黄芩苷对多杀性巴氏杆菌感染猪巨噬细胞后炎症因子表达及信号通路影响的研究

为研究不同浓度黄芩苷对多杀性巴氏杆菌(Pm)HN-13株感染的猪巨噬细胞(HD11)内炎症因子表达的影响及与炎症信号通路的相互作用关系,本研究采用western blot检测HN-13株感染(0、30 min、60 min、90 min)HD11细胞中促分裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路3个关键蛋白(p-ERK/ERK、p-p38/p38、p-JNK/JNK)的表达水平;采用ELISA和荧光定量RT-PCR(RT-qPCR)分析检测低浓度剂量黄芩苷(L组,20μmol/L)、中浓度剂量黄芩苷(M组,40μmol/L)和高浓度剂量黄芩苷(H组,60μmol/L)对Pm感染的猪巨噬细胞内肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)和IL-1β分泌水平及其m RNA转录水平的影响,同时设置对照组(Control)和模型组(HN-13);利用抑制剂SCH772984阻断ERK通路,采用ELISA和RT-qPCR检测黄岑苷对Pm感染的HD11细胞内炎症因子TNF-α、IL-6和IL-1β表达及m RNA转录水平的影响,同时设置对照组(Control)、模型组(HN-13)、抑制组(HN-13+抑制剂)。结果显示:与HN-13株处理0 min组相比,随着感染时间的延长,HN-13株感染HD11细胞中p-ERK/ERK的蛋白表达量逐渐升高(P<0.01),而p-p38/p38和p-JNK/JNK蛋白表达量均未发生显著变化(P>0.05),表明,HN-13株可使HD11细胞炎症相关ERK通路蛋白表达增强,且与作用时间呈正相关。与模型组(HN-13)相比,3个浓度剂量的黄芩苷均显著抑制TNF-α、IL-6和IL-1β的分泌水平及m RNA转录水平(P<0.05),且抑制作用随着黄芩苷浓度升高而增强。与抑制组相比,黄芩苷与抑制剂共处理组可以显著抑制HN-13感染的HD11细胞中TNF-α、IL-1β和IL-6的分泌及m RNA转录水平(P<0.05)。综上所述,黄芩苷可以抑制Pm感染的HD11细胞中ERK通路相关蛋白的表达和分泌,进而发挥抗炎作用。本研究为研制防治Pm引起的猪肺疫的新药提供了思路。

黄芩苷调节cAMP/PKA/CREB信号通路对湿疹大鼠皮肤屏障功能的影响

目的探讨黄芩苷(BA)调节环磷酸腺苷(cAMP)/蛋白激酶A(PKA)/cAMP反应元件结合蛋白(CREB)通路对湿疹大鼠皮肤屏障功能的影响。方法将SD大鼠随机分为对照组(NC组)、Model组、低剂量BA组(BA-L组,25 mg/kg)、中剂量BA组(BA-M组,50 mg/kg)、高剂量BA组(BA-H组,100 mg/kg)、泼尼松组(PNS组,25 mg/kg)、BAH+cAMP抑制剂(SQ22536)组(100 mg/kg+2.13 mg/kg)、BA-H+PKA抑制剂(H-89)组(100 mg/kg+5 mg/kg),每组12只。除NC组外,其余组大鼠均构建湿疹大鼠模型。建模成功2 d后,分组进行给药处理。检测湿疹面积及严重度指数(EASI)评分、经皮肤水分流失量(TEWL)、角质层含水量(WCSC)变化;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测大鼠血清中免疫球蛋白E(IgE)、干扰素-γ(IFN-γ)、白细胞介素-4(IL-4)水平及大鼠背部受试区皮损组织中c AMP蛋白表达;HE染色检测大鼠背部受试区皮损组织病理变化;Western blot检测大鼠背部受试区皮损组织中水通道蛋白3(AQP3)、cathelicidin相关抗菌肽(CRAMP)、p-PKA、p-CREB蛋白表达。结果与NC组比较,Model组大鼠背部受试区皮损组织病理损伤严重,EASI评分、TEWL、IgE、IL-4水平升高,WCSC、IFN-γ水平、AQP3、CRAMP、cAMP、p-PKA、p-CREB蛋白水平降低(P<0.05)。与Model组比较,BA-L组、BA-M组、BA-H组、PNS组大鼠背部受试区皮损组织病理损伤减轻,EASI评分、TEWL、IgE、IL-4水平降低,WCSC、IFN-γ水平、AQP3、CRAMP、cAMP、p-PKA、p-CREB蛋白水平升高(P<0.05);且BA-L组、BA-M组、BA-H组上述指标变化呈剂量依赖性。SQ22536或H-89减弱了高剂量BA对湿疹大鼠皮肤屏障功能的改善作用。结论BA可能通过激活cAMP/PKA/CREB信号通路改善湿疹大鼠皮肤屏障功能。

