干扰素γ和铁死亡诱导剂联用抑制口腔舌鳞状细胞癌生长的机制研究

目的:探讨干扰素γ(IFN-γ)和铁死亡诱导剂(Erastin)联用抑制口腔舌鳞状细胞癌(OTSCC)生长的机制。方法:通过生物信息学分析和免疫组化染色检测SLC7A11在OTSCC中的表达;用CRISPR-cas9技术敲除CAL-27细胞的SLC7A11基因(SLC7A11 KO),用MTT实验检测铁死亡诱导剂Erastin处理WT和SLC7A11 KO细胞后的生存率;用谷胱甘肽(GSH)试剂盒、脂质氧化(MDA)试剂盒和流式分析技术检测铁死亡诱导剂处理细胞后脂质过氧化物的变化;用IFN-γ预处理细胞24 h后,用MTT实验检测CAL-27细胞对Erastin的敏感性的变化;用IFN-γ预处理24 h后,再Erastin处理12 h,用谷胱甘肽试剂盒、脂质氧化试剂盒和流式分析技术检测细胞脂质过氧化物的变化。结果:生物信息学分析和免疫组化染色结果显示,SLC7A11在OTSCC中高表达;与WT细胞相比SLC7A11 KO CAL-27细胞对铁死亡诱导剂的敏感性增加;铁死亡诱导剂处理后SLC7A11 KO细胞的GSH含量低于WT细胞,而脂质过氧化物含量高于WT细胞;IFN-γ可以增加了细胞对铁死亡诱导剂的敏感性;IFN-γ可以降低细胞的GSH含量,增加细胞的脂质过氧化物含量。结论:IFN-γ通过下凋SLC7A11导致GSH减少,增加MDA和Lipid ROS含量,进而增加了OTSCC对铁死亡诱导剂Erastin的敏感性。

舌鳞状细胞癌根治性切除术后患者预后预测列线图的构建与验证

目的:评估术前炎症生物标志物、预后营养指数和临床病理特征对舌鳞状细胞癌(tongue squamous cell carcinoma,TSCC)患者行根治性切除术后生存结局的预后价值,并以此构建患者预后预测列线图模型。方法:回顾性收集2017年1月至2018年7月于北京大学口腔医院接受根治性肿瘤切除术的297例TSCC患者的病例资料,随机按照7∶3比例分为训练集和验证集。分析患者术前全身炎症反应标志物中性粒细胞/淋巴细胞比率(neutrophil-to-lymphocyte ratio,NLR)、淋巴细胞/单核细胞比率(lymphocyte-to-monocyte ratio,LMR)、血小板/淋巴细胞比率(platelet-to-lymphocyte ratio,PLR)、系统免疫炎症指数(systemic immune-inflammation index,SII)、系统性炎症评分(systemic inflammation score,SIS)及预后营养指数(prognostic nutritional index,PNI)与TSCC患者术后总生存期(overall survival,OS)和疾病特异性生存期(disease-specific survival,DSS)的相关性。使用X-tile软件确定连续变量的最佳截断值作为分界点。采用Kaplan-Meier生存分析和多变量Cox回归模型分析影响TSCC患者的独立预后预测因素,据此构建OS和DSS的生存相关列线图预测模型,通过训练集和验证集进行模型内部交叉验证和外部验证,具体通过一致性指数、时间依赖性受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线、曲线下面积(area under the curve,AUC)、校准曲线和决策曲线分析对列线图的准确性进行验证。结果:单因素Cox回归分析显示,TNM分期、T分期、N分期、分化程度、侵袭深度(depth of invasion,DOI)、肿瘤直径和治疗前PNI水平为影响TSCC预后危险因素;多因素Cox回归分析显示,治疗前PNI水平、N分期、DOI和肿瘤直径为患者5年OS或DSS的独立预后因素(P<0.05)。治疗前N分期≥1、PNI≤50.65和DOI>2.4 cm与较差的5年OS显著相关,而N分期≥1、PNI≤50.65、肿瘤直径>3.4 cm与较差的5年DSS显著相关。基于独立预后因素构建的TSCC术后患者OS和DSS的列线图预测模型的一致性指数分别为0.708(95%CI,0.625~0.791)和0.717(95%CI,0.600~0.834),验证集验证结果显示,OS和DSS列线图预测模型的一致性指数为0.659(95%CI,0.550~0.767)和0.780(95%CI,0.669~0.890)。OS列线图模型和DSS列线图模型的1年、3年和5年的时间依赖性ROC分析(AUC分别为0.66、0.71、0.72和0.68、0.77、0.79)表明模型具有稳定的判别能力。校准曲线显示OS和DSS预测估值与实际观察值之间具有良好的一致性,决策曲线分析反映模型具有较好的临床应用价值。结论:治疗前PNI、N分期、DOI和肿瘤直径可能对TSCC患者的OS和DSS有可靠的预测价值,基于这些参数构建的预后预测列线图在预测TSCC根治性切除术后患者的OS和DSS方面表现出良好的准确性和有效性,是评估生存结局的有效工具,有助于选择有针对性的联合治疗来改善患者预后。

