诺瓦克样病毒腹泻及其检测技术研究进展

诺瓦克样病毒（Norwalk-like Viruses,NLVs）属于杯状病毒科诺瓦克样病毒属,是一种分布广泛的肠道腹泻病毒,暴发无地域性,无季节性,能引起成人和儿童急性胃肠炎,是继轮状病毒之后又一引发病毒性胃肠炎的最主要病原[1]。由诺瓦克病毒引发的高传染性肠胃炎疫情目前正在日本迅速蔓延,据日本国立传染病研究所传染病信息中心推算,

诺瓦克样病毒胃肠炎集体性爆发的证实与思考

目的通过对诺瓦克样病毒胃肠炎集体爆发的调查和证实,总结处理不明原因疾病的经验。方法运用流行病学方法对3所幼儿园和1所小学发生的急性胃肠炎集体爆发进行调查,对病人粪便样本进行诺瓦克样病毒核酸检验。结果4起集体爆发的胃肠炎均以恶心呕吐为主要表现,有2个发病高峰,病程较短,有自愈倾向,没有明显的年龄、班级、楼层分布的集中趋势。对第4起爆发的22份病人粪便样本进行诺瓦克病毒的PCR检测,其中19份阳性,同时有4份经DNA测序证实与诺瓦克样病毒同源。结论此一系列不明原因的胃肠炎是由诺瓦克样病毒引起的。这是我国证实由诺瓦克样病毒感染而引起的集体性急性胃肠炎的爆发。

诺瓦克和诺瓦克样病毒的研究进展

诺瓦克和诺瓦克样病毒作为急性胃肠炎的病原之一,日益受到人们的重视。本文主要对这种病原所致疾病的流行情况、病原的血清免疫学及其基因组织和蛋白表达等方面进行了综述。

太平洋牡蛎中诺瓦克样病毒的RT-PCR法检测和病毒聚合酶区部分序列的分析

利用pH9.5的甘氨酸缓冲液性处理太平洋牡蛎(Crassostrea gigas)匀浆液,PEG沉淀病毒粒子的方法对未知的是否污染有诺瓦克样病毒(Norwalk-like Virus,NLVs)的牡蛎样品进行处理,并提取病毒RNA,进行RT-PCR,凝胶电泳检测扩增结果。初步建立了牡蛎中NVLs的检测方法。纯化所得的特异PCR产物,克隆到T-载体中,筛选转化子,提取质粒,并进行PCR电泳鉴定。重组质粒序列测定结果在NCBI上进行BLASTn显示所得产物与已发表的诺瓦克样病毒的相应序列具有极高的同源性(>95％);根据Genebee在线分析系统AliBee-Multiple Alignment进行对中国的诺瓦克样病毒粪便分离株和牡蛎分离株的扩增序列进行相似性分析,结果从我国养殖的牡蛎样品中和胃肠炎病人粪便中分离出2个的诺瓦克样病毒之间无显著的差异。

北京地区人群诺瓦克样病毒血清抗体水平调查

为了解诺瓦克样病毒在我国人群中的流行情况，采用间接酶联免疫吸附法（ＥＬＩＳＡ），分别以重组杆状病毒表达的Ｎｏｒｗａｌｋ（ｒＮＶ）和Ｍｅｘｉｃｏ（ｒＭＸ）病毒样颗粒为抗原，检测了北京地区１１０９份不同年龄人群血清标本中的特异性ＩｇＧ抗体。总检出率为ｒＮＶ８８．８％，ｒＭＸ９０．６％。两种型别抗原的抗体分布形式类似：７－１１个月的阳性率最低，分别为ＮＶ４１．４％，ＭＸ３６．２％；１岁时达到ＮＶ６５．２％，ＭＸ６９．６％；３岁时达到ＮＶ８４．６％，ＭＸ８９．７％；８、９岁后均接近１００％。结果提示。

群体性诺瓦克样病毒性胃肠炎疫情分析

目的 分析广州市2 0 0 3年群体性诺瓦克样病毒性胃肠炎流行特征,加强该病的预防控制工作。方法 采用现场流行病学调查方法,对广州市2 0 0 3年群体性诺瓦克样病毒性胃肠炎疫情进行调查分析。结果 2 0 0 3年10月～12月底,广州市共报告8起群体性诺瓦克样病毒性胃肠炎疫情,共计病例396例,每起疫情均从部分患者粪便标本中检出诺瓦克病毒核酸或抗原。结论 RT- PCR的阳性检出率大于ELISA法,粪便标本检出率高。诺瓦克样病毒性胃肠炎常引起暴发疫情,及时采取控制措施可避免疫情扩散。

