采前施用苯并噻二唑对‘蛇龙珠’葡萄果实发育过程中色泽和香气的影响

【目的】分析施用苯并噻二唑(benzothiadiazole,BTH)对葡萄成熟过程中叶绿素、类胡萝卜素、花色苷及相关基因表达量的影响,明确BTH对葡萄成熟过程中游离态和结合态香气种类和浓度的影响,初步探讨BTH调控葡萄果实花色苷和香气合成的机制。【方法】以酿酒葡萄‘蛇龙珠’为试材,果实膨大期整株喷施含0.1%吐温80的0.37 mmol·L^(-1)BTH水溶液,以仅喷施含0.1%吐温80的水溶液为对照组(CK)。通过测定葡萄果皮中的叶绿素、类胡萝卜素、总花色苷、总原花青素和花色苷合成相关基因表达量,表征游离态和结合态香气浓度和组成的变化,评估BTH处理对葡萄品质的影响。【结果】BTH处理显著降低葡萄成熟过程中叶绿素a、叶绿素b和总类胡萝卜素的积累,显著提高总原花青素、总花色苷和红葡萄颜色指数,促进葡萄着色。此外,BTH还显著上调VvCHS1、VvF3H1、VvDFR、VvLDOX、VvUFGT和VvMYBA1等花色苷合成相关基因的表达量。BTH处理显著降低游离态和结合态C_(6)/C_(9)化合物、游离态直链脂肪族、游离态支链脂肪族含量,显著提高结合态直链脂肪族、游离态和结合态芳香族、结合态支链脂肪族、游离态和结合态萜烯、游离态和结合态降异戊二烯浓度。通过定义葡萄成熟阶段的定性标记物和定量标记物发现,成熟过程中两个相邻发育期葡萄中香气物质的演变差异较大,BTH能显著影响‘蛇龙珠’葡萄成熟过程中的游离态和结合态香气演变趋势,BTH处理能显著改变花后9周和11周的游离态以及11周的结合态香气积累趋势。此外,游离态C_(6)/C_(9)化合物、直链脂肪族和萜烯,结合态C_(6)/C_(9)化合物、直链脂肪族、萜烯六大类香气是区分CK和BTH葡萄呈香表现的主要贡献组分。以气味活性值>0.1为阈值,共筛选出包括3-己烯醛和β-紫罗兰酮在内的23个活性香气成分。BTH处理主要减弱葡萄的植物香和脂肪香,增强花卉香和水果香气味。【结论】BTH通过改变叶绿素、类胡萝卜素、花色苷和合成相关基因的表达模式,促进葡萄着色,改变香气含量和组成,进而提高葡萄品质。

茉莉酸甲酯类生长调节剂对‘蛇龙珠’葡萄果实品质及脂氧合酶代谢途径的影响

以‘蛇龙珠’葡萄果实为试材,通过测定其基本理化指标,筛选茉莉酸甲酯(methyljasmonate,MeJA)类物质最适浓度,同时结合顶空固相微萃取-气相色谱-质谱联用技术及酶联免疫吸附试验分析MeJA类物质响应的挥发性关键代谢物及关键酶活性,探究采前MeJA类物质处理对‘蛇龙珠’葡萄果实品质及脂氧合酶(lipoxygenase,LOX)代谢途径中绿叶挥发物的影响。结果表明,与对照组相比,0.1 mmol/L MeJA和5 mmol/L二氢茉莉酸甲酯处理可显著提高‘蛇龙珠’葡萄果实百粒质量、总糖质量浓度、可溶性固形物质量分数、pH值、总酚及总花色苷含量,在采收期时分别提高了10.24%、27.83%、28.24%、4.80%、77.63%、85.29%和9.15%、24.01%、24.41%、8.30%、69.21%、71.57%,果实可滴定酸质量浓度分别降低40.0%及30.24%,果实品质得到显著提高和改善。此浓度处理后,‘蛇龙珠’葡萄果实C6类化合物含量明显提高,更加突出其果实香气的典型性。同时,LOX代谢途径中各个关键酶活性与代谢产物之间具有显著相关性,说明较适浓度的MeJA类物质处理对‘蛇龙珠’葡萄果实中绿叶挥发物的积累具有积极作用。

