链脲佐菌素诱导糖尿病脑病大鼠模型的构建及评价

背景:目前研究较成熟的糖尿病脑病模型主要有链脲佐菌素诱导模型、高糖高脂饮食诱导模型和自发性动物模型。建立简便易行、周期短、安全有效的糖尿病脑病模型对其发病机制的深入探讨和治疗药物的筛选有重要的作用。目的:进一步验证链脲佐菌素诱导糖尿病脑病大鼠模型的方法并对其进行评价。方法:将20只SD大鼠随机分为对照组(n=10)和模型组(n=10),模型组大鼠左下腹腔一次性注射45 mg/kg链脲佐菌素建立糖尿病实验动物模型,对照组大鼠用等量的柠檬酸缓冲液代替注射。实验期间监测大鼠体质量、饮食量、饮水量和血糖,8周后检测葡萄糖耐量和氧化应激水平,并比较脑组织病理变化及凋亡蛋白的表达情况。结果与结论:①与对照组相比,模型组大鼠饮食量、饮水量、脑指数、血糖和血糖曲线下面积显著升高、体质量明显下降(P<0.01);②脑组织病理学显示,模型组大鼠存活神经细胞数量明显减少(P<0.01),神经细胞病理损伤明显高于对照组;③模型组大鼠较对照组血清超氧化物歧化酶、过氧化氢酶和谷胱甘肽活力均明显降低(P<0.01),氧化活性丙二醛的浓度明显升高(P<0.05);④脑组织中凋亡相关蛋白Bax和Caspase-3表达水平增加,Bcl-2表达水平降低(P<0.01);⑤结果说明,注射45 mg/kg链脲佐菌素8周后可以使糖尿病大鼠脑组织有明显的病理损伤,成功构建糖尿病脑病大鼠模型。

原儿茶醛对链脲佐菌素诱导小鼠糖尿病心肌病的改善作用

研究了原儿茶醛(Protocatechualdehyde,PCA)对糖尿病心肌病(Diabetic Cardiomyopathy,DCM)小鼠的心脏保护作用及其可能的分子机制。成功构建DCM小鼠模型后给予PCA干预治疗。记录小鼠心脏与体质量比值,测定心功能,检测心肌组织中促炎症因子、肌钙蛋白I、乳酸脱氢酶(Lactate Dehydrogenase,LDH)和肌酸激酶(Creatine Kinase,CK)的表达水平,并通过苏木精-伊红(Hematoxylin Eosin,HE)和马松染色观察了心肌组织的形态学变化。检测心肌组织和大鼠心肌细胞中核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(Nod Like Receptor Protein 3,NLRP3)等蛋白的表达,并评估了PCA对心肌细胞存活率的影响。结果显示,PCA干预DCM小鼠中心脏与体质量比值、射血分数和短轴缩短距分别增加为5.42 mg/g、54.91%和28.07%,血清中LDH、CK和肌钙蛋白I分别降低为538.51 U/L、885.93 U/L和221.87 pg/mL,同时降低了肿瘤坏死因子α,白细胞介素1β和白细胞介素6的水平(P<0.05)。同时,PCA也能有效抑制高糖引起的心肌细胞毒性和NLRP3炎症小体的激活。PCA具有保护DCM小鼠心肌的作用,抑制NLRP3炎症小体的激活可能是发挥心脏改善作用的途径。

