橄榄黑斑病病原菌的分离鉴定及防治药剂筛选

为明确引起潮州市橄榄黑斑病的病原菌种类,筛选有效防治药剂,对发病果实采用组织分离法进行了病原菌的分离与纯化,并结合形态学和分子生物学技术对病原菌进行鉴定。鉴定结果表明,引起橄榄黑斑病的病原菌为链格孢菌(Alternaria alternata)。通过菌丝生长速率法测定了14种杀菌剂对病原菌的抑菌效果,结果表明14种杀菌剂对链格孢菌均有抑制作用,其中3%中生菌素可湿性粉剂、80%克菌丹水分散粒剂、8%氟硅唑微乳剂和40%苯甲·嘧菌酯悬浮剂的抑菌效果较好,EC_(50)分别为1.267、1.207、1.100、0.944 mg·L^(-1)。田间防效测定结果表明,40%苯甲·嘧菌酯悬浮剂、8%氟硅唑微乳剂的防治效果显著,防效为68.58%、65.44%;而30%王铜、2%春雷霉素的防效较差,仅为10%左右。综上,推荐将8%氟硅唑微乳剂和40%苯甲·嘧菌酯悬浮剂2种药剂作为防控橄榄黑斑病的首选药剂。本研究可为橄榄黑斑病高效杀菌剂的筛选提供数据参考,并为其防控工作提供科学依据。

甘薯苗期黑斑病对薯苗生长的影响及药剂浸种对黑斑病的防治效果

为明确甘薯苗期黑斑病对薯苗生长的影响及25%肟菌·异菌脲悬浮剂浸种的防治效果,通过人工接菌和药液浸种试验,对各处理的种薯发芽、生长、产苗量及薯苗带菌率进行了调查。结果表明,种薯或基质带菌育苗,种薯发芽数与未接菌处理相比没有显著差异;不同浓度25%肟菌·异菌脲悬浮剂浸种对种薯发芽数也未见显著影响。与未接菌处理相比,种薯带菌和育苗基质带菌处理未药剂浸种时产苗量分别减少43.97%和59.82%。使用25%肟菌·异菌脲悬浮剂500 mg/L浸种时,种薯和基质带菌试验中千克种薯产苗分别为74.12株和69.56株,苗床接菌试验中产苗分别为126.92株和85.31株,均显著高于未药剂浸种的处理。调查发现,种薯或苗床带菌会使萌发的嫩芽受黑斑病菌感染,引起死苗、生长停滞和薯苗带菌,是产苗量减少的主要原因。25%肟菌·异菌脲悬浮剂浸种可减少薯苗发病,增加产苗量。

不同花生品种黑斑病抗性鉴定

通过田间自然病圃鉴定法对河南省新选育的20个花生品种进行黑斑病抗性鉴定,筛选抗黑斑病品种,为安阳市花生推广种植提供参考。结果表明,不同花生品种对黑斑病抗性存在明显差异,筛选获得高抗品种1个(豫花47号)、抗病品种2个(安花10号、开农31号)、中抗品种4个(周花8号、商花228号、豫花154号、豫花148号)、感病品种12个、高感品种1个(信花11号),未发现对黑斑病完全免疫的品种。豫花47号、安花10号、开农31号对黑斑病的抗性较好,可以在安阳市推广应用。

环境因子及栽培措施对核桃细菌性黑斑病的影响

为找出核桃黑斑病的发生与核桃品种、生长环境以及栽培措施之间的关系,调查了17个核桃品种的病情指数,生长地的海拔、地形坡度、降雨量、温度、郁闭度、地面覆盖率等环境因子,以及灌溉次数、防治次数、是否清园等栽培措施,采用主成分分析法和相关性方法分析了环境因子、栽培措施与核桃细菌性黑斑病发生的关系。结果表明:(1)根据17个核桃品种的病情指数得出中强特勒、辽核1号、西扶为抗病品种;(2)发现核桃黑斑病病情指数与郁闭度、防治次数和是否清园具有强相关性,郁闭度为正相关,防治次数和是否清园为负相关,平均温度、地面覆盖率与病情指数为负相关。(3)核桃黑斑病发病率与雨水为极显著正相关,与海拔高度为极显著负相关。建议在推广中应结合立地条件,合理布局,两树的间距需在6 m以上,郁闭度控制在0.6以下,并做好清园、灌溉和防治等树体管理工作,以减少核桃病害的发生。

