秋水仙碱对高脂饮食诱导的载脂蛋白E基因敲除小鼠动脉粥样硬化的影响

目的探讨秋水仙碱对高脂饮食诱导的载脂蛋白E基因敲除(ApoE^(-/-))小鼠动脉粥样硬化的影响。方法选取12只C57BL/6J野生型小鼠作为对照组;24只ApoE^(-/-)小鼠完全随机分为模型组和秋水仙碱组、每组12只。对照组给予普通饲料喂养;模型组、秋水仙碱组给予高脂饲料喂养建立动脉粥样硬化模型,秋水仙碱组同时给予秋水仙碱2 mg/(kg·d)灌胃,持续8周。留取小鼠血液和主动脉组织标本,检测各组血脂及C反应蛋白水平,染色观察小鼠主动脉病理变化,比较各组动脉粥样硬化斑块核帽比及易损指数。结果干预后模型组、秋水仙碱组总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇、C反应蛋白均高于对照组但秋水仙碱组低于模型组,高密度脂蛋白胆固醇均低于对照组但秋水仙碱组高于模型组(均P<0.05)。秋水仙碱组小鼠主动脉内皮细胞凋亡数量、胶原纤维含量、主动脉组织CD68和α-平滑肌肌动蛋白阳性表达量均显著低于模型组(均P<0.05)。秋水仙碱组小鼠动脉粥样硬化斑块核帽比和易损指数显著低于模型组[(3.24±0.49)比(9.54±1.49)、(2.84±0.39)比(8.64±1.29)](均P<0.05)。结论秋水仙碱可显著减轻高脂饮食诱导的ApoE^(-/-)小鼠主动脉粥样硬化。

母鼠高脂饮食与运动干预对雄性子代胰岛素敏感性及下丘脑弓状核的影响

背景:肥胖母体的子代,有些代谢基因在某些环境影响下处于“沉默”状态,这些“沉默”的基因可能因后天环境的影响又被“唤醒”,继而引起代谢调控紊乱。目的:雄性子代在不同饮食结构的情况下,探索母鼠长期高脂和运动干预的代谢遗传效应。方法:3周龄雌性C57BL/6小鼠70只,随机分成高脂安静组与高脂运动组,干预16周后自然分娩。2组在4周哺乳期结束后,各随机抽取子代雄性小鼠16只,共32只分为4组:高脂安静-高脂组、高脂运动-高脂组、高脂安静-普食组、高脂运动-普食组,分别给予6周高脂喂养或普食喂养。子代在第10周进行葡萄糖耐量试验与胰岛素耐量试验,随后进行体成分分析及取材。肝脏蛋白免疫印迹测定p-Akt水平;下丘脑弓状核免疫荧光分析神经肽Y和阿黑皮素的表达情况。结果与结论:①在高脂饮食模式下,与高脂安静组相比,高脂运动组子代小鼠的糖代谢能力、体质量、体成分等都有显著性改善(P<0.05);②在普食饮食模式下,与高脂安静组相比,高脂运动组子代小鼠下丘脑弓状核的神经肽Y表达量显著下降(P<0.05),阿黑皮素表达显著上调(P<0.05),肝脏Akt(Ser473)磷酸化蛋白表达在胰岛素(-)的情况下无显著性差异,但在胰岛素(+)的情况下组间差异有显著性意义(P<0.05);③结果说明,子代在高脂模式下,母体长期运动获得的代谢保护效应可能会随着子代高脂暴露时间的延长而逐渐弱化;子代在普食模式下,母代长期的运动可以改善雄性子代能量代谢的中枢调控和胰岛素的敏感性。

电针足三里调节短期高脂饮食大鼠胃运动的迷走传入信号机制

目的观察电针足三里对高脂饮食大鼠胃动力的影响,探讨针刺调节胃动力的迷走传入机制。方法将30只SD雄性大鼠随机分为正常组(10只)、和高脂组(20只)。正常组喂养普通饲料,高脂组喂养高脂饲料,持续4周后高脂组随机分为模型组和电针组,每组10只。电针组予以电针双侧足三里穴,2 mA,2/15 Hz,20 min/次,1次/d,6次/周,连续2周,观察并记录各组大鼠体质量。干预结束后记录白色脂肪组织(WAT)和棕色脂肪组织(BAT)重量;检测大鼠胃排空率;检测大鼠血糖、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)和血浆瘦素(LEP)、胰岛素水平;检测结状神经节(NG)内瘦素受体(LEP-R),p-STAT3和辣椒素受体1(TRPV1)蛋白表达。结果和正常组比较,模型组体质量和附睾白色脂肪组织(eWAT)含量增加(P<0.05),BAT含量减少(P<0.05);TG和TC增高(P<0.05),LEP含量降低(P<0.05),胃排空率延迟(P<0.05);NG内LEP-R和TRPV1表达水平降低(P<0.05),p-STAT3水平无变化。干预后和模型组比较,电针组体质量降低(P<0.05),eWAT含量减少(P<0.05),BAT增多(P<0.05),血浆瘦素水平增加(P<0.05),TG和TC水平降低(P<0.05)胃排空率加快(P<0.05);NG内LEP-R和TRPV1表达水平提高(P<0.05)。结论高脂饮食诱导的胃排空延迟可能机制为TRPV1介导的迷走传入信号降低,与瘦素受体及其信号通路无关。电针足三里可以改善高脂饮食诱导的胃排空延迟,其机制可能在于改善TRPV1介导的迷走传入信号。

