免疫亲和层析技术协同酶联免疫吸附法检测赭曲霉毒素A

利用免疫亲和层析技术(immunoaffinity chromatography,IAC)对样品中赭曲霉毒素A(ochratoxin A,OTA)进行捕获与浓缩,利用酶联免疫吸附(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)法对IAC捕获的目标物OTA进行测定。IAC与ELISA中的抗OTA单克隆抗体来自不同的克隆株,分属不同独特型,与OTA结合靶点的选择性存在差异,IAC与ELISA协同检测,可以有效过滤OTA结构类似物造成的干扰,提高免疫分析的特异性与灵敏度。该方法用于加标样品测定时,OTA的检出限为0.2 ng/g,定量限为0.4 ng/g,OTA的平均回收率为75.9%,与单一的ELISA法相比,该方法虽然回收率略低,但灵敏度可以显著提高,达到ELISA法的60倍。通过对49份样品的实际检测,该方法检出阳性样品与国标法的符合率达到100%,漏检率为0%,由此可见,该方法在准确性上表现出明显的优势。作为一种综合免疫分析技术,该方法不需要大型仪器设备,对操作环境没有严格要求,便于基层实验室对样品中OTA的分析。

酶联免疫吸附法在食品中重金属残留检测中的应用

酶联免疫吸附法(Enzyme Linked Immunosorbent Assay,ELISA)以其高特异性、高灵敏度等优势,在食品重金属残留检测领域展现出广阔的应用前景。本文综述了ELISA检测水产品中汞、谷物中镉、蔬菜中铅、奶制品中铬和食用油中砷的研究进展,重点阐述了抗原设计、抗体制备、样品前处理和检测条件优化等关键技术。针对不同食品基质,提出了进一步提升ELISA检测性能的建议,为食源性重金属分析提供参考。

酶联免疫吸附法在畜产品快速检测中的应用

酶联免疫吸附法是畜产品质量安全检测常用的快检方法之一,能快速、准确、高效地对相关产品进行检测。伴随着行业的高速发展,人们对畜产品的需求数量及质量要求也在逐步上升,畜产品的食品安全问题越来越受到重视。但近年来,畜产品中存在着动物疫病、兽药残留及产品非法添加物等相关问题。因此,使用快速、准确的检测方法筛查畜产品的质量安全至关重要。本文以酶联免疫吸附法为主要技术导向,深入剖析其原理,同时对该技术在畜产品快检中的应用情况分层介绍,以期为行业相关研究人员提供依据。

间接竞争酶联免疫吸附法检测保健食品中糖皮质激素类药物

目的建立间接竞争酶联免疫吸附(indirect competitive enzyme-linked immunosorbent assay,ic-ELISA)法用于保健食品中糖皮质激素类药物多残留检测。方法将可的松、地塞米松分别与丁二酸酐衍生制备免疫半抗原,倍他米松衍生制备包被半抗原,采用活泼酯法与载体蛋白偶联制备人工抗原,采用紫外(ultraviolet,UV)吸收光谱鉴定及基质辅助激光解析串联飞行时间质谱(matrix assisted laser desorption-tandem time of flight-mass spectrometry,MALDI-TOF-MS)测定人工抗原的偶联比。通过动物免疫,制备针对糖皮质激素类药物的兔多克隆抗体,建立保健食品中糖皮质激素类药物多残留检测ic-ELISA法。结果地塞米松丁二酸酐衍生物为免疫半抗原,倍他米松丁二酸酐衍生物为包被半抗原。通过优化实验条件,确定了最佳的包被原质量浓度为1.25μg/m L,以及最佳的抗体稀释倍数为9000倍。在此条件下,本研究建立的ic-ELISA法对11种糖皮质激素类药物的半抑制质量浓度为0.68~40.17 ng/m L,展现了良好的检测灵敏度。使用甲醇超声提取,样品提取液通过标准稀释液稀释500倍消除基质效应,11种目标分析物在4种剂型保健食品中的添加回收率为81.2%~118.7%,变异系数低于14.00%。结论本研究成功制备糖皮质激素类药物的广谱性多克隆抗体,并建立了保健食品中糖皮质激素类药物多残留检测ic-ELISA法,可用于保健食品中糖皮质激素类药物的快速筛查。

