碳青酶烯类肠杆菌目细菌黏菌素耐药基因mcr-1相关感染的分子机制及临床特征

目的 探讨携带mcr-1耐药基因的耐碳青酶烯类肠杆菌目细菌(CRE)相关感染的分子机制及临床特征,为该类菌株感染的临床诊疗及预防区域内传播与暴发流行提供参考依据。方法 收集聊城市第二人民医院2016年1月—2022年12月分离自临床的非重复CRE,采用乙二胺四乙酸碳青霉烯酶失活试验(eCIM)与改良碳青霉烯酶失活试验(mCIM)检测碳青霉烯酶表型;采用微量肉汤稀释法进行体外药敏试验;采用聚合酶链反应(PCR)扩增并测序分析与黏菌素耐药相关的mcr-1基因及碳青霉烯类耐药基因;采用多位点序列分型技术(MLST)确定菌株的序列分型(ST)。收集mcr-1基因阳性菌株感染患者的病历资料,统计相关信息并进行分析。结果 共分离CRE菌株127株,包括65株大肠埃希菌,52株肺炎克雷伯菌,3株阴沟肠杆菌,3株产酸克雷伯菌,2株奇异变形杆菌,以及产气肠杆菌、弗氏柠檬酸杆菌各1株。所有CRE菌株中有6株携带mcr-1基因,且同时为blaNDM-5基因阳性。携带mcr-1的6株CRE仅对替加环素具有较高的敏感性,表现为低水平耐药。MLST分型结果显示有4种不同的ST型别,其中2株为ST167,2株为ST410,其余2株分别株为ST48和ST361。6例患者的性别、年龄、抗菌药物使用史、基础疾病及病情严重程度均不同,各项感染指标有不同程度的升高,患者最终均治愈出院。结论 黏菌素耐药基因mcr-1在聊城地区临床分离的CRE中检出率较低且呈低水平耐药,但已发现该基因与碳青霉烯酶耐药基因共存的现象,需引起临床重视并加强监测。

崇明岛地区511株碳青霉烯耐药肠杆菌目细菌临床感染特征及耐药性分析

了解上海崇明岛地区耐碳青霉烯肠杆菌目(CRE)细菌的临床分布特征及耐药情况,为临床控制CRE的流行和传播提供帮助。方法 收集上海新华医院崇明分院2017年1月至2021年12月分离的非重复CRE菌株,对各年检出率、标本来源、病区、感染人群、病原菌组成及耐药性变迁进行分析,用酶抑制剂增强试验检测碳青霉烯酶表型。结果 共检出CRE 511株,2017-2021检出率分别为:7.0%(60/863)、5.4%(75/1389),7.8%(108/1377),9.8%(125/1278),10.3%(143/1382)呈增长趋势,差异具有统计学意义(P<0.05);标本来源排名前五的为呼吸道(13.6%)、尿液(7.4%)、血液(6.4%)、无菌体液(5.3%)、分泌物(4.0%);病区分布排名前五的为ICU(30.3%)、外科ICU(20.8%)、神经外科(18.4%)、急诊病区(11.8%)、普外科(6.1%);菌种排名前五的为肺炎克雷伯菌(79.3%)、大肠埃希菌(9.6%)、阴沟肠杆菌(4.9%)、产气克雷伯菌(3.1%)、粘质沙雷菌(1.4%);肺炎克雷伯菌酶型以产丝氨酸碳青霉烯酶(KPC)为主(92.8%),肺炎克雷伯菌以外的其他CRE菌株以产金属β-内酰胺酶(NDM)为主(75.5%)。结论 上海崇明岛地区CRE菌株检出率呈逐年升高的趋势,主要分离自呼吸道标本,主要菌株为肺炎克雷伯菌,主要分离科室为ICU,临床应规范使用抗菌药物,主动加强CRE的筛查,以控制CRE的流行和传播。

肠杆菌目细菌致导尿管相关性尿路感染患者发生碳青霉烯类药物耐药的影响因素分析

目的:分析肠杆菌目细菌致导尿管相关性尿路感染(catheter-associated urinary tract infections,CAUTI)患者发生碳青霉烯类药物耐药的影响因素,为临床针对耐碳青霉烯类肠杆菌目细菌(carbapenem-resistant Entero‐bacterales,CRE)制定更有效的感控措施提供参考。方法:利用杏林医院感染实时监控系统,选取2016年1月-2021年12月苏北人民医院收治的719例肠杆菌目细菌致CAUTI患者作为研究对象,采集患者的年龄、性别、手术史、用药情况、基础疾病、侵入性操作情况、住院时间、病原学检查结果等情况,分析CAUTI患者耐碳青霉烯类药物的发生情况及其影响因素。结果:719例肠杆菌目细菌致CAUTI患者中,检出CRE的有96例(占13.35%),而检出碳青霉烯类敏感肠杆菌目细菌(carbapenem-sensitivity Enterobacterales,CSE)的则有623例(占86.65%);回归分析结果显示,男性、入住ICU、特殊使用级抗菌药物使用天数是肠杆菌目细菌致CAUTI患者发生碳青霉烯类药物耐药的独立危险因素(P<0.05)。结论:CAUTI患者病情多危重,是院感防控重点人群,尤其需要关注留置导尿管的男性患者,同时需与药学部、医务处、检验科协作提高临床抗菌药物合理使用率,并联合医务处、护理部全面落实多重耐药菌防控措施,对ICU转至普通病房的患者要加强感控措施交接。

