超声造影在胰腺移植中的研究进展

胰腺移植治疗糖尿病,尤其是胰肾联合移植应用于治疗糖尿病合并终末期肾病的临床效果日益改善,使得越来越多的移植中心开展胰腺移植手术。但复杂的手术和各种并发症,降低了患者和移植物的生存率。特别是术后早期较高的血管并发症发生率。而超声造影在胰腺移植术后的应用越来越显示出了优越性。本文主要就超声造影在胰腺移植术后血管评估、供体胰腺评估、血栓形成、预测胰岛素分泌能力、排斥反应及并发症方面的应用加以综述,以期为胰腺移植的临床应用和深入研究提供参考。

胰腺移植适应证的变迁

随着人们生活方式的改变,糖尿病的发病率逐年上升,截至2021年全球有超过5.37亿人患有糖尿病(diabetes mellitus,DM),中国占比四分之一,超过1.4亿,其中90%以上被诊断为2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)^([1])。DM已成为全球终末期肾脏疾病(end stage kidney disease,ESKD)的主要原因,约占50%^([2])。根据2019中国肾脏疾病数据网络的报告显示,在慢性肾脏疾病中,糖尿病肾病已跃居第1位,约占27%^([3])。

大鼠胰肠重建式单纯胰腺移植动物模型的构建

目的 :研究建立胰肠重建式大鼠单纯胰腺移植(pancreastransplantationalone,PTA)的方法 .方法 :SD大鼠分为 :对照组 (NDC组 ,n =1 0 )和PTA组 (n =2 2 ) ;糖尿病大鼠采用脲链霉素诱导 ,PTA组血管吻合采用供胰腺腹主动脉绊 (含腹腔动脉及脾动脉 )及门静脉绊 (含脾静脉 )与受体腹主动脉及左肾静脉分别行端侧和端端吻合 (袖套式 ) ;胰腺断端与小肠行Roux y式吻合 .并于术前和术后 1 ,3,7,1 4和 30d监测受体质量、饮水量、进食量、尿量和空腹血糖 .结果 :PTA组平均手术时间 :供体为 (32 .2± 1 2 .7)min ,受体为 (6 3.4± 1 5 .9)min ,移植物均无热缺血时间 ,冷缺血时间为 (4 8.6± 1 8.3)min .PTA组除 1 1例 (5 0 % )于 1mo内死亡或胰腺失去功能外 ,均成活 1mo以上 ;并发症主要为胰漏及继发性胰腺炎 (7例 ,31 .8% ) ;成功的胰腺移植后 1d血糖即下降 ,3d达到正常 ;饮水量、进食量、尿量均减少 ,1 4d后基本稳定 .结论

^(32)P-胶体局部给药治疗胰腺移植瘤及其在淋巴道的运转

目的 研究^(32)P-磷酸铬(^(32)P-胶体)在裸鼠人胰腺癌Pc-3移植瘤间质注射后的抗癌效应及其在淋巴道的运转。方法 48只荷瘤裸鼠随机分为8组,每组6只。3.7、7.4、14.8、18.5、29.6 MBq组和冷胶体(0 MBq)对照组(1～6组)给药后14 d处死;14.8 MBq组、空白对照组(7组,8组)给药后饲养时间最长达40 d,平均30 d。通过光镜、透射电镜及免疫组织化学等方法,观察给药后^(32)P-胶体在瘤体内积聚情况、14 d瘤细胞坏死率及形态学改变,对CD34蛋白质表达阳性进行微血管密度(MVD)计数;动态观察通过淋巴道转运的^(32)P-胶体对腹股沟淋巴结(GLN)的生物学效应。结果 ^(32)P-胶体注射后主要积聚在瘤体内。1～6组瘤细胞坏死率分别为20％、45％、65％、70％、95％和4％(F=4.14～105.36,P<0.01);MVD分别为38.5±4.0、28.0±2.9、17.0±2.9、8.8±1.5、5.7±2.3和65.0±5.2(t=11.9～26.1,P<0.01)。7组瘤体缩小干瘪,结痂脱落。GLN肿大,给药组迟于并小于6组和8组;移植瘤虽包膜完整,但已存在淋巴道转移,受^(32)P射线作用后瘤细胞发生变性死亡,GLN辐射损伤程度与给药剂量呈正相关,4周后组织修复正常。结论 ^(32)P-胶体瘤体内注射抗癌效应明显,能同时治疗胰腺癌及早期淋巴转移。

