5-氨基酮戊酸光动力治疗对鲍温病皮损中p53 Caveolin-1表达的影响

目的:探讨5-氨基酮戊酸光动力疗法对鲍温病皮损中p53、Caveolin-1表达的影响及意义。方法:运用5-氨基酮戊酸光动力疗法治疗鲍温病及周围正常皮肤组织各40例,采用免疫组织化学技术(SP法)检测光动力治疗前后鲍温病及周围正常皮肤组织中p53、Caveolin-1的阳性细胞表达率。结果:治疗前p53蛋白在正常皮肤组织及BD中表达的阳性率分别为10%、40%(χ^(2)=11.202,P<0.001),差异有统计学意义。治疗后p53在正常皮肤组织及BD的阳性率为10%、5%(χ^(2)=0.712,P=0.399),两者间差异无统计学意义。治疗前后p53在BD中的阳性表达率差异有统计学意义(χ^(2)=14.811,P<0.001)。治疗前Caveolin-1在正常皮肤组织及BD中阳性表达率为15%、55%(χ^(2)=14.449,P<0.001),两者间差异有统计学意义。治疗后正常皮肤组织及BD中Caveolin-1的阳性率为5%、12.5%(χ^(2)=0.816,P=0.366),差异无统计学意义。治疗前后Caveolin-1在BD中的阳性表达率差异有统计学意义(χ^(2)=19.013,P<0.001)。BD中p53与Caveolin-1阳性表达呈正相关性(r=0.533,P=0.015)。结论:p53及Caveolin-1的高表达可能与BD的发生密切关联,且ALA-PDT能够抑制p53及Caveolin-1的表达,从而抑制疾病的发展。通过更大样本量的研究,p53及Caveolin-1可能会成为皮肤相关疾病的诊断工具,并为其治疗提供新的靶点。

Caveolin-1介导流体剪切应力调控MC3T3-E1成骨细胞增殖和凋亡

背景:流体剪切应力在成骨细胞增殖和凋亡中起着重要作用。然而,Caveolin-1(Cav-1)是否参与成骨细胞中流体剪切应力诱导的增殖与凋亡过程尚不清楚。目的:探讨Cav-1在流体剪切应力调控成骨细胞增殖和凋亡中的作用。方法:选择生长状态良好的MC3T3-E1成骨细胞,加载不同时间(0,30,60,90 min)且强度为1.2 Pa的流体剪切应力,观察Cav-1蛋白的表达,筛选出时间为60 min的条件进行实验。将MC3T3-E1细胞分为:对照组、流体剪切应力组、流体剪切应力+pcDNA 3.1组(对照)、流体剪切应力+pcDNA Cav-1组(过表达质粒),分别采用流体剪切应力和过表达Cav-1等方式干预,通过q RT-PCR和Western blot检测MC3T3-E1细胞内增殖以及凋亡相关分子的表达量;通过CCK-8与Ed U实验检测MC3T3-E1细胞增殖活性;采用Hoechst 33258染色以及流式细胞术检测MC3T3-E1细胞凋亡情况。结果与结论:加载流体剪切应力后MC3T3-E1细胞中Cav-1的表达显著下调,且加载60 min表达水平最低。过表达Cav-1减弱了流体剪切应力促进MC3T3-E1细胞增殖及抑制细胞凋亡的效应。说明Cav-1在流体剪切应力调节成骨细胞增殖和凋亡过程中具有重要的作用,并可能为骨质疏松症提供潜在治疗策略。

