肥胖脂肪组织中巨噬细胞亚型与代谢性疾病的关系

背景:巨噬细胞亚型表现出组织异质性,脂肪组织巨噬细胞表型很大程度上受肥胖的影响,肥胖脂肪组织巨噬细胞导致的局部和系统炎症反应被认为是肥胖相关代谢性疾病的关键病理学原因。目的:通过总结脂肪组织巨噬细胞不同亚型炎症特点及其与肥胖相关代谢性疾病的关系,为靶向特定巨噬细胞亚型探索肥胖相关代谢性疾病的防治策略提供参考依据。方法:检索中国知网、PubMed数据库相关文献,中文检索词为“肥胖,脂肪组织,脂肪组织巨噬细胞,巨噬细胞极化,代谢性疾病”;英文检索词为“obesity,adipose tissue,adipose tissue macrophages,macrophage polarization,metabolic diseases”,依据入选标准对检索结果进行录用或排除,最终纳入符合标准的91篇文献进行综述。结果与结论:①巨噬细胞具有组织异质性,正常情况下,脂肪组织巨噬细胞以抗炎M2型常驻巨噬细胞为主,维持组织炎症稳态;发生肥胖时,肥大脂肪细胞周围围绕大量外来浸润性巨噬细胞,并且大部分表现出促炎特点。因此,曾经被认为是促炎M1型的脂肪组织巨噬细胞实际上可能是多种促炎亚型的集合。对各种促炎亚型特点的进一步认识有助于深入了解肥胖脂肪组织炎症紊乱的机制。②肥胖情况下,外来浸润性巨噬细胞围绕在肥大脂肪细胞周围形成冠状结构,目前已发现冠状结构中有6种不同亚型,其中大部分表现出促炎特性,少数亚型具备抗炎特点,因此充分发挥抗炎亚型作用的同时抑制促炎亚型的分化可能是缓解肥胖脂肪组织炎症损害的新靶向。③已有研究发现M3、MMe、CD9^(+)、LAM脂肪组织巨噬细胞亚型参与动脉粥样硬化、糖尿病、胰岛素抵抗、癌症等代谢疾病的发生发展,DARC+和MFehi脂肪组织巨噬细胞亚型在治疗非酒精性脂肪肝、肥胖胰岛素抵抗、铁死亡相关代谢疾病中起到关键作用。上述研究进一步说明肥胖脂肪组织外来浸润巨噬细胞引起的炎症紊乱是肥胖诱发代谢性疾病的重要病理基础,对各种亚型特点的进一步深入研究具有重要的理论和现实意义。

内脏脂肪组织与骨关节炎因果关联的分析

背景:尽管肥胖与骨关节炎之间存在关联,但作为肥胖关键因素的内脏脂肪组织与骨关节炎之间的因果关系尚不明确。目的:采用两样本孟德尔随机化方法探讨内脏脂肪组织与骨关节炎的因果关系。方法:从大规模全基因组关联分析(GWAS)中筛选出221个与内脏脂肪组织强相关且无连锁不平衡的单核苷酸多态性。骨关节炎的汇总数据来自一项大型全基因组关联分析,纳入了来自9个不同人群多达826690名受试者(177517名骨关节炎患者和649173名对照)。采用两样本孟德尔随机化评估内脏脂肪组织与早期任意部位骨关节炎(45岁之前)、任意部位骨关节炎、膝骨关节炎、髋骨关节炎、膝/髋骨关节炎、脊柱骨关节炎、拇指骨关节炎、手指骨关节炎之间的因果关联。以逆方差加权为主要方法进行孟德尔随机化分析,同时将加权中位数法、MR-Egger法用于补充说明。结果与结论:①逆方差加权分析结果显示,内脏脂肪组织对早期任意部位骨关节炎(OR=1.91,95%CI:1.64-2.24,P=6.04×10^(-16))、任意部位骨关节炎(OR=1.44,95%CI:1.38-1.49,P=3.65×10^(-75))、膝骨关节炎(OR=1.87,95%CI:1.75-2.00,P=1.29×10-79)、髋骨关节炎(OR=1.34,95%CI:1.24-1.45,P=2.84×10^(-14))、膝/髋骨关节炎(OR=1.71,95%CI:1.62-1.80,P=2.97×10^(-83))、脊柱骨关节炎(OR=1.42,95%CI:1.31-1.54,P=8.89×10^(-17))、拇指骨关节炎(OR=1.26,95%CI:1.10-1.44,P=6.21×10^(-4))、手指骨关节炎(OR=1.29,95%CI:1.13-1.49,P=2.68×10^(-4))具有正向因果效应;②敏感性分析结果显示,内脏脂肪组织对8种骨关节炎的因果效应没有异质性、多效性或异常值;③结果提示内脏脂肪组织是骨关节炎的风险因素,过多的内脏脂肪组织可能会增加患骨关节炎的风险。

