ALDH1A2、MMP2和E-cadherin在结肠癌组织中的表达及相关性

目的:研究结肠癌组织中ALDH1A2、E-cadherin和MMP2的表达及与临床病理特征之间的关系.方法:应用免疫组织化学SP法、逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)、免疫印迹(Western blot)检测52例结肠癌及癌旁组织中ALDH1A2、E-cadherin和MMP2蛋白的表达,分析其间的相关性以及与肿瘤临床病理特征之间的关系.结果:免疫组织化学测定显示ALDH1A2在52例结肠癌癌旁组织阳性率为67.31%;E-cadherin在52例结肠癌癌旁阳性率为90.38%;癌旁组织ALDH1A2、E-cadherin的表达率高于癌组织.MMP2在52例结肠癌组织中阳性率占86.54%,高于癌旁组织(P<0.05).逆转录-PCR及免疫印迹技术显示同样结果.ALDH1A2、MMP2及E-cadherin在结肠癌中的表达具有相关性.结论:结肠癌中ALDH1A2、E-cadherin表达低于癌旁组织,MMP2表达高于癌旁组织,ALDH1A2、MMP2及E-cadherin三者密切相关.

干扰ALDH1A1表达的shRNA载体成功转染宫颈癌HeLa细胞及意义

目的:采用shRNA转染构建干扰乙醛脱氢酶-1(ALDH1A1)表达的宫颈癌HeLa细胞,以进一步探讨ALDH1A1与宫颈癌细胞的生物学特性之间的关系。方法:体外培养宫颈癌HeLa细胞,加入梯度浓度G418溶液进行筛选,确定最佳筛选浓度;取对数生长期细胞,采用Lipofectamine 2000脂质体将4种干扰重组质粒(ALDH1A1-1719、ALDH1A1-574、ALDH1A1-740、ALDH1A1-921,其中有一种具最佳干扰效果)及1种阴性对照质粒(shNC)转染宫颈癌HeLa细胞。5种重组质粒与Lipofectamine 2000脂质体的比例均为0.2μg:1μL,空白对照组中仅加入Lipofectamine2000脂质体。6 h后换液,24 h后荧光显微镜下观察荧光表达情况。结果:确定G418的最佳筛选浓度为400 mg/L;5种重组质粒均成功转染入HeLa细胞中。其中ALDH1A1-1719的转染效率为4.67%;ALDH1A1-574的转染效率为1.16%;ALDH1A1-740的转染效率为12.45%;ALDH1A1-921的转染效率为3.42%;shNC组的转染效率为1.02%。结论:干扰ALDH1A1表达的shRNA载体转染宫颈腺癌HeLa细胞成功可行且效果好。

ALDH1A1在肾透明细胞癌组织中的表达及其临床意义

目的:探讨ALDH1A1(aldehyde dehydrogenase 1A1,ALDH1A1)在肾透明细胞癌(clear cell renal cell carcinoma,ccRCC)组织中的表达及其与患者临床病理特征及预后的关系。方法:应用免疫组化SP法检测95例ccRCC和23例正常肾组织石蜡中ALDH1A1蛋白的表达水平。Realtime PCR和Western Blot检测20例新鲜ccRCC及癌旁组织中ALDH1A1 mRNA和蛋白的表达量。结果:ccRCC石蜡组织中ALDH1A1表达高于正常肾组织,两者之间差异有统计学意义(P<0.05)。新鲜ccRCC组织中ALDH1A1 mRNA及蛋白的表达水平较癌旁正常肾组织显著升高。ALDH1A1表达与肿瘤大小、临床分期、血管侵袭及复发相关(P<0.05)。Log-rank分析进一步表明ALDH1A1高表达提示不良预后。结论:ALDH1A1的表达与ccRCC的生物学行为关系密切,可能为ccRCC的治疗提供新的靶点。

