羊肠道病毒研究进展

肠道病毒(Enterovirus,EV)是小RNA病毒科(Picornaviridae)肠道病毒属(Enterovirus)的成员。肠道病毒属包括EV-A~EV-L 12个肠道病毒种和RV-A~RV-C 3个鼻病毒种(Rhinovirus)。其中EV-A~EV-D主要感染人类,EV-E和EV-F主要感染牛,EV-G主要感染猪和羊[1-5],也有报道从羊体内检测出了EV-E和EV-F[6-7]。山羊及绵羊肠道病毒(Caprine/Ovine enterovirus,CEV/OEV)是一种新发病原,主要引起羊以高热、严重腹泻、流涎等为主要特征的疾病,有时也会表现为脑炎和脊髓炎[6-8]。

猪肠道病毒感染的致病机理与营养调控研究进展

腹泻是养猪业面临的世界性难题,由猪肠道病毒感染导致的仔猪腹泻更是如此。营养与动物健康关系十分密切,营养干预已是防控肠道病毒感染的重要措施。营养干预的理论基础是弄清病毒的致病机制及营养对病毒及其感染与动物康复过程的调节作用。本文在简述猪主要肠道病毒特征基础上,重点围绕免疫、细胞命运和肠道微生物等方面总结了病毒的致病机制和营养调控作用研究进展,旨在为深入认识和研究营养与猪肠道病毒的关系,开发肠道保健和抗病营养技术提供参考。

污泥厌氧稳定化流程中肠道病毒的去除与归趋

根据对典型肠道病毒的生物性研究,选取诺如病毒、腺病毒、轮状病毒作为研究对象,以安徽某污泥厂作为研究地点,污泥厂采用的是离心浓缩-水解-厌氧消化-机械脱水-太阳能干化技术,旨在评估不同污泥处理工艺对这些病毒去除效果的影响。本研究利用实时荧光定量PCR技术,对污泥处理各阶段的病毒含量进行定量分析。研究表明,污泥厌氧消化是诺如病毒和腺病毒的去除效率最高的单元,其对数去除率分别为0.68 lg和0.61 lg,太阳能干化单元是轮状病毒的去除效率最高的单元,其对数去除率为0.73 lg。该污泥处理流程对诺如病毒、腺病毒、轮状病毒总量的去除分别达到了98.7%,97.6%,98.4%,但由于进泥中病毒总量较高,最终污泥处置进入环境中含量为1.52×10^(4) copies/g DW,5.17×10^(4) copies/g DW,7.92×10^(3) copies/g DW。

儿童肠道病毒感染所致神经系统感染疾病

病毒感染是儿童中枢神经系统(central nervous system,CNS)感染的重要原因[1-2],尤其是胎儿和新生儿。可导致脑膜炎、脑炎、癫痫发作、头颅影像学异常及遗留永久的神经系统症状。据报道,80%~90%的儿童病毒性脑膜炎由肠道病毒(enterovirus,EV)引起[3]。其中有约10%患者合并脑损伤,可出现脑室旁白质软化,严重者遗留认知障碍、脑性瘫痪等后遗症[4]。尽管大多数EV感染后,患病者散发为主,但有引起大规模疫情的报道[5-6]。此外,EV还可引起CNS持续感染,致大脑功能受到严重损害。所以EV感染引起的CNS感染,对人类健康造成严重损害及沉重经济负担,应引起重视。现将EV感染所致神经系统疾病进行综述,以期提高临床医生对该类型感染的认识。

新冠疫情防控下手足口病肠道病毒的流行特征及变迁趋势

针对2019冠状病毒病(coronavirus disease 2019,COVID-19)疫情,在早期缺乏有效药物干预的情况下,大多数国家都采取了疫情防控措施,该措施的实施导致人们生活及行为方式的改变,减轻了COVID-19的传播.然而,这一策略对其他常见传染病的影响尚不清楚.本文通过分析疫情防控下手足口病肠道病毒的流行及变迁趋势,阐明实施疫情防控措施在减少手足口病肠道病毒流行方面非常有效,并对其基因变迁产生明显影响;探讨免疫力缺失和传染性疾病暴发之间的关系,提示疫情期间由于人们缺乏暴露于各种传染性病原体的机会导致免疫力缺失,未来可能出现多种传染病的共同流行,可为疫情大流行后常见及新发传染病的监测和防控、抗病毒药物和疫苗的研究提供启发.

