三重TaqMan qPCR检测呼吸道感染衣原体方法的建立及应用

目的本试验的目的是建立可以快速鉴别诊断呼吸道感染肺炎衣原体(Cpn)、鹦鹉热衣原体(Cps)和沙眼衣原体(Ct)的三重TaqMan qPCR方法,有助于衣原体病的科学防控和指导临床用药,为公共卫生安全提供保障。方法选择Cpn、Cps和Ct特异基因ARGR、ompA和ORF8设计引物,建立标准曲线,优化反应条件和体系,验证方法的灵敏度、重复性;通过单独检测3种衣原体的荧光定量PCR方法验证本研究建立方法的准确性。结果结果显示,所建立的三重TaqMan qPCR方法特异度和重复性好,检测灵敏度分别为45 copy/μL(Cpn)、40 copy/μL(Cps)和43 copy/μL(Ct);利用该方法对600个临床样本进行检测,其检出率与参考方法比较,差异无统计学意义(P>0.05),表明该方法检测结果可靠。结论本研究建立的检测呼吸道感染衣原体的三重TaqMan qPCR方法特异性和重复性好,灵敏度高,结果可靠,为呼吸道感染衣原体临床诊治和流行病学监控提供有力工具。

肺炎衣原体与新型冠状病毒共感染及其对机体炎症因子分泌水平的影响

目的明确肺炎衣原体(Cpn)与新型冠状病毒(SARS-CoV-2)共感染的特征及其对SARS-CoV-2诱导机体炎症反应的影响。方法选取2022年12月20日—2023年2月20日郴州市某医院就诊的新型冠状病毒感染(COVID-19)患者,按COVID-19严重程度将重型和危重型作为重症组,轻型和中型作为轻症组,再依据患者年龄(≥18岁为成年,<18岁为未成年)分为成年重症组、成年轻症组、未成年重症组、未成年轻症组。采用倾向性评分对重症组、轻症组患者的年龄、性别、基础疾病进行1∶1匹配。收集患者支气管肺泡灌洗液(BALF)、咽拭子及血清标本,应用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测Cpn IgG/IgM抗体,流式细胞术检测BALF中白细胞介素(IL)-8等12项常见细胞因子水平,并比较各组之间的差异。结果共纳入102例患者,其中重型和危重型(重症)患者61例,轻型和中型(轻症)患者41例;年龄≥18岁的患者71例,年龄<18岁未成年患者31例。成年重症组患者39例,成年轻型组患者32例,经倾向性评分成功匹配30对;未成年重症组患者22例,未成年轻型组患者9例,经倾向性评分成功匹配8对。COVID-19患者中Cpn IgG、IgM阳性率分别为36.27%(37例)、8.82%(9例),其中1例Cpn IgG和IgM同为阳性。成人重症组合并Cpn IgG阳性患者血清标本中干扰素(IFN)-α水平高于IgG阴性患者(P=0.037),两组患者BALF、血清标本中其他细胞因子水平比较差异均无统计学意义(均P>0.05);成人轻症组合并Cpn IgG阳性患者血清标本中IL-8和IL-17水平均高于Cpn IgG阴性患者(均P<0.05)。未成年轻症组合并Cpn IgM阳性患者BALF及血清标本中IL-8水平均高于Cpn IgM阴性患者(均P<0.05)。Logistic回归分析结果显示,Cpn IgG阳性和IgM阳性都不是导致COVID-19发展成重症的危险因素。结论合并Cpn感染不是导致COVID-19患者发展成重症的危险因素,Cpn感染对SARS-CoV-2导致的炎症因子分泌影响有限。