陕西省核桃黑斑病新病原的鉴定及室内药剂筛选

分离田间红仁核桃(Juglans regia ‘Robert Livermore’)病叶上的黑斑病病原细菌,通过科赫氏试验明确致病菌,并通过病原菌生化试验以及分子生物学技术明确病原菌的分类学地位。结果表明,从红仁核桃的田间核桃病叶中分离到23株菌落形态一致的细菌菌株,从中随机选取菌株进行科赫氏回接试验能引起红仁核桃叶片发病,通过生理生化表型试验,结合基于16S rDNA、gyrB、rpoD基因序列的多位点序列分析,将该病原鉴定为扁桃假单胞菌(Pseudomonas amygdali)。随后对12种药剂进行室内毒力测定,筛选出的6种药剂对该病原菌具有明显抑制作用。其中,四霉素抑菌效果最好,EC50为50.353 4 μg/mL,其他药剂抑菌效果表现为中生菌素>春雷霉素>噻菌酮>噻唑锌>氢氧化铜。

胡萝卜黑斑病人工接种鉴定体系建立及抗性种质资源筛选

黑斑病是胡萝卜最常见和最具破坏性的病害之一。通过对比不同菌液接种浓度、不同接种苗龄等条件对黑斑病病情指数的影响,筛选出胡萝卜黑斑病人工接种鉴定的最适宜条件,进而建立一套准确、稳定的人工接种鉴定体系。结果显示,菌液浓度为1×10^(4)个·ml^(-1),接种苗龄为8片真叶是最适宜的人工接种鉴定条件。利用此鉴定体系对94份胡萝卜材料进行黑斑病抗性鉴定,从中筛选出1份抗病材料(di=28.4),为胡萝卜抗黑斑病育种提供了重要抗源材料。

超声波联合水杨酸处理对冬枣采后黑斑病的防控研究

为探究超声波(ultrasound,US)联合水杨酸(salicylic acid,SA)处理对冬枣采后黑斑病的防控效果及其机理,该文使用US单独或联合SA处理冬枣果实,测定发病率、自然腐烂率,筛选出最佳的处理条件,并从其对病原菌的直接作用、诱导枣果实抗病性等方面对其防治机制进一步研究。结果表明,US单独或联合SA处理均能有效控制冬枣采后黑斑病,并显著降低自然腐烂率,且联合处理的防治效果显著优于单独处理(P<0.05)。对其作用机制进一步探究,US联合SA处理能显著抑制Alternaria alternata的菌丝生长(P<0.05)。US处理不仅能降低A.alternata在冬枣伤口处的附着量,还能使冬枣果皮表面形成微裂纹,从而利于SA与果实接触,促进SA向果实渗透。此外,US与SA联合处理可以显著提高果实过氧化物酶、多酚氧化酶、苯丙氨酸解氨酶、4-香豆酸辅酶A连接酶活性(P<0.05),促进冬枣中的总酚、黄酮、游离酚、结合酚的积累(P<0.05),诱导枣果实抗病性,提高枣果实对病害的防御能力,从而降低果实腐烂率。综上所述,US联合SA作为一种绿色安全的处理方式对于控制冬枣采后黑斑病具有良好的研究潜力和开发前景。

核桃细菌性黑斑病的发病规律及田间防治技术

核桃细菌性黑斑病,主要危害核桃果实,是核桃主要病害之一。尤其是河北省存在初夏易大旱导致树势衰弱、雨季雨水多病害发生重,冬季暖冬病虫害基数大等问题,极易引起核桃黑斑病大发生。因此,核桃种植户一定要随时关注核桃黑斑病的发生情况,引起足够重视,及早预防。

刺五加黑斑病生防细菌分离、筛选及室内防控效果

【目的】筛选对刺五加黑斑病具有生防潜力的细菌菌株。【方法】采用平板对峙法从健康刺五加根际土壤中分离筛选对刺五加黑斑病菌具有拮抗作用的菌株,基于形态学、生理生化鉴定及16S rDNA结合gyrB测序分析进行菌种分类鉴定,测定其抗菌谱;并通过叶面定殖及盆栽防效试验进一步评价该菌的生防潜力。【结果】分离得到419株细菌,其中,菌株YZ-375鉴定为贝莱斯芽孢杆菌Bacillus velezensis。菌株YZ-375对刺五加黑斑病菌的拮抗效果较好,无菌滤液的抑制率为65.85%,且对人参立枯丝核菌Rhizoctonia solani、人参链格孢菌Alternaria panax、人参茄腐皮镰孢菌Fusarium solani、人参核盘菌Sclerotinia ginseng、人参毁灭柱孢菌Cylindrocarpon destructans、五味子尖镰孢菌Fusarium oxysporum均具有拮抗效果,抑制率为69.21%~77.44%。在鲜叶定殖35 d后,菌株YZ-375菌量仍能保持在每克鲜叶103CFU。菌株YZ-375对刺五加黑斑病防效达72.31%,与枯草芽孢杆菌、苯醚甲环唑防效无显著差异。【结论】贝莱斯芽孢杆菌YZ-375具有良好的生防潜力,具有一定的开发应用前景。