监测Th1/Th2细胞因子变化对猪胰腺移植急性排斥反应早期诊断的意义

目的研究Th1／Th2型细胞因子IFN-γ／IL-4变化对胰腺移植手术后急性排斥反应早期诊断的意义。方法杂种长白猪24只，分为对照组、移植组和免疫抑制治疗组。移植组为同种异体胰十二指肠移植，免疫抑制治疗组在进行同种异体胰十二指肠移植手术同时应用环孢素A（CsA）＋霉酚酸酯（MMF）＋甲强龙三联治疗方案。术前1d和移植手术后1、3、5、7d采猪静脉血。检测血糖、胰岛素及胰高血糖素水平，流式细胞仪检测Th1／Th2型细胞因子IFN-γ和IL-4在CD4^＋细胞中的表达，并取移植胰腺组织进行病理学检查及进行评分。结果①术后1～7d移植组IFN-γ表达呈进行性上调，免疫抑制组轻度上调，在术后1、3、5、7d移植组与免疫抑制组IFN-γ的表达差异有统计学意义（P〈0．05）。②移植组IL-4的表达呈进行性下调，免疫抑制组IL-4表达进行性上调，在术后3、5、7d移植组和免疫抑制组IL-4的表达差异有统计学意义（P〈0．05）。③与对照组比较，移植组和免疫抑制组血糖、胰岛素及胰高血糖素水平的变化无统计学意义（P〉0．05）。④与移植组相比，免疫抑制组术后5d和7d胰腺排斥反应程度较轻（P〈0．05）。结论监测Th1（IFN-γ）和Th2（IL-4）型细胞因子变化可以早期发现胰腺移植后急性排斥反应。免疫抑制治疗可以下调Th1（IFN-γ）细胞因子表达，上调Th2（IL-4）型细胞因子的表达。

袖套法制作大鼠胰腺移植模型

目的 :建立一种改进的大鼠胰腺移植模型。方法 :共完成 80例大鼠胰腺移植 ,术中不阻断受体下腔静脉 ,用袖套法完成供体门静脉与受体左肾静脉断端的吻合 ,动脉用缝合法吻合。结果 :受体平均手术时间 5 0min ,静脉袖套吻合时间 3min ,腹主动脉阻断时间 10min ,冷缺血时间 5 0min。手术成功率达 90 %。移植术后胰腺功能恢复正常 ,组织病理学改变轻微。结论 :袖套法制作大鼠胰腺移植模型操作简单 ,成功率高 ,结果稳定。

胰头动脉血供与胰腺移植时胃十二指肠动脉重建的研究

目的了解胰头动脉血供及其变异情况,为胰腺移植时胃十二指肠动脉(GD.a)的重建提供理论依据。方法回顾分析300例胰腺动脉造影片,分析胰头动脉血供的变异情况。结果300例造影中,GD.a显影为131例,能辨认胰十二指肠上前动脉(ASPD.a)和胰十二指肠上后动脉(PSPD.a)者均有79例,GD.a可以发出供血于胰体尾部的胰横动脉(PT.a),其变异率为12.98?。此外,GD.a尚发出小分支供血于胰头20.61?。ASPD.a-AIPD.a,PSPD.a-PIPD.a动脉弓的缺失率分别为15.19?和24.05?。结论重建胃十二指肠动脉可以保证胰头十二指肠完整的血供。

