大肠杆菌Tat蛋白质转运体系

Tat是大肠杆菌中能够将折叠蛋白质跨膜转运的体系,其信号肽中含有一个高度保守的双精氨酸模体。Tat体系包括TatA、TatB、TatC和TatE4种蛋白质,它们的复合物在大肠杆菌质膜上形成转运通道。大肠杆菌Tat体系转运的底物蛋白质多为呼吸电子传递链组分,与大肠杆菌的许多生命活动有关。

磷脂酰肌醇在蛋白质转运中的作用

细胞的极性是真核细胞的一个特征，要求脂质和蛋白质在细胞内合成后运送到浆膜的特定部位。细胞内蛋白质的运输包括两个重要的分选中心：高尔基体的成熟面（TGN）是蛋白质的输出中心，在这里蛋白质被包装入不同的转运载体，进而与内体或浆膜融合；另一个分选中心是再循环内体，再循环内体的蛋白质进入内体的不同亚区域，进而被运到不同的目的地。磷脂酰肌醇（PI）是细胞膜上的一类磷脂，肌醇基团的不同位置被磷酸化，可产生7种不同的磷脂酰肌醇脂，

日粮赖氨酸对肉鸡生长发育和肠道蛋白质转运载体基因表达的影响

试验旨在评估日粮赖氨酸缺乏或过量对肉鸡生长发育和肠道蛋白质转运载体基因表达的影响。采用单因素试验设计,选取360只1日龄AA肉鸡雏随机分成3个处理,每个处理6个重复,每个重复20只鸡,分别饲喂赖氨酸水平为0.60%(赖氨酸缺乏组,LL组)、1.00%(赖氨酸适量组,ML组)、1.40%(赖氨酸过量组,HL组)的日粮,以ML组为对照组,LL组和HL组为试验组。试验期为3周。结果表明:(1)与ML组相比,LL组肉鸡胸肌重、腿肌重极显著降低,料重比极显著升高(P<0.01)。(2)与ML组相比,LL组极显著上调肉鸡十二指肠Pep T1、B0AT、EAAT3基因表达,极显著下调CAT1基因表达(P<0.01);HL组极显著下调Pep T1、B0AT、EAAT3基因表达(P<0.01),显著下调CAT1基因表达(P<0.05)。(3)与ML组相比,LL组极显著下调肉鸡空肠Pep T1、B0AT、EAAT3、CAT1基因表达(P<0.01);HL组极显著上调Pep T1、B0AT基因表达,极显著下调EAAT3、CAT1基因表达(P<0.01)。(4)与ML组相比,LL组极显著上调肉鸡回肠Pep T1、B0AT基因表达,极显著下调EAAT3基因表达(P<0.01),显著下调CAT1基因表达(P<0.05);HL组极显著上调EAAT3基因表达(P<0.01),显著上调CAT1基因表达,显著下调B0AT基因表达(P<0.05)。试验揭示赖氨酸缺乏主要通过下调肉鸡空肠蛋白质转运载体基因表达量,而过量主要通过下调肉鸡十二指肠蛋白质转运载体基因表达量,从而抑制肉鸡肠道蛋白质转运吸收,降低蛋白质沉积效率,进而可能严重阻碍肉鸡生长发育。

蛋白质向叶绿体的转运

对近年来叶绿体蛋白质前导肽序列、叶绿体被膜中的蛋白质转运器、监护蛋白在蛋白转运过程中的作用、蛋白质导入叶绿体的途径。

HERG钾通道蛋白质转运异常和功能恢复与唧的研究进展

HERG基因编码快速激活延迟整流钾电流（rapidly activated delayed rectifier potassuim current，Ikr）的α亚单位，而Ikr在人类心脏动作电位3期复极化过程中起着重要的作用。HERG基因突变引起遗传性2型长QT综合征（hereditarylongQTsyndrome2，hLQT2），表现为心电图QT间期延长、T波异常，易于发生尖端扭转型室速、晕厥及心源性猝死。截至目前，已发现300多个HERG基因突变位点，而其中多数突变导致LQT2机制为蛋白质转运异常。近年报道很多药物可致获得性长QT综合征（acquired long QT syndrome，aLQTS），机制除药物直接阻滞HERG通道外，亦伴随对HERG蛋白转运的抑制从而使细胞膜Ikr电流减少。很多体外实验又证明，低温、一些药物可纠正部分突变蛋白转运障碍，使膜电流恢复。然而迄今，有关HERG突变蛋白转运缺陷、药物抑制蛋白转运及药物恢复异常蛋白转运的分子生物学机制，尚未完全清楚，本文就目前HERG蛋白转运及药物对蛋白转运影响的分子生物学机制研究进展做一综述，为长QT综合征从发病机制角度寻求更有效的防治手段提供理论依据。