协同刺激分子B7-H4在舌鳞状细胞癌组织中的表达及其与预后的关系

目的:观察协同刺激分子B7同系物4(B7 homolog 4,B7-H4)在人口腔舌鳞状细胞癌(oral tongue squamous cell carcinoma,OTSCC)中的表达,并探讨其与预后的关系。方法:选取2006年1月至2018年12月在苏州大学附属第三医院病理科存档的99例OTSCC患者的癌组织、30例OTSCC患者的癌旁组织石蜡包埋块,通过免疫组织化学染色检测B7-H4在OTSCC癌组织、OTSCC癌旁组织中的表达情况,采用卡方检验分析OTSCC癌组织中B7-H4的表达与患者临床病理特征的关系,运用生存分析法(Kaplan-Meier法)分析B7-H4表达与患者总生存期(overall survival,OS)的关系,拟合Cox模型评价各临床病理特征与患者预后的关系。结果:免疫组织化学检测结果显示,OTSCC组织中B7-H4无表达或低表达共40例,占总样本的40.4%,高表达59例,占总样本的59.6%;99例OTSCC患者临床病理资料分析结果显示,B7-H4的表达与临床分期、N分期相关(P<0.001);Kaplan-Meier生存分析显示,B7-H4表达较高患者的OS低于B7-H4表达较低的患者,差异具有统计学意义(HR=1.013,95%CI=1.004~1.022,P<0.05);单因素Cox回归生存分析模型示,T分期、组织分化程度、肿瘤大小、B7-H4表达与OTSCC患者预后相关(P<0.05);在多因素Cox回归生存分析模型中,B7-H4高表达(HR=1.015,95%CI=1.005 3~1.024,P<0.01)和组织分化程度(HR=1.665,95%CI=1.004 7~2.760,P<0.05)可作为OTSCC患者预后评判的独立危险因素。结论:B7-H4的表达与OTSCC患者预后显著相关,其有助于OTSCC患者预后评估。

NFATc4在舌鳞状细胞癌神经侵犯诊断中的作用

目的:通过比较活化T细胞核因子胞质4(NFATc4)与S100钙结合蛋白(S100)、p75神经营养素受体(p75)对舌鳞状细胞癌(TSCC)神经侵犯(PNI)的免疫组织化学染色特点,探索NFATc4在TSCC PNI诊断中的作用。方法:收集59例TSCC病理标本,10例癌前病变为对照组,每个标本连续切片后采用免疫组织化学染色,观察NFATc4对TSCC以及神经的染色情况,并与S100和p75进行比较。结果:59例TSCC病理标本中,NFATc4阳性率为47.5%(28/59),PNI发生率为35.6%(21/59),NFATc4阳性表达组的PNI发生率高于NFATc4阴性表达组(P<0.05),NFATc4染色可见神经内膜淡染色,TSCC细胞胞质可见染色,NFATc4对神经的鉴别效果与S100和p75比较,无统计学差异(P>0.05)。结论:NFATc4的表达与PNI的发生存在关联,NFATc4能在染色神经束的同时,将TSCC组织染色,可以在同一个视野内直观地观察肿瘤与神经的关系,有利于提高PNI判读准确率,有望成为一个判断PNI的指标。