比较酶联免疫吸附法与胶体层析法在AIDS病毒抗体筛查中的应用价值

目的:比较酶联免疫吸附法与胶体层析法在艾滋病(AIDS)病毒抗体筛查中的应用价值。方法:选取吉安县疾病预防控制中心2022年10月—2023年12月共2500份AIDS病毒抗体筛查标本,均采用酶联免疫吸附法与胶体层析法检查,以实验室检查结果作为“金标准”,比较酶联免疫吸附法与胶体层析法在AIDS病毒抗体筛查中的应用价值。结果:2500例AIDS病毒抗体筛查的患者,经实验室检查结果确证,27例患者检测结果为阳性,2473例患者检测为阴性;经酶联免疫吸附法检测,阳性检出率为96.30%(26/27);经胶体层析法检测,阳性检出率为70.37%(19/27),酶联免疫吸附法在AIDS病毒抗体筛查中的阳性检出率高于胶体层析法,差异有统计学意义(x^(2)=4.800,P=0.029)。酶联免疫吸附法对HIV抗体的检测结果与实验室检查结果具有极好的一致性(Kappa=0.928),高于胶体层析法对HIV抗体的检测结果与实验室检查结果的一致性(Kappa=0.773)。以实验室检查结果为“金标准”,酶联免疫吸附法检测在AIDS病毒抗体筛查中的灵敏度为96.30%(26/27),准确度为99.84%(2496/2500),阴性预测值为99.96%(2470/2471)高于胶体层析法在AIDS病毒抗体筛查中的灵敏度70.37%(19/27),准确度99.40%(2485/2500),阴性预测值99.68%(2466/2474),差异有统计学意义(P<0.05)。结论:酶联免疫吸附法在AIDS病毒抗体筛查中的阳性检出率高于胶体层析法,在AIDS病毒抗体筛查中的灵敏度、准确度、阴性预测值高于胶体层析法,整体诊断效能优于胶体层析法。

酶联免疫吸附法与蛋白质免疫印迹法检测抗核小体抗体在SLE诊断中的价值对比

目的比较蛋白质免疫印迹法(WB)、酶联免疫吸附法(ELISA)检测抗核小体抗体(AnuA)在系统性红斑狼疮(SLE)诊断中的价值。方法306例自身免疫疾病患者,根据明确的临床诊断结果将患者分为SLE组(SLE患者,144例)和非SLE组(非SLE患者,162例);选取同期非自身免疫疾病患者100例作为对照组。所有研究对象均采用ELISA及WB检测AnuA。分别统计两种检测方法的AnuA检测结果。比较两种检测方法对AnuA的诊断价值,包括准确度、敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值,并进行统计学检验,分析两种检测方法的一致性。结果SLE组:ELISA检测AnuA阳性120例、阴性24例,WB检测AnuA阳性109例、阴性35例;非SLE组:ELISA检测AnuA阳性76例、阴性86例,WB检测AnuA阳性71例、阴性91例;对照组:ELISA检测AnuA阳性17例、阴性83例,WB检测AnuA阳性11例、阴性89例;两种检测方法在SLE组、非SLE组和对照组的AnuA检测阳性率比较无统计学意义(P>0.05);但两种检测方法的SLE组患者AnuA阳性率明显高于非SLE组和对照组,且非SLE组患者AnuA阳性率明显高于对照组(P<0.05)。ELISA检测AnuA的敏感度87.4%(180/206)高于WB检测的80.1%(165/206)(P<0.05);两种检测方法的特异度、阳性预测值、阴性预测值、准确度比较无统计学意义(P>0.05)。两种检测方法检测结果的总符合率为90.1%,判断具有较好的一致性(K值=0.516)。结论ELISA及WB检测AnuA在SLE中均具有较高的诊断效能,临床可在AnuA初步检测中运用WB,如有必要可在复检中运用ELISA,有效提高检测阳性率,为临床诊断SLE提供参考。