细胞中蛋白质的合成和转运(一)

细胞的一切功能活动，都离不开蛋白质的参与，细胞中蛋白质的合成场所有两处：基质中和ＲＥＲ 上的多聚核糖体上。特定蛋白有特定的合成场所和转运方式，本文简要介绍了分泌蛋白、膜嵌入蛋白、溶酶体蛋白、亲核蛋白、过氧物酶体蛋白、叶绿体蛋白。

豆梨磷转运蛋白质基因(PcPht1)的克隆、表达及启动子分析

为明确梨砧木豆梨(Pyrus calleryana Dcne.)磷转运蛋白质基因的序列特点和表达模式,采用同源克隆、RACE技术和染色体步移法克隆获得1个Pht基因PcPht1的cDNA、DNA及启动子序列,并利用RT-PCR检测在不同供磷水平下该基因在豆梨幼苗中的表达情况。结果表明PcPht1 cDNA序列编码区长1 617 bp,编码1个由538个氨基酸组成的蛋白质,其相对分子质量为5.908×104。该基因编码区DNA序列没有内含子,其启动子除了具有TATA/CAAT-box外还包含防御与胁迫响应元件、光响应元件和茉莉酸甲酯响应顺式作用元件。PcPht1所编码蛋白质由12个疏水的跨膜区域组成,包括H2PO4-/nH+共运体、糖转运体和MFS通用底物转运体3个Pht1蛋白质特征结构域。PcPht1与大豆GmPht1;7和橡胶HbPht1间有较高的一致性(分别为88.0%和87.0%);与拟南芥Pht1蛋白质家族处于系统进化树的同一分支,并与AtPht1;4和AtPht1;7的亲缘关系最近。正常供磷条件下,PcPht1基因主要在根中表达,低磷时该基因的表达上调,提高供磷浓度其表达受到抑制,说明PcPht1的表达受环境磷浓度调控。

细菌蛋白质Tat转运系统的研究进展

蛋白质Tat转运系统不同于细菌中普遍存在的Sec转运系统 ,而与植物叶绿体中蛋白质转运的ΔpH依赖系统相似 .通过Tat系统转运的蛋白质底物含有特征性的双精氨酸保守序列核心S/T R R x F L K的信号肽 ,其h区的疏水性低 ,c区有由高赖氨酸、高精氨酸构成的避开Sec系统信号 ,信号肽和成熟蛋白质的组成对蛋白质的转运都有影响 .TatA、TatB、TatC和TatE四种蛋白质参与了大肠杆菌的Tat转运系统 .被转运的底物蛋白质绝大多数为与细菌厌氧呼吸有关的含氧化还原辅因子的酶 ,并以折叠形式转运 .

针对蛋白质转运的研究方法进展

蛋白质在核糖体被翻译出来后通过转运在细胞内的区室形成特殊定位和极化分布,这对于蛋白质发挥正常功能至关重要。新型标记技术和成像策略的出现能够直接观察到细胞内蛋白质的转运过程,以及用于研究转运调控的分子机制。该文着重于综述研究蛋白质转运的技术与方法策略。

蛋白质内在信号——控制其在细胞内的运输和定位

美国洛克菲勒大学细胞生物学家甘特.布劳贝尔(Gunter Blobel)因他在蛋白质转运定位机制研究方面的杰出成就，

球形芽孢杆菌C3-41菌株铵盐利用特性及铵转运蛋白质分析

对球形芽孢杆菌（Lysiniacillus sphaericus）C3-41在不同铵盐浓度中的生长进行了研究. 结果表明,在铵盐浓度为0.5～4.0 g/L范围内时,菌株正常生长并形成毒素,但是芽孢形成时间随铵盐浓度的升高而提前. 从该菌株中提取基因组DNA,通过PCR的方法克隆了其基因组中疑似铵转运蛋白质的编码基因amt基因序列 （GeneID： 501248970）. 为了研究amt基因在T7启动子启动下的表达, 构建了表达质粒pETAMT并转化进大肠杆菌中,对得到的重组菌株进行活性分析. 结果表明,重组菌株E-pETAMT与对照菌株E-pET28a相比具有明显的将铵盐转运进细胞内及将铵盐分泌到细胞外的活性,即表明该amt基因编码的蛋白质在重组菌株E-pETAMT中表达并表现出铵转运蛋白质的活性. 通过KEGG软件对C3-41菌株氮代谢途径的分析表明,铵盐既用于其氨基酸的合成,也是部分氨基酸的代谢产物.