砖红镰刀菌菌株Pa2对草莓黑斑病菌的抑制活性分析

【目的】探究内生真菌砖红镰刀菌(Fusarium lateritium)菌株Pa2对草莓黑斑病菌(Alternaria alternata)的抑制效果,为开发草莓黑斑病生防菌剂奠定理论基础。【方法】以草莓黑斑病为防治对象,通过菌丝生长速率法、孢子萌发法以及SYTOX绿菁染色法分析菌株Pa2对草莓黑斑病菌的菌丝生长、孢子萌发、细胞膜通透性的影响,通过离体果实与叶片测定砖红镰刀菌菌株Pa2对草莓黑斑病菌的防治效果,初步探讨砖红镰刀菌Pa2对草莓黑斑病的抑制活性与防效。【结果】平板对峙试验表明,菌株Pa2对草莓黑斑病菌生长抑制效果达80.96%。菌株Pa2上清液不仅可以破坏菌丝细胞膜,而且对病菌菌丝生长以及孢子萌发的抑制能力随上清液浓度的升高而增强。同时,菌株Pa2能够显著抑制草莓黑斑病菌在果实与叶片上的侵染能力。【结论】砖红镰刀菌菌株Pa2对草莓黑斑病菌具有很好的抑制作用,在草莓黑斑病的生物防治方面具有潜在的应用价值。

桃树叶部黑斑病病原菌鉴定及生物药剂田间防效评价

桃树叶部黑斑病是河北省桃树主要的叶部病害之一,致病病原菌种类较多,且与桃穿孔病早期症状相似,容易混淆。因此,明确河北省桃树叶部病害的致病病原菌有利于针对性地防治桃树叶部病害。本研究采集河北省桃树主要种植区典型的桃树病叶,分离纯化获得致病病原菌,利用柯赫氏法则验证病原菌的致病性。根据病原菌形态特征结合rDNA-ITS、EF-1α、Alt-al和RPB2多基因联合序列分析等分子生物学手段鉴定病原菌种类,分离获得39株菌株,明确引起河北省桃树叶部黑斑病的致病病原菌为链格孢菌(Alternaria alternata)。然后采用菌丝生长速率法测定8种杀菌剂对桃树叶部黑斑病致病菌的毒力,发现43%戊唑醇抑制效果最好,EC50值为17.661 mg/L;生物药剂16%多抗霉素、80%乙蒜素,EC50值分别为61.613和87.518 mg/L。基于室内毒力测定结果,对药剂进行了田间防治效果检测,43%戊唑醇对桃黑斑病田间防效为76.86%,生物药剂16%多抗霉素和80%乙蒜素田间防效分别为70.13%和64.93%。本研究筛选出了对防治链格孢菌具有针对性的有效药剂,其中生物药剂具有绿色无污染的特点,指导桃产业生产实践、构建不同商业桃园的绿色防控体系提供了依据。

黄芪根部黑斑病菌的分离鉴定及培养特征研究

旨在明确西北盐碱地种植的黄芪根部黑斑病的主要致病因子。首先采用组织分离法从发病部位分离病原菌,通过纯化和离体回接确定其致病菌,基于形态学及分子生物学方法进行鉴定,进一步研究不同培养条件对其生长繁殖的影响。结果表明,引起黄芪根部黑斑并导致断根腐烂的致病菌主要包括三线镰刀菌(Fusarium tricinctum)和腐皮镰刀菌(Fusarium solani)。F.tricinctum HT2生长的最适pH、NaCl含量、碳源及氮源分别为pH 8、NaCl 2.0%、甘露醇及蛋白胨,产孢的最适碳氮源分别为葡萄糖和酵母粉;F.solani HT4生长的最适条件分别为pH 8、NaCl 0.0%、蔗糖及酵母粉,产孢的最适碳氮源分别为蔗糖和酵母粉。