流产衣原体非典型重症肺炎的诊断及临床特点

目的 探讨流产衣原体非典型重症肺炎的诊断及临床特点。方法 收集2021年1月—2022年11月某院收治并诊断为流产衣原体非典型重症肺炎4例患者的临床资料,全面分析该疾病的临床特征、诊治要点及注意事项。结果 4例患者均为男性,年龄63~73岁,急性起病,均表现为高热、咳嗽、咳痰;3例患者有家禽接触史,1例有流产山羊接触史。4例患者从有临床症状到出现急性呼吸衰竭的间隔时长为1~6 d,且入院时氧合指数(PaO_(2)/FiO_(2))均<200 mmHg,随病情发展呈进行性下降,需积极呼吸机支持。2例患者白细胞计数升高,4例中性粒细胞百分比升高,3例血小板计数轻度降低;4例患者中2例患者天冬氨酸转氨酶升高,2例患者丙氨酸转氨酶升高,3例患者肌酸激酶升高,4例患者血清肌酐均升高,2例轻度低钠血症;4例C反应蛋白、降钙素原、白介素-6明显升高。4例患者胸部CT表现以单个或多个肺叶累及为主,渗出实变,后期累及多个肺叶。支气管肺泡灌洗液宏基因组二代测序均检测出流产衣原体DNA序列。结合4例患者的临床表现、接触史、胸部CT、宏基因组二代测序等结果,诊断为流产衣原体非典型重症肺炎,通过及时调整以多西环素为基础的抗感染治疗方案后,患者病情好转出院。结论 流产衣原体也可能导致人类肺炎发生,感染后可导致严重临床后果,当患者有动物接触史时,需警惕此类疾病;宏基因组二代测序可以检出流产衣原体。

鸭源A型鹦鹉热衣原体的分离鉴定

目的对疑似鹦鹉热衣原体感染鸭进行检测、病原分离培养和基因型鉴定。方法从山东某鸭场采集病鸭肺脏,进行衣原体荧光PCR检测;将阳性样本匀浆和无菌处理后,接种L929细胞,连续传代培养,通过Giemsa染色和电子显微镜观察细胞内衣原体包涵体的形成;提取分离株DNA并测序,分析16S rRNA、16-23S IGS和ompA基因序列进行种属鉴定和基因分型。结果成功分离到1株鸭源鹦鹉热衣原体,基因型鉴定为A型。结论鸭源A型鹦鹉热衣原体的分离鉴定扩大了对A型菌株感染宿主范围的认识,为其生物学特性、致病性和防控技术及公共卫生等相关研究提供基础资料。

不孕不育人群生殖道沙眼衣原体感染影响因素分析

目的了解不孕不育门诊人群生殖道沙眼衣原体(CT)感染现状及影响因素,为制定该人群的CT防治策略提供依据。方法2021年4—12月在深圳市宝安区4家开设有不孕不育门诊的医疗机构的常规就诊者中招募调查对象。在获得知情同意情况下,收集其社会人口学相关信息并采集尿液标本进行CT核酸检测。运用Logistic回归分析该人群CT感染的影响因素。结果共招募954例不孕不育患者,CT阳性率为3.56%。Logistic回归分析结果表明,年龄<25岁(OR=3.91,95%CI:1.58~9.67)、文化程度为大专(OR=4.33,95%CI:1.23~15.24)、最近1年性伴数量≥2个(OR=4.25,95%CI:1.72~10.55)是该人群感染CT的危险因素。在调查对象中,74.42%不了解CT感染的相关症状,73.90%既往未检测过CT。结论深圳市宝安区不孕不育人群CT感染率较高,性活跃年龄段、文化程度相对较低、有多个性伴是CT感染的危险因素,应在不孕不育专科门诊中针对以上人群开展CT筛查,同时开展健康宣传,提高人群生殖健康。

生殖道沙眼衣原体的感染流行特征及空间聚集性分析:基于2014—2023年广州市海珠区数据

目的 了解广州市海珠区生殖道沙眼衣原体感染的流行特征,为制定干预措施提供参考依据。方法 通过“中国疾病预防控制信息系统传染病监测报告管理”模块收集2014—2023年广州市海珠区生殖道沙眼衣原体感染疫情数据,进行流行病学和空间聚集性分析。结果 广州市海珠区生殖道沙眼衣原体感染报告发病率从2014年的90.02/10万下降到2023年的51.55/10万,年均发病率下降6.01%,呈缓慢下降趋势(Z=-11.44,P<0.001);男性报告发病率略平稳,女性报告发病率呈下降趋势(Z=-13.38,P<0.001);发病年龄主要集中在20~39岁人群(占82.48%);职业以家务及待业、商业服务人员、职业不详为主。2017、2019—2023年报告病例数存在正向空间自相关性(均Moran′s I指数>0,Z>1.960,P<0.05),其中空间聚集程度2020年最高,2017年最低;“高-高”聚集区域主要集中在赤岗街道和凤阳街道;“低-高”聚集区域为琶洲街道。结论 2014—2023年广州市海珠区生殖道沙眼衣原体感染发病率呈缓慢下降趋势,在人群和空间分布上有显著聚集性,需加强重点人群的防治工作,控制疫情流行。