河西走廊张掖产区蛇龙珠葡萄果实最佳采收期的确定

【目的】为了确定河西走廊张掖产区蛇龙珠葡萄果实的最佳采收期。【方法】以甘肃河西走廊张掖产区蛇龙珠葡萄为材料,共设置6个不同采收时期,测定葡萄果实的可溶性糖、可溶性固形物、可滴定酸、总酚、单宁、糖组分和有机酸组分等指标,并结合主成分分析,确定河西走廊张掖产区蛇龙珠葡萄最佳采收期。【结果】随着采收时间的延迟,蛇龙珠葡萄果实可溶性固形物和可溶性糖均表现出逐渐增加的趋势,在花后第106天时达到最大值,分别为24.53%和24.03%;可滴定酸、酒石酸和苹果酸含量均表现为逐渐降低的趋势,三者含量在花后第106天时均达到最小值,分别为0.63 mg/g、2.55 mg/g、2.15 mg/g;总酚和单宁含量呈前升后降的趋势,在花后第103天时均达最大值,分别为23.13 mg/g和6.45 mg/g,随后逐渐降低。通过对16个指标进行主成分分析,综合得出在花后第100天,103天和106天采收的蛇龙珠葡萄的综合品质排名在前三。【结论】蛇龙珠葡萄的最佳采收期范围为花后第100~106天,其中花后第103天时采收的果实综合品质最佳。

‘蛇龙珠’葡萄果实糖酸含量和代谢关键酶活的变化

糖酸是决定葡萄品质及葡萄酒风味的重要指标之一。本研究以酿酒葡萄‘蛇龙珠’为试验材料,在其生长发育过程中的E-L 33、35、36、37和38这5个时期,测定和分析了果实生长发育过程中可溶性糖(葡萄糖、果糖)、主要有机酸(酒石酸、苹果酸)和游离氨基酸的动态变化,并分别测定了果实中磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(PEPC)和磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(PEPCK)活性的变化。结果表明,‘蛇龙珠’果实在生长发育过程中葡萄糖和果糖逐渐增加;精氨酸、脯氨酸、缬氨酸、亮氨酸和丙氨酸等游离氨基酸含量逐渐增加;主要有机酸酒石酸和苹果酸含量逐渐下降,PEPC酶的活性在E-L 35时期后表现出与果实中苹果酸含量相似的变化趋势,表明葡萄果实中苹果酸的降解可能受PEPC酶的影响。通过对有效成份含量的研究,更深入地了解葡萄果实的发育过程,并为优化葡萄酒酿造和调整香气特性提供参考。

蛇龙珠干红葡萄酒香气成分的GC-MS分析

研究宁夏贺兰山东麓地区蛇龙珠 (CabernetGernischt)干红葡萄酒香气的化学成分 ,采用溶液萃取法提取蛇龙珠干红葡萄酒中的香气成分 ;用气相色谱 -质谱进行分离测定 ,结合计算机检索技术对分离化合物进行鉴定 ,应用TIC峰面积归一法测定各成分的相对含量 ;分离出32个峰 ,鉴定出29个香气化学成分 ,共占其色谱流出组分总量的98.06 % ;其中相对含量以3_甲基丁醇 (47.97% )、丁二酸二乙酯 (16.49% )、苯乙醇(10.33%)、2_羟基丙酸乙酯(6.41 %)、2_甲基丙醇(3.51 %)、二氢化_2[3氢]_呋喃酮(2.07%)、2,3_丁二醇(1.93 %)、四氢化2_甲基噻吩(1.68 %)、乙酸乙酯(1.21 %)、己醇(0.95 %)等成分为主。

蛇龙珠营养系干红葡萄酒中的挥发性风味物质

确定蛇龙珠不同营养系葡萄酒中挥发性风味物质的差异及对其感官品质的影响。利用顶空固相微萃取和气相色谱-质谱联用技术对8个蛇龙珠营养系干红葡萄酒中50种主要挥发性成分进行定性和定量检测,采用香气活性值(odor activity value,OAV)、单因素方差分析和主成分分析对测定数据进行处理分析。结果显示:在蛇龙珠干红葡萄酒中β-大马酮等24种化合物OAV不小于1,对葡萄酒香气具有贡献。乙酸乙酯等12种化合物可较好实现对8个蛇龙珠营养系干红葡萄酒的判别分类,E-01、E-02、E-04、E-05营养系间存在明显差异,而E-06、E-07和E-08之间差异很小。结合感官品评结果发现,γ-壬内酯和里哪醇对提高蛇龙珠干红葡萄酒感官品质具有较大贡献,但含量需控制在一定范围内;而壬醛和4-乙基苯酚含量较高会显著降低葡萄酒感官品质,此外,β-大马酮、乙酸乙酯、癸酸乙酯等含量较高也会对葡萄酒的感官品质带来负面影响。蛇龙珠干红葡萄酒的香气特点不是由某个或某类香气成分产生的,是各种香气成分平衡作用的结果。

