鸡传染性法氏囊病病毒ELISA抗体检测试剂盒的初步应用

为建立鸡传染性法氏囊病病毒ELISA抗体检测试剂盒,该研究以灭活纯化的鸡传染性法氏囊病病毒作为包被抗原,连续制备了3批次鸡传染性法氏囊病病毒ELISA抗体检测试剂盒中试产品。结果表明:该试剂盒对IBDV阳性血清检测的灵敏度可达1∶6400;对鸡新城疫病毒、鸡减蛋下降综合征病毒、鸡传染性支气管炎病毒、鸡抗网状内皮组织增生症病毒、鸡马立克氏病病毒、禽流感病毒H5亚型、鸡传染性贫血病毒阳性血清和SPF鸡阴性血清均无交叉反应;批内和批间重复性的变异系数分别在4.21%和5.07%以内。应用该试剂盒和某进口同类ELISA试剂盒对258份临床白羽肉鸡血清样品同时进行对比检测,相对敏感性、相对特异性和符合率分别为98.44%、96.97%和98.06%。可见,该试验建立的鸡传染性法氏囊病病毒ELISA抗体检测试剂盒具有有操作简便、特异性强、灵敏度高的特点。

鸡传染性法氏囊病的科学防治

在我国养鸡业中,目前鸡传染性法氏囊病主要采用疫苗接种来预防,但效果并不理想,而且会产生严重的不良反应,因此需要采取药物预防控制该病的发生与流行。科学防治鸡传染性法氏囊病的前提是准确诊断,该病具有高度接触性和致死性且容易复发,给养殖户带来很大经济损失。为了有效防控该病,必须采取一系列综合性的防控措施,包括但不限于加强消毒和饲养管理,以及预防该病对免疫系统的抑制作用,以避免混合感染和并发症的发生。

鸡传染性法氏囊病的诊断与防制

鸡传染性法氏囊病是由传染性法氏囊病毒引起的一种主要危害雏鸡、青年鸡的急性高度接触性传染病。病鸡会出现嗜睡,羽毛逆立,腹泻,粪便呈白色水样,胸肌和腿肌出血,法氏囊肿胀、出血和坏死等典型症状。法氏囊是鸡体内的主要免疫器官,当其受到传染性法氏囊病毒侵害后,会造成机体免疫力下降,增加了对其他病原的易感性,降低鸡群的整体免疫力,甚至造成病鸡死亡。同时,本病也会使疫苗免疫应答降低,甚至造成疫苗免疫失败。

一例鸡传染性法氏囊病的诊治

鸡传染性法氏囊病是由传染性法氏囊病毒引起的一种急性、高度接触性传染性疾病[1]。鸡传染性法氏囊病是当前养鸡业的主要传染病之一;由于该病发病突然、发病率高,同时引起鸡体免疫机能障碍,容易引起其他病原感染和继发性合并症,给养鸡业造成了巨大的经济损失。本文报告一个鸡传染性法氏囊病例的诊治过程。

鸡传染性法氏囊病的诊治

鸡传染性法氏囊病,以高度接触性和传染迅速为特性,持续威胁着鸡群的健康与安全。鸡传染性法氏囊病病毒,为双股RNA结构,侵害鸡的法氏囊,导致严重的病理变化和死亡率。本文详细探讨了鸡传染性法氏囊病的病原特性、流行病学规律、典型临床与病理表现、精确诊断手段以及全面防治策略,旨在为养鸡业提供更为深入、全面的科学认识与应对措施。

鸡传染性法氏囊病的治疗与预防措施

在养殖业中,法氏囊病的暴发不仅影响单个鸡场的经济效益,还可能对整个地区的家禽生产造成严重影响。基于此,本文就鸡传染性法氏囊病的兽医治疗进行了深入分析,旨在为基层养殖业的发展提供科学参考依据。