染色质重塑蛋白MORC2通过调节ALDH1A3表达促进乳腺癌细胞的干性

背景与目的:染色质重塑蛋白MORC家族CW型锌指结构蛋白2(microrchidia family CW-type zinc finger 2,MORC2)在DNA介导的基因转录及DNA损伤修复等基本生物学过程中发挥重要作用,但其对乳腺癌细胞生物学行为的影响目前尚无相关报道。乙醛脱氢酶(aldehyde dehydrogenase,ALDH)家族成员ALDH1A3(aldehyde dehydrogenase family 1 member A3,ALDH1A3)是一种公认的乳腺癌干细胞的标志物,但其在乳腺癌细胞中的调控机制目前尚不清楚。该研究拟探讨敲低MORC2基因对ALDH1A3表达以及对乳腺癌细胞干性的影响。方法:利用短发夹RNA(short hairpin RNA,sh RNA)介导的基因沉默方法构建稳定敲低MORC2基因的乳腺癌细胞系;利用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction,RTFQ-PCR)和蛋白[质]印迹法(Western blot)分析敲低MORC2基因对ALDH1A3表达的影响;利用微球体形成实验和流式细胞荧光分选技术(fluorescence activated cell sorting,FACS)分析敲低MORC2对乳腺癌干细胞亚群的影响。结果:Western blot和RTFQ-PCR分析结果显示,敲低MORC2基因显著下调ALDH1A3蛋白及m RNA水平;微球体形成实验显示敲低MORC2基因显著抑制MCF-7细胞的成球能力;FACS分析显示敲低MORC2基因显著下调ALDH1A3阳性乳腺癌干细胞亚群,而对CD44+CD24-乳腺癌干细胞亚群没有明显影响。结论:MORC2通过调节ALDH1A3的表达促进乳腺癌干细胞表型。

延黄牛ALDH1A1基因多态性及其与体尺和肉质性状的相关性研究

为揭示乙醛脱氢酶1A1(ALDH1A1)基因多态性对延黄牛体尺和肉质性状的影响,实验以ALDH1A1基因作为体尺和肉质性状的候选基因,以16月龄的99头延黄牛母牛为研究对象,采用PCR扩增产物Sanger直接测序的方法对延黄牛ALDH1A1基因13个外显子的单核苷酸多态性(SNP)进行研究,利用SSPS19.0软件分析ALDH1A1基因SNP位点与体尺和肉质性状的关联性。结果表明:在延黄牛ALDH1A1基因第4外显子处检测到T/G突变,且引起编码氨基酸的改变;经卡方适合性检验,该SNP位点在延黄牛群体中处于Hardy-Weinberg平衡状态,但T/G突变位点的杂合度(He)相对较低,在延黄牛群体中的变异较小,属于低度多态(PIC<0.25),仅能提供少量遗传信息;关联分析结果表明,ALDH1A1基因第4外显子不同基因型与延黄牛体尺性状中的十字部高、胸围、腹围和管围存在显著相关(P<0.05),与肉质性状中的背膘厚存在显著相关(P<0.05),与肌内脂肪具有一定的相关性(P>0.05)。综上所述,ALDH1A1基因外显子在延黄牛中存在多态性,且与延黄牛体尺和部分肉质性状存在显著性差异,能否作为延黄牛肉质和体尺性状的遗传标记有待于扩大样本数量进一步验证。