1例牛肠道病毒的诊断与防治报告

为确定广西百色市那坡县某牛场发病犊牛的病原体,收集腹泻犊牛的粪便样本,并进行逆转录-聚合酶链反应(Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction,RT-PCR)检测、产物序列扩增及同源性分析等一系列实验室诊断。RT-PCR扩增结果表明,临床病例样本为牛肠道病毒阳性;序列分析揭示,所检测的病毒属于E2亚型肠道病毒,未观察到其他病毒的混合感染。基于以上诊断结果,可以确认该牛场出现牛肠道病毒感染。因此,对患病犊牛实施隔离、补液和消毒等一系列综合防控措施,有效控制疫情的进一步蔓延和发展。该文通过对广西百色1例牛肠道病毒病的鉴别诊断及防治措施进行概述,为广西地区牛肠道病毒进一步研究提供参考。

污水处理厂中典型肠道病毒的分布与检测方法及其风险评估

新冠肺炎威胁了全球经济和公众健康,其在粪便和污水中的检出表明了存在粪口传播的可能性。污水在城市污水处理系统中来源广泛,是水传播病毒的重要途径。为进一步开展污水处理设施中病毒的相关研究工作,文中分析了污水处理系统中典型肠道病毒的定量分布现状,总结了污水处理流程中病毒的灭活机制,并对国内外污水处理厂的肠道病毒研究进展进行归纳。此外,梳理了污水处理厂样本中典型肠道病毒的浓缩及检测方法,最后结合定量微生物风险评价(quantitative microbial risk assessment,QMRA)分析方法,讨论了病毒的浓度、感染概率及其潜在的健康风险。研究对国内病毒排放标准和风险评价体系的建立进行了探讨,为实现污水处理厂肠道病毒全过程风险管理和后续处理处置相关规范的制定提供参考和理论支撑。

广西地区犬和猫肠道病毒的病原学调查研究

为了解引起广西地区犬和猫腹泻等肠道病原的分布情况,并探究犬和猫新型肠道病毒感染的临床特征,为临床中及早诊治和防控肠道疾病提供参考依据,本试验采集宠物犬和猫粪便拭子样品394份(犬样品172份,猫样品222份),并通过聚合酶链式反应(PCR)或反转录酶-聚合酶链式反应(RT-PCR)筛查犬细小病毒(CPV)、猫瘟病毒(FPV)和查帕马细小病毒(ChPV)等13种主要犬和猫肠道病毒,并分析肠道病毒阳性率与年龄、性别、免疫状况和临床症状之间的相关性。结果显示,犬粪便样品中总阳性样品数为49份,占比28.49%;其中CPV的阳性率最高,达到15.12%,临床症状为典型的肠道症状;其次,犬粪便样品中还检测到犬冠状病毒(CCoV,4.65%)、猫杯状病毒(FCV,4.07%)、嵴病毒(KoV,4.07%)、博卡病毒(BoV,3.49%)、犬瘟热病毒(CDV,2.91%)和布法病毒(BuV,0.58%);其中11份粪便样品混合感染了2种及以上种类的肠道病毒,CPV感染占10份。幼龄犬对CCoV和FCV比较易感;各肠道病毒阳性率与性别无相关性,部分肠道病毒阳性率与免疫状况和临床症状有相关性。猫粪便样品中总阳性样品数为32份,占比14.41%;FPV的阳性率最高,达到8.11%;其次,猫粪便样品中还检测到新型肠道病毒,包括FCV(4.05%)、ChPV(1.35%)、BoV(1.35%)、BuV(0.45%)和猫冠状病毒(FCoV,0.45%);其中混合感染样品仅4份,而FCV感染占3份。FPV和BoV阳性率与猫的年龄和免疫状况存在相关性,各肠道病毒阳性率与猫的性别和临床症状无明显相关性。值得关注的是,犬和猫粪便中均可检测到A型流感病毒(IAV),阳性率分别为2.91%和0.45%。综上表明,CPV和FPV仍是引起犬和猫肠道疾病的主要病原,同时也是混合感染的重要组成;多种新型肠道病毒的阳性率虽然不高,但仍是引起肠道或肠外疾病中不可忽视的病原;IAV的检出再次强调了犬和猫作为“中间宿主”的重要作用。本试验结果不仅为犬和猫肠道传染病的防控提供预警,也为切断宠物-人IAV传播提供重要参考。