化学发光免疫分析法与酶联免疫吸附法在乙型病毒性肝炎诊断中的效能比较

目的:比较化学发光免疫分析(CLIA)法与酶联免疫吸附(ELISA)法在乙型病毒性肝炎(乙肝)诊断中的效能。方法:选取2020年5月至2022年5月该院收治的154例疑似乙肝患者为研究对象,均行CLIA法、ELISA法检测乙肝血清标志物[乙型肝炎表面抗原(HBsAg)、乙型肝炎表面抗体(HBsAb)、乙型肝炎e抗原(HBeAg)、乙型肝炎e抗体(HBeAb)、乙型肝炎核心抗体(HBcAb)]水平,以荧光定量聚合酶链反应(PCR)法检测结果为金标准,比较CLIA法与ELISA法在乙肝中的诊断效能及对低水平HBsAg的检出率。结果:154例疑似乙肝患者中,荧光定量PCR法诊断阳性92例,阴性62例;HBsAg水平0.06~0.10 U/mL 5例,0.11~0.50 U/mL 5例,0.51~2.50 U/mL 8例,2.51~3.00 U/mL 2例。CLIA法诊断阳性89例,阴性65例;ELISA法诊断阳性78例,阴性76例。CLIA法诊断乙肝的灵敏度、准确度、阴性预测值均高于ELISA法,漏诊率低于ELISA法,差异有统计学意义(P<0.05)。CLIA法对HBsAg水平0.06~0.10 U/mL的检出率高于ELISA法,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:CLIA法在乙肝中的诊断效能高于ELISA法。

化学发光免疫分析法与酶联免疫吸附法在乙肝病毒标志物检测结果的比较分析

探讨比较化学发光免疫分析法(ECLlA法)与酶联免疫吸附法(ELISA法)在乙肝病毒标志物检测中的结果。方法 选取我院2023年1月至2023年12月收治的110例乙肝病毒感染患者,所有患者均同时采用ECLlA法与ELISA法进行血清标志物检测,比较两种检测结果及成本。结果 检测结果显示,ECLlA法检测中HBsAg、HBeAb、HBeAg阳性检出率高于ELISA法检测(P<0.05);ECLlA法检测的检测准确性为95.45%,高于ELISA法检测的77.27%(P<0.05);ECLlA法检测的成本为(112.36±8.35)元,高于ELISA法检测的(30.45±2.54)元(P<0.05)。结论 相较于ELISA法来讲,ECLlA法的乙肝五项阳性检出率更高,更有利于乙肝病毒感染的早期诊断,但其检测成本相对会高点,需根据患者个体情况选择合适检测方式。

高通量酶联免疫吸附法测定黑参及其制品中黄曲霉毒素B1的含量

目的探究黑参及其制品中黄曲霉毒素B1的污染情况,填补该领域的研究数据空白,为其食品安全性评估提供数据支撑,探索可被广泛应用于此类产品中黄曲霉毒素B1的筛查方法。方法采用高通量酶联免疫吸附法测定黑参及其制品共120个样本中的黄曲霉毒素B1的含量,使用统计学方法对实验数据进行分析,同时进行方法学考察,验证该方法的灵敏性与精密度。结果该方法的准确度与精密度较好,定量限为0.5μg/kg,阳性检出率为46%,黑参、黑参粉、黑参液、黑参膏的黄曲霉毒素B1含量平均值分别为1.417、2.227、0.691、1.264μg/kg,不同类型样本间存在显著差异。结论整体情况良好,但存在一定的黄曲霉毒素B1污染风险,该方法适用于黑参及其制品中黄曲霉毒素B1的高通量筛查。