左心房心外膜脂肪组织体积及CT衰减值在房颤射频消融术后复发的预测价值

目的探究左心房(LA)心外膜脂肪组织体积(EATV)及CT衰减值与心房颤动(AF)射频消融术后复发的关系。方法随访AF术前接受左房肺静脉CT血管造影(LAPV-CTA)的患者,随访终点是AF复发,随访时间是1年,最终纳入110例患者复发36例,未复发74例)。通过Siemens Synogo.Via测量总EATV、EAT CT衰减值、LA-EATV及LA-EAT CT衰减值,比较两组间的差异。结果36例(32.7%)出现复发,与AF未复发组相比,AF复发组持续性AF比例(13%)更高,合并冠心病比例更低(28%),T-EATV[(141.08±46.28)cm^(3)VS(96.44±34.93)cm^(3),P<0.05]与LA-EATV[(16.50±6.23)cm^(3)VS(9.82±4.52)cm^(3),P<0.05]更大,AF复发组LA-EAT CT衰减值[(-74.58±3.86)HU VS(-79.48±7.27)HU,P<0.05]更高。结论LAEATV、LA-EAT CT衰减值是AF射频消融术后复发的独立预测因子,LA-EATV与LA-EAT CT衰减值的联合模型预则AF复发的效能最高。

β_(3)-肾上腺素受体在犊牦牛肾周脂肪组织中的表达分布

【目的】探究β_(3)-肾上腺素受体(β_(3)-AR, ADRB3)在犊牦牛寒冷适应中的调控作用。【方法】选取不同日龄(1、7和30日龄)的健康雄性犊牦牛,采用免疫组织化学染色(IHC)、实时荧光定量PCR(qRT-PCR)以及Western blot(WB)对犊牦牛棕色/白色脂肪组织中ADRB3 mRNA及β_(3)-AR蛋白的表达、分布及激素敏感性脂肪酶(HSL)基因mRNA表达进行分析。【结果】IHC结果显示,β_(3)-AR在犊牦牛肾周棕色和白色脂肪细胞中均有分布,且从1~30日龄,β_(3)-AR阳性表达强度显著增加(P<0.05)。qRT-PCR结果显示,从1~30日龄,ADRB3和HSL mRNA表达水平显著增加(P<0.05)。WB结果显示,从1~30日龄,β_(3)-AR蛋白表达水平显著增加(P<0.05)。【结论】ADRB3 mRNA和β_(3)-AR蛋白在犊牦牛肾周棕色和白色脂肪组织中均有表达,且其表达量在白色脂肪组织中高于棕色脂肪组织,说明β_(3)-AR在犊牦牛肾周脂肪组织产热和脂解中均发挥重要的调节作用。

内脏脂肪组织影像学特征与阿尔茨海默病的相关性研究

目的探讨腹部内脏脂肪组织(VAT)影像学特征与阿尔茨海默病(AD)的相关性。方法选取2021年3月至2023年8月于四川省人民医院、成都市第八人民医院收治的AD患者83例做为试验组(AD组),选取同期来院就诊的认知功能正常者83例为对照组(CN组)。采集人口学、血管危险因素、临床实验室指标。采用Slice-O-Matic法测算经脐VAT面积、经脐皮下脂肪(SAT)面积、肾周脂肪(PRAT)总面积。使用PACS系统测定肝平均衰减值(DAV)、脾平均DAV、胰平均DAV。采用Spearman秩相关分析方法探索VAT各主要影像学参数与MMSE评分间的相关性,使用二元Logistic回归模型分析VAT各主要影像学指标与AD发病风险的关系,绘制ROC曲线比较VAT指标间对AD发病的预测效能。结果较CN组而言,AD组PRAT总面积、PRAT总面积/经脐VAT面积、PRAT总面积/经脐SAT面积、肝平均DAV、肝平均DAV/脾平均DAV显著增高(P<0.05);上述各影像学指标的增长提高了AD发生的风险,且与全体受试者简易智能状态检查量表评分呈负相关(P<0.05),其各自ROC曲线下面积(AUC)均大于0.5(P<0.05)。结论腹部VAT影像学特征具有成为AD生物标志物的潜力。