羧甲基茯苓多糖对肠道病毒71型的抗病毒活性及其机制研究

为研究羧甲基茯苓多糖(CMP)对肠道病毒71型(EV71)的抗病毒活性,并探讨其作用机制,采用CCK-8法检测CMP对人恶性胚胎横纹肌瘤细胞(RD细胞)增殖的影响;采用致细胞病变效应(CPE)法观察CMP对EV71感染引起的CPE的抑制作用;采用致半数细胞病理改变的病毒感染剂量(TCID50)法检测CMP对EV71感染性病毒颗粒的抑制水平;采用RT-qPCR法检测EV71结构蛋白VP1的表达;采用Western blotting法分析VP1、P62、LC3、Caspase-3、cleaved Caspase-3蛋白的表达。结果表明:不同质量浓度(0、250、500、1000μg/mL)CMP对RD细胞无明显的细胞毒性;与对照组相比,CMP在无毒性浓度范围内可有效抑制EV71的复制,且能够呈剂量依赖性地降低病毒感染引起的细胞病变效应;CMP可呈剂量依赖性地降低EV71病毒结构蛋白VP1的表达和子代感染性病毒颗粒的产生;CMP可下调EV71病毒感染的RD细胞中的LC3-Ⅱ、cleaved Caspase-3的表达。

E型牛肠道病毒新疆BL311株的分离鉴定及致病性分析

以采集自新疆博乐某牛场腹泻牛的粪便,接种胎牛肾细胞(Madin-Darby bovine kidney,MDBK),盲传15代分离牛肠道病毒(Bovine enterovirus,BEV),使用蚀斑纯化法连续纯化5轮得到纯化病毒,并命名为BL311。使用BL311株感染MDBK细胞后,观察细胞病变效应(cytopathic effect,CPE),采用Reed-Muench法计算病毒滴度,利用理化性质检测、透射电镜观察、基因型分析及对小鼠的致病性试验鉴定BL311分离株。结果显示,BL311分离株感染MDBK细胞24 h后细胞出现变圆、破裂和脱落等致细胞病变效应,病毒滴度显著增高(P<0.05);36 h后细胞出现大量CPE,病毒滴度极显著增高(P<0.01)。理化性质鉴定结果显示BL311分离株对有机溶剂具有一定抵抗力,紫外光照射1 h或56℃环境培养1 h可使毒株失活。电镜下观察BL311毒株为直径25~30 nm的球形颗粒,具有典型的小RNA病毒粒子形态。基因测序结果显示BL311毒株的基因全长是7514 nt,与国内报道的HY12分离株(KF748290)的同源性高达99%,属于BEV-E3型。致病性实验结果显示,BALB/c小鼠感染BL311毒株后,器官表现为肿大,且伴有出血;病理组织学观察可见组织器官炎性细胞浸润及出血。本研究分离纯化得到1株具有较强致病性的E种肠道病毒,将为新疆BEV的流行病学调查及致病机制研究提供依据。