双抗体夹心酶联免疫吸附法检测鱼糜制品中鸡蛋卵白蛋白

目的建立双抗体夹心酶联免疫吸附(sandwich enzyme linked immunosorbent assay,sELISA)法检测鸡蛋卵白蛋白(ovalbumin,OVA)的方法,组装定量检测鱼糜制品中OVA含量的ELISA检测试剂盒。方法确定各步骤反应时间,使用棋盘法确定捕获抗体和检测抗体的最佳工作浓度,建立检测方法并对其性能进行评价。结果反应最佳条件为:抗原孵育20 min,检测抗体孵育20min,酶促反应显色10 min。兔抗OVA抗体为捕获抗体,工作质量浓度为1μg/mL,辣根过氧化物酶(horseradish peroxidase,HRP)标记兔抗OVA抗体为检测抗体,1:5000(V:V)稀释。采用四参数逻辑曲线拟合标准曲线,所建立sELISA方法的检测范围为8.5~200.0 ng/mL,检出限为3.5 ng/mL,定量限为8.5 ng/mL。批次内和批次间的变异系数分别为2.31%~4.58%和6.06%~12.23%;鱼糜基质中的回收率为80%~130%;测得28种常见食物样品中4种样品的交叉反应率小于0.002%;试剂盒在4℃保存6个月期间,标准品检测结果的变异系数为4.29%~18.91%。结论建立的方法快速、灵敏、准确、稳定性好,可用于鱼糜制品中鸡蛋OVA的定量检测。

酶联免疫吸附法检测与快速血浆反应素试验在梅毒检验中的价值分析

目的分析酶联免疫吸附法检测(ELISA)和快速血浆反应素试验(RPR)用于梅毒检验的价值。方法选取疑似梅毒患者128例,均先后通过ELISA、RPR检测有无感染梅毒螺旋体,将明胶凝集试验(TPPA)检查结果当作金标准,比较ELISA、RPR用于梅毒检验的准确度、敏感度、特异度、阴性预测值及阳性预测值情况。结果TPPA检测发现阳性86例,阴性42例;ELISA检测发现阳性85例,阴性43例;RPR检测发现阳性71例,阴性57例。ELISA检测的准确度、敏感度以及阴性预测值均高于RPR(P<0.05);ELISA检测的特异度、阳性预测值略高于RPR,但组间相比差异无显著意义(P>0.05)。结论和RPR相比,ELISA在梅毒检验中准确度、敏感度和特异度更高,有助于临床诊断疾病和制定后续治疗方案。

酶联免疫吸附法检测花生中黄曲霉毒素B_(1)的影响因素分析

酶联免疫吸附法在众多领域被广范应用,但因其影响因素较多以及重演性问题的残留,导致酶联免疫吸附检测标准化程度较低。为推动酶联免疫吸附检测标准化进程,研究了酶联免疫吸附法检测花生中黄曲霉毒素B_(1)的过程中封闭条件、标准品稀释液中甲醇浓度、pH值等影响因素对实验结果的影响程度。研究结果表明,缓冲溶液pH值以及反应体系盐离子浓度对实验影响程度较大,可作为推进标准化进程的关键突破点,此外其他影响因素的研究为提高实验安全性和降低检测成本提供了一定数据支撑。研究建立了黄曲霉毒素B_(1)空白标准曲线和花生基质标准曲线,标准曲线检测范围为(IC 20~IC 80)0.001~0.027 ng/mL,利用加标回收实验测定的回收率为88.1%~95.1%。