黄芩苷对干酵母致热大鼠的解热作用及血清TNF-α、IL-1β、IL-6、PGE_(2)、cAMP和脑组织NF-κB表达的影响

目的:观察黄芩苷对干酵母致热大鼠的解热作用并探讨其作用机制。方法:采用背部皮下注射干酵母构建大鼠发热模型,SD雄性大鼠随机分为正常对照,模型组,阳性组(阿司匹林,0.1 g/kg),黄芩苷高、中、低剂量组(160、80、40 mg/kg),连续给药3 d,测定各组大鼠肛温的变化;酶联免疫法(ELISA)检测血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、前列腺素E_(2)(PGE_(2))与环磷酸腺苷(cAMP)水平;Western Blot检测各组大鼠脑组织NF-κB p65(核转录因子-κB p65)蛋白表达。结果:黄芩苷高剂量组有显著解热效果(P<0.01),黄芩苷各剂量组均可不同程度降低大鼠血清TNF-α、IL-1β、IL-6、PGE 2和cAMP含量;与正常组比较,模型组脑组织NF-κB p65蛋白表达增多,黄芩苷高剂量组可明显降低大鼠脑组织NF-κB p65表达(P<0.05)。结论:黄芩苷可显著性降低干酵母引起的体温升高,解热机制可能与抑制TNF-α、IL-1β、IL-6、PGE_(2)与cAMP的分泌和减少脑组织NF-κB p65蛋白表达有关。

黄芩苷调控PI3K/Akt通路对过氧化氢诱导的内皮祖细胞损伤的保护作用

目的 探讨黄芩苷通过调控磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)通路对过氧化氢(H_(2)O_(2))诱导的内皮祖细胞(EPCs)损伤的保护作用。方法 从SD大鼠骨髓中分离EPCs,并用荧光染色法进行鉴定。将EPCs细胞分为对照组、H_(2)O_(2)组(500μmol/L H_(2)O_(2)培养基培养细胞)、黄芩苷低、中、高剂量组(用30、60、120μg/ml黄芩苷分别预处理细胞24 h,再用500μmol/L H_(2)O_(2)培养基培养24 h)和黄芩苷高剂量+LY294002组(120μg/ml黄芩苷和10μmol/L LY294002分别预处理细胞24 h和1 h,再用500μmol/L H_(2)O_(2)培养基培养24 h)。噻唑蓝(MTT)法检测EPCs细胞活力;Hoechst33258核染色评价EPCs细胞凋亡;胱天蛋白酶(Caspase)-3荧光检测试剂盒检测EPCs细胞Caspase-3的活性;管形成实验检测EPCs细胞血管形成;试剂盒检测EPCs细胞内氧化损伤标志物[乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、活性氧(ROS)]水平;Western印迹检测EPCs细胞内凋亡B细胞淋巴瘤(Bcl)-2、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、Caspase-3、PI3K/Akt通路相关蛋白表达。结果 培养的EPCs呈鹅卵石状,1,1-二十八烷基-3,3,3,3-四甲基林碳菁标记的乙酰化低密度脂蛋白(Dil-ac-LDL)和异硫氰酸荧光素凝集素(FITC-UEA)-1阳性表达。H_(2)O_(2)降低细胞活力,增加凋亡率,减少Bcl-2/Bax比值,增加Caspase-3表达及相对Caspase-3活性,降低管形成能力和SOD水平,升高LDH、ROS、MDA水平,均有统计学差异(均P<0.05)。黄芩苷剂量依赖性地明显降低了H_(2)O_(2)诱导的EPCs凋亡率、Caspase-3表达、相对Caspase-3活性及LDH、ROS、MDA的释放,明显促进了管的形成、细胞活力和SOD产生,并明显升高Bcl-2/Bax比值(均P<0.05)。H_(2)O_(2)处理后EPCs中p-PI3K/PI3K与p-Akt/Akt比值均显著下降(P<0.05)。PI3K抑制剂LY294002阻断了黄芩苷对H_(2)O_(2)处理的EPCs的保护作用。结论 黄芩苷通过激活PI3K/Akt通路,保护EPCs免受H_(2)O_(2)诱导的细胞损伤。