耐碳青霉烯类肠杆菌目细菌耐药的临床危险因素分析

了解耐碳青霉烯类肠杆菌目细菌耐药的相关影响因素。方法 本研究100例接受治疗的患者均于2022年1月至2023年1月接受实验,其中发生耐碳青霉烯类肠杆菌目细菌感染的患者和未发生感染的患者人数一致,均为50例,对选取研究对象的各项资料进行统计分析。结果 住院ICU>7d、使用碳青霉烯类抗生素和使用β-内酰胺酶抑制剂对耐碳青霉烯类肠杆菌目细菌耐药有显著影响。结论 住院ICU>7d、使用碳青霉烯类抗生素和使用β-内酰胺酶抑制剂会对耐碳青霉烯类肠杆菌目细菌耐药产生影响,应加强对易感患者的监控。

临床分离碳青霉烯类耐药肠杆菌目细菌菌株的分子流行病学及碳青霉烯酶抑制剂增强试验的应用

目的:碳青霉烯类耐药肠杆菌目细菌(carbapenem-resistant Enterobacterales,CRE)的流行已成为临床抗感染治疗的巨大挑战。本研究探讨本地区CRE耐药情况及分子流行病学特征,并评估碳青霉烯酶抑制剂增强试验在临床实验室的应用价值,旨在为临床合理使用抗菌药物提供依据。方法:收集中南大学湘雅医院临床标本中分离的非重复性CRE,最低抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC)联合纸片扩散法(Kirby-Bauer,KB)检测菌株的药物敏感性,PCR方法检测13种碳青霉烯酶基因。使用碳青霉烯酶抑制剂增强试验对126株经PCR确定为产碳青霉烯酶的菌株进行表型检测,了解该方法与金标准PCR结果的符合程度。结果:704株CRE呈现出高度耐药的情况,经检测,501株为产碳青霉烯酶的肠杆菌目细菌(carbapenemase producing Enterobacterales,CPE);CPE菌株以肺炎克雷伯菌为主,其次为阴沟肠杆菌和大肠埃希菌;碳青霉烯酶有9种,包括肺炎克雷伯菌碳青霉烯酶(Klebsiella pneumoniae carbapenemase,KPC)、新德里金属β-内酰胺酶(New Delhi metallo-β-lactamase,NDM)、维罗纳整合子金属酶β-内酰胺酶(Verona integronencoded metallo-β-lactamases,VIM)、亚胺培南酶(imipenemase,IMP)、苯唑西林酶48型(oxacillinase-48,OXA-48)以及罕见的亚胺培南水解β-内酰胺酶(imipenem-hydrolyzingβ-lactamase,IMI)、阿德莱德亚胺培南酶(adelaide imipenemase,AIM)、圭亚那超广谱β-内酰胺酶(guiana extended-spectrumβ-lactamase,GES)和Bicêtre碳青霉烯酶(bicêtre carbapenemase,BIC),KPC型丝氨酸酶检出率最高,为61.7%(309/501);碳青霉烯酶抑制剂增强试验检测单产A类丝氨酸碳青霉烯酶、单产B类金属酶以及同时产A类和B类酶菌株的符合率均为100%。结论:湖南省长沙市CRE菌株分布非常广泛,产碳青霉烯酶(特别是KPC型丝氨酸酶)是这类细菌对碳青霉烯类药物耐药的主要机制。在湖南省长沙市首次检出了肠杆菌目细菌携带GES、IMI型基因。碳青霉烯酶抑制剂增强试验结果显示该方法能准确检测产A类丝氨酸酶和B类金属酶的CRE,且操作简单、结果容易判读,能满足临床微生物实验室丝氨酸碳青霉烯酶和/或金属酶检测的需求,为临床精准用药提供依据。

肠杆菌目细菌碳青霉烯酶的实验室检测和临床报告规范专家共识(第二版)

当前,细菌耐药已成为全球公共健康领域的重大挑战,其中尤以碳青霉烯类耐药肠杆菌目细菌(carbapenem-resistant Enterobacterales,CRE)引起的感染形势最为严峻。碳青霉烯类抗生素包括亚胺培南、美罗培南和厄他培南等,是治疗多重耐药革兰阴性杆菌所致感染最有效的抗菌药物之一。随着该类药物在临床的广泛使用,CRE菌株的检出率呈逐年快速上升趋势。