鹦鹉热衣原体肺炎的CT表现特征

目的探讨鹦鹉热衣原体肺炎患者的CT表现特征。方法回顾性分析笔者医院经宏基因二代测序(macrogene second-generation sequencing,m NGS)技术确诊10例鹦鹉热衣原体肺炎患者的胸部CT图像。结果7例(70%)患者与鸟(禽)类或其粪便有接触史。入院胸部CT均表现为团片状渗出实变影,均位于单肺,其中累及单叶8例(80%)、双叶2例(20%);10例(100%)均伴有支气管充气征,9例(90%)有磨玻璃影,8例(80%)局部小叶间隔或小叶内间隔增厚;1例(10%)病灶呈“扇形”改变,1例(10%)病灶见“反晕症”,9d内复查9例(90%)有进展,表现为病灶融合增大呈更大范围实变或新出现病灶。结论鹦鹉热衣原体肺炎CT表现具有一定特征,结合鸟(禽)类接触史可提示诊断。

鹦鹉热衣原体肺炎的胸部CT影像表现

目的:探讨鹦鹉热衣原体肺炎的胸部CT影像表现。方法:回顾性分析22例鹦鹉热衣原体肺炎患者的临床及胸部CT资料,分析肺内病变的影像学特点及肺外影像表现。结果:22例鹦鹉热衣原体肺炎中,15例肺内病变表现为大叶性肺炎,5例表现为斑片结节,2例表现为支气管肺炎,常见伴随征象包括:小叶间隔增厚(12例)、小叶内网状影(11例)、铺路石征(6例),少数可见晕征(3例)、反晕征(1例)、小叶中心性结节(1例)、支气管壁增厚(2例)、支气管牵引性扩张(1例)。所有病变均未见坏死或空洞。肺内病变分布:累及单肺19例,双肺3例;累及上肺区6例,下肺区13例,上、下肺区同时受累3例;外周分布12例,支气管血管周围分布4例,弥漫分布6例。10例合并胸腔积液,3例伴纵隔淋巴结增大。结论:鹦鹉热衣原体肺炎的影像表现以大叶性肺炎最多见,典型者表现为斑片状实变伴空气支气管征,多合并磨玻璃密度影,常伴小叶间隔增厚、小叶内网状影及铺路石征等间质受累表现,可见胸腔积液、纵隔淋巴结增大。

冠心病经皮冠状动脉介入术治疗前后患者血清肺炎衣原体抗体IgA、超敏C-反应蛋白、血管生成素-2变化及预后预测价值研究

目的:探讨冠心病(CHD)经皮冠状动脉介入术治疗前后患者血清肺炎衣原体抗体IgA(CP-IgA)、超敏C-反应蛋白(hs-CRP)及血管生成素-2(Ang-2)变化及预后预测价值。方法:选取CHD患者135例为观察组,根据患者预后情况分为预后良好组(119例)及预后不良组(16例)。另选取同期体检健康者135例为对照组。比较观察组和对照组、观察组PCI前后以及两个亚组血清CP-IgA、hs-CRP及Ang-2水平。分析血清CP-IgA、hs-CRP及Ang-2与PCI术后CHD患者预后的相关性。分析血清CP-IgA、 hs-CRP及Ang-2对PCI术后CHD患者预后的预测价值。结果:观察组血清CP-IgA、hs-CRP及Ang-2水平高于对照组(均P<0.05)。观察组患者PCI术后血清CP-IgA及Ang-2水平较PCI术前降低,血清hs-CRP水平较PCI术前升高(均P<0.05)。预后良好组患者血清CP-IgA、hs-CRP及Ang-2水平低于预后不良组(均P<0.05)。血清CP-IgA、hs-CRP及Ang-2与PCI术后CHD患者预后呈正相关(均P<0.05)。血清CP-IgA、hs-CRP及Ang-2单独预测PCI术后CHD患者预后的曲线下面积(AUC)小于三项联合(均P<0.05)。结论:CHD患者血清CP-IgA、hs-CRP及Ang-2水平升高,PCI术后血清CP-IgA和Ang-2水平降低,hs-CRP水平升高。预后不良患者血清CP-IgA、hs-CRP及Ang-2水平升高,且三者联合对PCI术后CHD患者预后的预测价值较高。