大蒜素通过GSK-3β/β-catenin信号通路抑制舌鳞状细胞癌EMT的研究

本研究旨在探讨大蒜素(Allicin)对舌鳞状细胞癌上皮向间充质转化(EMT)的影响,并探究其作用机制。本实验采用CCK-8法检测不同剂量大蒜素对HSC-3和HSC-4细胞的生存作用并计算半数抑制作用(IC_(50));划痕和Transwell小室实验测定大蒜素对细胞的迁移能力和侵袭影响;Western Blot检测蛋白表达。结果显示,大蒜素对HSC-3和HSC-4细胞活性有抑制作用且具有时间和剂量依赖性;不同浓度(20、40、60μmol/L)的大蒜素能够抑制HSC-3和HSC-4细胞迁移和侵袭;Western Blot结果显示大蒜素能够升高EMT标志物E-cadherin表达,降低N-cadherin和Vimentin表达,同时对GSK-3β/β-catenin信号通路中P-GSK-3β和β-catenin蛋白起到抑制作用。结果表明,大蒜素能够抑制舌鳞状细胞癌HSC-3和HSC-4细胞侵袭和迁移,其机制可能是通过抑制GSK-3β/β-catenin信号通路逆转EMT发生实现的。

沉默长链非编码RNA HOTAIR对舌鳞状细胞癌细胞放射敏感性的影响

目的:研究下调长链非编码RNA HOTAIR的表达水平对舌鳞状细胞癌细胞株CAL-27和SCC-9放射敏感性的影响。方法:设计3条干扰HOTAIR的序列,通过慢病毒载体转染至CAL-27和SCC-9中,运用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)验证干扰效率。将细胞分为空白组(CAL-27、SCC-9)、实验组(si-HOTAIR CAL-27、si-HOTAIR SCC-9)、阴性对照组(si-NC CAL-27、si-NC SCC-9),再将以上细胞给予8 Gy电子线照射,MTT法检测各组细胞增殖,划痕实验检测各组细胞迁移,流式细胞实验检测各组细胞凋亡情况。结果:在3条慢病毒载体中,si-2及si-3可下调HOTAIR在CAL-27和SCC-9中的表达(P<0.05),且si-3干扰效率最高(P<0.05),在接受8 Gy电子线照射后,与对照组(si-NC CAL-27、si-NC SCC-9)相比,实验组(si-HOTAIR CAL-27、si-HOTAIR SCC-9)的增殖能力明显减弱(P<0.05);细胞凋亡率增加[(23.87±1.97)%vs.(46.03±2.49)%,(15.99±0.76)%vs.(39.38±2.95)%],迁移率下降[65.85%vs. 58.82%,47.81%vs. 37.78%],差异有统计学意义(P<0.05)。结论:降低HOTAIR的表达水平可提高舌鳞癌细胞CAL-27和SCC-9的放射敏感性。

不同颈部处理方式对全麻下早中期舌鳞状细胞癌淋巴清除及术后复发率的影响

目的:探讨肩胛舌骨上颈淋巴清扫术与舌骨上颈淋巴清扫术在全麻下对早中期舌鳞状细胞癌患者的临床疗效。方法:选取2020年10月—2021年12月赣州市人民医院收治的156例早中期舌鳞状细胞癌患者,随机将其分为对照组与研究组,各78例。对照组采取舌骨上颈淋巴清扫术治疗,研究组采取肩胛舌骨上颈淋巴清扫术治疗。比较两组淋巴清扫效果、生存质量、转阴率、转阴者复发率及治疗满意度。结果:研究组淋巴清扫总有效率显著高于对照组(P<0.05)。研究组转阴率显著高于对照组(P<0.05);研究组转阴者复发率低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后6个月,两组华盛顿医科大学生存质量量表(UW-QOL)评分均较治疗前明显升高,且研究组UW-QOL评分较对照组显著高(P<0.05)。研究组治疗满意度显著高于对照组(P<0.05)。结论:与舌骨上颈淋巴清扫术相比,肩胛舌骨上颈淋巴清扫术疗效更好,且更有助于减少舌鳞状细胞癌复发率、改善生存质量及提升治疗满意度。