德昂酸茶水提物对高脂饮食小鼠肠道病理及脂肪代谢相关基因表达的影响

通过灌胃不同剂量的德昂酸茶水提物,研究德昂酸茶对高脂饮食诱导肥胖小鼠的生理指标、肠道病理及脂肪代谢等相关基因的影响。结果表明:与高脂对照组相比,德昂酸茶可显著降低高脂饮食小鼠的体质量、腹脂比(P<0.05),对高脂饮食造成的小鼠小肠组织肠黏膜损伤具有一定的改善和保护作用;同时德昂酸茶中剂量组能显著上调高脂饮食小鼠肝脏组织、脂肪组织中PPARα、AOX、CPT-1的基因表达水平,并有效下调肝脏组织中脂肪酸合成酶的基因表达水平。

肠道菌群对高脂饮食诱导肥胖小鼠糖脂代谢紊乱的免疫调节作用

目的探讨混合抗生素作用于小鼠肠道菌群从而影响机体免疫调节,探索肠道菌群在肥胖发生发展中的作用,为肥胖防治提供新思路与途径。方法72只10周龄C57BL/6雄性小鼠随机分为空白对照(Ctrl)组、高脂喂养(HF)组、抗生素(ABX)组和联合(COMB)组(n=18)。前2周(灌胃干预周)Ctrl组和HF组采用生理盐水灌胃,ABX组和COMB组采用混合抗生素灌胃,灌胃体积均为0.2 mL/(只•d);后8周(饲料喂养周)Ctrl组和ABX组采用普通饲料喂养,HF组和COMB组采用高脂饲料喂养。每周测量小鼠体质量,灌胃干预周前后、饲料喂养第4、8周测量小鼠空腹血糖;实验结束时进行口服糖耐量实验;测定脏器系数,镜下观察白色和棕色脂肪组织细胞形态,测定血清游离脂肪酸、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白、甘油三酯、总胆固醇含量,ELISA法检测血清TNF-α、IL-10、IL-4、IL-13、IL-33、MCP-1含量;小鼠粪便进行二代测序。结果高脂饮食引起小鼠体质量增加,血清总胆固醇、低密度脂蛋白、IL-13、IL-33、TNF-α、MCP-1含量增加,糖耐量和脏器系数降低(P<0.05)。饲喂第1周至实验结束,COMB组体质量低于HF组(P<0.05)。COMB组较HF组糖耐量、血清总胆固醇、低密度脂蛋白、IL-13、IL-33、TNF-α、MCP-1含量降低(P<0.05)。HF组白色脂肪组织可见微血管充血出血,脂肪细胞不完整且极度膨胀,细胞质极度压缩;COMB组白色脂肪组织未见充血出血,脂肪细胞较完整。ABX组肠道菌群α多样性低于Ctrl组(P<0.05);ABX和HF组分别与Ctrl和COMB组微生物群落组成较为相近。结论高脂饮食诱导小鼠肥胖、糖脂代谢紊乱和机体炎症,短期混合抗生素使用能够调节小鼠肠道菌群,介导相关抗炎因子表达增加,上调宿主免疫,改善小鼠糖脂代谢。