黄芩苷辅助治疗青光眼临床疗效分析

目的探究黄芩苷辅助治疗青光眼的临床疗效。方法回顾性分析72例青光眼患者的临床资料,根据治疗方法进行分组,观察组36例(36眼)予以黄芩苷+布林佐胺滴眼液治疗,对照组36例(36眼)仅予布林佐胺滴眼液治疗。2组均连续治疗4周。比较2组临床总有效率及患眼治疗前后眼压、矫正视力和眼血流动力学参数的变化。结果治疗后,观察组临床总有效率为94.44%,显著高于对照组的77.78%(P<0.05)。2组患眼眼压均较治疗前降低(P均<0.05),且观察组显著低于对照组(P<0.05);2组患眼矫正视力均较治疗前升高(P均<0.05),且观察组显著高于对照组(P<0.05)。2组患眼视野平均缺损均较治疗前降低(P均<0.05),光敏感度较治疗前增高(P<均0.05);且观察组视野平均缺损显著低于对照组(P<0.05),光敏感度显著高于对照组(P<0.05)。2组患眼视网膜中央动脉(central retinal artery,CRA)的收缩期峰值流速(peak systolic velocity,PSV)、舒张末期血流速度(end diastolic velocity,EDV)等血流动力学指标均较前升高(P均<0.05),且观察组上述指标显著高于对照组(P均<0.05);2组患眼CRA的阻力指数(resistance index,RI)较前降低(P均<0.05),且观察组显著低于对照组(P<0.05)。结论黄芩苷辅助治疗青光眼可取得更为满意的治疗效果,可改善眼血流动力学参数,有助于降低眼压,提高矫正视力。

黄芩苷对人结直肠癌SW620细胞凋亡及周期的影响

观察黄芩苷通过抑制人结直肠癌SW620细胞增殖的作用,并探讨其可能的作用机制。方法 组别分为空白组、对照组以及按照100,200,400,600,800,1,000μmol/L黄芩苷组划分,其中空白组未利用黄芩苷培养基,黄芩苷组使用黄芩苷培养,且分别为不同浓度,并进行结肠癌SW620细胞处理。经24小时处理,利用MTT法验证黄芩苷是否会对SW620细胞增殖活性带来影响;利用CCK-8法对细胞的增殖情况、凋亡情况进行检测。结果 组间比较,黄芩苷组和对照组比较,能够对SW620细胞增殖情况予以抑制,抑制情况和药物浓度有关,两者为正比关系;经流式细胞仪器检测结果分析,黄芩苷给药组细胞凋亡率显著升高,且在G1、G2期发生阻滞。结论 黄芩苷能够抑制人结直肠癌SW620细胞增殖,并促进其凋亡,且在G1、G2期可发生细胞周期阻滞。

黄芩苷铝HPLC检测方法的建立

为了探究测定黄芩苷铝含量的有效方法,试验先摸索了供试品前处理方法,将黄芩苷铝完全转化成黄芩苷后以黄芩苷为对照品,建立测定黄芩苷含量的高效液相色谱(HPLC)检测方法,绘制标准曲线,并考察该方法的系统适用性、准确度、精密度、重复性、耐用性和稳定性,最后利用该方法对样品含量进行检测。结果表明:供试品前处理条件为向黄芩苷铝中加入乙腈-0.05%磷酸溶液(40∶60)并超声30 min;液相色谱条件,色谱柱为Hypersil ODS色谱柱(150 mm×4.6 mm, 5μm),流动相为乙腈-0.05%磷酸水溶液(30∶70),检测波长为278 nm,流速为1.00 mL/min,柱温为30℃,进样量为10μL。在该条件下,黄芩苷在20~320μg/mL内线性关系良好(R^(2)=0.999 9),精密度高、重复性好,平均回收率为101.24%,供试品溶液在36 h内稳定。在测试范围内,柱温、流速和色谱柱对样品中黄芩苷的含量测定无影响。说明建立的黄芩苷铝HPLC检测方法操作简单,可靠性高,可以用作黄芩苷铝含量的测定。