在我国腹泻患儿中发现诺瓦克样病霉感染

诺瓦克病毒是引起无菌性急性胃肠炎爆发的重要病原。１９９０年１０月至１９９１年１月从河南省急性腹泻门诊患儿便样中发现了诺瓦克样病毒。经电镜观察，病毒直径约为２８ｎｍ，病毒壳似由有结构的亚单位组成，进一步用诺瓦克病毒特异的寡核苷酸引物做逆转录一聚合酶链式反应（ＲＴ－ＰＣＲ），检定为阳性。由ＰＣＲ产物测得的核苷酸序列与诺瓦克病毒原型株相应序列比较，同源性为７２％。以上结果证实，在我国腹泻病人中有诺瓦克样病毒感染。这对我国病毒性胃肠炎流行的防治研究具有重要意义。

水体中诺瓦克病毒RT-PCR检测研究

诺瓦克病毒是公认的食源性或水源性非细菌性胃肠炎的主要致病因子之一。建立诺瓦克病毒的RT-PCR检测方法,验证其特异性及灵敏度,并在实验室人工污染水样,进行模拟水样的检测,验证RT-PCR检测方法的实用性。所用引物为RNA多聚酶区的JV12/JV13,多次反复实验,均可产生327bp预期大小的特异条带,并通过杂交进一步证实了其特异性和正确性;在临床粪样中,可达到的最高检测限为50pg/mL。在共42份模拟样品的检测中,经过播毒、富集和浓缩,38份均可检出诺瓦克病毒。其中4份池塘水未检出。在模拟水样中的检测灵敏度为200pg/mL。实验中所建立的试验条件和体系可用于实际水样中诺瓦克病毒的筛选,对水质控制起到了很好的监控作用。

一起诺瓦克病毒引起感染性腹泻爆发疫情调查分析

2006年10月28日浙江省宁海县疾病预防控制中心（CDC）接到黄坛镇卫生院报告，该镇后溪林村有10余例腹泻、呕吐症状病例。现将调查结果分析如下。

90例非轮状病毒腹泻患儿粪便中诺瓦克样病毒的检测

目的了解90份婴幼儿腹泻病人轮状病毒分子生物学方法检测阴性的粪便标本中诺瓦克样病毒感染状况。方法应用酶联免疫吸附实验方法(ELISA)进行诺瓦克样病毒抗原检测。结果90份粪便标本中诺瓦克样病毒I型(G1)和Ⅱ型(G2)阳性分别检出6例和19例,阳性率分别为6.67%和21.11%,两者差异有显著性。结论诺瓦克样病毒感染可能是武汉地区婴幼儿腹泻的重要病因之一,其中基因Ⅱ型为主要流行株。

深圳市一起诺瓦克病毒感染性腹泻暴发的流行病学调查分析

目的分析深圳市某区一起诺瓦克病毒感染性腹泻暴发的流行病学特征,为防制诺瓦克病毒感染性腹泻提供科学依据。方法确定病例定义进行病例搜索和流行病学调查。采用RT-PCR检测诺瓦克病毒抗原。结果本次疫情流行历时一周,共发病13例,其中幼儿8例,小学生1例,教职工4例。采集10个病例大便样本,实验室检测诺瓦克病毒抗原全部阳性。结论密切接触是此次诺瓦克病毒感染性腹泻暴发的主要传播途径,养成良好的个人卫生习惯、隔离传染源和切断传播途径是预防和控制此病的有效措施。

梅县学校食堂厨工诺瓦克病毒感染情况调查

目的了解梅县学校食堂厨工诺瓦克病毒感染情况,为诺瓦克病毒胃肠炎预防控制工作提供科学依据。方法应用酶联免疫法(ELISA)进行诺瓦克病毒抗原检测。结果234份粪便标本中检出诺瓦克病毒阳性8份,阳性率为3.42%。结论梅县学校食堂厨工存在诺瓦克病毒健康携带者,学校有爆发诺瓦克病毒胃肠炎的潜在危险。

诺瓦克病毒研究进展

诺瓦克病毒(Noroviruses,NVs)是1972年在美国首次发现的新生病毒,到1995年国内才有报道。该病毒是严重危害人类健康的重要食源性病毒,可导致不同年龄阶段人群的急性病毒性腹泻。因为至今没有发现合适的细胞系和动物模型用于NVs的体外增殖,所以对于该病毒的研究相对滞后。随着分子生物学及其他学科的不断发展,不同类群NVs全基因组测序完成并且病毒核衣壳蛋白分别获得真核和原核系统体外表达,从而对该病毒特性产生了一些新的认识和观点。论文从NVs的基因组结构与功能、蛋白质组成与功能、检测方法应用与发展和流行病学积累四个方面,系统介绍了该病毒国内外的研究现状以及其中存在的问题;其中,其蛋白质研究及其检测方法成为NVs的热点。论文还对NVs分子进化、检测技术和病毒体外增殖模式等提出不同的看法和建议。