银甲丸加减方对衣原体持续性感染输卵管炎模型小鼠输卵管病理及炎性因子的影响

目的:观察银甲丸加减方对生殖道衣原体(CT)持续性感染输卵管炎小鼠输卵管病理、CT清除率及炎性因子IL-10、IFN-γ和TGF-β的调节作用。方法:36只BALB/c小鼠随机分为6组,除空白组以外,其余组小鼠阴道内均接种衣原体建立CT持续性感染模型。造模成功后分组给药,第28天处死,HE染色观察小鼠上生殖道组织病理改变,q RT-PCR测定小鼠生殖道CT含量,ELISA检测小鼠血清IL-10、IFN-γ和TGF-β表达水平。结果:与空白对照组比较,模型组CT基因表达量显著增高(P<0.01)。与模型组比较银甲丸加减方中、高剂量组和阳性药物(阿奇霉素)对照组CT基因表达显著降低(P<0.05)。IL-10、IFN-γ含量显著上调(P<0.05),TGF-β含量显著下降(P<0.05)。结论:银甲丸加减方有助于缓解衣原体生殖道感染模型小鼠的输卵管炎病理状态,促进持续性感染CT的清除,其机制可能是通过调节细胞因子IL-10、IFN-γ和TGF-β的表达来实现。

鹦鹉热衣原体感染致重症肺炎1例

该文报道1例45岁女性患者,因胸闷、气短、发热等症状入院,影像学提示肺部感染,实验室检查鹦鹉热衣原体抗体IgM阳性(微量免疫荧光法),支气管肺泡灌洗液宏基因组高通量测序(mNGS)检出鹦鹉热衣原体核酸,予米诺环素和阿奇霉素抗感染治疗,病情稳定出院。

鹦鹉热衣原体肺炎病例特点并文献复习

目的探讨鹦鹉热衣原体肺炎的临床特点及治疗。方法回顾总结2020年9月~2021年7月我院通过支气管肺泡灌洗(BAL)联合宏基因二代测序(mNGS)诊断的5例鹦鹉热衣原体肺炎患者,分析5例患者症状、实验室检查、胸部CT、病理、治疗及预后,分析鹦鹉热衣原体肺炎患者的临床特征并文献复习。结果5例鹦鹉热衣原体肺炎患者中3例有鸽子接触史,2例有糖尿病病史。所有患者均出现发热,2例患者伴有咳嗽,1例患者出现腹痛。入院时患者的C-反应蛋白、血沉炎症指数水平均升高,胸部CT特点为实变影伴磨玻璃影;支气管肺泡灌洗液(BALF)细胞分类4例患者出现淋巴细胞增多;4例患者的支气管镜肺活检(TBLB)病理结果:炎性渗出、纤维素渗出、泡沫细胞浸润,1例伴机化。治疗使用多西环素或莫西沙星及其联合治疗,5例患者均好转出院。结论对于有禽类接触史、白细胞、降钙素原不高,淋巴细胞减低、低钠低氯血症、CT表现为斑片状实变影伴磨玻璃影患者需警惕鹦鹉热衣原体肺炎,BALF送检联合mNGS可提高鹦鹉热衣原体肺炎的诊断率。

鹦鹉热衣原体感染的诊断与防控

鹦鹉热是鹦鹉热衣原体(CP)引起的一种人兽共患病。患病禽(鸟)精神萎靡、厌食、羽毛松乱、眼鼻流分泌物、腹泻和严重脱水,临床表现为呼吸困难、发热,有结膜炎、关节炎,死亡等特征。人亦可感染而出现肺炎、败血症和流产等。