犊牦牛肾周棕色脂肪组织的发育及其产热相关基因的表达分析

棕色脂肪组织(BAT)作为非震颤性产热(NST)的主要产热器官,在新生动物的寒冷适应中发挥重要的作用。为探究犊牦牛肾周BAT的发育及其产热相关基因的表达,本试验采集1日龄、7日龄和30日龄犊牦牛肾周脂肪组织,利用苏木精-伊红染色观察脂肪细胞,利用透射电子显微镜观察脂滴和线粒体的超微结构,利用免疫组织化学染色、实时荧光定量PCR和蛋白质免疫印迹(Western blot)检测解偶联蛋白1(UCP1)在脂肪细胞的定位、mRNA和蛋白表达水平,以及脂肪转化因子过氧化物酶体增殖激活受体α(PPARα)和过氧化物酶体增殖物受体γ共激活因子1α(PGC-1α)基因mRNA表达水平。结果显示,犊牦牛肾周存在2种类型的脂肪细胞,即含有小脂滴和大量线粒体的棕色脂肪细胞以及含有大脂滴和少量线粒体的白色脂肪细胞;与1日龄犊牦牛相比,7日龄和30日龄犊牦牛肾周白色脂肪细胞的面积和密度均显著增加(P<0.05),棕色脂肪细胞的面积和密度均显著降低(P<0.05);不同日龄犊牦牛肾周棕色脂肪细胞和白色脂肪细胞质膜上均有UCP1阳性表达,与1日龄犊牦牛相比,7日龄和30日龄犊牦牛肾周脂肪细胞中UCP1阳性表达强度均显著降低(P<0.05);与1日龄犊牦牛相比,30日龄犊牦牛肾周脂肪组织中BAT产热相关基因(UCP1、PPARα和PGC-1α)mRNA表达水平均显著降低(P<0.05);与1日龄犊牦牛相比,7日龄和30日龄犊牦牛肾周脂肪组织中UCP1蛋白表达水平均显著降低(P<0.05)。结果表明,出生后犊牦牛肾周棕色脂肪细胞数量逐渐减少而白色脂肪细胞数量逐渐增加,且产热相关基因表达水平逐渐降低。该结果为深入探究犊牦牛寒冷适应机制提供了参考资料。

脂肪组织及其衍生成分在创面修复和血管化中的作用

背景:软组织损伤修复过程中,局部的血管化对创面愈合和功能恢复至关重要。脂肪组织被认为是人体最大的干细胞来源库,目前已开发出多种不同的脂肪成分被用于研究和治疗,其促进血管再生和软组织修复的能力被广泛研究。目的:综述血管化在软组织损伤修复中的研究进展,总结脂肪组织及其衍生成分的制备方法及其在血管化和软组织损伤修复中的应用。证实脂肪组织及其衍生成分在血管和软组织工程中具有卓越的研究价值和临床应用前景。方法:利用PubMed、Web of Science和CNKI数据库检索2010年1月至2023年2月发表的相关文献,中文检索词为“软组织修复,伤口愈合,血管化,血管新生,脂肪组织,间质血管成分细胞,脂肪源微血管片段,纳米脂肪,脂肪干细胞基质胶”,英文检索词为“soft tissue repair,wound healing,vascularization,angiogenesis,adipose tissue,stromal vascular fraction,adipose tissue-derived microvascular fragment,nanofat,adipose extracellular matrix/stromal vascular fraction gel”,并纳入少量年份久远的经典文献。通过阅读标题和摘要进行初筛,排除与文章主题不相关的文献,最终纳入69篇文献进行综述分析。结果与结论:(1)创面愈合是一项重要的生理过程,主要发生在组织受到损伤时,如创伤、手术、烧伤、肿瘤、感染以及血管性疾病引起的组织损伤缺损等;(2)创伤部位足够的血管化对组织修复、局部稳态的重新构建和功能恢复至关重要;(3)脂肪组织被认为是人体最大的干细胞来源库,目前已有多种不同的脂肪成分被用于研究和治疗;(4)由于其本身具有的成分和制备优势,脂肪组织将在未来的组织工程研究和治疗中继续扮演重要角色。

