UPLC-MS/MS法测定降血压类保健食品中13种二氢吡啶类钙拮抗剂

建立了超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)同时检测降血压类保健食品中非法添加13种二氢吡啶类钙拮抗剂的方法。片剂、功能茶样品用甲醇-水(4∶1)溶液超声提取,口服液样品用甲醇超声提取,采用Waters ACQUITY UPLC BEH C_(18)色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.7μm)分离,以2 mmol/L甲酸铵-0.1%甲酸水溶液和乙腈为流动相梯度洗脱,采用电喷雾离子源(ESI)正离子模式,多反应监测(MRM)模式进行检测。结果显示,13种分析物在对应质量浓度范围内线性关系良好,相关系数均不低于0.998 0,平均回收率为85.1%~119%,日内相对标准偏差(RSD)为0.37%~5.6%,日间RSD为1.6%~13%。各组分在片剂、功能茶、口服液3种基质中的检出限分别为0.1~2μg/kg、0.1~5μg/kg、0.1~1.7μg/L。采用该法对46个市售样品进行检测,有2个阳性样品分别检出硝苯地平(178.1μg/kg)与马尼地平(260.2μg/kg)。该方法操作简单、灵敏度高、精密度好,适用于保健食品中非法添加二氢吡啶类钙拮抗剂的筛查与定量分析。

新型钙拮抗剂的研究近况

钙拮抗剂又称钙通道阻滞剂，是在通道水平上选择性地阻滞钙离子经细胞膜上的钙离子通道进入细胞内，减少细胞内钙离子浓度的药物。它主要作用于心脏和血管，具有抑制钙离子内流的作用，可改变心肌、平滑肌兴奋一收缩耦联过程，松弛血管平滑肌，减轻负荷，降低血压，被广泛应用于高血压和冠心病治疗。钙离子拮抗剂对末梢血管选择性高，对代谢系统的影响小，并且安全性高，是治疗高血压的首选药物，从国内外发展看，钙拮抗剂上世纪八十年代发展成为一类心血管新药，

β受体阻滞剂联合钙拮抗剂在高血压治疗中的研究进展

高血压是以动脉血压持续偏高为主要表现的心血管疾病之一,临床症状为头痛头晕、胸闷、睡眠质量差等,具有治疗周期长、病情进展较慢、复发率居高不下等特征,且随着年龄的增长发病率呈现明显上升趋势。长期高血压可导致冠心病、脑梗死、肾衰竭等疾病发病率高发,严重者甚至威胁患者生命健康安全。因此,如何控制血压和治疗高血压已成为我国的一个关键问题。β受体阻滞剂和钙拮抗剂是治疗高血压一线药物,疗效良好。鉴于此,本文分析两种药物对高血压的作用机制、应用情况,对β受体阻滞剂联合钙拮抗剂在高血压治疗中的治疗效果展开综述,以期为临床治疗高血压提供参考。

2005～2007年武汉亚洲心脏病医院钙拮抗剂应用分析

目的：分析武汉亚洲心脏病医院钙拮抗剂应用情况及发展趋势.方法：对该院2005年-2007年钙拮抗剂的用药金额、用药频度、消耗金额进行统计.结果：钙拮抗剂的消耗金额呈上升趋势,氨氯地平的消耗金额最高,左氨氯地平和硝苯地平控释片的用药频度占前两位.结论：长效二氢吡啶类钙拮抗剂具有广阔的市场前景.

老年冠心病患者氯吡格雷联用钙拮抗剂的疗效观察:一项基于倾向评分的回顾性队列研究

目的比较老年冠心病患者单用氯吡格雷与氯吡格雷联用钙拮抗剂（CCB）的疗效。方法选自2000年1月~2011年2月有完整住院资料及门诊随访记录,服用氯吡格雷的老年冠心病患者1021名,其中单用氯吡格雷402例,氯吡格雷联用CCB 619例,其中二氢吡啶类钙拮抗剂547例,非二氢吡啶类钙拮抗剂72例;P糖蛋白（Pgp）抑制剂的钙拮抗剂患者357例,非Pgp抑制剂的CCB患者262例。研究主要终点为随访期内全因死亡,次要终点为心绞痛再入院,心梗再入院,血管再通术（PCI或CABG）,脑卒中,TIA。结果氯吡格雷组和联用CCB组发病密度（全因死亡）分别是50.55/1000、42.02/1000,粗RR 0.83（95%CI：0.55~1.26）,调整RR 0.47（95%CI：0.14~1.6）,两组全因死亡率无显著差异（P〉0.05）;终点事件发生率比较也无显著差异（P〉0.05）。对所有混杂因素进行倾向评分加权后,非二氢吡啶类CCB比二氢吡啶类CCB增加缺血性心脑血管事件风险,SMRW调整OR=1.97（95%：1.2~3.23）,P=0.007;氯吡格雷联用CCB组与单用氯吡格雷组加权前后全因死亡率及终点事件比较,差异无统计学意义。不同代谢途径CCB加权前后全因死亡率比较无显著差异（P〉0.05）。结论老年冠心病患者联用氯吡格雷及CCB治疗不增加全因死亡及缺血性心脑血管事件的发生,不同代谢途径CCB之间死亡率无明显差异,非二氢吡啶类CCB与氯吡格雷联用时比二氢吡啶类CCB致缺血性心脑血管终点事件的风险更高。

