油菜蜂粮发酵过程中细菌的变化规律研究

该文以灭菌后的油菜蜂花粉在自然蜂群中发酵的蜂粮为原料,研究发酵过程细菌的变化规律。结果显示:蜂粮发酵过程共含细菌25个种,其中厚壁菌门(Firmicutes)12种,放线菌门(Actinobacteria)4种,变形菌门(Proteobacteria)9种。前期(第1周)细菌浓度最高;中期(第2~3周)细菌浓度逐步下降,再上升后又下降;后期(第4周以后)一直保持很低的细菌浓度,并且优势菌株为头皮葡萄球菌(Staphylococcus capitis),山羊葡萄球菌(Staphylococcus caprae)和melliventris乳杆菌(Lactobacillus melliventris)。

蜂粮的化学成分和生物活性概述

蜂粮是蜜蜂把采集的花粉通过咀嚼并混入腺体分泌物后,填装到巢房内,加入少量的花蜜或蜂蜜,在34~36℃和一定湿度条件下在蜂箱内经过两个星期的发酵而成。蜂粮本身含有广泛的营养成分,主要含有水、蛋白质、氨基酸、脂肪酸、碳水化合物、矿物盐、多酚、类黄酮及一些生物活性物质等。其中脂质、维生素和酚类化合物作为天然的抗氧化剂,可以作为一种有价值的食品添加剂。由于蜜蜂采集花粉来源不同,蜂粮的化学成分和生物活性也有所差异,但这并不影响蜂粮所隐藏的潜在价值。

天然蜂粮生产技术研究与应用

【目的】蜂粮是蜂群中幼虫和幼蜂的食物,也是幼虫发育过程中的全价营养来源,同时也是供人类食用的蜂产品,其开发利用前景广阔,但目前因生产技术的制约导致不能市场化。本论文旨在研究如何快速生产优质的天然蜂粮,为天然蜂粮的机械化生产提供技术支撑。【方法】根据蜜蜂贮粉生物学原理设计一种能快速生产天然蜂粮的装置——天然蜂粮生产器,包括贮粮器和脱粮器,并以西方蜜蜂(Apis mellifera)为试验材料,研究天然蜂粮生产器在蜂群中使用的可行性。在白莲花期,选取5个强势相当的继箱群作为试验蜂群,分别将贮粮器放入每个试验继箱群巢箱内,待蜂粮酿制为成熟蜂粮后将其从蜂群提出,利用脱粮器将蜂粮生产出来(贮粮器蜂粮);在相同蜂群利用脱粉器分别收集新鲜白莲蜂花粉(新鲜蜂花粉);同时从蜂群中提出贮有成熟蜂粮的天然巢脾,采用手工挖取方法收集蜂粮(蜡脾蜂粮)。所有样品分别进行理化性质和营养成分分析:在常温下利用p H计测定其p H,利用水分活度仪扩散法测定其水活度,用直接干燥法测定其水分含量,采用氯化三苯基四氮唑(TTC)法测定其花粉粒活性,运用Marklund法测定其超氧化物歧化酶活力,运用紫外分光光度法测定其过氧化氢酶活力,使用氨基酸自动分析仪测定其水解氨基酸和游离氨基酸种类及含量。【结果】工蜂能在天然蜂粮贮粮器中贮存并酿制蜂粮,脱粮器可以快速地将贮粮器中的蜂粮生产出来,且生产出的蜂粮保持了原有状态。新鲜蜂花粉的p H、水活度、水分含量、花粉粒活性、过氧化氢酶和超氧化物歧化酶活性均显著高于蜡脾蜂粮和贮粮器蜂粮。新鲜蜂花粉、蜡脾蜂粮和贮粮器蜂粮中的游离氨基酸总含量和水解氨基酸总含量三者间均不存在显著差异,但蜡脾蜂粮和贮粮器蜂粮水解氨基酸中缬氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、酪氨酸、组氨酸、精氨酸含量,以及游离氨基酸中的天冬氨酸、脯氨酸含量均显著高于新鲜蜂花粉。蜡脾蜂粮与贮粮器蜂粮两者间理化性质和营养成分总体无显著差异。【结论】本研究设计的天然蜂粮生产器,可以生产天然蜂粮,值得在养蜂生产中推广应用。

天然蜂粮生产技术及贮存规律研究

为系统研究天然蜂粮贮存规律及其生产技术,利用天然蜂粮生产器生产蜂粮,并分析其生产效率及其在蜂群中蜂粮的贮粮规律;通过加强蜂群的饲养管理等措施使天然蜂粮生产器生产效率达到最佳。结果表明:工蜂能在天然蜂粮生产器中贮存并酿制蜂粮,其在继箱群中蜂粮的贮存率显著高于平箱群,且同一蜂群不同位置蜂粮的贮存率也存在显著性差异,蜂群两侧蜂粮贮存率高于中间位置;脱粮器可以快速地将贮粮器中的蜂粮脱取出来,与手工脱取蜂粮相比,天然蜂粮生产器脱取效率提高了16～30倍;形成了与天然蜂粮生产器相配套的天然蜂粮生产技术。