高糖高脂饮食结合链脲佐菌素序贯法建立大鼠2型糖尿病模型研究

通过序贯法寻找到大鼠成活率、模型成功率及稳定性均较高的腹腔注射链脲佐菌素(Streptozotocin,STZ)的适宜剂量。方法 8周龄的SD雄性大鼠,45%的高糖高脂饮食诱导6周之后腹腔注射低剂量1%的STZ,以大鼠出现多饮多尿体重减少的症状和注射STZ后72小时随机血糖≥16.7mmol/L为建模标准。建模成功后继续高脂高糖饲养3周,并间断测量随机血糖值,以随机血糖≥16.7mmol/L为成模稳定性的标准。实验组根据序贯法找到腹腔注射STZ的适宜剂量,以30mg/kg的1% STZ作为高脂饮食(high-fat diet,HFD)联合STZ制备大鼠2型糖尿病的初始剂量,以存活率或成模率≥60%作为降低或升高STZ剂量的标准,以2mg/kg作为下降或上升的幅度,然后以成模率升高或降低作为降低或升高STZ剂量的标准,继续以2mg/kg作为下降或上升的幅度,最终找出使得大鼠成模率≥60%的最适STZ剂量。结果 造模组Ⅱ(STZ剂量32mg/kg)和造模组Ⅲ(STZ剂量34mg/kg)成模率皆为60%且无死亡大鼠。造模结束后四周Ⅱ组大鼠中有一只血糖低于16.7mmol/L,Ⅲ组大鼠血糖仍维持在较高水平。结论 高糖高脂饮食结合STZ腹腔注射诱导大鼠2型糖尿病大鼠模型时的STZ的最佳剂量是32mg/kg。

高脂喂养联合低剂量链脲佐菌素诱导的2型糖尿病大鼠模型稳定性观察

目的建立一种简便的2型糖尿病模型并观察该模型的长期稳定性。方法①高脂喂养联合低剂量链脲佐菌素(STZ,45mg·kg-1)诱导2型糖尿病的方法,测定STZ注射后72hSD大鼠的血清空腹血糖(FBG)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(CHO)和胰岛素(INS)含量,并用HOMA法计算胰岛素敏感指数(ISI),将72hFBG≥10·0mmol·L-1及ISI≤正常动物均值的大鼠定为糖尿病模型大鼠;同时监测不同时间点大鼠的非空腹血糖(NFBG)、体重、饮食及饮水日摄取量的变化;②连续给予糖尿病模型大鼠灌胃(ig)苯乙双胍(75mg·kg-1)3d,研究该模型的有效性。结果①与正常对照组相比,高脂喂养4wk的大鼠饮食、饮水日摄取量没有明显差异;体重增加,差异无统计学意义。STZ注射后72h时91·7%的大鼠达到成模标准;②该糖尿病动物模型在STZ注射后的12wk内NFBG水平一直较高(>20·0mmol·L-1);③苯乙双胍能降低该2型糖尿病动物模型的NFBG。结论该实验建立的2型糖尿病动物模型造模方法简单、易行,且模型长期稳定。

温筋通对链脲佐菌素糖尿病大鼠血糖及坐骨神经终末期糖基化终产物的影响

目的 :观察中药复方温筋通对糖尿病大鼠血糖、坐骨神经终末期糖基化终产物的影响。方法 :采用链脲佐菌素糖尿病大鼠模型 ,随机分为预防组和治疗组 ,给予温筋通灌胃 ,并以氨基胍作为对照 ,治疗 12周 ,观察温筋通对糖尿病大鼠血糖和坐骨神经终末期糖基化终产物的影响。结果 :温筋通预防组和治疗组血糖、温筋通预防组和氨基胍组坐骨神经终末期糖基化终产物 ,均较模型组为低 (P <0 0 1) ;氨基胍组血糖高于温筋通预防组 (P <0 0 5 ) ,与模型组比较 ,差异无显著性 (P >0 0 5 )。结论 :温筋通可能通过降低血糖、抑制终末期糖基化终产物在神经组织中的形成 。

链脲佐菌素诱导大鼠糖尿病肾病模型的方法学探讨

目的:对比观察不同方法对链脲佐菌素(STZ)诱导速发型糖尿病肾病(DN)模型的影响。方法wis tar和SD大鼠,空腹或非空腹状态下,STZ一次腹腔注射,72h后监测血糖、尿蛋白以及一般项目,同时行肾胰病理检查。结果:空腹wistar鼠成模率62.5%,SD鼠为87.5%,非空腹组成模率是10%,未成模鼠小剂量空腹追加STZ无一例成模。成模鼠肾胰显示特征性改变。不同时点血糖值差异大,第二周平均尿蛋白排泄即达33.48mg/24h。结论:非空腹鼠成模率极低,SD鼠成模可能优于wistar鼠,成模前血糖至少连续三天同时点监测,对早期DN的观察最好始于成模后第一周。