绵羊OSBPL11、PAEP、ALDH1A2基因多态性与胸椎数关联分析

为探究OSBPL11、PAEP、ALDH1A2基因多态性与胸椎数之间的关联性,筛选胸椎数相关重要分子标记,本研究利用Sequenom Mass ARRAY?SNP技术检测苏尼特羊和小尾寒羊与胸椎数相关的重要候选基因OSBPL11、PAEP、ALDH1A2的单核苷酸多态性(SNPs)位点,开展群体遗传学分析,并与胸椎数进行关联分析。结果显示,小尾寒羊和苏尼特羊群体中OSBPL11基因g.188064535A>G位点含有AA、AG和GG 3种基因型,PAEP基因g.3541777A>G位点含有AA、AG和GG3种基因型,ALDH1A2基因g.49249275G>A含有GG和AG 2种基因型。OSBPL11基因g.188064535A>G位点中小尾寒羊和苏尼特羊均为低度多态(PIC<0.25);PAEP基因g.3541777A>G位点中小尾寒羊和苏尼特羊均为中度多态(0.25A位点中小尾寒羊和苏尼特羊均为低度多态(PIC<0.25)。小尾寒羊和苏尼特羊3个候选基因的SNPs均处于哈代温伯格平衡状态(P>0.05)。关联分析结果表明,在苏尼特羊中ALDH1A2基因g.49249275G>A位点野生型(GG)的胸椎数显著低于杂合型(AG),其他位点在小尾寒羊和苏尼特羊中与胸椎数均没有显著关系。综上所述,ALDH1A2基因g.49249275G>A位点可作为潜在的绵羊多胸椎数分子标记。本研究结果为提高绵羊胸椎数、改良绵羊生长发育提供了理论基础。

RhoC表达对喉鳞癌Hep2肿瘤细胞凋亡、肿瘤干细胞标志物-ALDH1A1及细胞形态的影响

目的研究Ras同源类似物C(ras homology C,Rho C)对喉鳞状细胞癌生物学行为的影响。方法通过脂质体转染技术将外源基因导入喉鳞状细胞癌细胞-Hep2肿瘤细胞,抑制/增强肿瘤细胞中Rho C表达,TUNEL法检测Rho C对Hep2肿瘤细胞凋亡的影响,罗丹明标记的鬼笔环肽染色细胞骨架观察Hep2肿瘤细胞形态变化,实时荧光定量核酸扩增检测(real-time quantitative polymerase chain reaction detecting system,QPCR)方法检测Rho C对Hep2肿瘤细胞肿瘤干细胞标志物乙醛脱氢酶A1(aldehyde dehydrogenase 1 family,member A1,ALDH1A1)的表达的影响。结果抑制Rho C表达可使Hep2肿瘤细胞凋亡增强,肿瘤细胞群中肿瘤干细胞标志物ALDH1A1 mRNA表达水平降低;改变Rho C表达后,肿瘤细胞形态发生了不同的改变。结论Rho C在喉鳞癌的转移中具有重要的作用,以Rho C为治疗靶点在控制肿瘤转移方面具有重要的临床应用价值。

延黄牛ALDH1A1基因内含子4多态性及其与肉用性状的相关性分析

试验旨在研究乙醛脱氢酶1A1(acetaldehyde dehydrogenase 1A1,ALDH1A1)基因内含子4多态性及其对延黄牛肉用性状的影响。选取99头18月龄延黄牛母牛,采用PCR扩增产物Sanger直接测序法测定99头延黄牛ALDH1A1基因内含子4的单核苷酸多态性(SNP),运用SPSS 19.0软件分析ALDH1A1基因内含子4SNP与延黄牛肉用性状(体高、体斜长、十字部高、胸围、腹围、管围、体重、背膘厚、眼肌面积和肌内脂肪)的关联性。结果显示,延黄牛ALDH1A1基因内含子4存在C/T突变位点,该位点的突变引起了编码氨基酸(谷氨酰胺,Q)的改变;共发现3种基因型:TT、TC和CC,2种等位基因:T和C,其中TC为优势等位基因型,C为优势等位基因。卡方适合性检验结果发现,该SNP在延黄牛群体中处于Hardy-Weinberg平衡状态(P>0.05)。群体遗传参数分析发现,该突变位点的杂合度(He)相对较低,表明其在延黄牛群体中的变异较小,该位点属于中度多态(0.25<PIC<0.5),说明该遗传标记能够提供遗传信息。关联分析结果表明,延黄牛体尺和肉质性状指标在不同基因型间差异均不显著(P>0.05)。结果表明,ALDH1A1基因内含子4在延黄牛中存在突变,能否作为延黄牛肉用性状的遗传标记有待于扩大样本数量进一步研究。