黄芩苷抗结直肠癌药理学作用研究进展

结直肠癌是常见的消化道肿瘤之一,目前其临床治疗手段中手术治疗占主要地位,但因其易复发及易侵袭转移,且常规治疗毒副作用较大等缺陷,治疗效果不佳。黄芩苷是从中药黄芩中提取出的重要有效成分,其生物活性显著,具有消炎、抗血栓形成、缓解哮喘、抗癌、降糖等药理学作用。通过梳理并总结相关文献,发现黄芩苷抗结直肠癌的药理学研究主要集中在调控癌细胞增殖、凋亡、侵袭转移、分化等方面,为黄芩苷在结直肠癌预防及临床中的应用提供参考。

基于5-LOX/LTB4信号通路探讨黄芩苷/栀子苷对PM_(2.5)暴露致血管内皮功能障碍的干预作用及其机制

目的基于5-LOX/LTB4信号通路探究黄芩苷/栀子苷(BC/GD)对PM_(2.5)诱导的血管内皮功能障碍的改善作用及其机制。方法利用离体肌张力描记技术测定BC/GD对不同状态下血管环张力的影响。将32只大鼠随机分为对照组、PM_(2.5)组、30 mg·kg^(-1)BC/GD组和60 mg·kg^(-1)BC/GD组,利用气管滴注法构建PM_(2.5)暴露模型,持续2个月,造模1个月后灌胃给予对应药物,持续1个月,末次给药后,HE染色观察肠系膜动脉血管内皮状态;化学发光法检测肠系膜动脉活性氧(ROS)水平;硝酸还原酶法检测一氧化氮(NO)水平;ELISA法检测血清炎症因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、转化生长因子β1(TGF-β1)、白三烯B4(LTB4)水平;Western blot法检测5-脂氧酶(5-LOX)、内皮细胞一氧化氮合酶(eNOS)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)蛋白表达。结果BC/GD对基础状态的肠系膜动脉血管环张力无明显影响,但能明显舒张由5-HT预收缩的血管环;一氧化氮合酶抑制剂L-NAME、环氧合酶抑制剂INDO或L-NAME+INDO均能明显抑制BC/GD的血管舒张作用,但L-NAME的抑制作用更明显;50、100 mg·mL^(-1)PM_(2.5)能降低血管环对乙酰胆碱(ACh)的舒张血管效应,而BC/GD能明显改善PM_(2.5)诱导的舒张效应减弱。与对照组相比,PM_(2.5)组大鼠肠系膜动脉内皮完整性严重受损、内皮皱缩,大鼠血清中TNF-α、IL-1β、IL-6、LTB4水平显著升高、TGF-β1水平显著降低,肠系膜动脉组织中5-LOX、iNOS蛋白表达明显增加,eNOS蛋白表达降低,ROS水平升高,NO水平降低。与PM_(2.5)组相比,BC/GD能改善内皮损伤程度和完整性,可显著降低血清中TNF-α、IL-1β、IL-6、LTB4水平,升高TGF-β1水平;明显降低肠系膜动脉5-LOX、iNOS表达,升高eNOS蛋白表达;降低ROS水平,升高NO水平。结论BC/GD可通过抑制5-LOX/LTB4信号通路表达,从而降低ROS水平,抑制炎性损伤,上调eNOS表达,下调iNOS表达,升高血管中NO水平,改善PM_(2.5)诱导的血管内皮功能障碍。