红心猕猴桃黑斑病气象条件分析及其评估模型

本研究基于2020—2022年在贵州米箩等20个红心猕猴桃基地进行的调查,以及同期气象资料分析,探讨了红心猕猴桃黑斑病发生与连阴雨天气的关联性。通过收集5月1日—7月31日逐日平均温度、降水量、平均相对湿度、平均低云量等气象资料,分析该期间连阴雨天气特征,结合黑斑病发生地、发病率,探讨了黑斑病与连阴雨天气的定量关系,确定了红心猕猴桃黑斑病发生的连阴雨天气指标阈值。研究发现,红心猕猴桃黑斑病与品种有较大的关系,且在5—7月红心猕猴桃果实生长期内,当连阴雨天气在15 d及以上,同时日平均温度在20.0℃及以上、日平均相对湿度在90%及以上、日平均低云量在0.90及以上时,红心猕猴桃果实极易感染黑斑病,该指标可以作为红心猕猴桃黑斑病发生的气象预警指标。根据这些发现,研究建立了红心猕猴桃黑斑病气象灾害评估模型,为红心猕猴桃生产开展黑斑病气象评估服务提供科学参考。

响应面法优化梨黑斑病生防链霉菌SZF-179发酵培养基

由链格孢引起的梨黑斑病是梨树生长及采后贮藏过程中的重要病害,其防治主要依赖于化学杀菌剂,亟需开发安全高效的生物杀菌剂。我们前期筛选获得的奥唐纳链霉菌Streptomyces odonnellii SZF-179菌株对梨黑斑病菌具有较强拮抗活性。为提高其发酵水平,探究其在梨黑斑病生物防控中的应用潜力,采用响应面法对该菌株的发酵培养基进行了优化。通过单因素试验确定最佳摇瓶发酵条件、最适碳氮源与无机盐组合,Plackett-Burman试验筛选出影响菌株发酵上清液抑菌活性的3个显著因子:麦芽糖、酵母膏和碳酸钙;再结合最陡爬坡试验、Box-Behnken设计及响应面法拟合显著因子与菌株发酵上清液抑菌率的非线性方程求解,得到优化的发酵培养基配方,其组成为麦芽糖15.86 g/L、土豆淀粉10.00 g/L、酵母膏8.15 g/L、芝麻粕5.00 g/L、硫酸铵0.50 g/L和碳酸钙0.20 g/L。此模型预测发酵液上清液50倍稀释液抑菌率为70.39%,验证值为70.51%,预测值与验证值之间吻合较好,较优化前发酵液上清液50倍稀释液抑菌率(30.70%)提高了约1.3倍。优化后发酵培养物对梨黑斑病的田间防治效果达到61.21%,并使梨树的落叶率降至14.56%,显著低于对照的44.25%。本研究为新型绿色高效梨黑斑病生物杀菌剂产品的研制提供重要的技术支撑。

3种中草药浸提液对梨黑斑病菌的拮抗筛选

本文采用菌丝生长速率法,以三七、铁皮石斛、小球藻3种中草药为试材,研究中草药单剂和复合剂配方对梨黑斑病病原菌菌丝生长的拮抗效果,以期筛选出抑菌效果最佳的浸提液单剂和复合剂。结果表明:单剂中小球藻在浓度为100mg/mL时抑菌效果最好,与其他处理有显著差异,其抑菌率为68%,且随着浓度的降低,抑菌效果越差;其次为三七、铁皮石斛。复合剂中铁皮石斛、三七、小球藻(体积比1:2:3)浓度为100mg/mL时,对梨黑斑病菌的抑制作用最好,抑菌率为69%,且小球藻比例越高,抑菌效果就越明显,其次分别为三七、铁皮石斛。由此可知复合剂中起决定作用的中草药从高到低为:小球藻>三七>铁皮石斛;而3种中草药配比相同时抑菌效果最弱,可能是因其抑菌效果相互抵消造成的。由此可知小球藻是防治梨黑斑病病菌潜在的植物资源,具有很大的研发前景。