链脲佐菌素糖尿病模型动物血糖及体征动态变化的研究

目的探讨链脲佐菌素(streptozotocin)糖尿病模型动物血糖和体征动态变化的特点。方法链脲佐菌素1次或多次腹腔注射,分别建立大鼠和小鼠糖尿病模型;检测血糖变化,以进食量(g)/体质量(g),饮水量(ml)/体质量(g)计算进食量系数和饮水量系数。结果雄性大鼠链脲佐菌素60mg/kg糖尿病成模率为65.0%,血糖在注射后15d达到高峰,15～25d保持在较高水平,25d后出现明显的下降。小鼠链脲佐菌素200mg/kg分5次建立糖尿病成模率为90.0%,血糖的动态变化与大鼠类似,但血糖下降不明显。在这两个糖尿病模型中,动物的饮水量系数变化与血糖水平变化的相关性最高,相关系数r>0.97。结论链脲佐菌素糖尿病模型动物的血糖水平在造模开始后的15～25d维持在较高水平,可作为观察降血糖药物疗效的适宜时段。饮水量系数是反映血糖的水平变化的适宜指标。

高脂喂养合并小剂量链脲佐菌素建立2型糖尿病大鼠模型

目的观察不同配方的高脂饲料,以及不同周龄的大鼠对于该模型的造模成功率和模型病变特点的影响。方法将26只3周龄SD大鼠分为正常一组(N1组)、模型一组(M1组)和模型二组(M2组);26只5周龄SD大鼠分为正常二组(N2组)、模型三组(M3组)和模型四组(M4组)。M1组和M3组给予高脂饲料配方一喂养,M2组和M4组给予高脂饲料配方二喂养。4周后,各模型组大鼠腹腔注射STZ溶液35 mg/kg。连续观察大鼠的空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(FIN)、总胆固醇(TG)、甘油三酯(TC)水平。结果 5周龄SD大鼠的FBG水平在注射STZ后两周即可达到稳定状态,并维持在较高的水平;高脂饲料配方二使大鼠的进食量和体重增加明显,并且成功诱导出胰岛素抵抗(insulin resistance,IR)。结论选取5周龄SD大鼠作为模型动物,并给予配方二高脂饲料喂养,所建立的大鼠模型具备2型糖尿病的主要特征,是值得推广的2型糖尿病动物模型。

肉桂多酚对链脲佐菌素致糖尿病小鼠的保护作用

目的探讨肉桂多酚对链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)致糖尿病小鼠的保护作用及其分子机制。方法建立单剂量STZ 240mg/kg诱导糖尿病小鼠模型,随机分成5组:STZ模型对照组、二甲双胍阳性组(0.3g/kg)及肉桂多酚低、中、高剂量组(0.3、0.6、1.2g/kg),持续每天灌胃,共14d。并设置正常对照组。末次给药后,血糖试纸测定空腹血糖(fasting blood-glucose,FBG),生化法测定血清胰淀粉酶含量,酶联免疫吸附测定法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)测定血清胰岛素和胰高血糖素浓度,免疫组化法检测胰岛细胞中胰岛素阳性细胞数量,蛋白免疫印迹(Western blot)法检测胰脏细胞中蛋白激酶B(AKT)及其磷酸化水平。结果与STZ模型对照组小鼠比较,肉桂多酚干预组小鼠的血糖明显降低(P<0.05),血清胰岛素增加而胰高血糖素降低(P<0.05),胰岛细胞中胰岛素阳性细胞显著增加(P<0.05),胰脏细胞中蛋白激酶B(AKT)及其磷酸化水平同时增加(P<0.05),且表现为一定的剂量依赖性。结论肉桂多酚对STZ所致糖尿病小鼠胰脏损害表现出有效的细胞保护作用,其分子机制可能通过调节胰岛细胞AKT信号通路促进胰岛β细胞分泌胰岛,从而发挥降血糖药理活性。

实验性链脲佐菌素糖尿病动物模型的研究

采用腹腔内１次注射６０ｍｇ／ｋｇ体重ＳＴＺ方法，建立了速发型链脲佐菌素Ｗｉｓｔａｒ大鼠糖尿病模型。采用每周１次连续３周腹腔内注射ＣＦＡ０．５ｍｌ和ＳＴＺ（２５ｍｇ／ｋｇ）方法，建立了迟发型Ｗｉｓｔａｒ大鼠糖尿病模型。结果提示：速发型模型建立的机制与ＳＴＺ直接损伤胰岛β细胞有关，迟发型大鼠糖尿病模型胰岛β细胞损伤可能与Ｔ淋巴细胞介导的免疫机制有关。