扩展青霉对‘蛇龙珠’葡萄酒棒曲霉素及风味品质的影响

以‘蛇龙珠’葡萄为试材,通过扩展青霉(Penicillium expansum)侵染,测定其所酿制的葡萄酒中棒曲霉素的含量及对理化指标和挥发性风味物质的影响。结果表明,使用采后扩展青霉侵染的葡萄原料生产的葡萄酒棒曲霉素含量低于SN/T 2008—2007中高效液相色谱法检出限(10μg/L)水平,并未造成棒曲霉素的积累和超标,但处理对葡萄酒的理化指标及挥发性风味物质却产生影响,使得葡萄酒的色度、单宁、总酚和总花色苷含量均显著上升(P<0.05),而酒精体积分数则有所下降。同时对挥发性成分的检测发现,处理样品和对照酒样在风味物质数量和含量上均存有差别,其中1-辛烯-3-醇、3-甲硫基丙醇和辛酸等在处理中的含量较高(P<0.05),而乙酸苯乙酯、大马士酮和α-松油醇等化合物含量则低于对照(P<0.05)。利用物质的风味阈值和感官特征分析认为,扩展青霉侵染将造成葡萄酒原有的特色与风味发生改变,使葡萄酒存在品质劣变的风险。

遮光处理对转色至完熟期间“赤霞珠”和“蛇龙珠”葡萄果实品质的影响

以酿酒葡萄"赤霞珠"和"蛇龙珠"为材料,在转色-完熟期间通过套袋对其果实进行遮光处理,以常规管理果实为对照,分析遮光处理对酿酒葡萄果实理化及香气品质的影响。结果表明:遮光处理完熟"蛇龙珠"和"赤霞珠"果实百粒质量较对照分别高出7.43%和8.74%,平均粒径较对照分别高出1.57%和2.60%,可溶性固形物含量较对照分别高出7.50%和2.76%,pH值较对照分别高出4.16%和1.04%,可滴定酸含量较对照分别低出25.37%和14.71%。香气成分分析显示,遮光处理可抑制样品酿酒葡萄果实醇类物质的释放,促进醛类物质释放。

蛇龙珠干红葡萄酒发酵过程中游离态和键合态香气物质的变化分析

应用Amberlite XAD-2树脂吸附分离样品中的游离态和键合态香气物质,结合气相色谱-质谱联用技术对其进行定性,采用内标法定量分析蛇龙珠干红葡萄酒发酵过程中游离态和键合态香气物质的变化规律。通过NIST和Wiley检索定性出游离态香气物质组分85种,键合态香气物质组分61种,主要包括醇类、酯类、烃类、酮类、萜烯类及酸类化合物。结果表明:随酒精发酵进行,葡萄酒体系中主要的游离态及键合态香气物质均表现不同的变化规律,发酵后期体系中新增游离态香茅醇、香叶醇、香叶醛共3种萜烯类化合物;发酵结束后键合态乙酸乙酯、3-甲基-1-丁醇、正庚醇的含量均达到最大,而苯乙醇、乙酸戊酯及庚醛均未检测到。

酿造工艺对蛇龙珠干红葡萄酒花色苷和色泽品质的影响

采用高效液相色谱(HPLC)和CIELab参数分析SO2添加量、p H、发酵温度及皮渣接触时间对甘肃河西产区蛇龙珠干红葡萄酒花色苷构成和色泽品质的影响,结果表明:实验样品间花色苷种类无差异,但其含量和构成比例随发酵参数变化而改变。被分离定性的9种花色苷中二甲花翠素类花色苷含量及比例最高,是实验蛇龙珠干红葡萄酒的主体花色苷类型,主要以二甲花翠素单葡萄糖苷和乙酰化单葡萄糖苷形态存在于样品中,分别占总花色苷的33%和9%以上。单体花色苷和总花色苷的含量随着SO2添加量增加而降低;葡萄醪p H和发酵温度升高,样品总花色苷含量增加,单体花色苷的变化则各不相同;皮渣接触5 d的酒样总花色苷和单体花色苷含量最高。SO2添加量70 mg/L、p H3.7、发酵温度30℃和皮渣接触5 d的各实验酒样与对照相比,a*值和饱和度Cab值最大,L*值和b*值最小,色度角Hab也更接近0度,酒样的红色和紫红色调突出,总色度较深。

