基于面积归一化法对饲料中黄霉素总残留量的研究

建立了一种结合不同色谱及质谱技术测定饲料中黄霉素总残留量的方法。通过高效液相色谱对黄霉素标准混合物进行有效分离,结合液相色谱—串联质谱对黄霉素A化合物进行定量,并利用高分辨四极杆飞行时间质谱确定结果的准确性和唯一性,最终基于面积归一化法得出精确结果。黄霉素标准品经Platisil 5μm ODS色谱柱(250.0 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈和20 mmol/L(pH 5.0)乙酸铵溶液为流动相进行等度分离。同时,饲料基质经体积分数0.1%甲酸甲醇溶液提取,采用Oasis PRiME HLB通过式固相萃取对提取液进行净化。目标物经Atiantis T_(3)色谱柱(100.0 mm×2.1 mm,3μm),以乙腈和5 mmol/L(pH 5.0)乙酸铵溶液为流动相进行梯度分离,在负离子(ESI-)多反应监测(MRM)模式下进行定量分析。考查了不同高效液相色谱条件对黄霉素5种活性成分分离效果的影响,同时研究了不同提取溶剂和净化方式对黄霉素A化合物回收率的作用并优化其质谱条件。所建立的方法确保黄霉素5种活性成分完全分离,面积归一化法结果表明黄霉素A所占黄霉素混合物的比例为86.2%,RSD为0.66%。同时,该方法确保黄霉素A在10.0~1000.0 ng/mL范围内线性关系良好,线性相关系数(R^(2))大于等于0.9986。不同饲料基质中黄霉素A的低、中、高加标回收率为69.69%~88.60%,RSD为0.96%~3.38%,回收率稳定、重现性良好。经折算,各类饲料基质中,黄霉素抗生素的总加标回收率为80.66%~102.55%。统计结果表明,所建立的方法普适性广,准确性强,灵敏度高,适用于饲料中黄霉素总残留量的精确定量分析,解决了国内外对黄霉素检测不准确的技术问题。

高效液相色谱法检查不同厂家黄霉素中黄霉素A的相对量

用高效液相色谱法检查不同厂家生产的黄霉素标准品(相当于原料药)和预混剂中黄霉素A的相对量,色谱柱为YMC-Pack ODS-A C_(18)S-5μm,12nm,250mm×4.6mm,流动相为0.2％甲酸铵溶液(pH 4.9)∶乙腈(55∶45),检测波长258nm,流速0.5mL/min,进样量10μL。黄霉素组分1、组分2、组分3和组分4峰对黄霉素A峰的相对保留时间分别约为0.9、1.1、1.2、1.3。本方法操作简便,分离度好,结果准确可靠。

灰黄霉素的研究进展

灰黄霉素(Griseofulvin)是从灰黄青霉(Penicillium griseofulvin)培养液中得到的一种含氯代谢产物,是一种非多烯类的抗真菌抗生素.我国目前投产的灰黄霉素产生菌的发酵单位已达世界领先水平,而且使用原料简单,产品成本低,在国际市场上有很强的竟争力.概述了灰黄霉素的研究与应用进展,包括通过耐前体变株的筛选可获得灰黄霉素高产株;培养基中氯化物无机盐对该化合物的代谢有较重要的影响;采用超声波技术进行提取可缩短提取时间,提高提取率;由于灰黄霉素的溶解度很低,可对灰黄霉素的超细化处理做成喷雾剂或缓释药物.灰黄霉素不仅是一种普遍应用于临床治疗皮肤和角质层真菌感染的抗生素,而且在农业植物保护方面有着良好的应用前景.

超临界流体溶液快速膨胀法制备灰黄霉素微细颗粒

研究了通过超临界流体溶液快速膨胀 (RESS)技术制取灰黄霉素微细颗粒的过程 .在自行设计的实验装置上研究了RESS过程各操作变量对所制得的灰黄霉素颗粒粒度的影响 .研究结果表明 。