酶联免疫吸附法在食品安全检测中的应用

近年来,食品安全问题引起了公众的广泛关注,如食品中的药物残留、毒素残留及微生物污染等,这些问题严重威胁着人体健康。因此,确保食品的安全性与质量至关重要。微生物检测作为食品安全监管的有效手段之一,能够及时发现食品中的安全问题,有效预防食品安全事件的发生。本文阐述酶联免疫吸附法的原理、常见类型及操作步骤,及其在食品微生物检测中的应用,以期为食品安全检测提供有力保障与科学依据,提高食品安全检测的效率与准确性,保障公众的食品安全。

酶联免疫吸附法与金标快速检测板法检测乙肝五项血清标志物的价值

目的 比较酶联免疫吸附法(ELISA)与金标快速检测板法检测乙肝五项血清标志物的价值。方法 选取2020年1月至2022年6月医院收治的68例确诊乙肝患者作为研究对象,采集所有参检者空腹静脉血3 ml,采用ELISA、金标快速检测板法检测乙肝五项血清标志物[乙肝表面抗体(HBs Ab)、乙肝e抗体(HBe Ab)、乙肝表面抗原(HBs Ag)、乙肝e抗原(HBe Ag)、乙肝核心抗体(HBc Ab)]。比较两种方法的阳性检出率及对乙肝的诊断准确度。结果 两种检测方法对HBs Ag、HBe Ag的阳性检出率比较,差异无统计学意义(P>0.05);ELISA检测对HBs Ab、HBe Ab、HBc Ab的阳性检出率高于金标快速检测板法,差异有统计学意义(P<0.05)。ELISA诊断乙肝的准确度为88.24%(60/68),高于金标快速检测板法的73.53%(50/68),差异有统计学意义(χ~2=4.755,P=0.029)。结论 ELISA检测对乙肝五项血清标志物中HBs Ab、HBe Ab、HBc Ab的阳性检出率高于金标快速检测板法,且对乙肝具有较高的诊断准确度。

酶联免疫吸附法检测乙肝表面抗原不同程度乳糜血对其的干扰分析

目的:分析不同程度乳糜血浆乙肝表面抗原(HBsAg)检测结果的干扰,探讨乳糜血浆检测结果的可靠性。方法:采用酶联免疫吸附法(ELISA)法检测乳糜血浆中HBsAg。结果:不同乳糜指数血浆HBsAg检测结果比较,差异无统计学意义(P>0.05);不同乳糜程度血浆放置时间不同,HBsAg检测结果有区别,乳糜指数≤3的乳糜血浆5 d内检测,差异无统计学意义(P>0.05),乳糜指数为4、5、6、8及>8的乳糜血浆在第3 d检测,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:不同程度乳糜血浆HBsAg检测结果无影响,轻度乳糜血浆样本放置5 d内检测HBsAg结果无差异,中度及重度乳糜血浆样本必须3 d内完成检测。

在艾滋病检验中人类免疫缺陷病毒抗体酶联免疫吸附法筛查结果的研究及临床价值分析

目的:探究酶联免疫吸附法(ELISA)在检验艾滋病(AIDS)人类免疫缺陷病毒(HIV)抗体的临床应用价值。方法:选择2018年1月—2020年5月开封市第二中医院收治的130例疑似HIV感染者作为研究对象,以蛋白印迹检测法结果作为诊断HIV抗体阳性的“金标准”,分析胶体金法、ELISA法在HIV阳性中的诊断价值,另分析两种方法与蛋白印迹检测法在HIV抗体阳性诊断中的一致性。结果:经蛋白印迹检测法的HIV抗体阳性检出率为47.69%,胶体金法的HIV抗体阳性检出率为41.54%,ELISA法的HIV抗体阳性检出率为46.92%,三种方法在HIV抗体阳性检出率比较,差异无统计学意义(χ^(2)=1.179,P>0.05);ELISA法在HIV抗体阳性检出中灵敏度、准确度及阴性预测值均高于胶体金法,差异有统计学意义(χ^(2)=8.052、9.596、6.890,P<0.05);两种方法在特异度及阳性预测值比较中,差异无统计学意义(χ^(2)=0.831、1.114,P>0.05)。kappa检验显示:ELISA法与蛋白印迹检测法结果的一致性良好(kappa=0.954,P<0.001);胶体金法与蛋白印迹检测法的一致性尚可(kappa=0.752,P<0.001)。结论:ELISA法在AIDS中HIV抗体阳性筛查中具有较高的临床应用价值,灵敏度、准确度均较高,可作为HIV感染初期筛查的重要方法。