交泰丸对高脂饮食诱导肥胖小鼠血脑屏障损伤的影响及机制研究

目的研究交泰丸对高脂饮食诱导的肥胖小鼠大脑皮质血脑屏障的影响。方法将小鼠随机分为正常组(15只)和造模组(45只),高脂饮食喂养8周进行造模,以造模组体质量平均值高出正常组体质量的20%,视为小鼠肥胖模型建立成功。将造模成功的小鼠随机分为模型组、交泰丸组和阳性药组(二甲双胍),每组15只。给药4周后检测体质量及空腹血糖(FBG)水平,免疫荧光检测大脑皮质中紧密连接蛋白Claudin-5、ZO-1以及血管外渗IgG的表达;分离大脑皮质血管后采用Western blot法检测RhoA、ROCK2蛋白表达。结果与正常组比较,模型组小鼠体质量和FBG水平升高(P<0.01),大脑皮质血脑屏障紧密连接受损,Claudin-5、ZO-1表达降低(P<0.01),血管外渗IgG表达升高(P<0.01),RhoA、ROCK2蛋白表达升高(P<0.05);与模型组比较,二甲双胍组和交泰丸组小鼠体质量和FBG水平降低(P<0.05),大脑皮质血脑屏障紧密连接形态改善,且Claudin-5和ZO-1表达升高(P<0.05),血管外渗IgG表达降低(P<0.01),RhoA、ROCK2蛋白表达降低(P<0.05)。结论交泰丸能够改善高脂饮食诱导肥胖小鼠大脑皮质中紧密连接结构和血脑屏障功能,其机制与抑制RhoA/ROCK2信号通路有关。

金松酸对高脂饮食诱导的肥胖小鼠肝脏脂质代谢的影响

目的:本研究旨在探究金松酸(sciadonic acid,SA)对高脂饮食诱导小鼠肥胖的改善作用。方法:将48只C57BL/6雄鼠适应性喂养一周后随机分为正常组(C)、阳性对照组(S)、模型组(M)、金松酸低剂量组(LSA)、金松酸中剂量组(MSA)和金松酸高剂量组(HSA)。造模和给药同时进行,持续16周,低、高剂量组每日固定时间灌胃不同剂量的金松酸溶液。实验结束后从血脂代谢、肝脏脂肪代谢、肝脏氧化应激、肝脏脂质合成和代谢相关基因的表达等几个方面探讨金松酸调节肥胖小鼠脂质代谢的潜在机制。结果表明,高剂量金松酸干预肥胖小鼠能显著降低血清中总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)含量,增加高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)(P<0.05),抑制体重增长,减少附睾脂肪积累,对肝组织损伤具有改善作用。此外,金松酸能明显提高小鼠体内超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化酶(GSH-Px)等抗氧化酶的活性(P<0.05),并显著降低氧化终产物MDA的生成(P<0.05),缓解体内氧化应激反应,并通过调节脂质代谢相关基因的表达,抑制脂质合成,改善脂质代谢。综上,金松酸可通过抑制脂肪积累,缓解氧化应激,调控脂质合成和代谢改善肥胖小鼠脂质代谢紊乱。

等能量高脂饮食对SD大鼠能量代谢及耐力运动能力的影响

目的 探讨等能量的45%高脂饮食对SD大鼠代谢及耐力运动能力的影响。方法 24只雄性SD大鼠采用随机数字表法分为:常规喂养组(CON组)、高脂喂养组(HFD组)、常规喂养+训练组(CONT组)、高脂喂养+训练组(HFDT组)。其中CON组、CONT组给予常规饲料喂养,HFD组、HFDT组给予等能量的45%高脂饲料喂养;HFDT组和CONT组同时进行中等强度跑步耐力训练,持续6周。每周测量体质量、脂肪体质量和瘦体质量。用Pheno Master/Calo Treadmill系统测量静息和运动状态下的能量消耗和基础代谢率。在大鼠进行力竭测试后,检测血糖、血脂、血清肌酸激酶等指标。结果 干预6周后,HFDT组耐力运动能力较CONT组增强(P<0.05)。等能量喂养的各组大鼠体质量和体成分没有明显差异。静息时,各组大鼠总能量消耗与基础代谢率无明显差异,但在4周以前,CON组以碳水化合物为主要能量底物,HFD组则以脂肪为主,而碳水代谢率降低后升高,最终两组底物代谢率于第5~6周时达到相似水平。HFDT组以脂肪为主要代谢底物,CONT组以碳水化合物为主要代谢底物,在训练6周后仍存在统计学差异(P<0.05)。高脂饮食升高了HFD组大鼠血清胆固醇、TG、HDL-C等指标水平,但经历耐力训练的高脂饮食大鼠(HFDT组)血脂水平有所降低,且HFDT组β羟基丁酸(βHB)水平升高(P<0.05)。等能量不同饮食对肝肾功能及肌肉损伤指标的影响没有明显差别。结论 等能量高脂饮食可通过提高大鼠脂肪利用的能力,从而延长耐力运动时间,而不改变体成分或影响肝肾功能。