中药移植合剂对大鼠胰腺移植急性排斥反应的作用

目的:观察大鼠胰腺移植后的细胞凋亡情况,以及中药移植合剂在急性排斥反应中的作用并探讨其作用机制。方法:建立大鼠全胰十二指肠移植模型,均为异基因移植(以SD、Wistar大鼠作为供、受体),共分5组,每组10只。第1组:阴性对照组;第2组:环孢素A(cyclosporin A,CsA)组,5mg/(Kg·d);第3组:中药移植合剂组,每100g体重1mL/d;第4组:中西医结合组,中药移植合剂每100g体重1mL/d+CsA2.5mg/(Kg·d);第5组:亚治疗剂量CsA组,2.5mg/(Kg·d)。术后第7d每组处死5只大鼠,取移植胰腺,受体肝脏、肾脏行病理学检查,应用原位末端标记法(TUNEL)检测细胞凋亡情况。余鼠待出现急性排斥反应时处死,观察各组移植胰腺有功能存活时间。结果:中药移植合剂可以延长移植胰腺有功能存活时间,抑制胰腺腺泡细胞凋亡,其与亚治疗剂量CsA合用后可以达到治疗剂量CsA的抗排斥反应效果。结论:中药移植合剂具有一定的抗大鼠胰腺移植急性排斥反应的作用,作用机制与其抑制移植胰腺腺泡细胞凋亡有关,且与CsA具有协同作用。

PFC,TNF-α,NO在猪胰腺移植急性排斥反应中的意义

目的 研究胰周渗液细胞学 (PFC)检查、血清肿瘤坏死因子 (TNF α)和一氧化氮 (NO )在猪胰腺移植急性排斥反应中的价值。方法 建立猪胰腺移植模型后随机分成 3组 ,每组 6头。A组为同种异体胰腺移植 ,不使用免疫抑制治疗 ;B组为同种异体胰腺移植 ,使用免疫抑制治疗 ;C组为自体胰腺移植 ,不使用免疫抑制治疗。术后行连续穿刺活组织检查确立急性排斥反应的发生 ,并观察急性排斥反应发生时PFC以及血清TNF α和NO等的变化。结果 ( 1)A组胰腺移植成功 5只 ,失败 1只。存活 5只均发生急性排斥反应 ;B组 6只均移植成功 ,其中 2只发生轻度急性排斥反应 ;C组移植成功 4只均未发生急性排斥反应。 ( 2 )A组术后第 6天PFC阳性率 80 .0 % ( 4 /5 ) ,B组 16.7% ( 1/6)和C组 0 % ( 4 /4 ) ;术后第 7天A组血清TNF α和NO显著升高 ,B和C组术后升高不显著。结论 PFC ,TNF α ,NO可望作为猪胰腺移植急性排斥反应早期观察指标 。

缺血预处理抑制大鼠胰腺移植缺血再灌注胰腺细胞凋亡:活性氧与线粒体DNA修复酶的作用

背景:缺血预处理可诱发机体内源性保护机制,可全面有效地防治器官移植缺血再灌注损伤。在胰腺移植过程中冷、热缺血均可导致移植胰腺缺血再灌注损伤,线粒体结构及功能与胰腺病变密切相关,近些年研究发现,线粒体DNA存在修复体系,其与线粒体DNA损伤之间的平衡决定了疾病的发生和转归。目的:观察缺血预处理对大鼠胰腺移植缺血再灌注损伤时的细胞凋亡的影响,分析线粒体DNA修复酶8-氧鸟嘌呤DNA糖基化酶和氧化应激在其中的变化规律及可能途径。方法:纳入健康雄性SD大鼠50只,其中20只为供体,10只为假手术组,另20只糖尿病造模后分为缺血再灌注组和缺血预处理组,每组10只。假手术组只行开、关腹手术,缺血再灌注组和缺血预处理组行异位全胰十二指肠移植。缺血再灌注组对应供体大鼠于获取供胰前以4℃UW液灌洗20min;缺血预处理组对应供体大鼠于获取供胰前阻断腹主动脉5min,再灌注5min,共2次。供胰均控制热缺血时间为15min,冷缺血时间为180min。再灌注后12h检测血浆淀粉酶活性、血糖浓度及Caspase-3,9活化水平,流式细胞法检测腺泡细胞凋亡率,罗丹明123法检测线粒体膜电位,二氯荧光素法检测线粒体过氧化氢产生速率,高效液相色谱法检测线粒体DNA中8-氧鸟嘌呤质量浓度,荧光定量聚合酶链反应法检测8-氧鸟嘌呤DNA糖基化酶mRNA的表达,Western-blotting法检测细胞色素C释放、磷酸化Akt及线粒体8-氧鸟嘌呤DNA糖基化酶蛋白表达水平。结果与结论:缺血预处理可降低线粒体氧化应激,提高Akt磷酸化水平,从而上调8-氧鸟嘌呤DNA糖基化酶表达,减少线粒体DNA氧化损伤,抑制腺泡细胞凋亡,减轻移植胰缺血再灌注损伤。