延黄牛ALDH1A1基因CDS序列克隆及其在各组织中的表达差异研究

为探索乙醛脱氢酶1A1(acetaldehyde dehydrogenase 1A1,ALDH1A1)基因功能,本试验以16月龄延黄牛母牛为研究对象,屠宰后采集心脏、肝脏、肺脏、肾脏、胃、十二指肠、皮下脂肪和背最长肌,提取总RNA。根据GenBank上公布的牛ALDH1A1基因mRNA序列(登录号:NM_174239.2),利用Oligo 7.0软件设计引物,应用RTPCR扩增ALDH1A1基因,将扩增产物连接pMD18-T载体进行克隆测序,获得延黄牛ALDH1A1基因完整CDS序列,应用生物信息学软件分析核苷酸序列及其蛋白结构。以延黄牛不同组织总RNA为模板,通过实时荧光定量PCR技术检测ALDH1A1基因在延黄牛各组织间的表达差异。结果显示,ALDH1A1基因CDS序列全长1 506bp,编码501个氨基酸;延黄牛ALDH1A1基因序列与野牛、牛的同源性最高(≥99.7%),与猫和豹的同源性分别为89.4%和89.6%,符合物种进化规律。ALDH1A1蛋白分子质量为54.805ku,理论等电点为7.16,亲水性较强,占86.4%,酸性氨基酸和碱性氨基酸分别占11.4%和12.2%,属于可溶性蛋白,但不是分泌性蛋白,无典型信号肽切割位点;存在31个氨基酸磷酸化位点(分值>0.5)。延黄牛ALDH1A1蛋白二级结构含有α-螺旋、延伸链、β-转角和无规则卷曲,分别占42.12%、16.17%、8.18%和33.53%,与该蛋白三级结构预测结果相同。实时荧光定量PCR结果表明,ALDH1A1基因在延黄牛肝脏、胃、皮下脂肪、十二指肠和肾脏组织中极显著表达(P<0.01);在背最长肌中显著表达(P<0.05)。本试验结果为进一步开展延黄牛ALDH1A1基因功能及肉质基因筛选研究提供了参考依据。

ALDH1A1和ALDH6A1在肝门部胆管癌中的表达及其临床意义

目的探讨乙醛脱氢酶1A1(ALDH1A1)和乙醛脱氢酶6A1(ALDH6A1)在肝门部胆管癌组织中的表达及临床意义。方法收集东方肝胆外科医院2005年至2007年手术切除的49例肝门部胆管癌组织和10例配对的癌旁组织。采用免疫组化SP法检测上述组织中ALDH1A1和ALDH6A1的表达情况,分析两者表达与患者临床病理特征和预后的关系。结果在49例癌组织中,ALDH1A1和ALDH6A1蛋白的高表达率分别为69.4%(34/49)和44.9%(22/49),明显高于癌旁组织的30.0%(3/10)和10.0%(1/10)。ALDH1A1和ALDH6A1的表达与淋巴结转移有关(P<0.05),而与性别、年龄、TNM分期、肿瘤大小、浸润深度和神经侵犯无关(P>0.05)。ALDH1A1高表达者的中位无进展生存期(PFS)和中位总生存期(OS)均为12个月,明显短于低表达者的32个月和42个月,差异有统计学意义(P<0.05)。ALDH6A1高表达者的中位OS为16个月,短于低表达者的23个月,差异有统计学意义(P<0.05);ALDH6A1高表达者的中位PFS为15个月,短于低表达者的22个月,但差异无统计学意义(P>0.05)。Cox多因素分析显示,浸润深度和淋巴结转移是影响PFS的独立因素(P<0.05),浸润深度、淋巴结转移和ALDH1A1表达是影响OS的独立因素(P<0.05)。结论 ALDH1A1和ALDH6A1在肝门部胆管癌组织中表达增强,与肝门部胆管癌的发生、发展有关,ALDH1A1是评估预后潜在的肿瘤标志物。