钙拮抗剂对马兜铃酸Ⅰ所致LLC-K1细胞凋亡及细胞内钙离子浓度的作用

目的：研究马兜铃酸Ｉ（ＡＡＩ） 所致ＬＬＣＰＫ１ 细胞凋亡时细胞内游离钙离子浓度（［ Ｃａ２＋ ］ｉ） 的变化和钙拮抗剂拉西地平对细胞凋亡的作用。 方法：应用已建立的ＡＡＩ 所致ＬＬＣＰＫ１ 细胞凋亡模型，使用光镜、ＡｎｎｅｘｉｎＶＦｌｕｏｓ 凋亡检测试剂盒和流式细胞仪检测细胞凋亡，经Ｆｌｕｏ３／ＡＭ 染色，激光扫描共聚焦显微镜测定平均［Ｃａ２＋］ｉ 。 结果：０－０４ ｇ／Ｌ 的ＡＡＩ 作用２４ｈ 可致ＬＬＣＰＫ１ 细胞出现明显细胞凋亡和平均［Ｃａ２＋］ｉ 显著升高；拉西地平（１００ ｎｇ／Ｌ，１ μｇ／Ｌ） 可显著抑制ＡＡＩ 所致的［Ｃａ２ ＋］ｉ 升高并能降低凋亡细胞比例。 结论：在体外条件下ＡＡＩ 所致ＬＬＣＰＫ１ 细胞凋亡的发生可能与［Ｃａ２＋］ｉ 升高有关；拉西地平可能通过抑制［ Ｃａ２＋］ｉ 升高而抑制ＡＡＩ 所致的凋亡。

钙拮抗剂尼莫地平救治重型颅脑损伤的临床研究

观察了钙拮抗剂尼莫地平对重型颅脑损伤的治疗作用。尼莫地平治疗组３４６例，常规治疗对照组１４２例，结果表明，尼莫地平治疗组颅内压升高幅度较小，ＣＴ动态扫描脑水肿明显减轻，临床恢复良好率达８０．１％，病死率明显下降，仅为１８．２％。并就尼莫地平救治重型颅脑损伤的作用及有关机制等进行了讨论。

钙拮抗剂抗肝纤维化的实验与临床研究

目的:研究钙通道阻滞刑(CCB)抗肝纤维化的作用。方法:应用CCB汉防己甲素(Tet).维拉帕米(Ver)对实验性肝纤维化大鼠及115例慢性肝病患者抗肝纤维化治疗,并临床随访36个月。结果:血清Ⅲ型前胶原肽(PⅢP)及血清透明质酸(HA)含量与治疗前相比明显降低(P<0.01);14例(15.4％)肝纤维化消失,54例(58.1％)胶原纤维沉积明显减轻,19例(20.4％)胶原纤维轻度减轻,炎性细胞浸润明显减轻或消失,储脂细胞(FSC)数量及内质网、线粒体平均面积均减少,总有效率为93.6％,与对照组相比有非常显著差异(P<0.01-0.001)。结论:CCB对肝纤维化有治疗作用。