核桃青皮提取物对梨黑斑病的防治研究

【目的】采用不同提取剂提取成熟期的核桃果实青皮,研究核桃青皮提取物对梨黑斑病病原菌的抑菌效果,为废弃核桃青皮资源再利用的抑菌构建提供理论支撑。【方法】以梨黑斑病为试验材料,分别用不同浓度(25%、50%、75%、100%)的石油醚、乙酸乙酯、甲醇、乙醇为提取液提取成熟期的核桃果实青皮,获得核桃青皮提取物,研究核桃青皮提取物对梨黑斑病菌菌丝生长的影响。【结果】甲醇对核桃青皮中对梨黑斑病的抑菌物质的萃取效果最好;核桃青皮中对梨黑斑病的抑菌物质既有水溶性的也有易于有机溶剂萃取的,且在水和有机溶剂量相等时萃取效果最好;1.0 mL的核桃青皮提取物比其他用量对梨黑斑病的抑菌效果更好;50%甲醇提取的成熟期核桃青皮提取物对梨黑斑病菌丝的抑制效果最好。【结论】50%的甲醇提取的成熟期核桃青皮提取物对梨黑斑病菌落生长抑菌效果最好,抑制率可达到38.73%,对病原菌的毒力最强,EC_(50)为4.624483442 mL/100mL。

月季黑斑病的病原特征及其对杀菌剂的敏感性分析

月季是重要的观赏性植物,病害发生后会严重影响月季的外观品质。利用组织分离法,从月季病叶样品中分离和纯化了候选菌株;对供试菌株进行形态学鉴定、rDNA-ITS分子学鉴定以及系统进化关系分析,此外,还对供试菌株进行了柯赫氏法则验证及其对常见杀菌剂的敏感性分析试验。结果表明:供试菌株的菌落及分生孢子形态与链格孢菌(Alternaria spp.)一致,rDNA-ITS序列及系统发育树分析表明供试菌株为狭卵链格孢菌(A.angustiovoidea)。同时,柯赫氏法则试验表明,供试菌株的形态特征及其对寄主月季的致病性与狭卵链格孢菌(A.angustiovoidea)完全一致。此外,供试菌株对10种常用杀菌剂敏感性的分析试验进一步表明,供试菌株对丙硫菌唑不敏感;氟啶胺、咯菌腈、咪鲜胺、氟环唑、己唑醇、苯醚甲环唑、戊唑醇、粉唑醇、丙环唑对供试菌株具有较高的抑菌活性,EC50为0.059~0.962μg/mL。研究结果为月季黑斑病的识别及其化学防控研究提供了数据支撑。

黑斑病月季生理生化变化特征

以3个不同抗病能力月季品种为研究对象,分别选择不同部位叶片,测定MDA、SOD、POD和Pro含量等相关生理生化指标。结果表明:3个品种在不同生长阶段叶片MDA含量均有极显著差异,均随病害影响MDA含量有明显的升高;POD含量在3个时期先升高后降低,高抗品种变化幅度显著低于感病品种;抗病品种的SOD活性均高于感病品种;3个品种在不同生长阶段Pro含量差异显著,均随感病程度增加而降低。

香樟黑斑病病原菌鉴定及其拮抗菌B505的生防效果

为明确引起香樟黑斑病的病原菌,发掘防治该病害的生防细菌资源,根据科赫法则,采用组织分离法对引起香樟黑斑病的病原菌进行分离纯化。依据形态特征及ITS、Alta1、gdp基因对病原菌进行分类鉴定;测定不同培养基、温度、pH等因素对病原菌生长的影响;采用平板对峙法筛选香樟黑斑病拮抗细菌,并对其进行抑菌活性试验。结果表明,引起香樟黑斑病的病原菌为互隔交链孢菌Alternaria alternata,其最佳生长温度为25℃,最适pH为6.5,最适培养基为PDA培养基。筛选获得1株对香樟黑斑病有较强抑制作用的菌株B505,鉴定为贝莱斯芽胞杆菌Bacillus velezensis,该菌株可强烈抑制香樟黑斑病病原菌的菌丝生长和孢子萌发,对香樟离体叶片黑斑病的抑制率为55.6%,以上结果为生物防治香樟叶部病害提供了新的思路。

十堰市白菜黑斑病病原真菌的分离与鉴定

对湖北省十堰市当地白菜(Brassica pekinensis)品种的黑斑病进行病原真菌鉴定和病害分析,并提出相应的预防措施。采用组织分离法从病叶中分离得到病原真菌,并利用rDNA ITS和Alt-α1基因序列比对进行分析鉴定。结果表明,发现1个新的链格孢属(Alternaria sp.)真菌,推测其是导致十堰市当地白菜黑斑病的致病真菌。此外,确认ITS序列和Alt-α1基因序列的联合分析,能够区分3种常见的链格孢属真菌Alternaria brassicicola、Alternaria japonica、Alternaria brassicae。