ALDH1A3和CD133在皮肤鳞状细胞癌中的表达及其临床意义

目的:探讨和研究肿瘤干细胞标志物ALDH1A3和CD133在人皮肤鳞状细胞癌中的表达及其临床意义。方法:收集我院烧伤整形外科2012～2016年手术切除34例皮肤鳞癌组织蜡块标本及11例整形手术切除正常皮肤组织,采用免疫组化方法对两组标本中的ALDH1A3和CD133蛋白表达水平进行检测。结果:ALDH1A3和CD133在皮肤鳞状细胞癌患者瘤体组织中高表达(表达肿瘤干细胞标志蛋白的细胞比例较高),ALDH1A3阳性表达率为73.52%(25/34),CD133阳性表达率为79.41%(27/34)。ALDH1A3和CD133在正常皮肤组织中低表达(表达肿瘤干细胞标志蛋白的细胞比例较低),ALDH1A3阳性表达率为18.18%(2/11),CD133阳性表达率为9.09%(1/11)。ALDH1A3和CD133在皮肤鳞状细胞癌瘤体组织和正常皮肤组织均有表达,但在瘤体组织中的表达率更高,且两组差异性具有统计学意义(P<0.05)。结论:ALDH1A3和CD133蛋白在皮肤鳞状细胞癌瘤体组织中呈异常高表达,可能在皮肤鳞状细胞癌的发生、发展、分期中起到重要作用,并将有可能作为皮肤鳞状细胞癌肿瘤干细胞新的标志物。

下调miR-221-5p靶向ALDH1A2基因增强鼻咽癌细胞对顺铂的敏感性

目的研究miR-221-5p对鼻咽癌细胞增殖、凋亡和顺铂敏感性的影响及潜在作用机制。方法以人鼻咽上皮细胞NP69为对照组(NP69组),qRT-PCR和Western blot检测鼻咽癌细胞系SUNE1、HNE1和CNE2中ALDH1A2 mRNA和miR-221-5p的表达,然后在SUNE1细胞中抑制miR-221-5p表达和过表达ALDH1A2确定两者对细胞的影响。MTT法测定SUNE1细胞存活率和对顺铂的敏感性,流式细胞术检测细胞凋亡率;Western blot检测细胞中ALDH1A2、CyclinD1、Cleave-caspase-3和MRP1蛋白表达,双荧光素酶报告系统验证miR-221-5p和ALDH1A2的调控关系。结果与NP69组相比,在鼻咽癌细胞SUNE1、HNE1和CNE2中,miR-221-5p高表达,ALDH1A2低表达;低表达miR-221-5p和高表达ALDH1A2均可抑制鼻咽癌细胞SUNE1增殖,诱导凋亡,增强对顺铂的敏感性;miR-221-5p靶向负调控ALDH1A2的表达;低表达ALDH1A2可部分逆转miR-221-5p低表达对SUNE1细胞增殖、凋亡以及顺铂敏感性的影响。结论下调miR-221-5p可靶向促进ALDH1A2表达增强鼻咽癌SUNE1细胞的顺铂敏感性,抑制癌细胞增殖并诱导凋亡;miR-221-5p有望成为鼻咽癌顺铂的增敏靶点。