MDCT增强联合CTA复合多维技术在舌鳞状细胞癌评估中的诊断价值

目的:验证多排螺旋CT(MDCT)增强联合CT血管成像(CTA)多维技术在舌鳞状细胞癌诊断中的应用价值。方法:回顾性分析从2011年11月~2022年7月的44例舌鳞状细胞癌患者的影像学特征及指标,以病理检查结果作为诊断金标准,评价CT平扫及MDCT增强联合CTA多维技术对舌鳞状细胞癌定性、定量诊断的评估效能。结果:CT平扫对评估原发性舌鳞状细胞癌淋巴结转移的灵敏度及特异度分别为63.16%和55.56%,MDCT增强联合CTA多维技术的灵敏度及特异度分别为94.74%和55.56%。CT平扫对评估复发性舌鳞状细胞癌淋巴结转移的灵敏度及特异度均为50%,MDCT增强联合CTA多维技术的灵敏度及特异度分别为71.43%和66.67%。平扫时肿瘤面积及动、静脉期肿瘤面积与舌鳞状细胞癌淋巴结转移无显著相关。结论:MDCT增强联合CTA多维技术可用于舌鳞状细胞癌术前诊断与分期,对临床治疗方案制定具有一定指导意义。

CA2、CA9蛋白在舌鳞状细胞癌的表达及预后价值

目的探讨CA2、CA9蛋白在舌鳞状细胞癌(TSCC)中的表达及生存意义,并分析两者表达相关性及在癌症中的潜在机制。方法UCSC Xena在线分析CA2、CA9 mRNA在TSCC和对应正常组织中的表达,免疫组化验证CA2、CA9蛋白在89例TSCC及29例癌旁正常组织中的表达,并分析CA2、CA9蛋白表达相关性及其与临床因素相关性,同时研究了CA2、CA9对TSCC的诊断及生存意义。最后用STRING和Metascape数据库进一步探索了CA2和CA9蛋白潜在作用机制。结果与癌旁正常组织相比,UCSC Xena数据库显示CA2、CA9 mRNA在TSCC中均高表达(均P<0.05),同时免疫组化实验表明CA2、CA9蛋白在TSCC中也显著高表达(均P<0.05)。其中,CA2蛋白在TSCC中高表达率为21.35%,CA9高表达率达61.80%。CA2蛋白高表达与TSCC更好的分化程度相关(P<0.05),CA9过度表达与更差的T分期明显相关(P<0.05),且CA2与CA9蛋白表达呈正相关(r=0.240,P<0.05)。CA2、CA9蛋白在TSCC中的ROC曲线下面积分别为83.9%、85.8%,且两者过度表达均与患者的不良预后相关(均P<0.05)。COX多因素模型提示CA9过度表达可能是TSCC预后不良的独立因素(HR:2.748,P<0.05)。CA2、CA9可能参与了调节pH、缺氧反应等生物过程。结论CA2、CA9蛋白高表达提示TSCC患者的预后不良。

IL-34在舌鳞状细胞癌中的表达及意义

目的探讨白细胞介素34(IL-34)在舌鳞状细胞癌(TSCC)中的表达及临床病理学意义。方法使用酶联免疫吸附法(ELISA)检测IL-34在36例TSCC患者和36例正常人群血清中表达水平;通过免疫组织化学(IHC)以及实时荧光定量PCR技术(qRT-PCR)比较41例TSCC患者癌组织和癌旁组织中IL-34的表达情况,并进一步分析其表达情况与TSCC患者临床病理特征之间的关系;利用String数据库,LinkedOmics数据库和GEO数据库获得在TSCC中IL-34相关差异基因,通过Webgestalt数据库对TSCC中IL-34相关基因进行基因本体论(GO)功能分析和京都基因与基因组百科全书(KEGG)信号通路富集分析。结果ELISA结果显示TSCC患者血清IL-34浓度低于正常人群,差异有统计学意义(P<0.001);IHC和qRT-PCR结果显示与TSCC患者癌组织相比,IL-34在TSCC患者癌旁组织中高表达,差异有统计学意义(P<0.001),在癌组织中IL-34的表达水平和淋巴结是否转移,TNM分期有关(P<0.05),而与TSCC患者的年龄、性别、是否吸烟、是否喝酒以及肿瘤大小无关(P>0.05);通过数据库分析发现IL-34与CSF1R,PTPRJ相关性最强,GO功能分析结果显示:在TSCC中IL-34及相关基因在生物学过程(BP)中,主要富集在骨髓细胞分化等;在细胞组成(CC)中,主要富集在含胶原蛋白的细胞外基质等;在分子功能(MF)中,主要富集在细胞因子结合、信号受体激活剂活性等。KEGG信号通路富集显示:IL-34及相关差异基因主要参与破骨细胞分化,癌症中的蛋白多糖,MAPK信号通路等。结论IL-34在TSCC中低表达且参与TSCC的发生、发展,有望成为TSCC新的诊断标志物和治疗靶点。