四逆汤饼灸对兔膝骨关节炎软骨中Caveolin-1/p38 MAPK信号通路蛋白表达的影响

目的探讨四逆汤饼灸治疗膝骨关节炎(KOA)的作用机制。方法取新西兰兔50只,随机分为对照组、模型组、p38 MAPK抑制剂(抑制剂)组、四逆汤饼灸组、四逆汤饼灸联合p38 MAPK抑制剂(联合)组,每组10只。除对照组外,其他组采用右后肢膝关节伸直位石膏管型固定制备兔KOA模型。对照组、模型组不予治疗;抑制剂组于关节腔内注射p38 MAPK抑制剂TAK-715,1次/d,治疗2周;四逆汤饼灸组取鹤顶、内外膝眼穴位予以四逆汤饼灸治疗,1次/d,治疗2周;联合组于关节腔内注射p38 MAPK抑制剂TAK-715,并在鹤顶、内外膝眼穴位予以四逆汤饼灸治疗,1次/d,治疗2周。采用HE染色观察软骨病理变化,免疫组织化学染色法和蛋白质印迹法(Western blot)检测软骨组织中Caveolin-1、p38 MAPK、MMP-13蛋白的表达。结果HE染色结果显示,模型组软骨表面明显粗糙,破坏严重,细胞排列紊乱,Mankin’s评分明显升高;抑制剂组、四逆汤饼灸组及联合组软骨表面较光滑,软骨细胞分布较均匀,Mankin’s评分降低。免疫组化与Western blot结果显示,与对照组比较,模型组软骨组织中Caveolin-1、p38 MAPK、MMP-13的表达均升高(P均<0.05);与模型组比较,抑制剂组、四逆汤饼灸组及联合组软骨组织中Caveolin-1、p38MAPK、MMP-13的表达均降低(P均<0.05)。结论四逆汤饼灸能延缓KOA软骨的进一步破坏,其机制可能与抑制Caveolin-1/p38 MAPK信号通路蛋白的表达有关。

Caveolin-1与疾病发生相关性的研究进展

Caveolin-1(CAV1)是一种致癌膜蛋白,与胞吞作用、细胞外基质组织、胆固醇分布、细胞迁移和信号传导有关,在多种疾病中改变的CAV1通过控制新陈代谢来影响疾病的发展或进展。本文主要介绍了Caveolin-1在癌症、糖尿病、其他生理疾病中的作用以及在疾病发生发展方面的研究现状。

芹菜素调控Caveolin-1对慢性心力衰竭大鼠血管紧张素1-7及左室舒张功能的影响

目的:探讨芹菜素通过调控窖蛋白-1(Caveolin-1)对慢性心力衰竭(CHF)大鼠血管紧张素1-7(Ang1-7)及左室舒张功能的机制研究。方法:按照随机数字表法将大鼠分为假手术(Sham)组、CHF组、芹菜素组、Caveolin-1组及联合组,每组10只,除Sham组外均建立CHF大鼠模型。建模后24 h,芹菜素组大鼠腹腔注射2 mg/kg的芹菜素,Caveolin-1组腹腔注射1.2 mg/kg的Caveolin-1质粒的脂质体溶液,联合组大鼠腹腔注射2 mg/kg的芹菜素及1.2 mg/kg的Caveolin-1质粒的脂质体溶液,Sham组及CHF组大鼠腹腔注射等体积生理盐水。比较各组大鼠心脏收缩及舒张功能指标、血清因子水平;苏木精-伊红(HE)染色检测心肌组织病理形态;电镜观察心房超微结构;免疫组化检测心肌组织血管生成情况;蛋白免疫印迹检测心肌组织Caveolin-1、缺氧诱导因子1(HIF-1)、血管内皮生长因子(VEGF)蛋白水平。结果:CHF组与Sham组比较,大鼠左心室射血分数(LVEF)、左心室短轴缩短率(LVFS)、Ang1-7及Caveolin-1蛋白、HIF-1蛋白、VEGF蛋白降低,左心室舒张末期内径(LVEDD)、左心室收缩末期内径(LVESD)、左心室舒张末期容积(LVEDV)、左心室收缩末期容积(LVESV)、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、醛固酮(ALD)、肾素活性(PRA)升高,差异有统计学意义(P<0.05);芹菜素组、Caveolin-1组与CHF组比较,大鼠LVEF、LVFS、Ang1-7、Caveolin-1蛋白、HIF-1蛋白、VEGF蛋白及血管数目升高,LVESD、LVEDD、LVEDV、LVESV、AngⅡ、ALD、PRA降低,差异有统计学意义(P<0.05);芹菜素组与Caveolin-1组各指标比较,差异均无统计学意义(P>0.05);联合组与芹菜素组及Caveolin-1组各指标比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:芹菜素对慢性心力衰竭大鼠心脏舒张及收缩功能具有改善作用,并可通过上调Ang1-7改善心肌重塑从而保护心脏,其机制可能与激活Caveolin-1表达而增加心肌新生血管相关。