仔猪饲粮添加酸化剂及黄霉素对生产性能、消化道pH和微生物数量的影响

本试验研究了酸化剂的不同添加剂量及其与黄霉素合用对仔猪生产性能、消化道pH和微生物数量的影响。试验采用 3× 2 +1因子设计。在玉米 豆粕型基础饲粮中添加乳酸宝 (美国Kemin公司生产的复合酸化剂 ) 0 ,1.5 ,3kg/t或黄霉素 0或 10g/t。另设一正对照组 ,基础饲粮中添加乳酸宝 5kg/t。 112头平均体重为 7.9± 0 .90 (kg)的长白×荣昌杂交仔猪随机分配到 7个处理中 ,每处理 4个重复 (圈 ) ,每重复 (圈 ) 4头猪。试验共进行 4周。结果表明 ,添加乳酸宝降低仔猪采食量 (P <0 .0 5 ) ,提高饲料利用率 (P <0 .0 5 ) ,降低胃pH (P <0 .0 5 )和十二指肠pH(P <0 .0 1) ,减少空肠、盲肠和直肠大肠杆菌数量 (P <0 .0 5 ) ,降低腹泻程度 (P <0 .0 5 )。添加黄霉素改善饲料利用率(P <0 .0 5 ) ,降低腹泻指数 (P <0 .0 5 )。乳酸宝与黄霉素合用对各项指标均无进一步改善效果。若以生产性能为主要标识 ,乳酸宝在饲粮中的适宜用量为 1.5kg/t。

应用二次回归正交旋转组合设计优化黄霉素发酵培养基

在摇瓶条件下,采用二次回归正交旋转组合设计,优化黄霉素发酵培养基各组份的配比。优化结果表明:在葡萄糖、淀粉、硫酸铵、硫酸镁、碳酸钙的浓度为1%、3.75%、0.25%、0.015%、0.3%时,发酵效价最高。

灰黄霉素与牛血清白蛋白结合反应的荧光光谱研究

用荧光光谱法研究了在模拟人体体液条件下,灰黄霉素与牛血清白蛋白结合反应的荧光光谱和紫外-可见吸收光谱,发现灰黄霉素对牛血清白蛋白有较强的荧光猝灭作用,且其紫外吸收光谱和牛血清白蛋白的荧光发射光谱有一定程度的重叠.由Fòrste非辐射能量转移理论和热力学公式,得出了结合反应的结合常数、结合位置和结合过程基本热力学性质的变化等.

超临界溶液快速膨胀法制备灰黄霉素微粒

采用含有夹带剂丙酮的超临界溶液快速膨胀法制备灰黄霉素超细颗粒。所得微粒粒径约1μm。减小喷嘴孔径、提高夹带剂浓度或降低预膨胀温度均可使微粒粒径减小。

黄霉素对鲤鱼生产性能的影响

黄霉素(Flavomycin)商品名富乐旺,是一种抗生素类促生长剂黄磷脂素,对许多消化道内革兰氏阳性菌有显著的抗菌作用.为研究其在鲤鱼生长中的防病促生长效果,我们于1996年8月26日至10月18日进行了鲤鱼饲喂黄霉素的试验.

黄霉素对尼罗罗非鱼生长、微生态和免疫特性的影响

为了对黄霉素在水产养殖中的应用提供依据,将180尾平均质量3.90 g左右的健康尼罗罗非鱼随机分为2组,每组3个重复,每重复30尾,一组饲喂基础日粮(对照组),另一组在基础日粮中添加4 mg/kg黄霉素,以研究黄霉素对尼罗罗非鱼生长、微生态和免疫特性的影响。结果表明,与对照组相比,饲料中添加黄霉素使尼罗罗非鱼日增质量和特定生长率分别提高了11.11%(P<0.05)和5.38%(P<0.05),蛋白质效率和存活率均有提高的趋势,饲料系数有降低的趋势,但差异均不显著(P>0.05);黄霉素使尼罗罗非鱼肠道细菌数量显著降低(P<0.05),对皮肤和鳃细菌数量以及皮肤、鳃和肠道的菌群组成均无显著影响(P>0.05);黄霉素显著提高了白细胞吞噬百分率(P<0.05),对白细胞吞噬指数、血清和体表粘液的溶菌酶活性、红细胞C3b受体花环百分率和T淋巴细胞活性E花环百分率均无显著影响(P>0.05)。说明黄霉素提高了尼罗罗非鱼的生长性能和机体免疫力。

超临界溶液快速膨胀法制灰黄霉素微粒的预膨胀

用均相成核理论分析了超临界ＣＯ２ 快速膨胀法（ＲＥＳＳ）制备灰黄霉素微细颗粒过程中的预膨胀操作。指出在类似于灰黄霉素这样在反常冷凝区进行的ＲＥＳＳ过程，预膨胀段的加热不会导致溶质灰黄霉素在预膨胀段提前析出。