奥曲肽预防胰腺移植术后并发症有效性和安全性的Meta分析

目的系统评价奥曲肽预防胰腺移植术后并发症的有效性和安全性。方法计算机检索EMbase(1974～2008.1)、PubMed(1970～2008.1)、Cochrane图书馆(2008年第1期),中国生物医学文献数据库(1978～2008.1)查找有关奥曲肽预防胰腺移植术后并发症的临床试验研究。由两名评价者独立选择试验、提取资料和评估方法学质量,而后采用Cochrane协作网RevMan4.2.8软件进行统计分析。结果最终纳入3个RCT共82例胰腺移植受者。在移植术后第5天,奥曲肽组与空白对照组相比可降低尿淀粉酶,其差异有统计学意义[SMD=–784.86,95%CI(–1464.24,–105.49),P=0.02],但两组血淀粉酶的差异无统计学意义[SMD=–12.26,95%CI(–56.53,32.06),P=0.59]。奥曲肽组与空白对照组相比,术后各种并发症发生率的差异无统计学意义。奥曲肽组在胰腺移植90天存活和受者6个月生存率与空白对照组比较,其差异亦均无统计学意义[RR=0.96,95%CI(0.83,1.11),P=0.56;RR=1.17,95%CI(0.86,1.58),P=0.3]。在安全性方面,未报道奥曲肽对CsA和FK506吸收的影响,也无其他不良反应的报道。结论现有研究结果显示,与空白对照相比,奥曲肽不能明显降低胰腺移植术后胰腺炎、胰瘘及急性排斥反应的发生,对移植物和受者近期存活率也无明显影响。本系统评价纳入的RCT质量虽较高,但例数不多,上述结论尚需大样本、长期随访的高质量随机对照研究证实。

糖尿病肾脏损害能否被控制和逆转——强化胰岛素治疗及胰腺移植现状

糖尿病肾病（Ｄｉａｂｅｔｉｃｎｅｐｈｒｏｐａｔｈｙ，ＤＮ）是糖尿病最常见的并发症，也是糖尿病患者的主要死亡原因之一。美国肾脏病数据统计源（ＵＳＲＤ）１９９６年的统计资料显示，在终末期肾功能衰竭（Ｅｎｄｓｔａｇｅｏｆｒｅｎａｌｆａｉｌｕｒｅ，ＥＳＲＦ）...

大鼠胰肠和胰膀胱重建式单纯胰腺移植模型的比较研究

目的 探讨大鼠单纯胰腺移植 (PTA )的不同手术方法的效果。方法 近交系SD大鼠为供、受体 ,分为正常对照组 (NDC组 ) 10只 ,糖尿病组 (DC组 ) 10只 ,胰肠重建式组 (E D组 )和胰膀胱重建式组 (B D组 )各 2 2只。血管吻合采用供胰腺腹主动脉绊 (含脾动脉 )和门静脉绊 (含脾静脉 )与受体腹主动脉及左肾静脉分别行端侧和端端吻合 (袖套式 )。并于术前和术后 1,3 ,7,14 ,3 0d监测受体体重、进食量、饮水量和空腹血糖。并分析失败原因。结果 E D组受体手术时间长于B D组 (P<0 .0 5 )。E D组除 11例 ( 5 0 % )、B D组除 12例 ( 5 4.3 % )于 1个月内死亡或胰腺失去功能外 ,其余动物均存活 1个月以上。E D组术后并发症主要为胰漏及继发性胰腺炎 ;B D组主要为尿路并发症 ,前者并发症发生率略低于后者。成功的PTA后受体第 1天血糖即下降 ,第 3天基本达到正常水平 ;饮水量、进食量、尿量均减少 ,14d后基本稳定。结论 成功的E D和B D重建式PTA均可有效地恢复糖尿病大鼠内分泌功能。