迷迭香酸对H_(2)O_(2)诱导的视网膜色素上皮细胞衰老及HMGB1,Caveolin-1通路的影响

目的探讨迷迭香酸(RA)对过氧化氢(H_(2)O_(2))诱导的视网膜色素上皮细胞(ARPE-19)衰老的作用及可能机制。方法首先用不同浓度(100,200,400,800,1600μmol/L)H_(2)O_(2)处理ARPE-19细胞,CCK-8法检测细胞增殖,筛选合适的H_(2)O_(2)浓度构建细胞衰老模型。然后将ARPE-19细胞分为对照组、H_(2)O_(2)组(200μmol/L)和不同浓度(20,40,80μmol/L)RA预处理+H_(2)O_(2)(200μmol/L)组,CCK-8法检测细胞增殖,筛选最佳RA干预浓度。最后将ARPE-19细胞分为对照组、H_(2)O_(2)组(200μmol/L)、H_(2)O_(2)(200μmol/L)+RA(80μmol/L)组,用倒置显微镜观察各组细胞形态,SA-β-gal染色法检测细胞衰老情况,Western blotting检测衰老标志蛋白P16、P21的表达以及HMGB1,Caveolin-1的表达。结果ARPE-19细胞增殖率随H_(2)O_(2)刺激浓度的增加而降低(各浓度组两两比较,均P<0.01),随着RA浓度的增加而增加(各浓度组两两比较,均P<0.01)。倒置显微镜观察显示,与对照组相比,H_(2)O_(2)组ARPE-19细胞数量明显减少,细胞衰老率明显增加(均P<0.05);与H_(2)O_(2)组相比,H_(2)O_(2)+RA组ARPE-19细胞数量明显增多,细胞衰老率明显降低(均P<0.05)。Western blotting检测显示,H_(2)O_(2)组细胞P16,P21蛋白表达较对照组明显增加(P<0.05);H_(2)O_(2)+RA组细胞P16,P21蛋白表达较H_(2)O_(2)组明显降低(P<0.05);H_(2)O_(2)组细胞HMGB1和Caveolin-1的蛋白表达较对照组明显增加(P<0.05);H_(2)O_(2)+RA组细胞HMGB1和Caveolin-1的蛋白表达较H_(2)O_(2)组明显降低(均P<0.05)。结论RA可以减轻H_(2)O_(2)诱导的ARPE-19细胞衰老,其机制可能与RA抑制HMGB1和Caveolin-1的激活有关。

Caveolin-1蛋白及其对血脑屏障通透性改变调节作用研究

血脑屏障(blood brain barrier)是人体血液与脑组织液进行物质交换的重要保护屏障系统,对中枢神经系统微环境稳态起着重要作用。Caveolin-1是横跨膜的支架蛋白,可以通过不同信号通路的转导、内吞、转细胞、胆固醇转运和脂质稳态作用,调节细胞增殖、凋亡、迁移、分化、血管生成等作用,是神经系统中非常重要的蛋白。本论文主要从Caveolin-1的结构、功能、相关通路、及治疗出发,对血脑屏障通透性改变调节进行论述,对脑血管相关疾病的治疗提供思路。

Caveolin-1的结构及其在骨代谢中的生物学功能

Caveolin-1(Cav1)是小窝(Caveolae)的结构蛋白组成部分,是多种信号分子中的主要调控因子,参与包括信号转导、胞吞作用、胆固醇分布和细胞迁移等在内的多种细胞过程,是多种疾病预防和治疗的候选靶点。随着研究的深入,Cav1在维持骨代谢平衡中的作用也被发现。本文综述了Cav1的基因结构和蛋白结构,分别从间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)成骨、成脂分化和造血干细胞(hematopoietic stem cells,HSCs)破骨分化方向总结了Cav1对骨代谢的调控机制。