钙拮抗剂干预对高血压合并左心室肥厚的影响

目的 探讨钙拮抗剂非洛地平逆转高血压 (EH )合并左心室肥厚 (L VH )的作用及其机制。方法 选择 EH合并 L VH的患者 30例 ,测定非洛地平治疗 (5～ 10 mg/ d) 2 4周前后左室重量指数 (L VMI)、胰岛素敏感指数 (ISI)及血浆肾素活性 (PRA)、血管紧张素 (Ang )、醛固酮 (AL D)、内皮素 (ET)、一氧化氮 (NO)、去甲肾上腺素 (NE)水平。结果 非洛地平治疗后 ,L VMI减小 (P<0 .0 1) ,ET降低 (P<0 .0 5 ) ,NO、ISI升高 (P均 <0 .0 1) ,而 PRA、Ang 、AL D、及 NE无显著变化。结论 钙拮抗剂非洛地平可以逆转 EH合并 L VH,其机制可能与非洛地平改善内皮细胞功能和胰岛素抵抗 ,而对肾素 -血管紧张素 -醛固酮系统 (RAAS)及交感神经系统 (SYS)

钙拮抗剂延缓衰老的作用

目的：介绍国内外有关神经细胞老化的发生与钙离子调控能力的关系以及钙拮抗剂用于抗衰老研究的最新进展。方法：根据国内外大量有代表性的研究成果，结合自己工作实践，进一步分析、整理和归纳。结果：脑老化是伴随着神经细胞内钙稳态的失调和细胞钙调节能力降低而发生。钙拮抗剂可阻断细胞外钙内流，促进细胞内钙库摄钙，维持细胞内钙平衡；并可改善脑细胞结构，增加脑血流量，保证细胞的营养供应。结论：钙拮抗剂用于延缓衰老的研究为探索老年病的发病机制以及老年病的针对性治疗提供了新思路。

钙拮抗剂治疗高血压病患者钙调素水平的变化

目的：观察在用钙拮抗剂硝苯地平治疗高血压病的过程中，细胞内外钙调素水平的改变。方法：将７４例高血压病患者分为Ａ组：未使用任何类型的钙拮抗剂；Ｂ组：规则使用硝苯地平，治疗时间≤１个月；Ｃ组：规则使用硝苯地平，治疗时间＞３个月。用反转录多聚酶链反应（ＲＴＰＣＲ）法测定淋巴细胞内钙调素基因的信使核糖核酸（ＲＮＡ）转录水平。另外选择８２例高血压病患者分为Ａ′组、Ｂ′组、Ｃ′组（标准同前），用放射免疫测定法（ＲＩＡ）测定细胞外（即血清）钙调素浓度。结果：服用硝苯地平＞３个月时，高血压病患者淋巴细胞内钙调素基因信使ＲＮＡ的转录水平显著降低（Ｐ＜０．０１），而治疗时间在≤１个月者，钙调素基因的转录水平尚无明显变化（Ｐ＞０．０５）。服用硝苯地平≤１个月者，血清钙调素浓度下降，而＞３个月者则相对增高，但两组间无统计学差异（Ｐ＞０．０５）。结论：长期服用硝苯地平的高血压病患者，淋巴细胞内钙调素基因信使ＲＮＡ表达受到抑制，但血清中钙调素水平无显著变化。

二氢吡啶类钙拮抗剂长期使用增加死亡危险的可能性及有关机制

钙拮抗剂已被广泛地用于治疗心绞痛和高血压等心血管疾病。但它的严重药物不良反应，在近１０年的大规模临床试验中，也逐渐被人们所认识，尤其是短效双氢吡啶类钙拮抗剂。长效制剂无此药物不良反应。本文就目前钙拮抗剂大剂量长期使用增加死亡率，致心肌缺血，诱发出血，血压过低，负性肌力作用和诱发心律失常等，及钙拮抗剂对缺血心肌的保护作用进行讨论，认为它不具有细胞保护作用，而是通过改变血流动力学，对缺血心肌的改善起一定作用；还认为其药物不良反应与剂量呈正相关。

钙拮抗剂增加化疗中卵巢癌细胞凋亡相关因子的研究

目的：探讨钙拮抗剂（ＣＡ）对促进化疗药物诱发卵巢癌细胞凋亡的作用。方法：从６８例首次手术及１７例复发卵巢癌患者腹水中提取富含癌细胞的悬液，应用３种荧光单克隆抗体Ｐ１７０、ＣＤ９５、及Ａｐｏ２７标记，经流式细胞仪检测。结果：应用ＣＡ组化疗后癌细胞ＣＤ９５及Ａｐｏ２７含量均高于对照组（Ｐ＜００５）；对癌细胞Ｐ１７０含量无明显影响（Ｐ＞００５）；复发组癌细胞Ｐ１７０含量显著高于初发手术组（Ｐ＜００５），化疗可使外周血淋巴细胞ＣＤ９５及Ａｐｏ２７含量增加。结论：ＣＡ对加强化疗药物疗效有明显的作用，具有重要的临床价值。