维吾尔族妇女宫颈癌发生与ALDH1A1基因表达调控的关系及临床意义

目的本研究利用新疆维吾尔族妇女宫颈癌标本资源,对ALDH1A1基因的mRNA和蛋白质表达水平进行定量分析,探讨宫颈癌发生与该基因表达调控的关系及临床意义。方法收集维吾尔族妇女宫颈鳞癌(cervical squamous cell carcinoma,CSCC)、宫颈内上皮内瘤变(cervical intraepithelial neoplasia,CIN)Ⅱ~Ⅲ及宫颈炎患者的新鲜组织标本58例和石蜡包埋组织切片75例,利用荧光定量RT-PCR方法、免疫组织化学等方法检测ALDH1A1基因在宫颈病变组织中的表达水平变化。结果ALDH1A1 mRNA在宫颈癌组织中的表达量(1.733±0.968),显著高于正常宫颈组织中的表达量(0.458±0.347,P<0.05)。随着宫颈病变的进程ALDH1A1蛋白的表达升高,ALDH1A1蛋白在官颈癌组织中表达率为77.5%(31/40),显著高于正常宫颈组织中的表达率36.8%(7/19)(P<0.01)。单一基因表达水平检测对宫颈癌诊断的特异性和敏感度分析,该基因的曲线下面积均>0.7,说明上述基因检测的诊断准确度较高,对宫颈癌有一定的预警价值,推测ALDH1A1基因的高表达可能成为宫颈癌早期预警的标志物。结论 ALDH1A1可作为宫颈癌肿瘤干细胞特异标志物,该基因转录表达上调或蛋白质表达水平升高与维族妇女宫颈癌发生有密切关系,可能成为肿瘤诊断和预后的分子标志物。

ALDH1A2基因过表达对结肠癌LoVo细胞增殖、侵袭及黏附能力的影响

目的观察ALDH1A2基因过表达对LoVo细胞增殖、侵袭及黏附能力的影响。方法将携带有人外源性ALDH1A2基凶的真核表达质粒转染人结肠癌细胞株LoVo细胞，分别应用逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）和Westernblot法从mRNA及蛋白水平测定3组细胞中ALDH1A2水平变化，通过噻唑蓝（MTF）、Matrige!体外侵袭实验、平板克隆形成实验、黏附实验测定不同组别细胞增殖能力、侵袭转移能力、克隆形成能力及黏附能力的变化。结果RT—PCR及Westernblot结果显示，与空质粒转染组及空白对照组细胞比较，转染pEGFP—NI—ALDH1A2的细胞其内源性ALDHlA2mRNA及蛋白表达水平显著增加（P〈0．05）；MTY及平板克隆实验显示转染pEGFP-N1-ALDH1A2质粒的LoVo增殖能力显著下降；Matrigel体外侵袭实验证实，转染pEGFP—N1-ALDH1A2质粒的LoVo穿膜细胞数为（21．4±3．1）个，显著低于转染空质粒及空白组，LoVo穿膜细胞数为（71．9±7．27、78．3±9．35）个，差异有统计学意义（P〈0．05），黏附实验结果显示，转染pEGFP—N1-ALDHIA2质粒的LoVo黏附能力显著降低（P〈0．05），提示转染pSUPER—TF-1质粒的LoVo细胞侵袭、黏附能力显著下降。结论ALDH1A2基因过表达可以明显降低LoVo细胞增殖能力、体外侵袭黏附能力。

Wnt信号通路在ALDH1A1影响胃癌细胞生物学行为中作用

目的探讨乙醛脱氢酶1A1(ALDH1A1)基因表达对胃癌细胞的生物学行为影响及机制。方法通过脂质体将shRNA-ALDH1A1载体转染到胃癌MKN-45细胞,48 h后,采用RT-PCR及蛋白印迹(WB)法检测转染后MKN-45细胞中ALDH1A1蛋白及mRNA表达;四唑盐(MTT)法检测细胞活力;Transwell法检测胃癌细胞迁移及侵袭能力;WB检测细胞中基质金属蛋白酶2(MMP2)、MMP9及Wnt/β-catenin信号通路表达情况。结果shRNA-ALDH1A1转染组M KN-45细胞中ALDH1A1蛋白及mRNA表达量[分别为(0.09±0.01)、(0.08±0.01)]明显低于对照组[分别为(0.89±0.09)、(0.48±0.05)];shRNA-ALDH1A1组M KN-45细胞活力(0.40±0.04)低于对照组(0.73±0.07),细胞迁移、侵袭数目[分别为(39.78±3.24)、(42.53±4.25)个/视野]少于对照组[分别为(98.86±9.03)、(90.52±9.14)个/视野];shRNA-ALDH1A1组MKN-45细胞中MMP2、MMP9、Wnt1、Wnt5a及β-catenin表达水平[分别为(0.10±0.01)、(0.10±0.01)、(0.28±0.03)、(0.12±0.01)、(0.19±0.02)]明显低于对照组[分别为(0.49±0.04)、(0.95±0.09)、(1.29±0.12)、(0.52±0.04)、(0.56±0.05)],差异均具有统计学意义(P<0.01)。结论 ALDH1A1基因沉默可明显降低胃癌细胞MKN-45活力、抑制细胞迁移、侵袭能力,其机制可能与抑制Wnt/β-catenin信号通路有关。