小型猪胰腺移植急性排斥反应模型的实验研究

目的 建立小型猪胰腺移植动物模型 ,探索早期诊断急性排斥反应的方法。方法 4 0只猪随机配对行胰腺移植 2 0次 ,将供胰所带的血管与受体髂血管吻合 ,所带小段十二指肠与空肠吻合 ,术中监测平均动脉压、中心静脉压及血气。术后测定受体的血淀粉酶、血糖 ,监测外周血免疫指标 ,彩色多普勒检测供胰血流及超声引导下活检、组织病理检查。结果 移植手术成功率为 90 % ,受体平均动脉压在吻合血管开放后有明显下降 ,与血流开放前差异有显著性 (P <0 0 5 ) ,输血有助于手术成功 ,受体术后平均存活 (12 6± 2 3)d。外周血免疫学监测指标早于供胰的组织病理改变 ,两者的改变均早于急性排斥反应的临床表现。结论 小型猪适用于胰腺移植模型的建立 ,加强术中循环功能的管理、及时输血有利于受体成活 ;

缺血预处理对大鼠胰腺移植的保护作用

目的 探讨缺血预处理对大鼠胰腺移植的远期保护作用。方法 糖尿病大鼠随机分为缺血再灌注组(I/R组, n= 3 0 )和缺血预处理组(IPC组, n= 3 0 ),两组移植前2d,再灌注后3d和7d随机各杀死6只大鼠,取血查血糖及淀粉酶,同时取胰腺组织行HE染色; 6只大鼠用于观测各种代谢指标。其余6只大鼠用来观察大鼠存活率。结果 IPC组1个月存活率高于I/R组( 5 /6∶3 /6, P< 0. 0 1 );再灌注后IPC组各时间点血糖(P< 0. 0 1 )、血淀粉酶(P< 0. 0 1 )、进食量(P< 0. 0 5 )、排尿量(P< 0. 0 1 )和饮水量(P< 0. 0 5 )均低于I/R组;I/R组移植胰的损伤程度大于IPC组。结论 缺血预处理可增加大鼠胰腺移植的存活率,降低血淀粉酶活性,减轻胰腺的再灌注损伤程度,对大鼠胰腺移植具有保护作用。

不同缺血后处理方法对大鼠胰腺移植的保护作用及其机制

背景:缺血-再灌注损伤是胰腺移植后血栓形成和急性胰腺炎的主要原因之一,又是胰腺移植中不可避免的过程,会严重影响移植胰腺的功能。如何减轻缺血-再灌注损伤是目前移植外科的研究热点之一。目的:观察不同缺血后处理方法对大鼠移植胰腺冷缺血再灌注损伤的保护作用。方法:48只糖尿病SD大鼠随机数字表法分为为4组,对照组,缺血后处理1组(再灌注30s缺血30s1次),缺血后处理2组(再灌注30s/缺血30s3次)和缺血后处理3组(再灌注30s/缺血30s6次),各组均行胰腺移植;48只建康SD大鼠为供体;检测各组大鼠再灌注前后血糖,再灌注后2h移植胰腺组织中超氧化物歧化酶、丙二醛及髓过氧化物酶变化,TUNEL法检测移植胰腺组织细胞凋亡情况。结果与结论:再灌注后缺血后处理组较对照组血糖降低(P<0.01);缺血后处理2组较缺血后处理1组和缺血后处理3组血糖低(P<0.05);再灌注后缺血后处理组较对照组移植胰腺组织中超氧化物歧化酶水平高(P<0.01),丙二醛及髓过氧化物酶水平低(P<0.01),缺血后处理2组较缺血后处理1组和缺血后处理3组超氧化物歧化酶水平高(P<0.05)、丙二醛及髓过氧化物酶水平低(P<0.05)。再灌注后缺血后处理组较对照组移植胰组织中细胞凋亡指数值低(P<0.01),缺血后处理2组较缺血后处理1组和缺血后处理3组细胞凋亡指数值低(P<0.05),提示缺血后处理对大鼠移植胰腺的缺血再灌注损伤具有保护作用,并可以减少移植胰腺缺血再灌注后的细胞凋亡,再灌注30s/缺血30s循环3次是最佳的大鼠移植胰缺血后处理诱导办法。