岩藻多糖对高脂饮食诱导小鼠肥胖和血脂代谢紊乱的预防作用研究

目的:研究岩藻多糖对高脂饮食诱导小鼠肥胖和血脂代谢紊乱的影响。方法:将小鼠随机分为3组:对照组、高脂饮食组及岩藻多糖[100 mg/(kg·d)]处理组,每组6只。对照组喂食基础饲料,其余各组小鼠喂食高脂饲料,对照组、模型组给予生理盐水,岩藻多糖处理组给予岩藻多糖100 mg/(kg·d),每天灌胃1次,连续给药42 d。给药期间记录动物体重和摄食量;给药结束后计算小鼠脂体比,测定各组小鼠的血脂水平[甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和游离脂肪酸(FFA)]。结果:经岩藻多糖处理后可有效降低高脂饮食诱导的小鼠体重增加(P<0.01)和脂体比(P<0.05)。岩藻多糖灌胃后,对小鼠的摄食量无显著影响(P>0.05),但高脂饮食组能量摄入显著高于对照组(P<0.01),而岩藻多糖处理组小鼠摄食量和能量摄入量略低于高脂饮食组,但两组之间没有显著统计学意义(P>0.05)。岩藻多糖灌胃处理后,小鼠血清TG、TC、LDL-C和FFA水平较高脂饮食组呈现不同程度的下降趋势,HDL-C水平则显著升高。结论:岩藻多糖对高脂饮食诱导小鼠肥胖具有较强的预防作用,此外,还能预防高脂饮食引起的血脂代谢紊乱。

基于生物信息学对比分析高脂饮食和蛋氨酸胆碱缺乏饮食构建的非酒精性脂肪性肝病小鼠模型

目的比较高脂饮食(high-fat diet,HFD)饮食和蛋氨酸胆碱缺乏(methionine-choline-deficient,MCD)饮食对C57小鼠非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)模型的影响,通过生物信息学方法揭示其差异表达基因(GEO-data-based analysis of differentially expressed genes,DEGs)并进行功能分析。方法从GEO数据库中获取GSE78170、GSE123354的表达数据。使用R语言分别比较C57小鼠对照组与MCD饮食组、C57小鼠对照组与HFD饮食组数据获得DEGs。对DEGs进行进一步的差异分析、功能富集分析、构建基因和蛋白互作网络及重叠DEGs对比分析。结果筛选出HFD诱导的上调基因44个,下调基因16个;MCD诱导的上调基因43个,下调基因73个;分析富集分析排名前12位的生物学过程,提示HFD与肝脏单纯脂肪积累相关,MCD则能全方位促进NAFL进一步转变为NASH。结论HFD诱导的基因主要涉及肝脏脂肪积累,而MCD更倾向于全方位促进NAFL向NASH的进展。

生命早期双酚A暴露联合断乳后高脂饮食对小鼠糖脂代谢的影响及其机制

目的:研究生命早期双酚A(BPA)暴露联合断乳后高脂饮食对小鼠糖脂代谢的影响,并探讨其发生机制。方法:在母鼠受孕第6天至子代小鼠断乳前按0.5 mg/(kg·d)对母鼠进行双酚A饮水染毒,分成未染毒组和BPA组,每组10只孕鼠。子代小鼠断乳后终止BPA染毒,并进行高脂饮食干预,分成普通饮食未染毒组、普通饮食BPA组、高脂饮食未染毒组和高脂饮食BPA组,每组10只,雌雄各半。在子代小鼠出生后第21天(PND21)和第91天(PND91)时处死小鼠并收集血液和胰腺组织样本,PND91小鼠在处死前进行葡萄糖耐量和胰岛素耐量试验,采用高分辨液质联用仪对小鼠胰腺进行非靶向脂质组学检测,实时荧光定量PCR法(qPCR)检测小鼠胰腺神经酰胺合成基因的mRNA表达水平,ELISA试剂盒检测小鼠血浆胰岛素和胰腺神经酰胺合成酶(Cers)活性,试剂盒检测小鼠胰腺丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性。结果:PND21时,与未染毒组相比,BPA暴露组子代雄性和雌性小鼠均出现体质量增长加快。PND91时,与高脂饮食未染毒组相比,高脂饮食BPA组雄性小鼠体质量增加(P<0.05)。PND91小鼠的葡萄糖耐量和胰岛素耐量试验结果显示,与高脂饮食未染毒组相比,高脂饮食BPA组雄性和雌性小鼠血糖曲线下面积均显著增加(P<0.05)。计算小鼠胰岛素抵抗指数发现,与高脂饮食未染毒组相比,PND91高脂饮食BPA组雄性小鼠胰岛素抵抗指数升高(P<0.05)。胰腺的非靶向脂质组学检测结果表明,PND21小鼠中,与未染毒组相比,BPA组雄性和雌性小鼠神经酰胺(Cer)丰度显著升高(P<0.05);PND91小鼠中,与高脂饮食未染毒组相比,高脂饮食BPA组雄性小鼠神经酰胺(Cer)丰度显著升高(P<0.05)。胰腺qPCR检测结果发现,PND21小鼠中,与未染毒组相比,BPA组雄性小鼠Cers4和Cers6 mRNA的表达上调,雌性小鼠Cers4mRNA的表达上调(P<0.05);PND91小鼠中,与高脂饮食未染毒组相比,高脂饮食BPA组雄性小鼠Cers2、Cers4和Cers6 mRNA的表达上调(P<0.05)。胰腺神经酰胺合成酶活力检测结果显示,PND21小鼠中,与未染毒组相比,BPA组雄性小鼠Cers2、Cers4和Cers6活力显著增强(P<0.05);PND91小鼠中,与高脂饮食未染毒组相比,高脂饮食BPA组雄性小鼠Cers2和Cers4活力显著增强(P<0.05)。氧化和抗氧化指标检测结果显示,PND91小鼠中,与高脂饮食未染毒组相比,高脂饮食BPA组雄性小鼠胰腺MDA含量显著增加、SOD活力显著降低(P<0.05)。相关性分析表明,PND91雄性小鼠胰腺神经酰胺丰度与胰腺氧化和抗氧化比值存在显著的正相关关系(P<0.05)。结论:生命早期BPA暴露联合断乳后高脂饮食损害了子代小鼠葡萄糖耐量和胰岛素耐量,并以性别特异性方式增加子代雄性小鼠胰腺神经酰胺从头合成,后者与雄性小鼠胰腺氧化和抗氧化失衡密切相关。