ALDH7A1和EDNRB2基因分型及其与乌骨鸡皮肤乌色度关联分析

【目的】为进一步验证醛脱氢酶7家族成员A1(ALDH7A1)和内皮素受体B2(EDNRB2)在乌骨鸡黑色素沉积中的作用,本研究对ALDH7A1和EDNRB2基因单核苷酸多态性(SNPs)位点进行基因分型,分析其多态位点与皮肤乌色度的关联性,找出对皮肤乌色度有显著效应的SNP标记,为培育乌色度高的屠宰型乌骨鸡肉鸡的分子标记辅助育种提供参考。【方法】采用基于飞行时间质谱对丝羽乌骨鸡192个个体的ALDH7A1和EDNRB2基因SNPs位点进行基因分型,采用HaploView 4.1软件分析这些SNPs位点的连锁不平衡(LD)程度,并分析不同基因型和单倍型与皮肤亮度(L^(*))值的相关性。【结果】ALDH7A1基因的2个SNPs位点(rs317018616 C>A和rs15992676 T>C,分别为SNP1和SNP2)和EDNRB2基因2个SNPs位点(rs739725493 G>A和rs316614064 C>T,分别为SNP3和SNP4)质谱检出率为100%,ALDH7A1基因2个SNPs位点只有2种纯合子基因型,EDNRB2基因2个SNPs位点都有3种基因型。卡方检验表明,ALDH7A1基因2个SNPs位点偏离Hardy-Weinberg平衡(P<0.05),EDNRB2基因2个SNPs位点均处于Hardy-Weinberg平衡状态(P>0.05)。SNP1位点遗传多样性较低(PIC<0.25),其他3个SNPs位点为中度多态(0.25<PIC<0.05);SNP2位点TT基因型乌骨鸡大腿部皮肤L^(*)值显著低于CC基因型(P<0.05),SNP4位点CC和CT基因型乌骨鸡大腿部皮肤L^(*)值显著低于TT基因型(P<0.05),SNP1和SNP3位点不同基因型间乌骨鸡大腿部皮肤L^(*)值无显著差异(P>0.05)。连锁不平衡分析表明,ALDH7A1基因SNP1和SNP2位点处于强连锁不平衡状态,SNP1-SNP2连锁后产生3种单倍型,其中AATT和CCTT单倍型乌骨鸡大腿部皮肤L^(*)值显著低于CCCC(P<0.05),但3种单倍型个体间背部皮肤和胸部皮肤L^(*)值均差异不显著(P>0.05)。【结论】ALDH7A1和EDNRB2基因与丝羽乌骨鸡大腿部皮肤乌色度密切相关,ALDH7A1基因的AATT、CCTT单倍型和EDNRB2基因的TT基因型可作为研究丝羽乌骨鸡大腿部皮肤乌色度的候选分子标记,本研究为下一步利用分子标记辅助育种加快培育乌色度高的丝羽乌骨鸡新品种提供参考。

ALDH1A2基因过表达对结肠癌移植瘤生长的影响

目的:采用转染的细胞构建裸鼠移植瘤,研究ALDH1A2过表达对异种移植瘤的影响。方法:利用不同组别的LOVO细胞接种裸鼠构建移植瘤模型,观察成瘤时间、瘤体平均体积,平均瘤重,探讨ALDH1A2在体内对结肠癌的影响。结果:ALDH1A2组及ATRA组裸鼠成瘤时间较对照组有显著延长,瘤体体积较对照组显著减少,瘤重也较对照组显著减轻,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:成功地建立了人结肠癌细胞裸鼠移植瘤模型,AL-DH1A2组裸鼠成瘤时间短,瘤重低,ALDH1A2过表达可抑制LOVO细胞的增殖。