冠状动脉心肌桥对其近端冠状动脉周围脂肪组织参数的影响

目的观察冠状动脉心肌桥(MB)对其近端冠状动脉周围脂肪组织(PCAT)参数的影响。方法回顾性收集287例经冠状动脉CT血管造影(CCTA)检查未见冠状动脉斑块的临床疑诊冠状动脉心脏病患者;根据左前降支(LAD)有无MB将其分为MB组(n=150)与无MB组(n=137)。测量MB组LAD-MB长度及深度,并根据MB深度划分纵深型与浅表型亚组。比较组间及MB组内亚组间LAD PCAT参数——脂肪衰减指数(FAI)及脂肪总体积(FV);以单因素及多因素线性回归分析MB组临床因素(年龄、性别、体质量指数)及MB长度、深度与PCAT参数的相关性。结果MB组FAI高于而FV低于无MB组(P均<0.001)。MB组150例中,浅表型亚组99例、纵深型亚组51例;前者FAI低于而FV高于纵深型后者(P均<0.001)。150例LAD-MB中位长度20.10 mm、中位深度0.80 mm。单因素线性回归分析显示,全部287例中,性别与FAI呈负相关;MB组FAI与LAD-MB长度及深度均呈正相关,而FV与之均呈负相关(P均<0.05)。多因素线性回归分析显示,MB组FAI与LAD-MB长度及深度均呈正相关(B=0.105、1.797,P均<0.05)而FV与后二者均呈负相关(B=-15.585、-162.343,P均<0.05),FAI及FV均与临床因素无明显相关(P均>0.05)。结论MB可致其近端PCAT FAI升高、FV降低。

65岁及以上老年人群中基于脂肪组织过多引起的慢性疾病患病情况及影响因素分析

背景美国临床内分泌学家协会和美国内分泌学会提出基于脂肪组织过多引起的慢性疾病(ABCD)模型来评价肥胖,目前国内针对ABCD的研究极少,应用效能也尚不清楚。目的运用ABCD这一新的肥胖评价指标,了解中国65岁及以上老年人群中ABCD的患病情况及其影响因素。方法选择2021年1—12月参加广东省深圳市坪山区28家社区健康服务中心体检的65岁及以上老年人5562名,通过问卷调查、体格检查、实验室检测获取研究对象基本特征,根据ABCD模型的诊断标准对样本人群进行ABCD分期,计算ABCD及各个分期的患病率,采用多因素Logistic回归分析探究ABCD分期与不同心脏代谢危险因素风险的关系。结果本研究中ABCD患病率为71.0%,0期、1期、2期患病率分别为4.8%(267/5562)、32.5%(1808/5562)、33.7%(1874/5562)。多因素Logistic回归分析结果显示,以ABCD正常为参照组,除高总胆固醇与饮酒外,糖尿病、高血压、三酰甘油升高、高密度脂蛋白胆固醇降低、低密度脂蛋白胆固醇升高、吸烟与ABCD分期存在关联(P<0.05);ABCD 1期发生高血压、三酰甘油升高、高密度脂蛋白胆固醇降低、低密度脂蛋白胆固醇升高的风险分别是正常人群的2.393倍、1.515倍、1.940倍、1.688倍、1.376倍;ABCD 2期发生糖尿病、高血压、三酰甘油升高、高密度脂蛋白胆固醇降低、低密度脂蛋白胆固醇升高的风险分别是正常人群的2.918倍、4.231倍、9.282倍、4.128倍、2.970倍、1.672倍。吸烟是ABCD1期和2期的保护因素,OR(95%CI)分别为0.577(0.480~0.693)、0.752(0.633~0.893)。结论本研究中65岁及以上老年人ABCD患病情况存在男女差异,患病率与高血压、糖尿病、吸烟等心脏代谢危险因素存在关联,ABCD模型在中国老年人群中应用效果良好。