实验室炎症相关指标的列线图对预测舌鳞状细胞癌患者手术预后的价值

目的:舌鳞状细胞癌(TSCC)转移率和术后复发率均较高,本研究拟探讨实验室免疫相关指标的列线图模型对预测TSCC手术患者预后的价值。方法:对2008—2019年间在汕头大学医学院附属肿瘤医院接受治疗的167例TSCC患者进行回顾性分析。采用Cox回归分析确定与患者总生存期(OS)相关的独立预后因素,以建立列线图并预测患者OS。通过校准曲线、决策曲线和C-指数对模型的预测准确性进行评估。结果:多因素Cox回归分析和K-M生存分析显示,B因子、单核细胞计数、淋巴细胞-单核细胞比值和肿瘤淋巴结转移(TNM)分期是独立预后影响因素,将这些因素用来构建列线图预后模型。列线图的C-指数为0.754[95%CI(0.672,0.835)],高于TNM分期的0.679[95%CI(0.602,0.755)],并且列线图的赤池信息准则和贝叶斯信息准则分别为312.134和318.239,均低于单独TNM分期的319.163和320.689,表明列线图对OS的预测具有更好的拟合优度。校准曲线分析显示,列线图对OS的预测值与患者实际的观测值具有较好的一致性。此外,时间依赖性C-指数分析和决策曲线结果显示,与TNM分期相比,该预后模型具有良好的预测准确性和鉴别能力。结论:基于临床病理指标和术前炎症相关指标的列线图模型可能有助于预测TSCC手术患者的预后。

CPEB3在人舌鳞状细胞癌组织中的表达及与临床病理特征相关性分析

目的:探讨人舌鳞状细胞癌(TSCC)组织中胞质多聚腺苷化元件结合蛋白3(CPEB3)的表达及其临床意义。方法:通过UALCAN在线分析CPEB3在头颈部鳞状细胞癌(HNSC)组织中的差异表达及其与临床特征的相关性,免疫组织化学法检测CPEB3在TSCC和癌旁组织中的表达,分析CPEB3表达水平与TSCC病人病理特征间的相关性。结果:生物信息学分析结果显示,CPEB3在HNSC组织中的表达量明显低于正常组织(P<0.01)。与正常组织相比,CPEB3在不同分期和分化程度的HNSC病人中表达量降低(P<0.05);CPEB3低表达的HNSC病人的3年生存率低于CPEB3高表达的病人(P<0.05)。与癌旁组织相比,CPEB3在TSCC组织中低表达(P<0.01);CPEB3的表达与TSCC病人的性别和年龄无明显相关性(P>0.05),而与TNM分期、病理分级和淋巴结转移有相关性(P<0.05~P<0.01)。结论:CPEB3在TSCC中低表达,并与TNM分期、分化程度和淋巴结转移相关,CPEB3可能为TSCC诊断和治疗的潜在生物标志物。