鹦鹉热衣原体肺炎临床特征分析

目的综合分析25例确诊为社区获得性鹦鹉热衣原体肺炎患者的临床特征及诊治过程,为高效诊治鹦鹉热,降低并发症,提高重症患者的生存率提供科学依据。方法回顾性分析2020年9月至2023年2月由我院收治的25例鹦鹉热衣原体肺炎患者的临床资料,总结鹦鹉热衣原体肺炎的临床特征及诊治要点。结果25例患者,其中男性15例,女性10例,中位数年龄为69岁(41~80岁),主要临床表现为高热、咳嗽、气喘、乏力,均有鸟类或家禽类接触史,从起病到就诊时间为4 d(1~10 d)。患者白细胞基本正常,常规CRP、降钙素原(PCT)明显升高。15例患者进行细胞免疫检查,其中13例CD4、CD8细胞数量降低。气管镜检查主要表现为气道黏膜充血水肿,气道中痰液较少。患者存在低氧血症,严重者出现呼吸衰竭,医师对患者经验性使用抗菌药物治疗效果不佳。利用宏基因组二代测序(mNGS)技术及时调整以四环素类药物为基础的治疗方案后病情好转,缩短了鹦鹉热衣原体肺炎的诊断时间和病程。结论有鸟类或家禽类接触史的社区获得性肺炎患者,利用mNGS可提高鹦鹉热衣原体肺炎诊断的准确性,尽早启动以四环素为基础的治疗方案治疗效果显著,但仍需警惕在病程中继发细菌感染及其他并发症的风险。

小檗碱的体外抗衣原体活性研究

研究旨在阐明天然产物小檗碱的体外抗衣原体活性。首先,通过测定小檗碱对沙眼衣原体L2和鼠衣原体MoPn包涵体形成数量和感染性子代滴度的影响,发现小檗碱对两种衣原体均呈浓度依赖性抑制。其次,采用CCK-8试剂盒测定化合物对细胞活力的影响,显示浓度不高于8μmol/L时小檗碱无明显宿主细胞毒性。借助宿主细胞和衣原体预处理实验,发现小檗碱不能直接作用于宿主细胞,仅能微弱地直接作用于衣原体而影响衣原体的感染过程。最后,分析小檗碱对衣原体增殖过程的影响。后加药和撤药实验结果显示,小檗碱主要作用于2~12 h的EB→RB转化阶段;长期耐受实验结果表明,小檗碱可以延缓衣原体的生长周期,但不能完全杀死衣原体。综上,小檗碱具有广谱的体外抗衣原体活性,对衣原体增殖过程的干扰作用强于对感染过程的影响。

养鹦鹉与鹦鹉热衣原体肺炎

鹦鹉热衣原体肺炎是一种感染鹦鹉热衣原体而引起的人畜共患传染病,传染源主要是带菌鸟类(如鹦鹉、鸽子、金丝雀等)或家禽以及被污染的环境。病人在发病前多有鸟类或家禽接触史,呼吸道是常见传播途径。其临床表现各异,以发热、咳嗽为主,其他特征不显著,少许病人可迅速进展为重症肺炎,甚至危及生命。过往由于医生对疾病的认识不足且缺乏快速确诊方法,“鹦鹉热”确诊例数较少且易漏诊。近年来,随着宏基因组二代测序技术(mNGS)在临床上的广泛应用,越来越多的鹦鹉热衣原体肺炎得到确诊。

确诊鹦鹉热衣原体肺炎患者的临床症状分析

通过系统性分析确诊为鹦鹉热衣原体肺炎患者的临床特征,进一步完善对该疾病的认知,从而进行针对性治疗。方法 回顾分析本院2021年12月至2023年2月期间住院期间诊断为鹦鹉热衣原体肺炎的患者的临床信息,包括一般信息、临床症状及体征、实验室指标、影像学特点、治疗及转归。结果 确诊患者中男性有5例,女性有4例,年龄范围在43-75岁,中位年龄为62岁,临床表现主要为发热、体温超过39℃,咳嗽咳痰、乏力、胸闷气喘。其中发展为重症肺炎4例,伴有呼吸衰竭1例,伴有急性呼吸窘迫综合征1例。所有患者的实验室指标均出现不同程度的异常,炎症指标呈现不同程度的升高。患者的胸部CT都呈现不同程度的实变影、斑片影或者磨玻璃影,其中4例病变累及两肺,3例以左肺为著,2例以右肺为著,6例其间可见支气管充气征,7 例患者伴有不同程度的胸腔积液,1例伴有少量心包积液。患者的肺泡灌洗液、外周血或者痰液均送检mNGS,检测结果见鹦鹉热衣原体肺炎的特异性DNA片段。患者治疗方案调整为以四环素类为主,并根据临床症状联合应用其他抗生素,其中3例患者加用喹诺酮类,3例患者加用碳青霉烯类,3例患者加用青霉素类,其中1例合并隐球菌感染,予氟康唑、奥马环素联合治疗。结论 人类感染鹦鹉热衣原体主要是通过接触鸟类及鸟类的排泄物,病程中常伴有高热、气喘等急性症状,疾病进展快,诊断过程困难,经验性治疗往往没有明显疗效,应尽早送检mNGS明确诊断,及时进行精准治疗,抑制病程进展,改善患者预后。