m^(6)A甲基化修饰调控产热脂肪组织的研究进展

脂肪组织过度沉积会导致人体肥胖,并引发相关的代谢性疾病,同时也会直接影响畜禽生产效率和产品品质。因此,如何调控脂肪组织沉积对于保障人类身体健康、提高动物生产性能及改善动物产品品质都具有重要意义。而脂肪组织的产热功能成为了一个备受关注的领域,其可通过消耗葡萄糖、脂肪酸等能量物质对机体进行产热调节,从而达到维持机体能量平衡的目的。N6-甲基腺嘌呤(N6-methyladenosine,m^(6)A)修饰作为RNA分子上的主要表观遗传标记,在棕色脂肪组织激活、脂肪组织棕色化及产热中发挥重要功能。作者概述了脂肪组织的产热机制及mRNA m^(6)A相关修饰蛋白,重点论述了mRNA m^(6)A甲基化修饰对产热脂肪组织能量代谢的调控机制,深入解析了其在能量平衡、产热脂肪激活及代谢性疾病等方面的关键作用,以期为研究产热脂肪的具体产热机制奠定基础,并为精准靶向调控动物脂肪产热机制进而调控动物生产性能和产品品质提供新的思路。

心外膜脂肪组织与代谢综合征相关性的研究进展

代谢综合征是一组以胰岛素抵抗、超重/肥胖为核心,合并糖脂代谢异常、高血压等的代谢失衡综合征。心外膜脂肪组织作为一种特殊的脂肪组织,既具备脂肪储能、机械保护的生理特性;又具有高分泌活性,能够释放多种抗炎/炎症因子,调节游离脂肪酸的摄取/释放,其代谢稳态在代谢综合征的进程中发挥着重要的作用。心外膜脂肪组织与代谢综合征各组分的相关性研究也不断取得新进展,主要从异位脂肪堆积、游离脂肪酸超载、脂肪低度炎症、氧化应激方面探讨影响代谢综合征的核心机制,通过改善生活方式、药物干预、手术干预等措施均可减少心外膜脂肪组织体积,进而改善代谢综合征,减少心血管事件。因此本文将心外膜脂肪组织与代谢综合征的相关性、影响机制及治疗策略研究进展进行综述。

慢性肾脏病非透析患者瘦组织质量/脂肪组织质量比值与左心室肥厚的关系

目的:探讨瘦组织质量(lean tissue mass,LTM)/脂肪组织质量(adipose tissue mass,ATM)比值对慢性肾脏病(chronic kidney disease,CKD)非透析患者左心室肥厚(left ventricular hypertrophy,LVH)的影响。方法:纳入CKD非透析患者417例,根据左心室重量指数(left ventricular mass index,LVMI)分为左心室正常组(Non-LVH组)240例、左心室肥厚组(LVH组)177例。收集基线资料及实验室指标等参数,同时收集超声心动图及生物电阻抗检测结果,比较两组之间的基线数据及LTM/ATM比值等数据。采用多因素Logistic回归分析CKD非透析患者LVH的危险因素。绘制受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线评价LTM/ATM对LVH的预测价值。结果:LVH组高血压患病率、年龄、女性比例、收缩压显著高于Non-LVH组,BMI、血红蛋白、血白蛋白、估算的肾小球滤过率(estimated Glomerular Filtration Rate,eGFR)显著低于Non-LVH组,差异均有统计学意义。LVH组LTM、瘦组织指数、LTM/ATM比值低于Non-LVH组,两组之间容量负荷差异无统计学意义。多因素Logistic回归分析显示年龄、BMI、收缩压、血红蛋白、LTM/ATM比值+性别均为CKD非透析患者LVH的独立危险因素。LTM/ATM比值+性别联合血红蛋白预测LVH的ROC曲线下面积为0.769。结论:低LTM/ATM比值为CKD非透析患者LVH的危险因素,该比值预测此类患者LVH的发生具有一定价值。