高脂饮食引发胃肠菌群改变与胃肠肿瘤关系的研究进展

在健康个体中,胃肠道内有害菌、有益菌等处于共生平衡状态,其稳态的打破与胃肠肿瘤发生密切相关。研究表明高脂饮食引发胃肠菌群改变,失调的菌可能通过影响菌群代谢产物、导致胃肠屏障受损、抑制抗肿瘤免疫等方式促进胃肠肿瘤的发生发展。本文主要就高脂饮食引发胃肠菌群改变与胃肠肿瘤的关系;在高脂饮食介导下,菌群失调促进胃肠肿瘤发生发展的可能机制进行综述,以期为胃肠肿瘤治疗提供新思路。

针刺对高脂饮食诱导的肥胖小鼠炎症因子表达的影响

目的:观察针刺对高脂饮食诱导的肥胖小鼠的治疗作用及对血清炎症因子蛋白和m RNA表达的影响,探讨针刺减轻肥胖小鼠体质量的作用机制。方法:从50只C57BL/6J小鼠中随机筛选12只为空白组,饲以正常饮食,剩余38只饲以高脂饮食饲养12周。将造模成功的24只小鼠随机分为模型组和针刺组。治疗4周后,比较各组小鼠体质量、血清脂质水平的差异,HE染色观察各组小鼠肝脏和附睾脂肪的形态,用Western blotting检测各组小鼠血清中IL-1β、IL-6、TNF-α、MCP-1蛋白表达水平,采用实时荧光定量PCR检测各组小鼠血清中IL-1β m RNA、IL-6 mRNA、TNF-α mRNA、MCP-1 mRNA表达水平。结果:与模型组比较,针刺组小鼠体质量以及血清中TC、TG、LDL含量明显降低;针刺组小鼠的肝脏脂质代谢明显改善,脂肪细胞大小明显缩小,血清中炎性因子IL-1β、IL-6、TNF-α、MCP-1蛋白表达水平及IL-1β mRNA、IL-6 mRNA、TNF-α m RNA、MCP-1 mRNA的水平明显下降。结论:针刺能明显降低肥胖小鼠体质量,改善肥胖小鼠的病理损伤情况,下调血清中TC、TG、LDL的含量以及炎性因子IL-1β、IL-6、TNF-α、MCP-1蛋白表达水平及IL-1β mRNA、IL-6 mRNA、TNF-α mRNA、MCP-1 mRNA的表达,达到治疗肥胖的目的。