酪蛋白胶束/聚乳酸静电纺丝复合纤维膜性质及其对黄芩苷的负载性能研究

黄芩苷是一种黄酮类化合物,具有抗炎、抑菌、抗病毒等多种药理作用,但其水溶性差,生物利用度低。为了改善黄芩苷的水溶性,该文利用静电纺丝技术制备负载黄芩苷的酪蛋白胶束/聚乳酸复合纤维膜,研究了其微观结构、疏水性、溶解特性和体外释放性等。结果显示,黄芩苷的添加对纤维微观结构影响不大。随着酪蛋白胶束添加比例的增加,纤维直径减小,成纤性能下降,当其与聚乳酸质量比达到2∶1时,纤维直径最小,成纤能力较好。红外光谱和X射线衍射结果分析表明,黄芩苷被包封在纤维内部。酪蛋白胶束改善了聚乳酸纤维膜的溶胀性和降解率。随着酪蛋白胶束添加量的增加,纤维膜亲水性增强,降解率增大,溶胀率减小,溶胀时间缩短。体外释放结果表明,酪蛋白胶束-聚乳酸纤维膜对黄芩苷有良好的控释效果。研究结果可为黄芩苷的负载提供参考依据。

黄芩苷改善睡眠障碍引起的认知功能障碍机制的研究进展

黄芩苷(BA)是从黄芩根部分离出来的黄酮类化合物,具有抗炎、抗氧化、抗凋亡及显著的神经保护作用,且安全性高、副作用小。BA可用于防治中枢系统疾病所致的认知功能障碍、学习记忆缺陷等。睡眠障碍(SD)常伴随认知功能障碍,BA可改善上述症状,但机制尚不明确。本文就BA药理作用及其在SD导致的认知功能障碍中的研究进展进行综述,以期为BA的开发和利用以及认知功能障碍的中药治疗提供新的思路。

黄芩苷对犬抗氧化能力和免疫功能的影响

本试验旨在研究饲粮中添加黄芩苷(baicalin)对犬抗氧化能力和免疫功能的影响。试验采用单因素完全随机设计,将18只2周岁的成年雄性泰迪犬[体重(5.62±0.53)kg]随机分为3组,每组6个重复,每个重复1只。对照组(CON组)饲喂基础饲粮,试验组分别在基础饲粮中添加10和20 mg/kg的黄芩苷。预试期7 d,正试期23 d。结果表明:与对照组相比,饲粮中添加20 mg/kg的黄芩苷极显著提高了血清总抗氧化能力(T-AOC)和超氧化物歧化酶(SOD)活性(P<0.01),极降低了血清丙二醛(MDA)含量(P<0.01);饲粮中添加黄芩苷对血清总蛋白(TP)、肌酐(Cr)、尿素氮(UN)、肾损伤分子-1(KIM-1)含量及谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)活性没有显著影响(P>0.05);饲粮中添加20 mg/kg的黄芩苷显著或极显著提高了血清免疫球蛋白A(IgA)和免疫球蛋白M(IgM)含量(P<0.05和P<0.01),极显著提高了肠道淋巴结细胞中CD4/CD8(P<0.01);饲粮中添加黄芩苷提高了肠道淋巴结细胞中CD3、CD4和CD8细胞数量、巨噬细胞富集程度和Toll样受体4(TLR4)蛋白表达。综上所述,本试验条件下,饲粮中添加20 mg/kg黄芩苷能够有效地提高犬的抗氧化能力和免疫功能,并且不会对犬的代谢产生负面影响。