前列腺周围脂肪组织促进前列腺癌发展的研究进展

前列腺被其周围的脂肪组织所包裹,这些脂肪称之为前列腺周围脂肪组织(PPAT)。本文从PPAT与前列腺癌的相关性、PPAT测量的界限与方法,及其在前列腺肿瘤微环境的作用等方面进行综述,以期能为前列腺癌提供新的治疗策略和风险分层因素。

基于MRI影像组学对评估术前直肠癌周边纤维脂肪组织浸润的应用价值

目的 评估基于MRI影像组学模型对术前直肠癌周边纤维脂肪组织浸润的应用价值。方法 回顾性分析2019年12月~2022年3月于铜陵市人民医院术后经病理证实直肠癌75例患者术前MRI图像资料,根据病理结果分为纤维脂肪组织浸润组(n=33)及纤维脂肪组织未浸润组(n=42)。基于T2WI及动脉期对比增强T1WI(CE-T1WI)提取影像组学特征,将数据按照7:3的比例分为训练组(n=54)与验证组(n=21),采用最大相关最小冗余和最小绝对收缩和选择算子回归的方法对训练集数据进行特征降维,并将特征降维后作为特征向量,筛选出最佳的影像组学特征,构建出T2WI模型、CE-T1WI模型及T2WI+CE-T1WI模型3种影像组学模型,根据ROC曲线确定其中最优模型;根据肿瘤上下径、肿瘤最厚径、CE-T1WI相对信号强度比值(RCE-T1WI)、T2WI相对信号强度比值(RT2)、DWI相对信号强度比值(RDWI)及ADC值多因素Logistic回归分析构建出联合模型;评估最优模型与联合模型二者效能及临床效益。结果 基于T2WI和CE-T1W1各提取851个影像组学特征,最终分别获得10个和14个最佳特征,用于构建T2WI+CE-T1WI模型。基于T2WI模型、CE-T1W1模型及T2WI+CE-T1WI模型在训练组中对判定直肠癌周边纤维脂肪组织浸润的AUC分别为0.87(95%CI:0.75~0.95)、0.82(95%CI:0.70~0.91)和0.84(95%CI:0.71~0.92),在验证组中分别为0.76(95%CI:0.53~0.92)、0.73(95%CI:0.50~0.90)和0.76(95%CI:0.52~0.92)。采用联合模型在训练组中对直肠癌纤维脂肪组织浸润的AUC为0.91(95%CI:0.80~0.97),在验证组中AUC为0.80(95%CII:0.57~0.94)。决策曲线分析提示,阈值取0~1时,联合模型的净收益高于T2WI模型。结论 基于MRI影像组学的联合模型对评估术前直肠癌周边纤维脂肪组织浸润的效能较高。

一种简便的富含脂肪组织脱水前脱脂方法

目的寻找有效的富含脂肪组织的脱脂方法,提高HE制片的质量。方法20例富含脂肪组织及5例扁桃体经过对照组和5组实验组(不同比例AX脱脂液处理组)不同条件进行脱脂效果对比。结果在室温、37℃和56℃条件下,5种AX脱脂液处理组[无水乙醇(A)与二甲苯(X)按1:1、1:2、1:3、2:1和3:1]和对照组切片合格比例存在差异,具有统计学意义(P<0.05);在AX比例1:3时,HE切片可见裂隙;在AX比例2:1和3:1时,伊红染色着色较浅;在AX比例1:1和1:2时,切片较平整,少见裂隙,HE染色较佳。AX(1:2)脱脂处理扁桃体组织免疫组化结果显示CD20、CK和Ki-67染色强度与对照组无差别,定位准确;而经AX(1:1,1:3,2:1和3:1)脱脂处理扁桃体组织免疫组化结果显示CD20、CK和Ki-67染色强度减弱,定位尚清晰。经AX(1:3和3:1)脱脂处理后Ki-67染色细胞核出现“拖尾”现象,胞核多见空洞。56℃条件下,AX(1:2)脱脂处理的5例扁桃体组织提取的DNA经Nanodrop 2000测定,结果DNA纯度较佳。结论比例1:2的AX脱脂液组效果最佳,且水浴加热至37℃和56℃,脱脂速度明显加快,且对后续的免疫组化和分子检测均无影响。