黄霉素和大蒜素对鲫鱼生长性能及生理状况的影响

在基础饲料中分别添加10 mg/kg黄霉素和200 mg/kg大蒜素,研究其对鲫鱼生长性能、血清生化指标及抗氧化能力的影响。结果表明:黄霉素和大蒜素对鲫鱼的生长性能无显著影响(P>0.05)。大蒜素组血红蛋白显著高于其他两组(P<0.05),血清白蛋白、球蛋白、甘油三酯显著高于黄霉素组(P<0.05),血清葡萄糖显著低于对照组(P<0.05),血清总胆固醇、肝胰脏SOD活性显著高于对照组(P<0.05);大蒜素可改善其生理状况。

牛至油和黄霉素在奶牛生产中应用的研究

牛至油(Oiloriganum)是植物牛至(Oregano)的提取物,为一种绿色、高效、安全的添加剂;黄霉素(Flavomycin)是一种动物专用的添加剂;莫能菌素(Monensin)是一种聚醚类抗生素。牛至油和黄霉素联合应用即添加剂I,牛至油和莫能菌素联合应用即添加剂II。在每千克饲料中,添加剂I按牛至油25mg/kg,黄霉素8mg/kg剂量添加;添加剂II按牛至油25mg/kg,莫能菌素50mg/kg剂量添加,用于20头中国荷斯坦奶牛(ChinaHolstein)的饲养中,进行了60d的对比饲养试验。研究结果表明,在整个试验期间,与对照组相比,添加剂I组和添加剂II组的平均乳脂率分别提高了14.62%和14.20%,添加剂I组和添加剂II组的平均蛋白率分别提高了12.50%和11.92%,添加剂I组和添加剂II组的乳糖率分别降低了2.58%和1.92%,添加剂I组和添加剂II组的干物质分别提高了5.74%和5.84%,添加剂I组和添加剂II组牛奶质量明显优于对照组,差异显著(P<0.05)。

女贞子、五味子、四君子汤、大豆黄酮和黄霉素对蛋鸡脂质稳定性的影响

试验选用51周龄海兰褐蛋鸡144只,随机分为6个处理组,试验1、2和3组分别添加1%的女贞子、五味子和四君子汤,试验4组添加10mg/kg的大豆黄酮,试验5组添加5mg/kg黄霉素,试验6组为对照组。研究中草药及大豆黄酮对蛋鸡脂质稳定性的影响及其机理,同时比较中草药、大豆黄酮和黄霉素的效果。设预试期1周,正试期为6周。结果表明:1)添加3种中草药和大豆黄酮均有降低蛋鸡组织、血清或蛋黄中脂质过氧化物含量的作用,其中3种中草药的作用明显优于大豆黄酮和黄霉素(P<0.05),黄霉素的作用不明显;2)中草药、大豆黄酮和黄霉素对超氧化物歧化酶活性没有显著提高(P>0.05),但能显著提高谷胱甘肽还原酶活性(P<0.05);3)3种中草药和大豆黄酮均可显著提高蛋鸡组织或血清中谷胱甘肽含量(P<0.05)。结论为:3种中草药和大豆黄酮均有增强蛋鸡抗氧化水平和脂质稳定性的作用;3种中草药的抗氧化作用优于大豆黄酮;黄霉素对蛋鸡的抗氧化机能没有影响。

复合有机酸和黄霉素对肉鸡生产性能及肠道微生态的影响

选180只1日龄艾维茵肉鸡,随机分为3个处理,每个处理6个重复,每个重复10只鸡,试验期42天,研究复合有机酸和黄霉素对肉鸡生产性能、养分利用率、胃肠道酸度和微生物的影响,比较复合有机酸与黄霉素作用效果。结果表明:①饲粮添加150mg/kg黄霉素使肉鸡0～21日龄日增重提高6.63%(P<0.05);0.2%酸化剂使肉鸡22～42日龄日增重提高7.55%,料肉比降低3.96%;②酸化剂能显著提高22～42日龄肉鸡饲粮的钙磷利用率,而黄霉素有降低肉鸡22～42日龄饲粮钙磷利用率的趋势;③黄霉素和酸化剂能不同程度降低42日龄肉鸡盲肠内容物的pH值;添加酸化剂使肉鸡42日龄直肠大肠杆菌和乳酸杆菌分别显著增加12.10%和24.29%(P<0.05)。本试验结果表明,复合有机酸在改善肉鸡生产性能和胃肠道微生态效果方面与抗生素相当。