钙拮抗剂对环孢素A肾脏毒性的防护作用

本文报道在５５例肾移植术后患者中进行的一项随机对照比较试验，患者分别服用氨氯地平、拉西地平、硝苯吡啶、地尔硫４种钙拮抗剂。结果发现钙拮抗剂对环孢素Ａ肾毒性具有防护作用，合并应用钙拮抗剂可以有效地降低患者的血清肌酐、尿素氮水平，且基本不改变环孢素Ａ的血药浓度。与对照组相比，合并用氨氯地平、拉西地平、硝苯吡啶、地尔硫后，患者的血清肌酐水平下降的速度较快，与自身用药前分别下降了４５．０％（Ｐ＜０．０５），３４．９％，３３．６％，３８．５％。

钙拮抗剂对肝硬化病人食管曲张静脉压力及肝肾功能影响的研究

近来用心得安、血管加压素与硝酸甘油治疗肝硬化食管曲张静脉破裂出血屡有报道,但对此类药物的疗效及副反应仍有争议。为了寻求较理想的降低门脉压力药物,我院于1987～1988年采用钙拮抗剂(硝苯吡啶、异搏定、脑益嗪及汉防己甲素)治疗肝硬化食管静脉曲张患者120例,并以心得安作对照,以观察曲张静脉压力、心率、血压及肝肾功能的变化。

自由基清除剂和钙拮抗剂对肝细胞损伤和肝纤维化保护作用的比较

在以CCl_4复制大鼠肝纤维化过程中,投予自由基清除剂SOD,CAT和钙拮抗剂Ver、Nif,对二者在肝细胞损伤和肝纤维化中的预防和保护作用进行了比较。结果表明,SOD和CAT具有较明显的抗脂质过氧化作用,从而对肝细胞起保护作用,阻止了间质胶原纤维的增生,抑制了肝纤维化的形成。而Ver仅具轻度抗脂质过氧化作用,Nif则无抗脂质过氧化作用,不具有保护肝细胞功能,二者均无抗肝纤维化作用。

戊脉安等钙拮抗剂对平阳霉素细胞毒性的生化调节作用

本文在体外培养的L_(1210)细胞中观察了平阳霉素单用或与钙拮抗剂合用时的细胞毒作用,结果表明:戊脉安本身在无细胞毒性浓度下与平阳霉素联合应用时,可显著加强平阳霉素(75μg/ml)的细胞毒作用。而且这种增效作用随戊脉安浓度的增加而加强,细胞存活率可由平阳霉素单药时的25％,分别降低为0.11％-9.9％。同样,当戊脉安浓度固定为20μg/ml时,增效作用随着平阳霉素浓度的增加而加强。此外,还发现钙调蛋白阻滞剂利多卡因、氯丙嗪及普鲁卡因,对平阳霉素也具有类似的增效作用,其增效幅度也随着上述各种钙阻滞剂的浓度增加而加强。

抗癌药物与钙拮抗剂合用对体外人胃癌细胞的影响

目的和方法：本文报道了抗癌药物与５－氟脲嘧啶（５－ＦＵ）、阿霉素（ＤＯＸ）及长春新碱（ＶＣＲ）与钙拮抗剂维拉帕米（ＶＰＭ）、尼卡地平（ＮＩＣ）、汉防已甲素（ＴＥＴ）、硝苯吡啶（ＮＩＦ）及硫氮草酮（ＤＩＬ）单独和联合应用对体外人胃癌细胞株ＭＫＮ４５、ＭＫＮ２８及ＭＧＣ８０３细胞增殖影响的研究结果。结果：不同浓度的５种钙拮抗剂单独处理各胃癌细胞株，发现随着浓度升高，胃癌细胞增殖受到的抑制作用也增强，其中ＶＰＭ、ＮＩＣ和ＴＥＴ较为显著。在联合用药实验中，无毒剂量ＶＰＭ、ＮＩＣ与低浓度ＤＯＸ、５－ＦＵ、ＶＣＲ合用时，可使这些化疗药物抑制胃癌细胞增殖的作用增强２．７～７．５倍。小剂量的ＴＥＴ可增强ＤＯＸ对３种胃癌细胞株的细胞毒作用，亦可增强ＶＣＲ、５－ＦＵ对某些细胞株的作用。而ＮＩＦ和ＤＩＬ对抗癌药物细胞毒性的增强作用不显著。结论：结果提示ＶＰＭ、ＮＩＣ及ＴＥＴ等钙拮抗剂能增强ＤＯＸ。