黄芩苷通过抑制IL1R2表达对A549肺癌细胞增殖、迁移及凋亡的作用及机制研究

目的探究黄芩苷通过抑制IL1R2在A549肺癌细胞增殖、迁移及凋亡中的作用,并探究可能作用机制。方法体外培养A549肺癌细胞,转染si-IL1R2质粒分为对照组、低表达IL1R2组、黄芩苷+低表达IL1R2组、过表达IL1R2组、黄芩苷+过表达IL1R2组,对照组正常培养细胞,含有黄芩苷的实验组采用200mol/L的黄芩苷处理24h。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法测定IL1R2表达;采用CCK-8法、Transwell、流式细胞法分别观察细胞增殖、迁移能力及凋亡情况;采用Western Blotting法观察各组白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-ɑ(TNF-ɑ)表达。结果IL1R2低表达组干扰后A549细胞的增殖受到抑制,IL1R2过表达组则明显促进细胞增殖;低表达IL1R2组较对照组细胞迁移个数降低,过表达IL1R2组细胞迁移个数较对照组升高,与低表达IL1R2组细胞迁移个数相比,黄芩苷+低表达IL1R2组细胞迁移个数降低明显;与过表达IL1R2组迁移个数相比,黄芩苷+过表达IL1R2组细胞迁移个数降低;与对照组相比,过表达IL1R2组、黄芩苷+过表达IL1R2组细胞凋亡率均降低;黄芩苷+过表达IL1R2组较过表达IL1R2组细胞凋亡率升高;低表达IL1R2组IL-1β、IL-6、TNF-α等细胞因子表达明显下降,过表达IL1R2组各组细胞因子表达明显升高,黄芩苷+过表达IL1R2组各组细胞因子表达较过表达IL1R2组降低。结论黄芩苷通过抑制IL1R2表达抑制肺癌细胞的A549肺癌细胞增殖、迁移,促进肺癌细胞凋亡。

黄芩苷通过ROS依赖性调节RhoA/ROCK通路保护氯化钴诱导心肌细胞损伤的实验研究

目的:本研究旨在探讨黄芩苷(Baicalin)对氯化钴(CoCl_(2))诱导H9c2心肌细胞缺氧损伤的作用机制。方法:采用CoCl_(2)建立心肌细胞缺氧损伤模型,并分别加入不同浓度的黄芩苷培养。将正常氧培养设置为对照组,CoCl_(2)培养H9c2心肌细胞设置为CoCl_(2)组;Baicalin、Y27632(Rho激酶抑制剂)预处理的H9c2缺氧心肌细胞设置为CoCl_(2)+Baicalin组、CoCl_(2)+Y27632组、CoCl_(2)+Baicalin+Y27632组。通过细胞毒性检测试剂盒(CCK8)检测细胞活性;荧光探针测定细胞中活性氧(ROS)的表达;WST-8检测心肌细胞超氧化歧化酶(SOD)活力;TBA法测定丙二醇(MDA)浓度;同时采用WesternBlot方法分析RhoA、ROCK1、ROCK2、TNF-α、IL-1β蛋白表达情况。结果:处理H9c2细胞24 h后,1 000μmol/L的CoCl_(2)和75μmol/L黄芩苷对治疗心肌细胞缺氧损伤具有较好的细胞活力。CoCl_(2)组细胞活性明显低于对照组,加入黄芩苷后可显著提高细胞活性(P<0.05);与对照组相比,CoCl_(2)组心肌细胞可上调ROS、MDA表达,下调SOD活力,升高RhoA、ROCK1、ROCK2、TNF-α、IL-1β蛋白表达水平,加入Baicalin后可逆转上诉蛋白的表达水平;与CoCl_(2)组相比,CoCl_(2)+Baicalin可抑制ROS、MDA的表达,上调SOD含量,下调RhoA、ROCK1、ROCK2、TNF-α、IL-1β蛋白表达水平,而加入Y27632(Rho激酶抑制剂)后则可显著增强Baicalin带来的保护作用。结论:Baicalin可减轻CoCl_(2)诱导H9c2心肌细胞缺氧损伤的炎症、氧化应激反应,其机制与抑制ROS依赖性RhoA/ROCK通路有关。