一例鸡传染性法氏囊病的诊疗体会

鸡传染性法氏囊病(infectious bursal disease,IBD)是由传染性法氏囊病病毒(infectious bursal disease virus,IBDV)引起的一种高度接触性传染病,目前已成为危害养鸡业的重要传染病。本文介绍了IBD的发病情况、临床症状、病理变化、诊断和综合防治,并结合自身实践经验提出了诊疗体会,以期为养鸡生产者提供参考。

鸡传染性法氏囊病的诊断综述

鸡传染性法氏囊病是由传染性法氏囊病病毒引起鸡和火鸡的一种急性、高度接触性传染病。病毒损伤雏鸡的法氏囊,导致免疫抑制,干扰各种疫苗的免疫效果,给养鸡业造成巨大经济损失。本文从该病的流行病学、临床症状与病理变化、病原分离鉴定、免疫学诊断、聚合酶链式反应诊断等方面进行综述,以期为科学防控鸡传染性法氏囊病提供参考。

鸡传染性法氏囊病病毒超强毒株GX8/99株的致病性

鸡传染性法氏囊病病毒 (IBDV)超强毒株GX8/ 99,系 1999年从广西一自然发病鸡群采集到。用原始病鸡法氏囊悬液连续 3次人工感染SPF鸡后 ,再取其法氏囊制备悬液 ,分装 ,在 - 70℃保存。以此悬液经卵黄囊接种 10日龄SPF鸡胚 ,测定鸡胚的半数致死量 (ELD50 )。随着鸡的日龄和接种剂量的不同 ,其致死率有很大差异。对 2 8～ 30日龄SPF鸡 ,病毒接种量为 2 0 0个ELD50 时 ,感染后 7日内死亡率最高可达 73%～ 90 5 % (11/ 15和 19/ 2 1) ;感染量为 2 0个ELD50 时 ,死亡率亦可达 5 3%～ 92 % (8/ 15和 2 3/ 2 5 )。以 5 0 0个ELD50 感染 2 8～ 10 4日龄的SPF鸡 ,死亡率均在 5 5 1%～ 6 7 2 % ;甚至 113～ 12 0日龄的SPF鸡 ,感染后仍有 10 %～ 15 %致死率。但 12 8日龄的SPF鸡感染后既不引起死亡也不表现任何症状 ,但抗体全部转阳。人工接种发病死亡的鸡 ,其法氏囊的出血程度也随感染量和年龄而异。 5 0日龄鸡接种 2 0 0 0个ELD50 后 ,死亡的鸡 10 0 % (12 / 12 )法氏囊严重出血 ;而 4 0日龄鸡感染 2 0 0个ELD50 后 ,死亡鸡中仅 17% (3/ 18)发生出血。在 2、3、4周龄带有母源抗体的商品代蛋鸡 ,以 2 0 0 0个ELD50 病毒接种后 ,只引起 10 % (2 / 2 0 )、35 % (7/ 2 0 )和 35 % (7/ 2 0 )的死亡率。但在

鸡传染性法氏囊病病毒VP2蛋白研究进展

鸡传染性法氏囊病（Infectious bursal disease，IBD）是由鸡传染性法氏囊病病毒（Infectious bursal disease virus，IBDV）引起的一种急性、高度接触性传染病，主要危害3～6周龄的雏鸡。该病于1957年首次发现于美国Gumboro地区。50年来，IBD一直威胁着养禽业的发展。免疫抑制、抗原变异，特别是超强毒株（vvIBDV）的出现，使得该病的防控形势更加严峻。国际兽疫局（OIE）已将IBD列为“影响社会经济的重要疾病”。