四氧嘧啶与链脲佐菌素诱导小鼠糖尿病模型的效果比较

用相同总剂量的四氧嘧啶1次给药和2次给药及较大剂量链脲佐菌素1次给药3种方法诱导小白鼠糖尿病模型,多次测定血糖,体重等糖尿病相关指标,以确定糖尿病模型建立的最佳方法。结果表明,四氧嘧啶建模率为91．94％,高于链脲佐菌素建模率(66．7％)(P<0．05);四氧嘧啶建模组的死亡率为15％及体重下降率为 18．1％,均高于链脲佐菌素建模组(死亡率3．3％,体重下降率12．0％)(P<0．05);四氧嘧啶连续2次小剂量给药的建模效果优于1次性大剂量给药。两种药物比较,虽然四氧嘧啶的建模率高于链脲佐菌素,但其对建模小鼠的损害亦明显大于链脲佐菌素,建模时连续小剂量给药,并于4．5～5 h后灌胃质量分数50％葡萄糖,可以降低死亡率, 提高建模率。

链脲佐菌素诱导C57BL/6J小鼠2型糖尿病模型研究

目的 建立与 2型糖尿病 (非胰岛素依赖型糠尿病、NIDDM)病人临床特征和发病过程相似的NIDDM动物模型。方法 用高脂肪饲料喂养C57BL/6J雄性断乳小鼠 3周 ,腹腔注射链脲佐菌素 (STZ) ,继续喂养 4周 ,测定给药前和给药后 1、3、4周非空腹血糖、实验结束时非空腹胰岛素水平 ,观察胰腺形态学变化。结果 喂养 3周后 (给药前 )高脂饲料 -STZ组及高脂饲料 -柠檬酸组血糖浓度 (7 0± 0 39)mmol/L、(6 8± 0 4 5)mmol/L高于普通饲料 -STZ组及普通饲料 -柠檬酸组 (5 3± 0 4 0 )mmol/L、(5 4± 0 39)mmol/L ,P <0 0 5;实验结束时 ,高脂饲料 -STZ组血糖浓度 (13 1± 2 0 1)mmo/L高于高脂饲料 -柠檬酸 (6 9± 0 4 6 )mmol/L、普通饲料 -柠檬酸组 (6 0± 0 4 6 )mmol/L和普通饲料 -STZ组 (7 1± 0 6 2 )mmol/L(P <0 0 5) ,各组间血浆胰岛素浓度、体重及饮水量差异无显著性 ,P >0 0 5;实验过程中高脂饲料STZ组和柠檬酸组小鼠每天进食热量 (6 4 4 9± 9 2 )kJ/只 ,(70 7± 9 6 )kJ/只 ,显著高于普通饲料STZ组和柠檬酸组 (52 7± 7 9)kJ/只 ,(57 3± 11 7)kJ/只 ;各组小鼠胰腺和胰岛细胞形态正常。结论 高脂肪饲料和STZ是用C57BL/6J断乳幼鼠建立NIDDM模型所必须的 ,10 0mg/kg体重STZ对普通饲料小鼠?

链脲佐菌素诱导树鼩2型糖尿病

链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)是链球菌产生的天然化合物,对哺乳动物的胰岛B细胞有特异毒性,被广泛用于诱导1型和2型糖尿病。该研究通过多次小剂量注射STZ来建立树鼩2型糖尿病动物模型。24只树鼩被分为对照组以及60、70和80mg/kg剂量STZ诱导组。注射STZ后,成模树鼩出现明显的多饮、多食和多尿症状,平均体重未减轻,高血糖症状持续8～16周,尿糖显著阳性,肾功能及糖耐受明显受损,糖脂代谢紊乱,但未出现糖尿病乳酸中毒和高血糖高渗等并发症。该结果表明,多次小剂量STZ注射可诱导树鼩出现类似2型糖尿病症状和糖尿病肾脏损伤,且综合考虑STZ注射次数、成模率以及成模稳定性,两次注射80mg/kg剂量的STZ较适合用于创建树鼩2型糖尿病模型。