黄芩苷对慢性萎缩性胃炎小鼠JAK1、STAT3表达的影响

【目的】通过网络药理学和动物实验探讨黄芩苷对慢性萎缩性胃炎小鼠胃黏膜的修复机制。【方法】(1)应用网络药理学预测分析黄芩苷治疗慢性萎缩性胃炎的潜在关键靶点。(2)动物实验:将40只C57BL/6N小鼠随机分为正常组、模型组、维酶素组、黄芩苷组,每组10只。除正常组,其他3组小鼠采用N-甲基-N’-硝基-N-亚硝基胍(MNNG)灌胃结合饥饱失常法构建慢性萎缩性胃炎模型。给药结束后,采用苏木素-伊红(HE)染色法观察胃黏膜组织病理变化,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清中胃泌素(GAS)和前列腺素E2(PGE2)水平变化,采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)法和蛋白免疫印迹(Western Blot)法检测胃黏膜组织中Janus酪氨酸激酶1(JAK1)、信号转导和转录激活子3(STAT3)的mRNA与蛋白表达水平。【结果】网络药理学结果显示,黄芩苷与核心靶点JAK1、STAT3可自发结合。动物实验结果显示:与正常组比较,模型组小鼠胃黏膜组织发生萎缩,腺体排列紊乱,存在大量淋巴细胞,胃黏膜细胞凋亡指数显著升高(P<0.05),血清中GAS与PGE2水平显著降低(P<0.05),胃黏膜组织中JAK1、STAT3的mRNA与蛋白表达水平显著升高(P<0.05);与模型组比较,维酶素组与黄芩苷组小鼠胃黏膜病变减轻,腺体排列相对整齐,结构较完整,胃黏膜细胞凋亡指数显著降低(P<0.05),血清中GAS与PGE2水平显著升高(P<0.05),胃黏膜组织中JAK1、STAT3的mRNA与蛋白表达水平显著降低(P<0.05);黄芩苷组上述各指标与维酶素组比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。【结论】黄芩苷可有效修复慢性萎缩性胃炎小鼠胃黏膜病变,其机制可能与下调JAK1、STAT3的mRNA及蛋白表达有关。

黄芩苷在肺动脉高压中的研究进展

肺动脉高压是一种以肺动脉血管阻力持续升高、肺血管阻塞、血管重构、右心室肥厚、功能衰竭为特征的疾病,发病机制包括肺动脉内皮细胞功能障碍和肺动脉平滑肌细胞增殖,目前迫切需要新的治疗药物和方法。研究表明,黄芩苷对肺动脉高压的治疗有效,但具体作用机制不明。本文综述了黄芩苷药代动力学及对肺动脉高压的潜在治疗机制,主要包括抗炎反应、稳定细胞外基质、减轻氧化应激、抑制肺平滑肌细胞增殖、内皮-间质转化等,为中药治疗肺动脉高压提供依据。

黄芩苷体外抗IBV QX株的作用研究

为研究黄芩苷体外抗禽传染性支气管炎病毒(Avian infectious bronchitis virus,IBV)QX株的效果,试验对IBV进行复壮与扩繁,制备原代鸡胚肾(CEK)细胞,并测定IBV对CEK细胞的TCID50和黄芩苷对CEK细胞的最大无毒浓度(MNTC);在MNTC基础上采用CCK法测定不同浓度黄芩苷对IBV的有效抑制率,观察不同浓度黄芩苷对IBV导致的CEK细胞的细胞病变效应(CPE)的抑制情况,并采用qPCR法测定不同浓度黄芩苷对IBV N基因相对表达量的影响。结果表明:成功复壮并扩繁了IBV,其未被其他病毒污染,对CEK细胞的TCID50为1×10^(-4.75)/0.1 mL;黄芩苷对CEK细胞的MNTC为9.75 mg/L;该浓度黄芩苷对IBV的有效抑制率最高,为64.03%,能有效减轻IBV对CEK细胞的CPE;各浓度黄芩苷均可以极显著降低CEK细胞中IBV N基因相对表达量(P<0.01)。说明黄芩苷对CEK细胞的MNTC为9.75 mg/L,该浓度黄芩苷具有较好的体外抗IBV QX株的作用。