油菜蜂花粉及其蜂粮的营养成分

本文以油菜蜂花粉及其蜂粮为研究对象,对其常规营养成分、氨基酸和脂肪酸组成进行测定,评价并比较二者的营养价值。结果表明:油菜蜂粮的水分、还原糖和粗脂肪含量显著高于蜂花粉(p<0.05),灰分、蛋白质和总黄酮含量显著低于后者(p<0.05);油菜蜂花粉及其蜂粮中含有8种必需氨基酸,蜂粮总必需氨基酸与总氨基酸的比值(EEA/TAA)显著高于蜂花粉(p<0.05),分别为37.80%和34.74%;油菜蜂花粉和蜂粮的饱和脂肪酸中棕榈酸含量最高,分别为33.81%、33.50%,不饱和脂肪酸中亚麻酸含量最高,分别为32.42%、38.22%,差异显著(p<0.05)。油菜蜂粮是一种优质的必需氨基酸和必需脂肪酸营养源,可以作为一种潜在的原料应用于功能性食品的开发。

枇杷花和油菜花蜂粮中微生物的分离与鉴定

以重庆云阳枇杷花和油菜花蜂粮为研究对象,对其发酵过程中的菌种探究。分离蜂粮发酵过程中的微生物,并通过形态学、生理生化鉴定、26S r DNA序列同源性分析和构建系统进化树的方法对分离菌株进行了生物学鉴定,确定其种属。枇杷花中分离的酵母菌菌株与Zygosaccharomyces rouxii strain(KC146358.1)高度同源,确定该菌株为鲁氏酵母Zygosaccharomyces rouxii。并利用形态学及生理生化鉴定方法对枇杷花蜂粮及油菜花蜂粮中的细菌进行分离鉴定,枇杷花蜂粮中分离出5株菌株,其中MRS2、MC1、LB1这3株鉴定为乳酸球菌属Lactococcus lactis subsp.1actis,另外2株MRS1、LB2为肠球菌属Enterococcus durans。油菜花蜂粮中分离出7株菌株,经鉴定其为乳酸杆菌属Lactobacillus,其中菌株MRS3、MC2、LB3、LB4为植物乳杆菌Lactobacillus plantarum;菌株MRS4、MRS5、LB5为鼠李糖乳杆菌Lactobcacillus rhamnosus。这些菌种的分离为云阳地区的蜂粮微生物研究提供了科学内容,为蜂粮产品的开发提供了可供选择的菌株。

蜂粮酿制过程中细菌的变化规律

采用营养琼脂培养基、改良“L B”培养基、MRS(4.5 )、MRS(6 .5 )培养基分别对中国茶 (Camelliasinensis)的手采花粉 (floral pollen)、蜂花粉 (corbicular pollen)和不同酿制时间的蜂粮 (bee bread)样品中的细菌进行菌落计数和分析 .酿制初期的蜂粮样品在 MRS(4.5 )培养基和 MRS(6 .5 )培养基上生长的细菌菌落数占优势 ,随酿制时间的延长而迅速下降 ;5、10、15、2 1d蜂粮样品在改良“L B”培养基上生长的细菌菌落数占优势 ;6 0

蜂粮研究进展

蜂粮作为工蜂和幼蜂的食物营养来源,在蜂群生活中有重要意义。本文综述了蜂粮研究的现状,内容包括蜂粮酿制机理、不同蜂群贮酿蜂粮的习性、蜂粮酿制过程中的营养成分、微生物区系、花粉活力、水活度和pH等成分的变化、蜂粮开发利用现状等。对蜂粮研究和开发利用中存在的问题和研究方向进行了讨论。

花粉和蜂粮中霉菌的研究

测定中国茶（Camellia sinensis O．Ktze．））的手采花粉、蜂花粉、1d蜂粮、5d蜂粮、10d蜂粮、15d蜂粮、21d蜂粮、60d蜂粮样品中的霉菌菌落数分别是（个／g）：165、210、245、195、215、280、260、255。从这些样品中共分离出131株霉菌，这些菌分别属于9个属，它们是拟青霉属、曲霉属、青霉属、木霉属、小克银汉霉属、毛霉属、镰刀菌属、饱菌属、毛壳菌属等。鉴定出来的霉菌大多数为曲霉菌（4 5．80％）、青霉菌（26．72％）和毛霉菌（5．34％）。