ALDH1A1在肺腺癌组织中表达及临床意义

目的探讨ALDH1A1在肺腺癌组织中的表达及临床意义。方法采用免疫组织化学方法对105例行手术切除的肺腺癌标本存档蜡块以及20例癌旁正常肺组织进行研究,观察ALDH1A1在肺腺癌组织及正常肺组织中的表达情况,并结合完整随访资料进行分析。结果 ALDH1A1在肺腺癌组织中的阳性表达高于正常肺组织(P<0.05),其表达与肺腺癌分化程度、TNM分期密切相关。此外,既往有吸烟史患者的ALDH1A1阳性表达明显高于非吸烟者(P<0.05)。ALDH1A1阴性表达患者的生存时间明显多于阳性表达患者(P<0.05)。结论 ALDH1A1是肺腺癌预后不良因素,可能参与肺腺癌干细胞功能维持与调节,是未来肺腺癌研究与治疗的潜在靶点之一。

CyclinD1、P27、CK19、ALDH1A1在乳腺病变中表达及意义

目的探讨细胞周期D1(Cyclin D1)、P27、细胞角蛋白19(CK19)、ALDH1A1在乳腺病变中的表达及其临床意义。方法采用免疫组化法检测79例乳腺组织标本(包括正常乳腺、乳腺增生、乳腺导管原位癌、乳腺浸润性导管癌)中Cyclin D1、P27、CK19、ALDH1A1的表达情况,分析其与乳腺癌干细胞增殖及乳腺病变组织分化程度之间的关系。结果正常乳腺、乳腺增生、乳腺导管原位癌、乳腺浸润性导管癌中Cyclin D1、ALDH1A1的表达逐渐上升,P27、CK19的表达逐渐下降;乳腺正常及良性增生组织中Cyclin D1、CK19、ALDH1A1的表达明显低于乳腺导管原位癌及浸润性导管癌(P<0.05);乳腺正常及良性增生组织中P27的表达明显高于导管原位癌及浸润性导管癌(P<0.05)。结论 Cyclin D1、P27相互作用调节乳腺癌干细胞的发生及发展过程,CK19、ALDH1A1可作为乳腺癌诊断及恶性程度评估的参考指标。

ALDH3B1在胶质瘤形成机制中的作用

目的 结合生物信息学分析和免疫组织化学检测,探讨ALDH3B1在胶质瘤发生、发展机制中的作用及临床意义。方法 提取TCGA的泛癌数据和GTEx中对应的正常组织数据,分析人脑胶质瘤患者中ALDH3B1的表达水平与临床预后及病理特征的相关性。通过富集分析,探讨ALDH3B1及其相关性基因参与胶质瘤的机制。同时,收集河北医科大学第二医院神经外科115例原发性脑胶质瘤标本(Ⅱ级:30例、Ⅲ级:35例、Ⅳ级:50例)和5例正常脑组织标本,通过免疫组织化学染色测定ALDH3B1的表达情况。结果 ALDH3B1的表达水平在胶质瘤组织中较正常脑组织显著增高(P<0.05),高级别胶质瘤、IDH野生型、1p/19q无联合缺失标本中表达分别较低级别胶质瘤、IDH突变型、1p/19q联合缺失标本中表达显著增高;胶质瘤患者中ALDH3B1表达水平与总生存期(OS)呈显著负相关(P<0.001);富集分析显示ALDH3B1相关基因参与胶质瘤患者免疫应答调节、炎症反应、肿瘤坏死因子产生等过程。结论 ALDH3B1参与胶质瘤的病理机制,可以作为脑胶质瘤的一个独立预后风险指标。