不同浓度黄芩苷对奶牛瘤胃体外发酵参数和养分降解率的影响

试验旨在通过体外瘤胃发酵法研究不同的黄芩苷添加剂量对奶牛瘤胃体外产气量、发酵参数、养分降解率的影响。选取3头体重为650±50 kg、安装永久瘘管的荷斯坦奶牛作为瘤胃液的供体动物,试验共分4组(每个时间点各3个重复),黄芩苷的添加浓度分别为0(对照组A)、0.1(试验组B)、1(试验组C)、2 g·kg^(-1)(试验组D),体外发酵2 h、6 h、12 h、24 h、48 h后分别测定产气量、挥发性脂肪酸(VFA)、氨态氮(NH_(3)-N)、pH、干物质(DM)降解率、中性洗涤纤维(NDF)降解率、酸性洗涤纤维(ADF)降解率。结果表明:(1)随着发酵时间的增加,各组产气量呈上升趋势,各试验组各时间点产气量均显著低于对照组A(P<0.05)。(2)添加黄芩苷后,2 h、48 h各试验组发酵底物的干物质降解率显著高于对照组A(P<0.05);6 h、12 h各试验组中性洗涤纤维降解率高于对照组A(P<0.05);2~24 h各试验组发酵底物的酸性洗涤纤维降解率高于对照组A(P>0.05),其中1 g·kg^(-1)浓度的效果最好。(3)在整个发酵周期内各试验组各时间点的pH均高于或与对照组A相近,随着黄芩苷浓度的增加pH有先升高后降低的趋势;发酵12 h试验组C、试验组D的乙酸、TVFA含量均显著高于对照组A(P<0.05),在发酵2 h、12 h试验组B、试验组C的丁酸含量高于对照组A(P<0.05)。(4)发酵48 h内各试验组的NH 3-N含量均低于对照组A(P>0.05)。综上所述,通过各项指标分析比较,在本试验条件下,奶牛体外瘤胃发酵中适宜的黄芩苷添加浓度为1 g·kg^(-1)。

酸响应性黄芩苷脂质体抑制肿瘤细胞增殖及其免疫增敏的研究

目的制备一种酸响应性负载黄芩苷的免疫脂质体(baicalin-liposome-1,2-distearoyl-sn-glycero-3-phosphoethanolamine-poly(2-ethyl-2-oxazoline,BA-LP-PEOz),旨在利用肿瘤特异性的药物递送和化疗增敏作用,提高黄芩苷的抗肿瘤治疗效率,从而实现高效且不良反应少的治疗目标。方法负载黄芩苷的免疫脂质体由薄膜分散法制备而成,并测定该脂质体的理化性质,同时采用肺癌A549细胞进行体外细胞生长抑制评价,采用RAW264.7巨噬细胞进行体外细胞生长增殖评价。结果BA-LP-PEOz的包封率为(84.3±0.3)%,粒径为(135±5)nm,电位为(-14.9±1.4)mV。当选择合适的给药浓度(黄芩苷质量浓度为100μg·mL^(-1))时,BA-LP-PEOz不仅对A549肺癌细胞具有较强的直接杀伤作用,也可以促进RAW264.7巨噬细胞的增殖,增强巨噬细胞极化为M1型。结论BA-LP-PEOz使黄芩苷发挥了化疗及免疫治疗肿瘤的双重功效,提高黄芩苷的抗肿瘤治疗效率。

黄芩苷预治疗对小鼠红细胞输注模型中IgG和IgM抑制作用的研究

目的探讨采用黄芩苷预治疗对红细胞免疫的预防性效果。方法采用人类红细胞与佐剂脂多糖(LPS)联合输注C57BL/6小鼠建立红细胞输注模型。设立(1)红细胞输注模型组;(2)未处理对照组:仅注射PBS;(3)黄芩苷预治疗组:在红细胞输注模型建立前一周每天给予小鼠黄芩苷(250 mg/(kg·day))治疗;(4)地塞米松(DEX)对照组:在红细胞输注模型建立前一周每天给予地塞米松(5 mg/(kg·day))治疗。通过流式细胞术检测小鼠血清中IgG和IgM的表达量,并监测小鼠脾脏中的CD4 T细胞和B细胞变化。结果与模型组相比,黄芩苷预治疗能显著降低血清IgG(24823.0±1452.2 vs 15180.0±1172.5,P<0.05)和IgM(194206±2868.6 vs 112287±9741.5,P<0.05)的生成。与模型组相比,黄芩苷预处理组小鼠脾脏中CD25表达明显下降(1006.0±206.1 vs 548.4±19.1,P<0.05),B细胞比例显著降低(31.16%±6.06%vs 15.69%±4.59%,P<0.05),脾脏大小无显著差异[平均长度:(10±0.5)mm vs(12±0.5)mm,P>0.05]。结论黄芩苷能够抑制红细胞免疫,表现为抑制小鼠血清中IgG和IgM的生成,同时抑制脾脏中B细胞增殖和降低CD4 T细胞活化。