蜂粮中芽孢杆菌的分离鉴定及其耐酸耐高糖特性的分析

为丰富人工发酵蜂花粉生产蜂粮的菌种资源,从天然蜂粮中筛选芽孢杆菌。通过平板涂布法从中蜂蜂粮样品中分离产芽孢的细菌,利用16S rRNA基因同源比对及系统发育分析对其进行初步鉴定,并分析其耐酸耐高糖特性。共分离到16株隶属于Bacillus tequilensis、Bacillus aerophilus、Fictibacillus nanhaiensis、Bacillus sonorensis、Lysinibacillus xylanilyticus、Lysinibacillus fusiformis、Bacillus invictus、Bacillus methylotrophicus的芽孢杆菌。其中10株菌能在低酸和高糖条件下正常生长,菌株Br7、Br9和Br11的芽孢生成量较少,有潜力应用于人工发酵蜂花粉制备蜂粮。

长木蜂蜂粮酿制过程中pH值和花粉活力的测定

测定手采新鲜的芍药花粉、芍药长木蜂Xylocopa tranquebarorum(Swederus)花粉和不同酿制时间蜂粮样品的平均pH值,结果分别是6.19、5.92和4.05(40日龄蜂粮)。随着酿制时间的延长,蜂粮的pH值下降,2日龄蜂粮到3日龄蜂粮的pH值从5.57降至4.82,下降速率明显。经测定,紫藤长木蜂花粉和不同日龄蜂粮样品中紫藤花粉的纯度均在98%以上;芍药长木蜂花粉和不同日龄蜂粮样品中芍药花粉的纯度均在93%以上;测定紫藤花粉的长木蜂蜂粮和芍药花粉的长木蜂蜂粮中的花粉活力。结果表明,在1日龄蜂粮中花粉活力基本丧失,3日龄后均失去萌发力,并且不同的花粉蜂粮其花粉活力表现一致。

长木蜂蜂粮中微生物丰度及抑菌活性菌株的筛选

长木蜂属于野生蜂类,后代的生存和繁衍完全依靠雌蜂所提供的蜂粮,蜂粮保鲜时间的长短对蜂群的繁衍具有关键性作用。本文采用营养琼脂培养基、改良"LB"培养基、MRS(4.5)、MRS(6.5)培养基分别对芍药的手采花粉、长木蜂蜂花粉和不同酿制时间的蜂粮样品中的微生物进行菌落计数、分析和分离鉴定。酿制初期的蜂粮样品在营养琼脂培养基生长的细菌菌落数占优势,随酿制时间的延长而迅速下降;7d、8d蜂粮样品在改良"LB"培养基上生长的细菌菌落数占优势;10d之后的蜂粮样品在MRS(6.5)培养基上微生物菌落数占优势;分离的68株菌株,其中细菌43株,酵母17株,放线菌8株。从蜂粮中分离的酵母菌和放线菌菌株均来自长木蜂雌蜂的体表。分离的68株菌株中有12株有较强抑菌活性,尤其是放线菌NF-34菌株对真菌和细菌均有抑菌活性。

长木蜂蜂粮粗提液抑菌活性的研究

采用不同溶剂提取长木蜂蜂粮粗提液,并用杯碟法测定所得粗提液的抑菌活性。结果表明:不同的浸提方法提取粗提液得率有明显差别,沸水提取的得率最高,为80.14%;乙醚提取得率最低,为22.96%。不同溶剂的粗提液抑菌活性以70%(质量分数)乙醇粗提液的抑菌活性最强,水提液的次之,沸水提取液的最低。70%乙醇粗提液对细菌的抑菌活性明显大于对真菌的抑菌活性,对不同指示菌的抑菌活性有显著差异,表现为抑菌活性随粗提液浓度梯度增加而增强。粗提液对各种细菌的抑菌活性从高到低依次为:枯草杆菌、鳗弧菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、耶尔森菌。其中,对枯草芽孢杆菌最大抑菌圈直径为(23.61±0.89)mm。

油菜蜂花粉及其蜂粮不同溶剂提取物抗氧化活性研究

以油菜蜂花粉及其同种植物源的蜂粮为原料,采用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基清除和2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐[2,2'-azinobis-(3-ethylbenzthiazoline-6-sulphonate),ABTS]自由基清除两种体外抗氧化方法,评价并比较油菜蜂花粉及其蜂粮水提物和醇提物的体外抗氧化活性。结果表明:4种提取物对DPPH自由基和ABTS+·均具有一定的清除能力,依次为蜂花粉醇提物、蜂粮醇提物>蜂粮水提物>蜂花粉水提物,其中蜂花粉及其蜂粮醇提物清除能力最强,IC50值分别为0.204 mg/mL～0.290 mg/mL和0.094 mg/mL～0.167 mg/mL,二者没有显著差异(p>0.05);2种醇提物的体外抗氧化活性与蜂粮水提物、蜂花粉水提物存在显著差异(p<0.05)。结果进一步证实蜂花粉及其蜂粮均具有一定的体外抗氧化活性,为其在抗氧化功能性食品等领域的开发应用奠定了理论基础。