肠道菌群对高脂饮食诱导的代谢相关脂肪性肝病的影响研究进展

代谢相关脂肪性肝病(metabolic assciated fatty liver disease,MAFLD)是指影像学或肝组织学检查中存在脂肪肝,同时伴有肥胖和(或)超重、2型糖尿病和代谢功能障碍(如高血脂、高血压、胰岛素抵抗)中任意一个条件的慢性肝病。目前本病发病原因尚不完全明确,随着经济和生活水平的提高,高脂饮食(high-fat diet,HFD)成为诱导MAFLD的最大病因之一。研究表明肠道菌群可通过改变肠道微生态、调节脂代谢紊乱、降低胰岛素抵抗等方面改善高脂饮食诱导的MAFLD。因此,本文通过肠道菌群及其代谢产物对高脂饮食诱导的MAFLD的影响进行阐述,以期为临床治疗MAFLD提供新的思路和方法。

余甘子与茶多酚、左旋肉碱配伍对高脂饮食诱导大鼠肥胖的预防作用

目的:研究余甘子、余甘子与茶多酚、左旋肉碱配伍对高脂饮食诱导大鼠肥胖的预防作用。方法:实验组、模型对照组和阳性对照组大鼠给予高脂饲料进行喂养,空白对照组大鼠给予普通饲料进行喂养;同时实验组分别灌胃余甘子、余甘子茶多酚混合物、余甘子左旋肉碱混合物。灌胃结束后称量大鼠体质量、体内肾周脂肪、睾周脂肪质量,检测大鼠血清及肝脏组织中血脂4项水平。测定血清中瘦素、抵抗素和脂联素水平,检测肝脏内相关酶活性、总蛋白水平及脂肪组织内mRNA的表达情况,观察余甘子、余甘子与茶多酚、左旋肉碱配伍对预防肥胖模型大鼠的减肥效果及肝损伤影响。结果:模型对照组大鼠体质量、体内脂肪含量相较于空白对照组有明显增加,且差异具有显著性(P<0.001)。在余甘子的调节作用下,余甘子干预组与余甘子左旋肉碱配伍干预组大鼠体质量显著下降,肾周脂肪和睾周脂肪质量及其系数也显著降低,血清和肝脏中总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇水平显著降低,高密度脂蛋白胆固醇水平显著升高,同时血清中瘦素、抵抗素水平显著降低,脂联素水平升高;肝脏中碱性磷酸酶、天冬氨酸转氨酶、丙氨酸转氨酶活性和丙二醛含量下降,超氧化物歧化酶活性增加;脂肪组织内单磷酸腺苷依赖蛋白激酶α-2 mRNA的表达显著上调。余甘子茶多酚配伍干预组预防肥胖效果并不显著。结论:余甘子能够预防高脂饮食诱导的大鼠肥胖,且单独使用效果优于余甘子与茶多酚或左旋肉碱配伍使用。

高脂饮食诱导胰岛素抵抗过程中肝脏能量代谢特征的研究

本研究旨在通过建立胰岛素抵抗全过程的小鼠模型,研究在这个过程中,肝内线粒体功能和能量代谢的变化情况。试验选取60只雄性C57BL6小鼠,随机选取30只饲喂普通维持饲料作为对照组(Con组),另外30只饲喂高脂饲料作为高脂饮食组(HFD组)进行造模,分别于饲喂的第4、6、8、10和12周,各组随机选取6只小鼠进行处理,经胰岛素抵抗评估和病理组织学检查确认成功建立胰岛素抵抗全过程的模型。在第8和12周,采集鼠尾血液,进行葡萄糖耐受试验(glucose tolerance tests,IGTT)和胰岛素耐受试验(insulin tolerance tests,ITTs)。在第4、6、8、10和12周,采集小鼠的血清和肝组织样品进行试验:1)检测空腹血糖和血清含量;2)ELISA法检测肝组织中的Srebp-1c酶、PFK1和COX-Ⅰ含量;3)生化检测血清中的ALT和AST含量;4)Western blot法检测肝组织中的PI3K、Akt、P-Akt、GLUT4、GSK-3β、P-GSK-3β、FOXO1、P-FOXO1、SIRT1、AMPK、P-AMPK、PGC-1α蛋白表达量;5)采用透射电镜、HE染色、油红O染色、PAS染色检测肝病理组织和结构的变化。结果表明:1)12周的高脂日粮引起小鼠肥胖、HOMA-IR增加,油红O染色显示,明显的脂肪沉积,成功诱导小鼠胰岛素抵抗全过程模型;2)胰岛素抵抗过程中,小鼠ALT和AST增加,HE结果显示,明显的脂滴空泡、肝细胞结构紊乱;3)在饲喂高脂日粮的第4周之后,肝胰岛素上游信号开始受到影响;4)与Con-6组相比,HFD-6组小鼠肝内的GLUT4蛋白表达量和P-FOXO1/FOXO1比值、PFK1含量显著下降(P<0.01);与Con-4组相比,HFD-4组小鼠肝内的GSK-3β磷酸化、Srebp-1c酶水平逐渐降低(P<0.05);PAS结果显示从第8周开始,HFD组小鼠肝细胞内糖原含量减少;5)与Con-4组相比,HFD-4组小鼠肝的AMPK、P-AMPK、SIRT1含量显著降低(P<0.01和P<0.001);6)HFD组小鼠肝中Mfn2在第10周出现上升,Drp1蛋白的表达呈现先降低后升高的趋势;7)与HFD-6组相比,HFD-6组小鼠肝中的PINK1和Parkin蛋白明显下降(P<0.05)。综上表明,肝作为代谢的主要器官,在饲喂60%高脂饲料后,会发生选择性胰岛素抵抗,在抵抗后整体上能量分解代谢减弱、线粒体损伤增强,而清除损伤线粒体的自噬功能却减弱,另外在第8、10周时出现了短暂的线粒体生物发生与融合增强现象,说明由于肝能量缺乏导致了短暂的代偿作用。本研究从发生全过程的角度阐释肝胰岛素抵抗中的能量代谢特征和规律,为进一步深入研究营养过剩影响细胞能量代谢的机制提供参考。