二甲苯、正庚烷和正丁醇对脂肪组织透明效果的比较研究

为了找到安全、高效、可替代二甲苯的脂肪组织石蜡切片透明剂,试验采集2月龄健康民猪背部脂肪组织,经固定、脱水后,分别用二甲苯、正庚烷、正丁醇处理不同时间(二甲苯处理1 h,正庚烷处理1 h、2 h、3 h、4 h,正丁醇处理1 h、2 h、3 h、4 h、10 h)进行透明,观察透明效果,然后进行石蜡包埋和切片;选取3种透明剂将脂肪组织完全透明用时最短的石蜡切片,经脱蜡和水化处理后用苏木精染液和伊红染液进行H.E.染色,探究3种透明剂对脂肪组织形态结构的影响;并采用免疫组织化学技术检测过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome proliferators-activated receptor γ,PPARγ)的表达情况,探究3种透明剂是否会影响蛋白质的表达和定位。结果表明:二甲苯处理1 h、正庚烷处理2 h后脂肪组织可完全透明,而正丁醇处理10 h后脂肪组织才完全透明;正庚烷、正丁醇作为透明剂制备的脂肪组织石蜡切片细胞形态清晰、结构完整、着色好,与二甲苯作为透明剂的效果相似;在3种透明剂制备的脂肪组织石蜡切片中,PPARγ均清晰且准确地表达在脂肪细胞的细胞核中。说明正庚烷和正丁醇对脂肪组织的透明效果与二甲苯相似,但正庚烷透明速度较快,正丁醇透明速度很慢,因此实际应用中推荐使用正庚烷作为二甲苯的替代物。

心外膜脂肪组织厚度与急性心肌梗死PCI术后关系

目的探讨心外膜脂肪组织厚度(Epicardial adipose thickness,EAT)与急性心肌梗死PCI术后的关系。方法纳入南昌市第一医院2019年1月至2021年12月收治的急性心肌梗死患者70例,根据EAT将患者分为A组(EAT≥3.42 mm,38例)和B组(EAT<3.42 mm,32例)。比较两组患者的病史资料、BMI、临床生化指标、多项超声心动图检查参数等,并于PCI术后12个月内进行随访,以探讨急性心肌梗死PCI术后发生主要不良心血管事件(Major adverse cardiovascular events,MACEs)的危险因素。结果两组患者在12个月的过程中总共发生MACEs 18例,其中A组14例,B组4例。Logistic回归分析显示,EAT与MACEs的发生有显著联系(P=0.019,OR=2.900)。结论EAT与MACEs的发生具有相关性,是预测急性心肌梗死PCI术后发生MACEs的独立危险因素。

敲除PAMM基因对小鼠白色和棕色脂肪组织基因表达的影响

目的:巨噬细胞集落刺激因子诱导单核细胞活化的类过氧化物酶2(peroxiredoxin-like 2 activated in M-CSF stimulated monocytes,PAMM)是一种具有抗炎、抗氧化功能的蛋白,在脂肪组织中高表达,本文拟利用基因敲除小鼠,探究PAMM对白色和棕色脂肪组织形态及基因表达等的影响,以期为其功能研究提供新思路。方法:利用CRISPR-Cas9等技术构建PAMM基因敲除(knockout,KO)小鼠,用野生型(wild-type,WT)小鼠作为对照。收集腹股沟皮下白色脂肪组织(inguinal adipose tissue,IAT)和背部棕色脂肪组织(brown adipose tissue,BAT),通过HE染色观察组织形态,利用RNA-seq和RT-qPCR检测相关基因的表达。结果:通过基因组PCR及测序,证明基因敲除小鼠构建正确。敲除PAMM后IAT和BAT形态无明显变化,但E2F靶点、未折叠蛋白反应等基因集在IAT或BAT中富集。比较WT和KO小鼠组织,发现33个基因的变化趋势在IAT和BAT中保持一致;而仅在IAT中出现变化的基因,分布在胞外、胞膜等部位,参与免疫和趋化反应等,与钙信号通路等相关;仅在BAT中出现变化的基因,分布在胞外基质、胞核等部位,参与葡萄糖稳态、生物节律等过程。RT-qPCR检测钙通路及生物节律相关基因,变化趋势与测序结果类似。本文还观察了敲除PAMM对IAT和BAT之间差异表达基因的影响,发现WT和KO小鼠BAT/IAT的差异基因和通路大多相同,但也有部分基因和通路发生了变化。结论:PAMM敲除对IAT和BAT的形态结构无明显影响,但显著影响了二者的基因表达及相关信号通路,还可能影响IAT和BAT之间的相互作用。