我国预防儿童肠道病毒感染疫苗的临床研究进展

肠道病毒是单股正链RNA病毒,属于小RNA病毒科肠道病毒属,感染人的肠道病毒主要包括脊髓灰质炎病毒(polioviruse,PV)、柯萨奇病毒(coxsackievirus,CV)、肠道病毒68-71型(enterovirus,EV)、甲型肝炎病毒(hepatitis A virus,HAV)[1]。肠道病毒感染能引起流行性胸膜痛、手足口病(hand,foot and mouth disease,HFMD)、疱疹性咽炎、脊髓灰质炎、甲型病毒性肝炎等疾病。在美国,每年肠道病毒导致1000万~3000万人患病,高发于夏季和秋季[2]。肠道病毒是儿童感染的重要病原体,为家庭和社会带来严重的疾病负担。自1949年至今,脊髓灰质炎和甲型病毒性肝炎都是我国儿童肠道病毒感染导致的主要肠道传染病。2008年,我国EV71感染所致的HFMD暴发和流行,是迄今为止亚太地区最严重的一次HFMD流行。这些肠道病毒疾病的暴发和流行给流行地区带来了巨大的社会、经济负担。

肠道病毒检测技术的临床应用与建议

肠道病毒(enteroviruses,EV)属于小RNA病毒科肠道病毒属,基因组为单股正链RNA,长度约为7400bp,编码11个病毒蛋白(VP1-VP4、2A-2C、3A-3D)。病毒主要通过粪口途径传播,偶尔也经呼吸道传播,易造成暴发流行[1]。肠道病毒一直是造成儿童感染的重要病毒病原,可引起手足口病(hand,foot,and mouth disease,HFMD)、疱疹性咽峡炎、中枢神经系统感染、新生儿脓毒症、心肌炎心包炎等疾病。近年来,肠道病毒引发的HFMD、重症肺炎及急性弛缓性脊髓炎(acute flaccid myelitis,AFM)成为公共卫生焦点,引起广泛关注[2]。肠道病毒在免疫缺陷人群或者新生儿中易造成重症感染,部分肠道病毒容易引起新生儿院内感染暴发;因此,肠道病毒的实验室检测在临床诊疗中至关重要[3-4]。快速准确的肠道病毒检测能及时为临床提供病原学证据,有助于实施隔离、治疗和预防等措施,并且为学校、家庭对易感人群的防护措施制定提供依据。本文对肠道病毒相关检测技术及其临床应用进行梳理。

上海市长宁区儿童家长肠道病毒71型灭活疫苗接种意愿及影响因素分析

目的 了解上海市长宁区托幼机构儿童家长为孩子接种肠道病毒71型灭活疫苗(EV71疫苗)的意愿并分析影响因素,为推广EV71疫苗接种提出建议。方法 采用随机抽样的方式抽取长宁区托幼机构就读的儿童,向儿童家长发放问卷进行调查。结果 有75.40%的家长愿意为孩子接种EV71疫苗。Logistic回归分析,不认为EV71会产生强烈副作用、疫苗犹豫量表得分越高、主动获取知识得分越低的家长更愿意为孩子接种EV71疫苗。结论 家长为儿童接种EV71疫苗的意愿受到对EV71疫苗副作用的认知、疫苗犹豫和主动获取知识情况的影响,应对家长开展相关健康教育,以提升接种率。

人类肠道病毒的研究进展

自1908年脊髓灰质炎病毒被鉴定以来,已发现超百种肠道病毒致病血清型,可引起手足口病、新生儿败血症样疾病、无菌性脑炎、急性弛缓性脊髓炎、呼吸系统疾病、急性出血性结膜炎等多种疾病。近年来,诸如EV-A71和EVD68等肠道病毒趋于全球化周期性流行,已成为公共卫生领域不可忽视的重要挑战之一。然而,当前针对肠道病毒的防控手段仍然非常有限,迫切需要深入探究肠道病毒致病的分子机制,为开发高效、安全、广谱的抗肠道病毒药物提供新靶点与新思路。本文通过对肠道病毒的分类、流行病学、结构、生命周期、病毒蛋白与宿主因子相互作用、并发症致病机制与临床治疗以及动物感染模型的确立与应用等方面进行系统的综述,旨在为肠道病毒防治提供理论参考依据,为肠道病毒的药物研发与疫苗储备库建设提供新的思路。