高脂饮食对孕期小鼠脂肪组织构成和炎症特征的影响

目的·探究高脂饮食后雌鼠孕前、孕期脂肪组织的改变及其对子代脂肪组织可能产生的影响。方法·C57BL/6J雌性小鼠随机接受普通饮食(CON组,n=12)和高脂饮食(HFD组,n=12) 5周;根据是否妊娠再分为普通饮食非妊娠组(CON-UN组)、普通饮食妊娠组(CON-P组)和高脂饮食非妊娠组(HFD-UN组)、高脂饮食妊娠组(HFD-P组)。雌鼠在孕期和哺乳期均维持原有饮食。雌鼠分别于喂饲5周或孕18.5 d取其白色脂肪组织(内脏)和棕色脂肪组织(肩胛)。两组孕鼠的子代断乳后,分别接受普通饮食至第11周,取子代脂肪组织。采用苏木精-伊红(H-E)染色观察脂肪细胞的变化;流式细胞术检测白色脂肪组织中CD4^(+)T细胞、CD8^(+)T细胞、总T细胞、CD4^(+)T细胞/CD8^(+)T细胞比值及NK细胞的比例;实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测白色脂肪组织IL-6和IL-1β mRNA的表达。结果·高脂饮食喂养5周后,HFD组雌鼠体质量高于CON组雌鼠(P<0.05)。高脂饮食后,育龄期雌鼠和妊娠末期雌鼠的白色脂肪和棕色脂肪的质量均显著增加(均P<0.05)。HFD-UN组和HFD-P组雌鼠白色脂肪组织中同一视野下细胞数量明显减少,脂肪细胞大小不一,脂滴占比增大,细胞体积显著增大;HFD-UN组和HFD-P组脂滴面积占视野总面积的比例分别与CON-UN组和CON-P组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。HFD-UN组和HFD-P组棕色脂肪细胞则呈现出相对混乱的排列,脂肪细胞大小不一,但细胞体积无明显改变。HFD-UN组和HFD-P组脂肪组织中CD8^(+)T细胞比例和总T细胞比例升高,炎症因子IL-6、IL-1βmRNA表达水平升高;分别与CON-UN组和CON-P组比较,差异均具有统计学意义(均P<0.05)。育龄期雌鼠(HFD-UN组)脂肪组织中NK细胞比例降低,但在妊娠期(HFD-P组) NK细胞比例则明显升高,两者呈现相反趋势。HFD组子代断乳后恢复普通饮食,其体质量、白色脂肪和棕色脂肪质量仍显著高于CON组子代(均P<0.05),且白色脂肪细胞体积显著增大。结论·高脂饮食可引起育龄期和妊娠期雌鼠脂肪细胞结构、免疫细胞比例改变及炎症水平升高,并影响子代脂肪组织结构;脂肪组织可能是介导肥胖代际传递的新载体。