腹膜糖转运及钠-葡萄糖共转运蛋白2抑制剂在腹膜透析领域的研究进展

钠-葡萄糖共转运蛋白(sodium-glucose co-transporter,SGLT)2抑制剂是目前临床广泛使用的新药物,已知SGLT2抑制剂可以通过阻断SGLT2减少近端肾小管细胞对葡萄糖的重吸收来降低2型糖尿病患者的血糖。同时,该药物可为糖尿病及非糖尿病患者带来显著的肾脏及心血管获益。腹膜透析患者的人腹膜间皮细胞可表达SGLT。关于SGLT2抑制剂在腹膜透析领域的研究已有体外或动物实验报道,提示接受PD治疗的患者应用SGLT2抑制剂,可减少腹膜葡萄糖吸收,可能延迟腹膜纤维化的进展。同时,腹膜寿命的延长及转运功能的维持有利于保证透析充分性,改善患者预后。但是SGLT2抑制剂在腹膜透析领域的应用尚未引起广泛关注。本文将就腹膜糖代谢及SGLT2抑制剂在腹膜透析领域的研究进展做一综述。

转运蛋白在细菌吸附铜(Ⅱ)中的作用机理研究

为研究转运蛋白在细菌响应铜(Ⅱ)胁迫中发挥的作用,从Transporter Classification Database(TCDB)数据库中检索得到嗜根寡养单胞菌(Stenotrophomonas rhizophila)JC1基因组中4个参与Cu(Ⅱ)吸附、转运和外排的转运蛋白,并对其结构和功能进行分析。此外,研究菌株JC1对不同质量浓度的Cu^(2+)的吸附能力和耐受能力,并利用扫描电镜(SEM)、能量色散X射线光谱仪(EDS)和傅里叶变换红外光谱仪(FT-IR)分别分析Cu^(2+)胁迫后,菌株JC1的形态学、元素组成和官能团的变化。结果显示,菌株JC1可耐受Cu^(2+)的质量浓度为160 mg/L,但对120 mg/L Cu^(2+)有最大吸附率,为72.3%。经Cu^(2+)胁迫后,菌株JC1光滑的杆状结构消失,表面褶皱、呈短杆状,且其元素组成中出现了3个Cu^(2+)吸收峰。FT-IR分析结果表明,—OH、—C—O和—C—C等官能团在菌株JC1胞外吸附Cu^(2+)中发挥了重要作用。对4个转运蛋白质的结构分析结果显示,铜稳态蛋白cutC同源物存在于细胞质中,其氨基酸序列中有多个Cu^(2+)结合位点,可为菌株JC1吸附Cu^(2+)提供条件。铜抗性蛋白A位于周质空间,其特异性负责对Cu^(2+)的吸附。CopB是一种外膜孔蛋白,其氨基酸中含有的N、O、P等元素为菌株JC1与重金属的结合提供了电子。另外,菌株JC1的铜转位P-ATPase属于P1B-ATPase,含有8个跨膜结构,其中N-端含有丰富的组氨酸残基在菌株JC1结合Cu^(2+)过程中发挥重要作用。

钠-葡萄糖协同转运蛋白2抑制剂对心力衰竭时心肌代谢的影响

心力衰竭是各种心脏疾病的终末阶段,其发生发展涉及复杂的病理生理过程,其中心肌代谢异常是不可忽视的因素之一。钠-葡萄糖协同转运蛋白2(SGLT2)抑制剂作为一种新型口服降糖药,在降低心血管疾病的死亡率和心力衰竭患者的再住院率,调节心脏代谢方面发挥了显著作用。本综述阐述正常及衰竭心脏的代谢变化,并对SGLT2抑制剂对心力衰竭中心肌代谢方面的影响进行总结,旨在指导临床用药。

以SecA蛋白为“动力泵”的细菌Sec蛋白转运途径

细菌细胞中,三分之一的蛋白质是在合成后被转运到细胞质外才发挥功能的。其中大多数蛋白是通过Sec途径(即分泌途径secretion pathway)进行跨膜运动的。Sec转运酶是一个多组分的蛋白质复合体,膜蛋白三聚体SecYEG及水解ATP的动力蛋白SecA构成了Sec转运酶的核心。整合膜蛋白SecD,SecF和YajC形成了一个复合体亚单位,可与SecYEG相连并稳定SecA蛋白的膜结合形式。SecB是蛋白质转运中的伴侣分子,可以和很多蛋白质前体结合。SecM是由位于secA基因上游的secM基因编码的,可调节SecA蛋白的合成量,维持细胞在不同环境条件下的正常生长。新生肽链的信号肽被高度保守的SRP特异性识别。伴侣分子SecB通过与细胞膜上的SecA二聚体特异性结合将蛋白质前体引导至Sec转运途径,起始转运过程。结合蛋白质前体的SecA与组成转运通道的SecYEG复合体具有较高的亲和性。SecA经历插入和脱离细胞内膜SecYEG通道的循环,为转运提供所需的能量,每一次循环可推动20多个氨基酸的连续跨膜运动。