灰黄霉素在含共溶剂丙酮的超临界CO_2中溶解度的测定和关联

动态法测定了灰黄霉素在不同的操作温度、压力以及共溶剂丙酮浓度下在超临界CO2中的溶解度。用修正的PR状态方程关联了三元系统的溶解度模型,效果较好。

黄霉素和甘露寡糖对奥尼罗非鱼的生长性能及血清非特异性免疫的影响

本研究分两个试验考察饲料中添加黄霉素和甘露寡糖对奥尼罗非鱼(Oreochromis niloticus×O.aureus)生长性能、营养物质消化率及血清非特异性免疫的影响。试验Ⅰ以平均初重(1.00±0.00)g奥尼罗非鱼为试验对象,在基础饲料(对照组)中分别添加8 mg/kg黄霉素和5 g/kg甘露寡糖。结果表明,饲养8周后,添加8 mg/kg黄霉素和5 g/kg甘露寡糖,奥尼罗非鱼稚鱼增重率分别提高6.1%(P<0.10)和14.3%(P<0.05),饲料系数分别降低8.8%(P<0.05)和12.9%(P<0.05)。试验Ⅱ以平均初重(20.11±0.05)g奥尼罗非鱼为试验对象,试验设计与试验日粮同试验Ⅰ,饲养30 d后,添加黄霉素8 mg/kg和甘露寡糖5 g/kg,鱼体增重率分别提高10.2%(P<0.10)和19.2%(P<0.05),饲料系数分别降低10.2%(P<0.05)和13.4%(P<0.05);干物质消化率分别提高11.2%和12.9%(P<0.05),蛋白质消化率分别提高2.9%和3.4%(P<0.05);添加8 mg/kg黄霉素和5 g/kg甘露寡糖均显著提高血清碱性磷酸酶活性和溶菌酶活性(P<0.05)。研究表明,饲料中添加8 mg/kg黄霉素和5 g/kg甘露寡糖均可提高奥尼罗非鱼的生长性能、营养物质消化率和血清非特异性免疫。

灰黄霉素对尖孢镰刀菌抑制作用的研究

为进一步扩展灰黄霉素的农业应用范畴,选择采自甜瓜、黄瓜、西瓜、苦瓜、辣椒和西红柿的不同专化型的10株致病性尖孢镰刀菌作为试验对象,系统研究了灰黄霉素对尖孢镰刀菌的抑制作用。分别采用抑菌圈法和抑菌率法,测定灰黄霉素对不同寄主来源的尖孢镰刀菌的抑制作用,并显微观察灰黄霉素对尖孢镰刀菌菌丝生长的影响。结果表明,灰黄霉素对不同寄主来源的尖孢镰刀菌具有良好的广谱抑制作用,但对不同菌株抑制效果差异显著,其抑制中浓度IC50为0.42～2.81mM。尖孢镰刀菌经4mM灰黄霉素处理后,菌丝变得稀疏、畸形、膨大、扭曲,从而影响其生长。因此,灰黄霉素可用于开发防治作物枯萎病的新型生物农药。

黄霉素对生长缓慢的欧洲鳗促生长效果的研究

本文讨论了在配合饲料中添加不同剂量黄霉素对生长缓慢的欧洲鳗（Ａｎｇｕｉｕａａｎｇｕｉｌｌａ）仔鳗的促生长效果。试验结论：添加黄霉素的配合饲料对欧洲鳗有显著促生长作用。其适宜添加量为１０－１５ｐｐｍ，以添加１５ｐｐｍ为最佳，该组的增重比为１２１（对照组为１００），饵料系数为１．４５，经济效益最好。

灰黄霉素产生菌耐前体变株F－208的选育及其特性的研究

以灰黄霉素产生菌ＰｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍＰａｔｕｌｕｍＤ－７５６为出发菌株，通过紫外线＋氯化锂复合诱变获得了高度耐氯变株Ｆ－２０８，其孢子在含氯化物５％的固体培养基上仍正常萌发和生长，摇瓶发酵培养基氯化物浓度提高到２．０％时。其发酵单位较出发菌株提高１２．５％，同时该菌株仍保持着出发株所具备的优良发酵特性。