鸡传染性法氏囊病超强毒Gx及其致弱株基因组B节段的克隆和序列分析

用蛋白酶K法分离提取了鸡传染性法氏囊病病毒强毒株Gx及其致弱株Gt的病毒核酸dsRNA ,应用随机引物将RNA反转录成cDNA ,以此为模板用长距离一步法扩增出全长基因B节段 ,将其克隆入PMD18_T载体 ,进行了测序 ,并用DNAStar软件进行序列分析。测序结果表明 ,克隆的Gx株B节段全长为 2 82 7bp ,与超强毒参考株UK6 6 1的同源性为 88 2 % ,与强毒参考株Harbin_1株的同源性达 96 3% ;克隆的Gt株B节段全长为 2 82 7bp ,与弱毒参考株P2的同源性达 99 5 %。而Gx株与Gt株B节段的核苷酸的同源性只有 89 8% ;vvIBDV_Gx。

鸡传染性法氏囊病病毒vp2基因在杆状病毒表达系统中的表达及免疫原性研究

将鸡传染性法氏囊病病毒超强毒Gx株vp2基因克隆到载体pFastBac HTA中,构建重组转座载体pFVP2,然后将其转化DH10Bac感受态大肠杆菌,将vp2基因整合到Bacmid穿梭载体中,获得重组穿梭载体BacmidVP2;通过脂质体转染将其转染Sf9昆虫细胞,获得重组杆状病毒rBacVP2。用Western blot和间接免疫荧光试验分析表明IBDV VP2蛋白在Sf9昆虫细胞获得正确表达,所表达的重组VP2蛋白分子量约50 Ku。以rBacVP2感染Sf9细胞裂解物免疫3周龄SPF鸡,在免疫后7 d可检测到ELISA抗体;免疫后14 d可检测到琼脂免疫扩散抗体。攻毒试验表明,初次免疫后14 d对IBDV超强毒株的攻击保护率为75%,2次免疫后14 d对其的攻击保护率为100%。

鸡传染性法氏囊病免疫复合物疫苗对SPF雏鸡的免疫效果

用鸡传染性法氏囊病免疫复合物疫苗和活疫苗分别免疫1日龄SPF雏鸡,免疫后9d观察法氏囊病变,免疫后14、21、28d对各组鸡采血测定IBDV中和抗体,21d及28d时用强毒攻击,计算各组疫苗保护率。结果表明,免疫后9d免疫复合物疫苗组鸡法囊正常,活疫苗组鸡法氏囊全部明显萎缩;免疫后14、21、28d,免疫复合物疫苗组鸡IBDV中和抗体分别为2.9±0.99、8.1±0.88和10.6±1.78,活疫苗组IBDV中和抗体分别为3.3±1.14、8.3±1.16和9.2±1.23,免疫后21d及28d疫苗免疫组均100%保护。试验证明免疫复合物疫苗比活疫苗更为安全,免疫复合物疫苗免疫SPF雏鸡产生比活苗更高的IBDV中和抗体,保护率达100%。

鸡传染性法氏囊病病毒VP2基因突变对病毒体外复制的影响

为了进一步了解影响鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)复制效率和致病力的分子基础,作者在序列分析的基础上,利用反向遗传操作技术,针对VP2上2个重要的氨基酸位点(222和279),修饰和拯救了相应的2株突变病毒,并研究了突变病毒在体内外的生物学特性。复制动力学数据显示,VP2的222位由酪氨酸突变为脯氨酸可将IBDV在鸡胚成纤维细胞(CEF)上的复制滴度提高6倍以上,而279位氨基酸对病毒复制效率无显著影响。SPF鸡的感染试验显示,222位和279位氨基酸与IBDV的致病力没有关系。本研究首次报道了VP2 222位和279位氨基酸与IBDV复制效率和致病力的关系,有助于更加全面地了解IBDV的基因功能,也将为新型IBDV疫苗的设计提供依据和思路。