母代运动抵抗高脂饮食导致子代小鼠骨骼肌功能障碍的机制研究

目的:探究母代运动对子代小鼠长期高脂饮食导致骨骼肌功能障碍的保护效应及其机制。方法:雌性C57BL/6小鼠随机分为对照组(maternal control,M-Con)和运动组(maternal exercise,M-Ex)。M-Ex组小鼠孕前4周及孕期进行跑台运动;M-Con组在孕前及孕期均维持常规生活方式,在M-EX组小鼠训练时置于相同环境。M-Con组和M-Ex组与同龄野生型C57BL/6雄性小鼠交配后获得子代小鼠,子代小鼠正常饲养至3周龄后进行为期12周的高脂饮食(high-fat diet,HFD)干预。通过运动表现检测子代小鼠骨骼肌功能;利用组织化学染色分析子代小鼠骨骼肌纤维横截面积、脂质沉积、纤维化和纤维类型;利用蛋白质印迹(Western blot)检测子代小鼠骨骼肌mTOR、P70s6k、Fbx32、TNF-α、TNFR1、AMPK和PGC-1α的蛋白质表达水平;利用实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测脂质合成相关基因和线粒体生物发生相关基因表达水平。结果:与正常饲养的野生型小鼠(Sham)相比,M-Con组子代小鼠(HFD.Con)长期高脂饮食后,运动表现显著下降,骨骼肌肌指数和纤维横截面积显著降低,骨骼肌脂质合成相关基因表达显著升高,骨骼肌异位脂质沉积与纤维化面积显著增加,血浆TNF-α水平显著升高,骨骼肌TNF-α及TNFR1蛋白表达显著上调,骨骼肌线粒体功能障碍,琥珀酸脱氢酶染色阳性纤维数量显著降低,AMPK、PGC-1α蛋白表达显著降低。与HFD.Con组相比,M-Ex组子代小鼠(HFD.Ex)骨骼肌AMPK、PGC-1α蛋白表达水平显著升高,线粒体生物发生相关基因表达及琥珀酸脱氢酶染色阳性纤维数量显著增加,脂质合成相关基因及TNF-α和TNFR1蛋白表达水平显著下调,脂质沉积和纤维化面积显著降低,有效抵抗长期高脂饮食导致的骨骼肌功能障碍。结论:母代运动通过激活子代小鼠骨骼肌AMPK-PGC-1α信号通路,促进骨骼肌线粒体生物发生,降低子代小鼠长期高脂饮食导致的肥胖和骨骼肌脂质异位沉积,并抑制循环系统TNF-α水平和骨骼肌TNFR1的蛋白表达,有效缓解子代小鼠肌萎缩和骨骼肌纤维化的发生,保护子代小鼠骨骼肌免受高脂饮食导致的功能障碍。

高脂饮食影响小鼠肠道免疫功能的转录组分析

目的研究高脂饲喂对小鼠肠道免疫功能及相关基因表达的影响,并探讨高脂饮食导致肠道炎症和影响肠道屏障功能的潜在机制。方法2019年6月,将24只C57BL/6J雄性小鼠分为正常饮食组(CON组)和高脂饮食组(HFD组),每组12只,采用随机分组法分为4笼,每笼3只,分别饲喂18周。采用酶联免疫吸附试验试剂盒检测血糖、血脂等生化指标。采用Trizol试剂法提取小鼠盲肠组织总RNA,逆转录获得cDNA并建库进行RNA转录组测序,利用基因本体、京都基因与基因组百科全书数据库对差异表达基因进行功能分析和通路富集分析。结果HFD组小鼠第18周体重[(36.96±1.31)g],以及空腹血糖(GLU)[(6.65±0.41)mmol/L]、低密度脂蛋白胆固醇[(0.97±0.07)mmol/L]、总胆固醇[(4.08±0.15)mmol/L]、甘油三酯[(0.64±0.03)mmol/L]水平均明显高于CON组[分别为(31.81±0.53)g,(4.53±0.33)、(0.60±0.04)、(2.79±0.13)、(0.51±0.02)mmol/L],差异均有统计学意义(t=3.66、4.00、4.46、6.34、3.52,P=0.0014、0.0006、0.0002、<0.0001、0.0020)。盲肠组织差异表达基因主要富集到免疫和细胞死亡等多个生物学过程,其中cxcr4、ccr7、cxcl12、ccl28、cxcl13、ccl21a等主要炎症因子明显上调,高脂饮食明显降低了肠道屏障功能重要基因cndl4的表达,可能导致屏障功能受损。结论高脂饮食可明显影响肠道免疫功能,并可能诱导肠道屏障功能受损,是肠道炎症及炎性相关疾病的潜在致病因素。

高脂饮食对阿尔茨海默病病变的影响及小胶质细胞在其中的作用

阿尔茨海默病(Alzheimer disease,AD)病程漫长,本文从AD经典病理事件时间线出发,以小胶质细胞异常激活为桥梁,以期明确AD病理事件出现时间的先后顺序。脂质代谢异常与小胶质细胞功能异常、AD病理改变密切相关,以此为介入点,本文综述了短、长期高脂饮食对AD病变发展的影响及其可能的机制,以期为AD的早期介入提供思路。