应用GC-O和GC-MS研究蛇龙珠葡萄酒游离态挥发性香气成分

建立了提取和分离葡萄酒香气成分的方法。对烟台产区的蛇龙珠葡萄酒中的挥发性香气成分进行了定性分析,并比较其香气强度。葡萄酒样品的前处理包括:液液萃取、溶剂辅助萃取(SAFE)和香气成分分离技术,最终得到酸性/水溶性和中性/碱性两个组分。处理好的葡萄酒样品通过GC-O(gas chromatography-olfactometry)和GC-MS技术进行香气成分的定性和香气强度分析。从蛇龙珠葡萄酒中共鉴定出74种香气组分,包括酯类、醛酮类、醇类、酸类、萜烯类、酚类、甲氧基吡嗪类、降异戊二烯类和硫化物,其中3-甲基丁醇和β-大马酮是香气强度最强的组分。

蛇龙珠葡萄酵母菌种群多样性和生态分布特征

利用WL培养基、5.8S-ITS rDNA PCR-RFLP和5.8S-ITS rDNA序列分析法对从蛇龙珠葡萄果粒上的代表性酵母菌株进行分类鉴定,结果表明,所分离的蛇龙珠葡萄相关酵母菌分属于4个属的5个酵母菌种,分别为Hanseniaspora uvarum、Cryptococcus fla-vescens、Pichia norvegensis、Pichia fermentans和Candida zemplinina。不同产区蛇龙珠相关酵母菌群的组成与分布略有差异。

张裕酒庄级蛇龙珠干红葡萄酒香气成分分析

采用顶空固相微萃取技术(HS-SPME)和液液微萃取技术(LLME)提取张裕酒庄级蛇龙珠葡萄酒中香气成分,利用气质联用技术(GC-MS)进行检测,共69种成分被鉴定出来。借助SPSS软件对检测结果进行方差分析、Duncan多范围检验分析和距离分析,结果显示,乙酸乙酯、乳酸乙酯、辛酸乙酯、乙醛、β-苯乙酸乙酯、β-大马酮、反-威士忌内酯和4-乙基愈创木酚8种化合物在所研究的4个批次产品间无差异,属于特性成分,而乙酸、2-甲基丙酸、己酸、辛酸和癸酸5种酸性化合物存在显著性差异。4个批次的张裕酒庄级蛇龙珠干红葡萄酒间相似度非常高,特别是JZ-2和JZ-4、JZ-3和JZ-4间相似性最高。

避雨栽培对蛇龙珠果实及葡萄酒质量影响研究初报

研究避雨栽培对酿酒葡萄果实采收期、果实品质和葡萄酒质量的影响,为酿酒葡萄避雨栽培技术的实施提供理论依据。以蛇龙珠(Vitis viniferaL cv.Cabernet Gernischt)为材料,采用简单避雨方式和露地栽培(对照),在果实转色期后监测果实糖酸变化,并测定成熟果实还原糖、总酸、花色素、总酚和单宁等指标;采用小容器酿造工艺酿制蛇龙珠干红葡萄酒,测定葡萄酒的颜色、花色素、总酚和单宁等指标。结果表明:(1)避雨栽培推迟了蛇龙珠果实的成熟期;(2)避雨栽培对蛇龙珠果实花色素、葡萄果皮中单宁含量影响极显著,对其他指标没有显著影响;(3)避雨栽培对蛇龙珠干红葡萄酒花色素含量及颜色影响极显著,对总酚和单宁含量无显著影响。

蛇龙珠葡萄(烟台产区)自然发酵醪中选育的酿酒酵母发酵特性研究

对烟台产区蛇龙珠葡萄自然发酵醪中筛选的12株酿酒酵母进行发酵特性研究。首先对发酵终止后的残糖量和酒精体积分数测定,再对部分菌株进行耐酒精、耐酸、耐SO2和耐高糖能力测定,选取3株发酵性状较好的酿酒酵母用于蛇龙珠干红葡萄酒酿制。结果菌株YSF4的发酵特性良好,发酵后酒样指标较好,甚至优于商品化酵母,具备工业葡萄酒酿造应用潜力。