酶联免疫吸附法与高效液相色谱法检测玉米中黄曲霉毒素B_(1)的比较

采用酶联免疫吸附法(ELISA)与高效液相色谱法(HPLC)分别测定玉米中黄曲霉毒素B_(1)(AFB_(1))含量,对两者的检测结果进行对比分析。结果表明,两种方法对AFB_(1)的判定结果一致,证明本实验室采用的酶联免疫试剂盒是准确的,ELISA操作简单快速,适用于AFB_(1)的快速筛选,高效液相色谱法耗时长、成本高,更适用于疑似样品的确证及精确定量。

酶联免疫吸附法在高危人群梅毒筛查中的应用价值

目的探讨酶联免疫吸附法(ELISA)在高危人群梅毒筛查中的应用价值。方法于2020年5月至2022年10月我中心对高危人群中的200人进行梅毒筛查,均行ELISA法筛查,分析ELISA在高危人群中的诊断效能。结果在200人高危人群中,经ELISA法检出梅毒8例,占4.00%。结论ELISA法在高危人群梅毒筛查中的敏感性、特异性均较高,因此ELISA在梅毒筛查中具有重要的应用价值。

酶联免疫吸附法在乙肝两对半定性检测中的影响因素分析

探究观察酶联免疫吸附法在乙肝两对半定性检测中的影响因素。方法 2022年1月到2022年12月,选取5000例采用酶联免疫吸附法进行乙肝两对半定性检测的患者为研究对象,统计酶联免疫吸附法检测结果错误的患者例数,汇总患者的相关资料、统计检测影响因素,并进行多因素回归分析。结果 5000例患者中,有50例患者的检测结果错误,检测结果错误率是1.00%。前期准备工作、检验人员工作年限、检测标本质量、检测结果记录、检测过程是检测结果错误的影响因素。将前期准备工作不全、检验人员工作年限≤5年、检测标本质量不达标、检测结果记录不标准、检测过程不规范五项作为因变量,进行多因素 Logistics 回归分析,五项因素均是主要影响因素。结论 应用酶联免疫吸附法进行乙肝两对半定性检测期间存在较多影响因素,其中有五项因素属于主要影响因素,需临床高度重视,积极采用相关措施规避相关因素,提高患者的检测结果准确性。

应用酶联免疫吸附法在筛查人类免疫缺陷病毒抗体中的应用效果

目的:研究酶联免疫吸附法(ELISA)在筛查人类免疫缺陷病毒(HIV)抗体中的应用效果。方法:选取2021年5月—2022年5月济宁市兖州区疾病预防控制中心收治的疑似艾滋病患者94例为研究对象,均使用胶体金法、ELISA进行HIV抗体筛查。以免疫印迹法结果为“金标准”,比较胶体金法与ELISA诊断结果及灵敏度、特异度、准确率。结果:胶体金法检测真阳性71例,真阴性12例;ELISA检测真阳性79例,真阴性8例。ELISA诊断结果及灵敏度高于胶体金法,差异有统计学意义(P=0.016);胶体金法特异度高于ELISA,差异有统计学意义(P=0.047);ELISA与胶体金法准确率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:相比于胶体金法,在艾滋病HIV抗体筛查中应用ELISA的灵敏度更高,可作为初筛检查应用。但受到反转录病毒影响存在一定假阳性概率,还需要进一步复核确诊。