6-35月龄儿童接种肠道病毒71型灭活疫苗的手足口病保护效果和不良反应观察究

总结肠道病毒71型灭活疫苗(EV71)在用于6-35月龄儿童手足口病预防时的效果以及安全性;方法 对在我院接种和不接种肠道病毒71型灭活疫苗的6-35月龄儿童进行随访观察,统计接种和不接种肠道病毒71型灭活疫苗的儿童在1年内手足口病发生率和疫苗接种后的不良反应发生情况;结果 接种组和不接种组儿童的手足口病发生率分别分别为2.78%和10.24%(P<0.05),EV71灭活疫苗的VE为95%CI=73.85(61.50-83.65),接种组144名儿童的接种不良反应发生率为4.17%,轻度不良反应4例、中度不良反应2例;结论 肠道病毒71型灭活疫苗对6-35月龄儿童手足口病具有较好的防护效果,且安全性也较好,适宜儿童接种应用。

新生儿肠道病毒感染的诊疗进展

肠道病毒(enterovirus,EV)是一组引起季节性流行病的主要病原体之一,新生儿EV感染症状轻重不一,轻症仅有发热、腹泻、黄疸等非特异性表现,重症表现为脓毒症样综合征、心肌炎、中枢神经系统感染等,甚至出现多器官功能衰竭,早诊断、早治疗是其主要措施。

重视儿童人肠道病毒呼吸道感染

人肠道病毒(enterovirus,EVs)是一类小RNA病毒,主要通过粪-口和呼吸道飞沫途径传播,是儿童呼吸道感染的主要病原体之一。儿童感染后主要表现为亚临床感染或轻度呼吸道症状,如咳嗽、流涕,偶有致重症肺炎、中枢神经系统感染、心肌炎等[1-4]。目前在儿科临床多未开展呼吸道标本EVs常规检测,故EVs在儿童呼吸道感染中的地位常被忽视[5-6]。2014年肠道病毒D68(EV-D68)在全球暴发并导致大量儿童感染重症肺炎、急性弛缓性脊髓炎,欧美地区随之建立全国性EVs监测网络[7-9]。目前除了肠道病毒A71(enterovirus-A71,EV-A71)疫苗外,尚无临床可用的EVs疫苗和无特异性抗EVs药物,但重症EVs感染如能及早诊断、及早使用人静脉丙种球蛋白(intravenous immunoglobulins,IVIG),可能会有临床获益[10-12]。

2016至2022年杭州地区14259例儿童肠道病毒流行特征分析

目的了解杭州地区手足口病(hand-foot-mouth disease,HFMD)病原体肠道病毒(entero virus,EV)的阳性检出情况及流行特征,为今后制定杭州地区HFMD防控策略提供科学依据。方法收集整理2016年1月至2022年12月期间杭州市儿童医院检出的EV通用型核酸阳性的14259例的病例信息,对年龄、性别、检出时间等因素进行回顾性分析。结果EV历年平均阳性检出率为45.48%(14259/31354),其中男童阳性检出率为27.20%,女童为18.28%,差异有统计学意义(P<0.01)。不同年龄段患儿EV阳性检出率随年龄增大呈下降趋势,5岁以下儿童的EV阳性检出率占所有阳性检出患儿的90.38%。在季节方面,EV夏季高发,历年夏季5月至7月的总阳性检出数占总检出数的49.16%,自2016年以来EV阳性检出率呈逐年下降趋势。结论杭州地区EV感染具有性别差异,男童易感染,尤其需要重视5岁以下儿童的EV防护。另外HFMD存在一定的季节性,夏季高发,历年检出率自2016年后逐年下降,可能与疫苗推广和健康意识提高存在一定关系。