油菜蜂花粉及其蜂粮的挥发性成分研究

采用顶空固相微萃取-气相色谱-质谱联用法(HS-SPME-GC-MS)对油菜蜂花粉及其蜂粮的挥发性成分进行分析。结果显示,油菜蜂花粉和蜂粮中共分离鉴定出108种挥发性成分,主要包括烃类60种、酯类15种、醛类10种、胺类5种、酮类5种、醚类5种、酸类4种、醇类1种和杂环类化合物3种。油菜蜂花粉和蜂粮中分离鉴定出29种共有挥发性成分,分别占各自总挥发性成分的71.33%、59.60%,特有挥发性成分分别为40、39种。与油菜蜂花粉相比,蜂粮中酯类、芳香烃类、酮类和杂环类化合物的种类数明显增加;烷烃类、酯类、醛类、酮类以及杂环类化合物的相对含量明显增加。

蜂粮及发酵蜂花粉产品的研究进展

对蜂粮的营养价值、功能特性、发酵过程及发酵蜂花粉的研究进展进行综述,为深度开发蜂花粉发酵食品提供科学依据。

茶(Camelliasinensis)蜂花粉与蜂粮中花粉形态和营养成分的比较

采用扫描电子显微镜观察茶蜂花粉和不同酿制时间的蜂粮中花粉粒外部形态和萌发沟 ,没有发现花粉的细胞壁和细胞结构被破坏的迹象 ,花粉粒在蜂粮酿制过程中外部形态保持不变。通过体外模拟消化试验和光学显微镜观察 ,发现蜂粮中花粉粒内含物外吐的数量比蜂花粉多 ,而且在蜂粮酿制过程中 ,随着时间的延长 ,其内含物外吐的花粉粒所占的比例增加 ,花粉内含物外吐使花粉更易于被破壁和消化。蜂花粉和蜂粮中营养成分测定结果表明 ,蜂粮酿制初期 ,由于蜜蜂的添加物和乳酸发酵作用 ,其蛋白质、总糖含量比蜂花粉高 ;随着酿制时间的延长 。

蜂粮中的细菌对pH的影响

测定中国茶 (Camelliasinensis)的新鲜蜂花粉、晒干蜂花粉和不同酿制时间的蜂粮的平均pH分别是5 6 3、5 0 5和 4 0 6。通过接种试验 ,发现细菌是引起蜂粮pH下降的直接原因 ,其中植物乳球菌、果糖乳杆菌、詹氏乳杆菌等是产生有机酸的主要细菌 ,而利斯特氏杆菌对pH的作用不大。

蜂粮源乳酸菌发酵油菜蜂花粉的工艺优化

为利用蜂粮中分离筛选乳酸菌用于油菜蜂花粉的发酵,提高蜂花粉营养价值,优化蜂花粉发酵工艺,选取乳酸菌接种量、红曲霉发酵液添加量、加水量以及发酵温度,在单因素基础上采用正交试验L9(34)对油菜蜂花粉发酵工艺进行优化。实验结果显示:最佳工艺参数为乳酸菌接种量13%,红曲霉发酵液添加量10%,加水量25%,发酵温度33℃。发酵后蜂花粉适口性得以改善,提高了营养价值。为油菜蜂花粉的深加工提供了新的思路。

天然蜂粮生产方法

本文介绍生产天然蜂粮的方法是采用框式隔王栅把蜂箱分成产卵区,幼虫哺育区和生产区,产卵区内依次排放封盖子脾、正在出房的老封盖子脾和大幼虫脾,在幼虫哺育区与产卵区大幼虫脾相邻的位置放一张蜂粮生产脾,其后依次排放有幼虫脾和封盖子脾,使工蜂在蜂粮生产脾上贮存天然蜂粮。利用由带盖的圆筒、与圆筒的开口端相连的中空圆锥体和接于中空圆锥体锥顶的圆管组成的器具,把蜂粮生产脾巢房内的天然蜂粮不断地压挤出来,实现天然蜂粮生产的连续性,既大大提高天然蜂粮的生产效率,又不破坏蜂巢的原有结构,实现天然蜂粮产业化生产,本方法获得的蜂粮产品成条状,大小均一,不易散团,外观好,干净卫生,给产品的后续加工带来方便。