雷公藤配伍金钱草对荷瘤状态下的相杀减毒机制研究

目的在荷瘤病理状态下观测雷公藤配伍金钱草的相杀减毒机制。方法通过对S180荷瘤小鼠血清肾功能指标以及肾组织氧化应激和炎症相关指标的比较分析,探讨雷公藤配伍金钱草的相杀减毒作用及其机制。结果雷公藤给药后诱导了S180荷瘤小鼠的血清肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)、肾丙二醛(MDA)的水平均显著升高,以各配比(4/1~1/4)配伍金钱草给药后,均显著逆转了以上3个指标的异常(P<0.01);进一步机制分析显示,雷公藤诱导了荷瘤小鼠肾谷胱甘肽(GSH)、谷胱甘肽-S-转移酶(GST)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、白介素(IL)-10的水平的显著降低(P<0.01)以及肿瘤坏死因子(TNF)-α水平的显著升高(P<0.01),而以各配比与金钱草配伍给药后,均显著逆转了以上7个指标的异常(P<0.01)。结论配伍金钱草对雷公藤所致的荷瘤小鼠的肾损伤具有减毒作用,其机制可能涉及增强荷瘤状态下肾的抗氧化防御并抑制炎症反应。

E3泛素-蛋白连接酶Parkin介导线粒体自噬参与荷瘤小鼠心肌损伤

【目的】观察荷瘤状态下小鼠心肌损伤情况,探讨park2基因编码的E3泛素-蛋白连接酶Parkin介导线粒体自噬在荷瘤小鼠心肌损伤中的作用及机制。【方法】通过PCR和蛋白质免疫印迹筛选和鉴定park2^(-/-)小鼠;通过皮下移植瘤技术构建荷瘤动物模型,采用小动物心脏超声分析小鼠心脏结构与功能,观察心室内径、心室容积、射血分数、缩短分数以及心室壁厚度的变化;采用病理学方法分析小鼠心脏的形态学特征;使用Fluo-3、Rhod-2、DHE-ROS及JC-1探针进行线粒体损伤指标检测;通过qPCR技术分析线粒体生成相关因子tfam,nrf1,线粒体融合相关因子opa1,mfn2,线粒体分裂相关因子fis1,线粒体自噬相关因子park2表达改变;通过Western Blot技术检测关键蛋白LC3Ⅱ、LC3Ⅰ、Parkin表达水平。【结果】心脏超声检测结果显示,B16黑色素瘤荷瘤小鼠心脏功能下降明显(P<0.01);电镜结果显示,荷瘤状态下小鼠心肌细胞线粒体数量增多,出现空泡化改变(P=0.032);进一步分析显示荷瘤状态可引起心肌细胞线粒体损伤,并激活线粒体自噬;park2^(-/-)小鼠荷瘤后,其死亡率明显增加(P<0.05);对park2^(-/-)小鼠进行上述荧光探针、病理学观察及关键分子检测,结果显示park2^(-/-)小鼠线粒体损伤较WT小鼠严重,线粒体自噬过程受到抑制(P<0.01)。【结论】E3泛素-蛋白连接酶Parkin在荷瘤状态心肌损伤过程中具有一定的保护作用,这与其介导的线粒体自噬有关。