延伸护理对肠道病毒71型手足口病患儿遵医行为及其家长对疾病认知度的影响

目的:探讨延续护理对肠道病毒71型手足口病患儿遵医行为及其家长对疾病认知度的影响。方法:对2021年6月至2023年6月聊城市人民医院收治的80例肠道病毒71型手足口病患儿进行回顾性研究。将进行常规护理的患儿设为对照组,共30例患儿。将进行延伸护理的患儿设为试验组,共30例患儿。评估两组患儿遵医行为(个人卫生、饮食调理、口腔卫生、消毒隔离及皮肤保护)、患儿家长对疾病认知度(疾病发生、疾病发展、疾病治疗、疾病护理及疾病预后)及患儿生活质量(身体健康、心理健康、社会交往、睡眠质量及饮食能力)。结果:试验组患儿个人卫生评分(8.64±1.54)分、饮食调理评分(8.69±1.66)分、口腔卫生评分(7.84±2.74)分、消毒隔离评分(8.64±1.25)分及皮肤保护评分(8.89±1.21)分高于对照组患儿个人卫生评分(6.51±1.28)分、饮食调理评分(6.47±1.32)分、口腔卫生评分(5.98±2.34)分、消毒隔离评分(7.26±1.11)分及皮肤保护评分(7.68±1.55)分(P<0.05)。试验组患儿家长对疾病发生认知度评分(8.65±1.88)分、对疾病发展认知度评分(9.14±0.57)分、对疾病治疗认知度评分(8.68±1.55)分、对疾病护理认知度评分(9.01±0.97)分及对疾病预后认知度评分(8.67±1.65)分高于对照组患儿家长对疾病发生认知度评分(7.21±1.65)分、对疾病发展认知度评分(6.58±0.43)分、对疾病治疗认知度评分(6.87±1.25)分、对疾病护理认知度评分(7.04±0.6)分及对疾病预后认知度评分(6.84±1.24)分(P<0.05)。试验组患儿身体健康评分(83.65±10.37)分、心理健康评分(82.28±10.56)分、社会交往评分(83.61±10.09)分、睡眠质量评分(89.97±9.32)分及饮食能力评分(89.91±9.42)分高于对照组患儿身体健康评分(75.68±10.25)分、心理健康评分(76.42±10.15)分、社会交往评分(74.28±9.92)分、睡眠质量评分(83.12±9.65)分及饮食能力评分(83.07±8.76)分(P<0.05)。结论:延续护理应用于肠道病毒71型手足口病患儿护理中,可提高其遵医行为,改善其家长对疾病的认知度,提高其生活质量,改善其预后,值得临床应用及推广。

肠道病毒C组96型VP1蛋白线性B细胞表位筛选与鉴定

目的鉴定肠道病毒C组96型(enterovirus C96,EV-C96)VP1蛋白的线性B细胞表位。方法采用IEDB网站提供的在线分析工具分析、预测EV-C96 VP1蛋白的线性B细胞表位,结合其二级结构、β-转角、抗原性、亲水性等多项参数,筛选出优势候选表位;应用间接ELISA法检测候选表位与EV-C96免疫血清的反应性以及与21种其他常见手足口病病原血清的交叉反应性;应用微量中和试验测定表位抗体的中和效价;采用序列比对分析表位的序列保守性;应用结构对齐分析表位的结构特异性。结果通过生物信息学筛选出EVC96 VP1蛋白7个候选表位(P1~P7);ELISA法检测发现P7(氨基酸序列位置为282~304)与EV-C96多克隆抗体有强反应性,与其他常见EV多克隆抗体不发生明显反应;微量中和试验显示,P7抗体的中和效价低于1∶2;序列及结构分析结果显示,P7的氨基酸序列在EV-C96型内具有较高保守性,与其他EV相应位点氨基酸序列的结构有明显差异。结论P7表位为EV-C96特异的非中和性B细胞表位,可作为开发EV-C96检测试剂盒的候选抗原表位。