老年2型糖尿病患者血清CYR61、caveolin-1水平与骨质疏松症的关系

目的探讨血清高半胱氨酸蛋白61(CYR61)、小凹蛋白-1(caveolin-1)水平与老年2型糖尿病(T2DM)患者合并骨质疏松症的关系。方法选取2020年3月至2022年8月就诊的208例T2DM患者作为研究对象。记录患者一般资料,根据骨密度检测结果分为骨量正常组(骨密度T值>1)60例、骨量减少组(-2.5<骨密度T值≤-1)62例、骨质疏松组(骨密度T值≤-2.5)86例。采用酶联免疫吸附法检测血清CYR61、caveolin-1水平,采用全自动电化学发光仪检测骨代谢标志物Ⅰ型前胶原N端前肽(PINP)、骨钙素(BGP)、25羟基维生素D_(3)[25(OH)D_(3)]、Ⅰ型胶原羧基端肽β特殊序列(β-CTX)的水平;采用Pearson法分析T2DM合并骨质疏松症患者血清CYR61、caveolin-1水平与各指标的相关性;采用logistic多因素回归分析T2DM患者合并骨质疏松症的影响因素。结果骨质疏松组糖尿病病程、β-CTX显著高于骨量减少组和骨量正常组,血清CYR61、caveolin-1、PINP、BGP、25(OH)D_(3)水平显著低于骨量减少组和骨量正常组(P<0.05)。骨量减少组糖尿病病程、β-CTX显著高于骨量正常组,血清CYR61、caveolin-1、PINP、BGP、25(OH)D_(3)水平显著低于骨量正常组(P<0.05)。T2DM合并骨质疏松症患者CYR61与caveolin-1水平呈正相关(r=0.500,P<0.05),二者与PINP、BGP、25(OH)D_(3)呈正相关,与糖尿病病程、β-CTX呈负相关(P<0.05)。CYR61、caveolin-1是T2DM患者合并骨质疏松症的保护因素(P<0.05)。结论老年T2DM合并骨质疏松症患者血清CYR61、caveolin-1低表达,可一定程度反映患者骨代谢情况。

Caveolin-1蛋白和妊娠期糖尿病产妇胎盘组织中糖脂代谢信号转导通路和妊娠结局的关联研究

目的 探讨小凹蛋白-1(Cav-1)与妊娠期糖尿病(GDM)产妇胎盘组织中糖脂代谢信号转导通路和妊娠结局的关系。方法 选择2021年1—12月于本院进行产检并住院分娩的GDM产妇所产新生儿120例作为研究对象,根据产妇分娩结果将其分为GDM合并巨大儿(GDMM组,46例)与GDM合并正常新生儿(GDMN组,74例),另选同期在本院产检并住院分娩的正常产妇所产正常新生儿60名作为正常对照组。检测GDM产妇胎盘组织中Cav-1、GLUT1、p-AMPK(Thr172)以及p-ACC(Ser79)的蛋白表达水平并进行分析。结果 GDMM组产妇体质指数(孕前、分娩前)、孕期体重增加、空腹血糖(孕中期、孕晚期)、新生儿出生体重均分别明显高于GDMN组(P<0.05)。GDMM组产妇Cav-1、p-AMPK(Thr172)及p-ACC(Ser79)蛋白表达量均分别明显低于GDMN组,GLUT1蛋白表达量明显高于GDMN组(P<0.05)。新生儿出生体重与胎盘组织Cav-1、p-AMPK(Thr172)及p-ACC(Ser79)蛋白表达呈负相关(均P<0.05),与胎盘组织GLUT1呈正相关(P<0.05);胎盘组织Cav-1与GLUT1蛋白表达呈负相关(P<0.05),与p-AMPK(Thr172)及p-ACC(Ser79)蛋白表达呈正相关(均P<0.05);胎盘组织GLUT1与p-AMPK(Thr172)及p-ACC(Ser79)蛋白表达呈负相关(均P<0.05);胎盘组织p-AMPK(Thr172)与p-ACC(Ser79)蛋白表达呈正相关(P<0.05)。结论 GDM产妇胎盘组织中糖脂代谢信号转导通路相关蛋白的表达与新生儿出生体重密切有关,并参与了巨大儿的发生,应予以重视。