舌鳞状细胞癌中DKK1的表达及分子机制

目的应用生物信息学和分子生物学实验探讨Dickkopf相关蛋白1(DKK1)在舌鳞状细胞癌(TSCC)中的表达及分子机制。方法从TCGA-TSCC数据库下载患者信息,利用NetworkAnalysed网站筛选正常组织和癌组织间的差异表达基因,通过Kaplan-Meier分析和Lasson回归法寻找关键基因及临床预后,应用GO和KEGG分析差异表达基因的功能和通路,应用UALCAN数据库和免疫组化实验分析DKK1蛋白在TSCC中的表达,并分析其与临床病理特征的关系,应用Western blot实验检测DKK1在TSCC细胞中的表达,利用siRNA敲低Cal27细胞中DKK1蛋白的表达。结果NetworkAnalysed、Kaplan-Meier分析和Lasson回归法筛选出的3个关键基因DKK1、CYP19A1和IRX4在TSCC中高表达,且高表达组的患者生存率差。UALCAN数据库分析显示DKK1的mRNA水平在TSCC组织中高于正常组织,其高表达与TSCC患者的临床分期、组织学分级和淋巴结转移相关。免疫组化实验显示,DKK1蛋白在临床分期Ⅲ+Ⅳ期TSCC组织中的阳性率高于Ⅰ+Ⅱ期TSCC组织。与癌旁组织相比,DKK1蛋白在TSCC组织中的表达水平升高。Western blot实验显示DKK1蛋白在TSCC细胞Cal27中的表达高于正常口腔上皮细胞HOEC。在TSCC细胞Cal27中敲低DKK1的表达后,β-catenin、p-p65和p65蛋白表达量减少。结论DKK1在TSCC组织和细胞中高表达且发挥重要作用,其可能作为TSCC早期诊断和药物治疗的新靶点。

核内不均一核糖核蛋白A2/B1在舌鳞状细胞癌中的表达及作用

目的:舌鳞状细胞癌(tongue squamous cell carcinoma,TSCC)是口腔颌面部的常见癌症,严重危害人们的生命健康。核内不均一核糖核蛋白A2/B1(heterogeneous nuclear ribonucleoprotein A2/B1,hnRNP A2/B1)是一种RNA结合蛋白,可调控多种基因的表达,参与多种癌症的发生和发展。本研究旨在探究hnRNP A2/B1对TSCC进展的表达及作用。方法:基于基因表达综合(Gene Expression Omnibus,GEO)数据库中口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)相关芯片GSE146483、GSE85195分析hnRNP A2/B1在OSCC及正常口腔黏膜细胞、组织中的差异表达情况,基于TSCC相关芯片GSE4676分析hnRNP A2/B1表达与TSCC患者无病生存期的相关性。收集2021年7月至12月于湖南省肿瘤医院就诊的30例TSCC患者的癌及癌旁组织样本,采用real-time RT-PCR和蛋白质印迹法验证TSCC患者样本中hnRNP A2/B1的mRNA和蛋白质表达情况。以人TSCC细胞Tca-8113为研究对象,分别转染hnRNP A2/B1空载敲减质粒(sh-NC组)、敲减质粒(sh-hnRNP A2/B1组)、空载过表达质粒(OE-NC组)和过表达质粒(OE-hnRNP A2/B1组)。采用蛋白质印迹法检测hnRNP A2/B1敲减或过表达效率,细胞计数试剂盒-8(cell counting kit-8,CCK-8)检测Tca-8113细胞增殖活性,流式细胞术检测Tca-8113细胞凋亡率。结果:基于GEO数据库中的OSCC相关芯片GSE146483、GSE85195分析发现:hnRNP A2/B1在OSCC及正常口腔黏膜细胞、组织中均存在差异表达(均P<0.01),同时对TSCC相关芯片GSE4676的分析证实hnRNP A2/B1表达与TSCC患者无病生存期呈负相关(P=0.006)。Real-time RT-PCR和蛋白质印迹法结果显示:与癌旁组织样本相比,TSCC组织样本中hnRNP A2/B1的mRNA和蛋白质相对表达水平均显著上调(均P<0.01)。蛋白质印迹法结果显示:Tca-8113细胞在转染敲减或过表达hnRNP A2/B1质粒后,细胞内的hnRNP A2/B1表达水平被显著抑制或促进(均P<0.01)。CCK-8及流式细胞术结果显示:抑制Tca-8113细胞中hnRNP A2/B1的表达可以降低细胞增殖活性(P<0.05),增高细胞凋亡率(P<0.01);促进Tca-8113细胞中hnRNP A2/B1的表达可以增加细胞增殖活性(P<0.05),降低细胞凋亡率(P<0.01)。结论:HnRNP A2/B1是调控TSCC细胞增殖和凋亡水平的关键因子,通过抑制hnRNP A2/B1的表达可以降低TSCC细胞的增殖活性,促进TSCC细胞的凋亡。