鸡传染性法氏囊病的研究进展

通过对IBD基础研究、分子研究、IBDV抗原表位研究、IBD诊断方法研究和IBD疫苗研究5个方面的阐述,了解目前传染性法氏囊病的研究进展。

鸡传染性法氏囊病病毒dsRNA的提纯与应用

用传染性法氏囊病病毒 (IBDV)攻击 4周龄的非免疫鸡 ,以超速离心法从感染鸡法氏囊组织中分离、纯化IBDV ,应用蛋白酶K消化和Trizol(异硫氰酸胍 -酚 -氯仿法 )处理 2种方法从纯化的IBDV中抽提dsRNA。通过低熔点琼脂糖割胶 -酚 -氯仿抽提可获得纯化的dsRNA ,研究发现应用蛋白酶K消化获得的纯化RNA产量高 ,用其作模板进行RT -PCR可扩增IBDV基因组全长cDNAA片段和B片段、VP2基因和VP2 - 4 - 3基因。

鸡传染性法氏囊病病毒超强毒上海株SH95基因组B片段的克隆与分子系统进化树分析

分离、纯化了鸡传染性法氏囊病病毒超强毒(vvIBDV)上海株(SH95)的病毒核酸dsRNA,应用随机引物将RNA反转录成cDNA,以此为模板一步扩增出全长基因组B片段,将其克隆入pGEM-T载体,并进行序列分析。克隆的B片段全长2827个核苷酸,其编码的氨基酸与超强毒株HK46的同源性达98 18%(863/879)。分子系统进化树分析表明,SH95超强毒株与美国变异株E的亲缘关系最近,但与基于基因组A片段的系统进化分析完全不同,表明该毒株在发生过程中基因重配比基因重组发挥了更重要的作用。通过对14株IBDV编码氨基酸序列的分析、比较,推测B片段上11个独特的氨基酸位点可能与毒力相关。

鸡传染性法氏囊病新型疫苗的研究进展

鸡传染性法氏囊病(IBD)是由鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)引起的雏鸡的一种高度接触性传染病,自1962年报道以来,世界上主要养禽国家和地区均有流行,给养禽业带来严重经济损失。目前,IBD防控的主要方法是采用疫苗接种,使易感雏鸡获得主动或被动免疫保护,因此疫苗的质量对临床上IBD的防控起着至关重要的作用。虽然各国均有较好的商品化疫苗,但随着IBDV毒株的不断变异,商品化疫苗的抗原性与流行毒株不能完全匹配,临床上免疫失败时有发生,因此迫切需要研发与临床流行毒株相匹配的新型疫苗用于IBD的防控。对近期IBD的基因缺失苗、亚单位疫苗、DNA疫苗以及活载体疫苗等新型疫苗的研究进展进行概述,以此为IBD新型疫苗的研究提供参考。

商品化鸡传染性法氏囊病活疫苗的免疫效果及其对鸡法氏囊的损伤研究

用市售的3种中等毒力鸡传染性法氏囊病(infectious bursal disease,IBD)活疫苗分别免疫SPF鸡,9日龄首免,22日龄二免,并于二免后第2、9、21天,每组随机抽取5只,抽血测定IBD抗体,同时检查法氏囊的损伤情况。结果表明,3种中等毒力的IBD活疫苗对鸡法氏囊均会造成一定的损伤,但损伤程度有差异,且这种损伤在一定时期内可以恢复。3种中等毒力IBD活疫苗刺激鸡产生抗体的水平也存在差异。

鸡传染性法氏囊病病毒实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立

本试验根据GenBank中鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)基因组设计一对针对病毒vp5基因的引物和一条特异性Taq Man探针,建立了一种快速检测IBDV核酸载量的Taq Man荧光定量RT-PCR方法。通过对反应条件和反应体系的优化,使得该方法在108拷贝/μL～101拷贝/μL范围内具有良好的线性关系。能够灵敏地检测初始模板中30个拷贝的病毒核酸,其灵敏度是常规RT-PCR检测方法的100倍。该方法不与其它的禽源病毒发生非特异性反应,并且具有良好的重复性,为IBDV的定性定量检测提供了有效的工具。