细胞凋亡在大鼠胰腺移植急性排斥反应中的作用

目的探讨细胞凋亡和相关因子Fas、FasL、bcl-2和bax在大鼠胰腺移植急性排斥反应中的作用,评价十二指肠黏膜活检在胰腺移植中诊断排斥反应的价值。方法选SD和Wistar大鼠行全胰十二指肠移植,实验分同基因胰腺移植组和异基因胰腺移植组。于移植术后第3、5及7d分批处死受体,取移植胰腺和十二指肠标本用HE染色和原位末端脱氧核糖核苷酸转移酶标记技术(TUNEL)检测移植物。免疫组化法检测移植后胰腺和十二指肠Fas、FasL、bcl-2和bax的表达。结果异基因胰腺移植组胰腺和十二指肠病理评分相同者占61.1%(11/18);评分不同者占38.9%(7/18),其中胰腺评分较高者6例,十二指肠黏膜评分较高者仅1例。异基因胰腺移植组胰腺和十二指肠病理学评分和细胞凋亡指数均明显高于同基因胰腺移植组(P<0.05,P<0.01)。胰腺和十二指肠细胞凋亡指数与急性排斥反应的病理学评分成正相关(r=0.965,P<0.01;r=0.942,P<0.01)。随着术后时间延长,排斥反应分级上升,细胞凋亡增加,FasL表达升高,在异基因移植组bcl-2表达下降,而Fas和bax表达无明显变化。结论细胞凋亡与移植胰腺急性排斥反应的严重程度呈正相关,细胞凋亡指数可作为判断移植物损伤程度的指标。FasL和bcl-2与胰腺移植急性排斥及组织损伤密切相关。十二指肠黏膜活检有助于判断有无胰腺急性排斥反应发生。

大鼠单纯胰腺移植手术技术

目的 探讨大鼠单纯胰腺移植(PTA)的手术技巧。方法 88 只 SD大鼠分为供、受体。根据胰外分泌系统的不同处理分为胰肠重建式(E D组,n=22)和胰膀胱重建式(B D组,n=22)行 PTA,血管吻合采用供胰腺腹主动脉袢(含脾动脉)和门静脉袢(含脾静脉)与受体腹主动脉及左肾静脉分别行端侧和端端吻合(袖套式)。于术前和术后1 d、3 d、7 d、14 d和30 d监测受体尿量、进食量、饮水量和空腹血糖。结果 平均手术时间: 供体为(33.1±11.1) min,受体为(51.7±14.7) min; 移植物均无热缺血时间,平均冷缺血时间为(46.5±17.1) min; 成功的PTA后受体术后第1天血糖即下降,第3天基本达到正常水平; 饮水量、进食量及尿量均减少,14 d后基本稳定。结论 成功的PTA可有效地恢复糖尿病大鼠内分泌功能,掌握熟练的手术技巧非常重要。

穿孔素和颗粒酶B蛋白表达对胰腺移植急性排斥反应早期诊断的研究

目的研究移植胰腺局部穿孔素和颗粒酶B的蛋白表达对急性排斥反应的早期诊断和鉴别诊断的意义。方法将40只四川当地杂种长白猪随机分为3组，即对照组（n=8）、移植组（n=16）、移植＋免疫抑制剂治疗组（n=16）。移植手术为同种异体经门静脉回流、肠内引流全胰十二指肠移植。免疫抑制剂治疗组在进行同种异体胰十二指肠移植术同时应用环孢A＋骁悉＋甲强龙三联免疫抑制治疗。分别于术前1d和术后1、3、5、7d检测受者的锁骨下静脉血胰岛素、胰高血糖素、血糖水平。术后1、3、5、7d，开腹取胰腺组织进行常规病理学检查和免疫组化染色检测穿孔素和颗粒酶B的蛋白表达。结果①对照组、移植组以及移植＋免疫抑制剂组之间受者的血糖、胰岛素、胰高血糖素水平变化有统计学意义（P〈0．05）。②胰腺移植＋免疫抑制剂组与单纯胰腺移植组相比胰腺组织中穿孔素和颗粒酶B的蛋白表达及穿孔素和颗粒酶B的阳性淋巴细胞计数的差异有统计学意义（P〈0.05）。③免疫组化染色检测移植后胰腺组织中穿孔素和颗粒酶B蛋白表达。比常规病理学检查诊断排斥反应早2～4d。结论移植胰腺组织穿孔素和颗粒酶B局部蛋白表达变化早于常规病理学改变，结合常规病理学检查可以对胰腺急性排斥反应做出早期诊断和鉴别诊断。