舌鳞状细胞癌关键基因的筛选及其潜在治疗药物的预测

目的通过生物信息学方法筛选舌鳞状细胞癌的关键基因,并预测其潜在的治疗药物。方法从GEO数据库中下载GSE34105和GSE13601数据集,并利用limma包筛选DEGs。DAVID数据库对DEGs进行GO及KEGG富集分析。STRING数据库构建PPI网络,并在Cytoscape中进行可视化。“CytoHubba”筛选Hub基因,并利用TCGA数据库、HPA数据库及RT-qPCR进行验证。最后,在Cellminer数据库中筛选Hub基因潜在的治疗药物。结果共筛选出192个DEGs,其中上调基因84个,下调基因108个。GO富集分析显示,DEGs主要涉免疫反应、细胞外基质分解等生物学过程;KEGG富集分析显示,DEGs主要富集在EMC-受体相互作用信号通路。筛选出IFIT3、OAS2作为Hub基因。预测出布加替尼、艾沙佐米柠檬酸盐及硼替佐米等19种可能靶向作用于舌鳞状细胞癌的药物。结论通过生物信息学方法筛选出两个Hub基因,并预测其潜在的治疗药物,为研究舌鳞状细胞癌的分子机制及开发治疗药物提供理论基础。

舌鳞状细胞癌预后因素的探讨

目的 :探讨影响舌鳞癌预后的有效因素。方法 :对 12 1例舌鳞癌患者进行回顾研究 ,应用Cox比例风险模型对 13个与舌鳞癌术后生存率有关的指标进行回归分析。结果 :只有原发灶的切缘状态和颈淋巴结转移情况才是影响舌鳞癌术后生存率的独立指标 (P <0 0 5 )。结论 :对原发灶和颈转移淋巴组织的彻底手术切除是提高舌鳞癌患者生存率的关键。

CCND1、ORAOV1、ERCC1在舌鳞状细胞癌中的表达和临床意义

目的:通过观察CCND1、ORAOV1、ERCC1在舌鳞状细胞癌中的表达情况,探讨CCND1、ORAOV1、ERCC1与舌癌发生、发展的相关性。方法:应用免疫组织化学染色方法检测38例舌鳞状细胞癌组织芯片及4例正常舌组织芯片中CCND1,ORAOV1,ERCC1蛋白表达情况,并分析其与临床病理特征的关系。结果:舌癌组织中CCND1蛋白的阳性表达率明显高于正常舌组织(P<0.05),但其过表达水平与正常舌组织相比无统计学差异;CCND1阳性表达率及过表达水平与患者年龄、性别、肿瘤组织学分级及肿瘤有无淋巴结转移之间无明显相关。ORAOV1在舌癌组织中的表达明显升高(P<0.05),且与肿瘤有无淋巴结转移之间显著相关(P<0.05);ORAOV1在舌癌中的过表达水平与对照组相比无明显差异,但随着肿瘤分化程度的降低ORAOV1的过表达水平显著上升(P<0.05)。ERCC1蛋白在舌鳞状细胞癌组织中的阳性表达率及过表达水平均明显低于正常舌组织(P<0.05),并均与肿瘤有无淋巴结转移之间显著相关(P<0.05);且与高、中分化组相比,低分化组ERCC1蛋白过表达水平上升,但无统计学差异。结论:在舌鳞状细胞癌组织中CCND1和ORAOV1显著高表达,ERCC1表达显著降低,三者的检测对早期诊断舌癌具有指导意义。