温筋通对链脲佐菌素糖尿病大鼠坐骨神经糖化终产物受体mRNA表达的调节

目的 探讨中药复方温筋通对糖尿病大鼠坐骨神经糖化终产物 (AGEs)受体 (RAGE)m RNA表达的影响。 方法 4 0只大鼠采用链脲佐菌素制备糖尿病大鼠模型。制模后将大鼠随机分为模型组、氨基胍组、预防组和治疗组。预防组与治疗组分别在制模后不同时间给予温筋通灌胃。另选 10只体重、鼠龄相匹配的大鼠作为正常对照组。采用逆转录聚合酶链式反应 (RT- PCR)检测病程12周各组大鼠坐骨神经 RAGE m RNA表达水平。 结果 糖尿病大鼠坐骨神经 RAGE m RNA表达较正常对照组增强 (P<0 .0 1) ,温筋通预防组、治疗组及氨基胍预防组大鼠坐骨神经 RAGE m RNA表达较糖尿病未治疗组降低 (P<0 .0 5～ 0 .0 1)。 结论 温筋通可能通过调节糖尿病大鼠坐骨神经RAGE m RNA的异常表达 ,减轻

链脲佐菌素诱导SD和Wistar大鼠糖尿病模型的影响因素

目的通过注射链脲佐菌素(STZ)制作SD和Wistar大鼠糖尿病模型,观察大鼠品系、给药剂量、给药次数对大鼠成模率、死亡率的影响,同时研究利用口服葡萄糖耐量试验(OGTT)判断大鼠糖尿病成模率的意义。方法设置共同的正常对照组,①Wistar大鼠随机分为中剂量组(55 mg/kg)和高剂量组(65 mg/kg);②SD大鼠一次性腹腔注射STZ(55 mg/kg),与①中的Wistar大鼠作对比;③SD大鼠随机分为一次给药组和两次给药组,注射剂量均为55 mg/kg,观察期间进行OGTT。结果①Wistar大鼠成模率和死亡率均高于SD大鼠;②采用SD大鼠、中剂量给药和两次给药的方式可提高成模率,并降低死亡率;③在有明确胰岛病理改变的模型组大鼠,其OGTT异常阳性率显著高于空腹血糖异常阳性率。结论用STZ诱导糖尿病模型是一种稳定可靠的方法。Wistar大鼠成模率和死亡率均高于SD大鼠;选用中剂量给药及两次给药的方式可提高SD大鼠成模率,并降低死亡率,维持时间较长。在动物实验中OGTT比空腹血糖监测更有诊断意义,不易造成漏诊。

山茱萸环烯醚萜总苷对由链脲佐菌素诱导的糖尿病血管并发症大鼠血清sICAM-1、TNF-α的影响

目的 :探讨山茱萸环烯醚萜总苷对糖尿病血管并发症大鼠血清可溶性细胞间粘附分子 (sICAM 1)、肿瘤坏死因子(TNF α)的影响。方法 :STZ 60mg/kgip 1周后血糖值高于 16.7mM的糖尿病大鼠连续灌胃给药 12周环烯醚萜总苷 0 .5 g/kg、1.0 g/kg和氨基胍 0 .1g/kg ,各组取血清分别测定sICAM 1、TNF α的含量。 结果 :糖尿病血管并发症模型大鼠血清sICAM 1、TNF α较正常组上调 ,环烯醚萜总苷及氨基胍均能显著降低糖尿病血管并发症模型大鼠血清sICAM 1、TNF α的含量。结论 :环烯醚萜总苷能降低糖尿病血管并发症大鼠血清中过高的sICAM 1、TNF α水平 ,这一作用可能有利于控制糖尿病血管并发症的发生发展。

桑椹乙酸乙酯萃取物对链脲佐菌素致高血糖大鼠的降血糖作用

目的研究桑椹乙酸乙酯萃取物(EEM)对链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病大鼠的降糖作用。方法用STZ诱导出1型糖尿病大鼠模型分成5组,分别用水、格列苯脲和0.1、0.2、0.3 g/kg EEM连续灌胃3周,每周测定血糖。结果与模型对照组相比,0.2 g/kg EEM能显著降低糖尿病大鼠血糖、糖化血清蛋白,刺激胰岛素分泌,增加体质量,调节血脂,增强机体抗氧化能力,同时具有一定的保护肾脏的功能,但对肝脏有一定副作用。结论 EEM能有效的控制糖尿病大鼠血糖水平,一定程度改善糖脂代谢紊乱。