猪衣原体病的诊断与防控

猪衣原体病是由衣原体引起的一种接触性传染病,该病发病范围广,可以导致不同生长阶段的病猪出现不同的症状,尤其对妊娠母猪和种公猪威胁较大,可以导致妊娠母猪出现流产、产弱胎、死胎等,种公猪则出现繁殖障碍,对养猪业威胁极大。本文根据当地猪衣原体病的发生情况,分析了该病的流行病学、症状以及诊断和防控措施,以期降低该病的发生率,提高养猪效益。

老年患者鹦鹉热衣原体肺炎28例临床特征分析

目的研究老年患者鹦鹉热衣原体肺炎的临床特点、实验室检查、影像学以及治疗和转归。方法回顾性分析2020年8月—2023年8月在天津第三中心医院采用宏基因组二代测序技术诊断的28例老年鹦鹉热衣原体肺炎患者临床资料,采集患者病史、临床表现、实验室检查、胸部CT表现和治疗及转归情况。结果28例患者,年龄(72.1±8.8)岁,男16例,女12例,其中饲养鸽子3例,饲养鹦鹉4例。从发病到住院时间(5.6±3.0)d,住院时间(14.3±4.3)d。临床表现主要为发热、咳嗽、咳痰、心悸、腹泻等。实验室检查:白细胞计数(6.8±2.2)×10^(9)/L、中性粒细胞比例(81.1±8.7)×10^(9)/L、C反应蛋白155(126.5)mg/L。胸部CT表现多样:实变、实变伴磨玻璃影、磨玻璃影,支气管充气征、反晕征,胸腔积液等。CURB-65评分(1.43±0.84),PSI评分(109.75±32.97)。治疗情况:16例使用莫西沙星、5例使用左氧氟沙星,4例使用哌拉西林他唑巴坦联合米诺环素,2例使用碳青霉烯类联合米诺环素,1例使用碳青霉烯类联合莫西沙星。接受高流量吸氧病例有5例,28例患者均痊愈出院。住院时间与CURB-65评分、PSI评分、年龄、性别、C反应蛋白、胸部CT表现关系:PSI评分、C反应蛋白、双侧肺叶受累与住院时间成相关性,差异有统计学意义(P<0.05)。其他指标与住院时间无相关性。结论随着CRP、PSI评分升高,双侧多个肺叶受累,患者住院时间延长,喹诺酮类抗生素对于鹦鹉热衣原体肺炎有效。老年患者基础病多,社区获得性肺炎易合并多脏器功能损伤,易发展为重症,应尽早识别病原学,缩短病程,改善预后。

北京地区5例鹦鹉热衣原体感染病例流行病学及临床特征分析

目的分析北京市某区近一年的5例鹦鹉热衣原体感染病例的流行病学及临床特征。方法回顾性收集并分析北京市某区2022年11月—2023年10月的5起鹦鹉热疫情的发现、病例的流行病学及临床特征。结果在5例鹦鹉热病例中,2例来源于北京市某区2家医院报告的确诊病例,2例来源于某网络软件搜索的临床诊断病例,1例来源于医防融合过程中医务人员访谈。5例病例均有鸟类饲养史/接触史;均高热起病,其中4例因明显呼吸道症状就诊,1例因明显中枢神经系统症状就诊;4例病例经治疗后好转,1例病例死亡。结论应加强民众鹦鹉热衣原体感染健康教育,规范禽类售卖和饲养场所病原学监测,加强医疗机构鹦鹉热衣原体感染监测,提升医务人员鸟类饲养史/接触史问诊意识。