‘蛇龙珠’亲缘关系鉴定在营养系选种中的应用

对所收集的烟台及周边地区具有典型差异的‘蛇龙珠’进行亲缘关系分析,并将其与‘赤霞珠’、‘品丽珠’之间的亲缘关系进行验证,为优良酿酒葡萄营养系筛选提供理论依据。研究利用RAPD和PCR技术,对8个蛇龙珠营养系及‘赤霞珠’、‘品丽珠’进行遗传多样性分析,结果表明:E-03、E-04、E-06、E-07和E-08之间没有差异,E-01、E-02、E-05之间有一定差别。‘蛇龙珠’各营养系与‘品丽珠’之间亲缘关系较近,与‘赤霞珠’较远。对‘蛇龙株’进行营养系筛选可缩小到4个营养系进行进一步筛选。

蛇龙珠葡萄酒酿造过程中颜色变化规律研究

采用CIELAB法研究了蛇龙珠(Vitis vinifera L.cv.Cabernet Shelongzhu)红葡萄酒酿造过程中颜色变化规律,结果表明:蛇龙珠葡萄酒酿造过程中总颜色不稳定,第5d颜色最深;红色色调发酵前期迅速上升,中期不稳定,后期持续上升;黄色色调保持持续上升。添加单宁Ⅰ对蛇龙珠葡萄酒总颜色和红色的保护作用强于单宁Ⅱ,而单宁Ⅱ对黄色色调的增加明显。

蛇龙珠葡萄成熟过程中6种甲氧基吡嗪分析

建立了顶空固相微萃取和气相色谱-氮磷检测器法(HS-SPME-GC-NPD)测定葡萄中6种3-烷基-2-甲氧基吡嗪(MPs)的方法。经优化采用CAR/DVB/PDMS三相SPME萃取头浓缩提取葡萄中MPs,在30℃恒温条件下吸附3h。该方法具有良好的线性,6种MPs标准曲线的线性相关性系数均大于0.99;线性范围在0.78～100ng/L之间;检测限在0.20～1.40ng/L范围内;除2-甲氧基吡嗪(73.12%)外,其他5种MPs的回收率在83.20%～113.09%之间。应用本方法检测蛇龙珠葡萄成熟过程中MPs,发现在果实成熟过程中MPs含量呈递减趋势,其中2-异丁基-3-甲氧基吡嗪最为突出;3-异丁基-和3-异丙基-2-甲氧基吡嗪的含量大于其阈值,对蛇龙珠葡萄的"青椒"气味具有重要贡献。

谷朊蛋白对蛇龙珠干红葡萄酒的澄清效应因子分析

以蛇龙珠干红葡萄原酒为试材，对谷朊蛋白添加到葡萄酒中其澄清效应进行分析，以常用澄清剂皂土作为对照，确定其最佳使用量。测定澄清后蛇龙珠干红葡萄酒的外观、理化性质及稳定性等14项指标，并组织有经验的品酒员及消费者进行品评。结果表明：谷朊蛋白的添加量与其中9项指标有显著或极显著相关性，而且这9项指标之间大部分存在相关性。因此，通过因子分析提取3个公因子作为新的综合指标来代替原来的9项指标，能够共同解释原来指标87．827％的信息，其中E因子贡献率最高，综合了干浸出物、色价、钾、蛋白质和总酚这5项指标。综合得分排名在前2位的是谷朊蛋白添加量为300mg／L和450mg／L的干红葡萄酒，远大于皂土的综合因子得分。为进一步验证分析结果，对澄清后的葡萄酒进行品评，它们的品评成绩也排在前面。结论：谷朊蛋白对蛇龙珠干红葡萄酒具有澄清效应，但大量添加会导致葡萄酒品质下降，其最佳使用量为300-450mg／L。

蛇龙珠葡萄品种亲缘关系的RAPD分析

利用随机扩增多态性DNA(RAPD)技术对4个酿酒葡萄品种和11个鲜食葡萄品种的亲缘关系进行了研究。从30个随机引物中筛选出16个扩多态性引物,用于15个样品的正式扩增。共扩增出134条DNA带,其中多态性扩增带99条,占73.9%。根据DNA扩增结果计算出品种的遗传距离,并构建聚类树状图。分析结果表明,红地球、瑞必尔与其它13个品种的遗传距离最远,巨峰系列的葡萄品种间遗传距离值较小,蛇龙珠品种与其它3个酿酒葡萄品种在遗传基因上存在差异,与品丽珠的亲缘关系最近。