链脲佐菌素糖尿病仓鼠心肌病变的病理变化

目的 观察链脲佐菌素 (STZ)诱导糖尿病仓鼠机体代谢及心肌病理改变 ,建立一种理想的糖尿病心肌病变动物模型。方法 腹腔注射STZ建立糖尿病仓鼠动物模型 ,10周后电镜观察心肌超微结构 ,光镜观察心肌病理改变 ,免疫组化法检测心肌Ⅰ、Ⅲ型胶原变化 ,同时应用生化、放免法检测血糖、糖化血清蛋白、血脂、胰岛素变化。结果 与正常对照 (NC)组仓鼠相比 ,糖尿病 (DM )组仓鼠血糖和糖化血清蛋白水平显著升高 ;血TG、CHO和LDL也明显升高 ;病程 10周的糖尿病仓鼠表现为心肌内大量糖原颗粒沉积 ,心肌局灶性炎症细胞浸润和间质淡嗜伊红物质沉积 ;NC组仓鼠心肌Ⅰ、Ⅲ型胶原表达量为 1.92± 0 .2 7、1.11± 0 .12 ;DM组Ⅰ、Ⅲ型胶原表达量分别为NC组的 2 .71和 1.6 8倍 (P <0 .0 0 1、<0 .0 1) ,且Ⅰ /Ⅲ型胶原比值也明显升高 (P <0 .0 1)。结论腹腔注射STZ可诱导稳定的糖尿病仓鼠动物模型 ;糖尿病仓鼠机体代谢和心肌病理变化与人类相似 。

链脲佐菌素诱导小鼠Ⅱ型糖尿病模型的研究

通过注射链脲佐菌素(STZ)诱导建立与人类Ⅱ型糖尿病(NIDDM)相似的昆明鼠和C57鼠模型,比较两种鼠建模剂量和成模率的差异。将昆明鼠和C57小鼠随机分为正常对照组(A)及低、中、高剂量(每天50、70、90 mg/kg)用药组(B)(n=10)。正常对照组(A)饲喂普通饲料,用药组(B)饲喂高脂高糖饲料;第4周开始,A组腹腔注射柠檬酸缓冲液,B组腹腔注射STZ,连续4 d。测定给药前和给药后3、7、15 d空腹血糖和体重,观察小鼠饮食、饮水和排尿情况。给药前空腹血糖A、B组间无显著性差异(P>0.05);昆明鼠用药3 d后中、高剂量组均升高并达到建模标准,C57鼠用药7 d后中、高剂量组达到建模标准。两种小鼠用药3 d后各组体重均减低,并与对照组间有极显著差异(P>0.01)。C57鼠,STZ注射剂量越高,体重减轻幅度越大;并且自造模成功后,各用药组体重均出现逐日降低的趋势。诱导建立NIDDM模型的适宜STZ剂量昆明鼠为每天50 mg/kg和70 mg/kg,并以后者为佳;C57鼠为每天70 mg/kg。

牛磺酸对链脲佐菌素糖尿病大鼠胰岛β细胞的保护作用

利用链脲佐菌素诱导的Wistar糖尿病大鼠观察牛磺酸对其的防治作用。结果表明：①正常大鼠口服牛磺酸（8g·kg-1／d）对血糖和血清胰岛素浓度无明显影响；②糖尿病大鼠服用牛磺酸后可明显抑制其高血糖效应（P＜0．05，0．01，0．001）；③对链脲佐菌素诱致的大鼠血清胰岛素浓度的降低，牛磺酸具有明显的反转作用（P＜0．05，0．01，0．001）；④免疫组化结果表明，经牛磺酸防治的糖尿病大鼠表达胰岛素的胰岛数量较对照组显著增多（P＜0．05）。提示牛磺酸具有对抗和修复链脲佐菌素所引起的大鼠胰岛β细胞损伤的作用。