儿童诺瓦克样病毒感染临床特征及危险因素

目的了解儿童诺瓦克样病毒(Norwalk-like virus,NLVs)感染的临床特征及危险因素。方法收集临床诊断为病毒性腹泻患儿的粪便标本并填写调查表。对收集的标本分别采用ELISA检测轮状病毒(Rotavirus,RV)、RT-PCR检测NLVs。对调查表资料采用1∶1配对病例(NLVs)-病例(RV)及1∶1配对病例对照研究,分析NLVs感染的临床特点及危险因素。结果648份标本中检出RV 339份(52.31%),NLVs 80份(12.35%)。分析表明,NLVs所致腹泻的临床特征有别于RV腹泻,前者最早出现呕吐症状者居多(62.82%),并且有呕吐症状者多于后者。而RV腹泻患儿最早出现的症状以腹泻为主(65.38%)。发热、最高温度、发热天数、腹泻天数、是否输液治疗及就诊次数均为RV感染患儿高于NLVs感染患儿。对NLVs腹泻可能的危险因素进行单因素及多因素条件Logistic回归分析,最终筛选出4项危险因素,分别为吃生冷食品、与腹泻患者接触、吮手习惯及较少洗手。结论NLVs是导致儿童腹泻的重要病原体,其所致腹泻的临床特征不同于RV腹泻;RV腹泻临床症状较NLVs腹泻严重,但NLVs腹泻所造成的家庭经济负担不容忽视。

诺瓦克样病毒及其检测方法

诺瓦克样病毒是一种分布很广泛的,可导致成人和儿童急性胃肠炎的病毒,是除轮状病毒外引起腹泻的最主要的病毒病原,与食物、水源等的污染造成的急性胃肠炎暴发密切相关。文章介绍了诺瓦克样病毒的病原学、流行病学、临床表现和诊断检测等方面的研究进展。

一起家庭聚集性诺瓦克样病毒感染的调查

目的 :调查一起家庭聚集性非菌性腹泻病原、传播途径、临床表现以及病原学特性 .方法 :感染者腹泻粪便及其可疑食物采用RT PCR方法检测 ,并测序 .结果 :患儿、患儿父亲、患儿外公粪便标本及蟹肉标本均扩增出NLVs目的片断 ,测序分析表明该四份标本同源性为 1 0 0 % .结论 :证实该起家庭聚集性非菌性腹泻为诺瓦克样病毒感染所致 ,并在食物中检测到诺瓦克样病毒 。

一起福利院诺瓦克病毒胃肠炎暴发调查

目的调查分析2006年嘉定区一起由诺瓦克病毒引起的福利院胃肠炎暴发疫情的特征及其原因。方法采用现场流行病学方法进行调查,对标本采用RT-PCR方法检测诺瓦克病毒核酸。结果该起疫情共报告病例53例,52例集中在1号楼,1号楼的罹患率为24.41%,在7份病人标本中3份检出诺瓦克病毒核酸阳性。结论本次胃肠炎暴发疫情是由诺瓦克病毒引起,传播途径为人与人之间密切接触传播。

诺瓦克样病毒及其检测方法

诺瓦克样病毒是一种分布广泛,可导致成人和儿童急性胃肠炎的病毒,是除轮状病毒外最主要的致腹泻病毒病原,与食物、水源等污染造成的急性胃肠炎暴发密切相关。现对诺瓦克样病毒的病原学、流行病学、临床表现和诊断检测等方面的研究进展作一介绍。

诺瓦克样病毒抗体水平及其相关因素研究

目的 了解某军校学员诺瓦克样病毒抗体水平 ,同时调查分析与血型、入学前家庭所在地等的关系。方法 利用酶联免疫吸附试验检测血清中的诺瓦克样病毒rNV、rMX和r387特异性IgG抗体水平。结果 rNV、rMX和r387IgG抗体总检出率分别为 88 9% ,5 4 1%和 90 0 %。其中rMX抗体阳性率不同血型之间存在显著性差异 (P<0 0 5 ) ,以O型抗体阳性率最高 6 2 5 % (115 / 184 ) ,B型最低 4 9 1% (16 0 / 2 16 ) ,而rNV和r387抗体阳性率未见显著性差异。不同入学前家庭所在地 3种抗体阳性率均有显著性差异 ,其中以农村籍学员抗体阳性率最高 ,城市最低。结论 该军校人群中诺瓦克样病毒感染普遍 。