不同部位来源的耐碳青霉烯类肠杆菌目细菌检出情况及耐药性分析

目的:分析本院2018~2020年临床不同部位来源的耐碳青霉烯类肠杆菌目细菌(CRE)的检出情况及耐药性,为临床合理使用抗菌药物提供依据。方法:采用标准纸片法或仪器法,按照统一技术方案,鉴定并完成细菌耐药性检测。药敏结果依据美国临床实验室标准化协会(CLSI)标准进行判读,采用WHONET 5.6分析数据。结果:2018~2020年共检出肠杆菌目细菌11389株,其中,检出CRE 1690株(14.84%),2018年657株、2019年555株、2020年478株,呈逐年下降趋势。2018~2020年CRE菌株排名前3位的均是肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌、阴沟肠杆菌,共检出肺炎克雷伯菌1452株(占85.92%)、大肠埃希菌94株(占5.56%)、阴沟肠杆菌56株(占3.31%)。不同部位来源的肠杆菌目细菌中CRE的占比不同。其中,脑脊液中CRE的占比最高,连续3年均超过30%,且呈增长趋势;尿液中CRE占比最低,低于10%。未发现对替加环素耐药的CRE。CRE除对碳青霉烯类抗菌药物耐药外,对其他抗菌药物普遍耐药。对部分抗菌药物敏感的不同部位来源的CRE的耐药率不同。对部分抗菌药物敏感的碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌的耐药率高于碳青霉烯类耐药大肠埃希菌与碳青霉烯类耐药阴沟肠杆菌。结论:CRE的检出率呈逐年下降趋势,构成和耐药性变化不大。不同部位来源的CRE检出率不同,检出的CRE耐药性不同,临床需结合CRE来源部位制定抗感染方案。

2016-2018年东莞地区耐碳青霉烯类肠杆菌目细菌的耐药表型、耐药机制和分子流行病学分析

目的通过研究东莞地区的耐碳青霉烯类肠杆菌目细菌(carbapenem-resistant Enterobacteriaceae,CRE)的耐药情况和基因分型,研究耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(carbapenem-resistant Klebsiella pneumoniae,CRKP)的亲缘性、耐药机制和bla_(KPC-2)基因环境,为临床寻找控制和治疗该致病菌的更优方案提供参考。方法回顾性收集2016年1月—2018年12月东莞市人民医院、东莞东华医院、康华医院、东莞市中医院和东莞市妇幼保健院等十三所医院的住院患者的CRE菌株进行常规微生物培养、鉴定和药敏试验。以美罗培南或亚胺培南纸片法(K-B法)或最小抑菌浓度(MIC)测定法对肠杆菌目细菌进行初筛;采用改良Hodge试验、亚胺培南-EDTA双纸片协同试验和CIM试验检测CRE产酶情况;聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)检测并鉴定CRE的碳青霉烯类耐药基因(bla_(KPC)、bla_(NDM)、bla_(IMP)、bla_(DHA)、bla_(CTX-M)和bla_(CMY)),以及CRKP的多位点序列分型(multilocus sequence typing,MLST)和孔蛋白(OmpK35、OmpK36和OmpK37);通过Junction PCR、Mapping PCR和Crossing PCR检测bla_(KPC-2)基因环境;使用WHONET 5.6软件统计分析CRE临床分离株在标本和科室中的分布与耐药情况,以及碳青霉烯酶基因在科室中的分布情况。结果从37217株肠杆菌目细菌中共检出131株CRE(占0.35%),其中肺炎克雷伯菌79株(占60.31%)、大肠埃希菌21株(占16.03%)和阴沟肠杆菌12株(占9.16%);检出CRE的临床科室主要为ICU(66株,占50.38%);在检出CRE的标本中,位于前3位分别是痰液标本(56株,占42.75%)、尿液标本(21株,占16.03%)、伤口分泌物标本(12株,占9.16%);CRE对目前临床中常使用的抗菌药物表现出高耐药性,仅对阿米卡星耐药率较低,为21.38%。检测104株CRE(包括肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌和阴沟肠杆菌)发现的碳青霉烯酶有KPC-2型(57,54.81%)、NDM-1型(7株,6.73%)和NDM-5型(2株,1.92%);其中,CRKP主要为ST11型(49株,占62.03%),其次为ST1型(25株,占31.65%);ompK35(75株,占94.94%)、ompK36(77株,占97.47%)和ompK37(79株,占100%)发生突变的占比高;bla_(KPC-2)的基因环境主要为B1型突变型(38株,占48.10%),其次为A型突变型(14株,占17.72%)。结论2016—2018年东莞地区临床CRE检出率为0.35%,耐药性强,其中,CRKP主要为ST11型,主要流行的是KPC-2型,其基因环境为B1型突变型,而且孔蛋白突变占比极高,这提示东莞地区bla_(KPC-2)基因主要通过质粒进行传播,并且孔蛋白突变在CRE中发挥重要作用,院内感染医务工作者应根据该菌科室分布、耐药情况和耐药机制等特点,采取合理有效的预防和治疗方法。