代综方对肥胖小鼠白色脂肪组织糖原代谢的影响

目的观察代综方对肥胖小鼠脂肪组织糖原代谢的影响,探讨其激活白色脂肪组织棕色化的调控机制。方法采用高脂饲料喂养C57BL/6J小鼠建立肥胖模型,将成模小鼠分为模型组、二甲双胍组(0.15 g/kg)和代综方低(0.20 g/kg)、高(0.40 g/kg)剂量组,另取常规维持饲料喂养的小鼠作为正常组,每组12只,各给药组分别予相应药物灌胃,连续6周。测量小鼠体质量及空腹血糖,检测血清三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)含量,取肩胛棕色脂肪组织及腹股沟、肾周、附睾白色脂肪组织,分别测定脂肪组织质量并计算体脂系数,HE染色观察脂肪组织形态变化,PAS染色观察脂肪组织糖原分布,免疫组化染色检测腹股沟白色脂肪组织糖原合成酶2(Gys2)、蛋白磷酸酶1调节亚基3c(Ppp1r3c)、糖原合酶激酶(GSK)-3β表达。结果与正常组比较,模型组小鼠各时点体质量和空腹血糖均显著升高(P<0.05,P<0.01),血清TC、HDL-C含量显著升高(P<0.01);腹股沟、肾周、附睾白色脂肪组织质量及体脂系数显著升高(P<0.01),腹股沟白色脂肪组织细胞肥大、呈大空泡样,糖原积累较少,Gys2、Ppp1r3c表达显著降低(P<0.01)。与模型组比较,代综方高剂量组小鼠给药4、6周体质量和空腹血糖均显著降低(P<0.05,P<0.01),血清TG、TC、HDL-C、LDL-C含量均显著降低(P<0.01);肾周、附睾白色脂肪组织质量及体脂系数显著降低(P<0.05,P<0.01),腹股沟白色脂肪组织质量显著降低(P<0.05),腹股沟白色脂肪组织可见多处形态不规则的小空泡,周围伴有细胞核聚集,糖原积累增加,Gys2、Ppp1r3c阳性表达显著升高(P<0.01)。各组小鼠腹股沟白色脂肪组织GSK-3β表达差异无统计学意义。结论代综方可通过上调Ppp1r3c表达提高Gys2活性,促进糖原合成,诱导脂肪组织棕色化,增加脂肪产热,改善肥胖及相关糖脂代谢紊乱。

肾素-血管紧张素-醛固酮系统中不同组分在脂肪组织中的表达

目的观察肾素-血管紧张素-醛固酮系统(RAAS)的不同组分在人皮下、肾脏和肾上腺周围脂肪组织中的表达,探讨不同脂肪组织中RAAS各组分的特点。方法提取12例皮下脂肪、12例肾周脂肪和9例肾上腺周围脂肪总RNA,逆转录-聚合酶链反应方法进行血管紧张素原(AGT)、肾素(Renin)、血管紧张素转化酶(ACE)、血管紧张素转化酶2(ACE2)、血管紧张素Ⅱ受体1(AT1)、血管紧张素Ⅱ受体2(AT2)、醛固酮合成酶(CYP11B2)的mR-NA表达。结果皮下、肾脏和肾上腺周围脂肪组织中均存在AGT、ACE、ACE2、AT1和AT2mRNA表达,无CYP11B2mRNA表达。肾素mRNA仅在肾周和肾上腺周围脂肪组织中表达,其在肾周的表达显著高于肾上腺周围脂肪组织(P<0·05)。ACE、ACE2mRNA在肾周脂肪组织中的表达显著高于皮下脂肪组织(P<0·05)。ACEmRNA在3种脂肪组织中的表达均显著高于ACE2(P<0·05)。在肾上腺周围脂肪组织中,AT2mRNA的表达显著高于AT1(P<0·05)。结论脂肪组织中存在局部肾素-血管紧张素系统,但无醛固酮合成。