口舌鳞状细胞癌复发因素分析

目的:分析口腔舌鳞癌复发及转移的相关因素。方法:回顾性分析本院初治的210例原发口腔舌鳞状细胞癌病例,对比不同治疗方法的复发率,COX多因素回归模型分析局部复发、区域复发及远处转移的相关临床因素。结果:210例患者5年总生存率为61.1%,总复发率为31.9%,局部复发率为23.8%,区域复发率为16.7%,远处转8移.5率%为。多5.7因%素。分单析纯中手局术部组复、单发纯率放的疗影组响、因术素前为放治疗疗组方、术法后、放T分疗级组,患区者域总复的发局的部影复响发因率素分为别局为部5复.1发%、,4而2.远7%处、1转7.移3%的、影响因素为病理分化程度和区域复发。局部和区域复发分别有92.0%和91.4%治疗后2年出现,复发患者经再治疗后分别有24%和34.3%获得控制。结论:局部和区域控制是舌癌治疗的关键,早期舌癌可选择单纯手术,晚期舌癌应选择综合治疗,治疗后应密切随访至少2年,对复发病例进行及时治疗仍有部分患者可获得良好的局部及区域控制。

舌鳞状细胞癌Tca8113细胞系CD133^+亚群生物学特性的研究

目的研究CD133在人舌鳞癌Tca8113细胞系中的表达,观察纯化的CD133肿瘤细胞体外生长特性。方法采用有限稀释法观察单细胞体外增殖的能力;利用超低黏附板,观察舌鳞癌Tca8113细胞体外悬浮肿瘤细胞成球;流式细胞仪检测舌鳞癌Tca8113细胞系中的CD133表达;免疫磁珠分选技术纯化CD133肿瘤细胞,体外培养并观察其增殖及分化能力。结果单细胞体外增殖12 d后,仅有5.23%的细胞具有持续增殖的能力。体外观察发现,超低黏附96孔培养板中细胞悬浮生长,部分可以形成肿瘤球;Tca8113细胞系中有占肿瘤部分0.95%的CD133肿瘤细胞呈阳性表达,且分选出的CD133+肿瘤细胞的增殖能力均高于CD133-肿瘤细胞及未分选的肿瘤细胞;CD133在培养体系中的比例逐日下降,由培养第1天的92.45%下降至第12天的1.62%。结论 Tca8113细胞系中肿瘤细胞具有异质性,且CD133+细胞占肿瘤细胞比例较低,在体外分化和增殖能力较强,CD133可能是肿瘤起始细胞的表型标志之一。

腺病毒携带的人内皮抑素基因(Ad/hEnd)抑制人舌鳞状细胞癌生长的研究

背景与目的:舌癌是口腔常见的恶性肿瘤,目前常规采用以手术为主结合放疗化疗的综合治疗,总体的5年生存率只有50％左右,抗肿瘤血管生成治疗已 成为舌癌治疗的研究方向之一。本实验以5型E1缺陷型腺病毒携带的人内皮抑素基因(Ad/hEnd)感染舌癌细胞(Tca8113)和人脐静脉内皮细胞株(ECV),并对荷瘤裸鼠舌癌的抑瘤效果进行观察,研究其在舌癌细胞中的表达及对舌癌抑制作用。方法:(1)免疫组化法检测内皮抑素蛋白在Tca8113细胞和ECV细胞中的表达及分布。ELISA法检测上清中内皮抑素含量,Western blot检测内皮抑素基因在Tca8113和ECV细胞的表达特征。(2)流式细胞仪检测Ad/hEnd感染ECV后的细胞周期及凋亡,WST-1法检测Ad/hEnd对ECV细胞增殖的抑制。(3)Ad/hEnd对荷瘤裸鼠的舌癌的生长抑制分析。结果:(1)实验结果显示感染Ad/hEnd后Tca8113细胞和ECV细胞胞浆内可有效合成内皮抑素蛋白,细胞培养液上清中的内皮抑素蛋白表达浓度呈时间剂量依赖关系,最高达到597 ng/ml,可持续到第7天,并且表达产物有抑制人体静脉内皮细胞ECV生长特性,呈剂量依赖关系。(2)Ad/hEnd可延长感染后的ECV细胞的S期及G_2期,并出现细胞凋亡现象。(3)应用Ad/hEnd后第3天肿瘤体积增长受到抑制,第6天开始肿瘤抑制明显增强,第3周抑瘤率达45.8％。结论:本实?