依达拉奉通过Caveolin-1/VEGF信号通路促进缺血性卒中大鼠脑血管新生及神经功能修复的作用机制探讨

目的探讨依达拉奉促进缺血性卒中大鼠脑血管新生及神经功能修复的作用机制。方法选择无特定病原(SPF)级SD雄性大鼠60只。随机取12只作为假手术组,剩余48只大鼠通过阻塞大脑中动脉血流构建缺血性卒中模型,并分为缺血性卒中组、依达拉奉组、抑制剂组和依达拉奉+抑制剂组,每组12只。通过Morris水迷宫检测认知功能,通过2,3,5-三苯基氯化四氮唑(TTC)染色检测脑梗死面积。取全脑组织,冷冻切片后通过免疫荧光法观察缺血核心区小凹蛋白-1(Caveolin-1)/CD34、双肾上腺皮质激素(DCX)/5-溴脱氧尿苷(BrdU)蛋白荧光强度。取脑组织缺血侧基底结区组织,通过Western blot法检测Caveolin-1、血管内皮生长因子(VEGF)、脑源性神经营养因子(BDNF)与酪氨酸激酶受体B(TrkB)蛋白表达水平。结果与假手术组相比,缺血性卒中组大鼠神经功能评分增加,逃避潜伏期增加且穿越平台次数减少,Caveolin-1、CD34荧光强度增加,Caveolin-1与VEGF蛋白表达增加,BDNF、TrkB、DCX和BrdU蛋白表达减少,差异有统计学意义(P<0.05)。与缺血性卒中组相比,依达拉奉组大鼠神经功能评分、逃避潜伏期减少,穿越平台次数增加,脑梗死面积减少,Caveolin-1与CD34共表达提高,Caveolin-1、VEGF蛋白表达水平进一步增加,BDNF、TrkB、DCX和BrdU蛋白表达增加,差异有统计学意义(P<0.05)。与依达拉奉组相比,抑制剂组与依达拉奉+抑制剂组大鼠Caveolin-1与VEGF蛋白表达降低,Caveolin-1与CD34共表达减少,脑梗死面积与逃避潜伏期增加,差异有统计学意义(P<0.05)。结论依达拉奉的抗缺血性卒中作用与Caveolin-1/VEGF信号通路激活相关,并通过促进神经血管新生,恢复缺血区血供,减轻大鼠神经功能损伤,提高认知功能。

缺氧肾小管上皮细胞Rab7/Caveolin-1/MMP-2轴失调促进肾纤维化

目的:研究肾纤维化晚期Ras相关GTP结合蛋白7(Ras-related GTP binding protein 7,Rab7)可否通过小窝蛋白-1(Caveolin-1)的介导调节基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2, MMP-2)的活性,从而对肾纤维化产生影响。方法:通过单侧输尿管结扎(unilateral ureteral obstruction, UUO)法构建C57BL/6小鼠肾纤维化模型,检测肾纤维化组织中缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α, HIF-1α)、Rab7和Caveolin-1的表达以及MMP-2的活性。利用肾小管上皮细胞株(HK-2)进行体外实验,构建HK-2 Rab7-shRNA细胞,将HK-2和HK-2 Rab7-shRNA细胞分别进行常氧和缺氧培养,并检测各组中HIF-1α、Rab7、Caveolin-1的表达和MMP-2的活性,以及纤维化相关指标I型胶原(Collagen-1)、波形蛋白(Vimentin)和α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin, α-SMA)的表达。结果:利用小鼠UUO模型发现,相较正常肾脏组织,肾纤维化组织中Rab7和Caveolin-1的表达均上调,而MMP-2的活性反而下降。进一步体外实验显示,在HK-2细胞中Rab7下调后可通过抑制Caveolin-1的表达进而提高MMP-2的活性,并会使Collagen-1、Vimentin和α-SMA等反映纤维化的指标表达下调。结论:Rab7与MMP-2的活性密切相关;Rab7对MMP-2活性的调节通过Caveolin-1介导;当Rab7表达受抑后,可促进肾纤维化的缓解。

大鼠脑内caveolin-1蛋白的表达及其在分辨学习中的作用

Caveolin-1(Cav-1)蛋白作为细胞质膜结构小窝(caveolae)的标志蛋白,在胆固醇运输、膜组装、信号转导和细胞转化过程中扮演重要的角色。为了探讨Cav-1蛋白在中枢神经系统可塑性及学习记忆中的作用,本文以Sprague-Dawley大鼠为实验对象,利用蛋白质免疫印迹杂交方法观察了Cav-1蛋白在不同年龄大鼠脑内表达的特征,并研究了Y-迷宫训练前后Cav-1蛋白表达的变化。结果表明:(1)大鼠不同脑区Cav-1蛋白表达的年龄特征不同。海马内的表达属青年鼠最高,其次是老年鼠和幼年鼠;皮层内的表达属幼年鼠最高,其次是老年鼠,青年鼠最低;小脑内的表达无明显年龄差异。(2)Y-迷宫训练引起青年鼠海马和前额叶皮层内Cav-1蛋白的表达显著增加。结果提示,Cav-1蛋白与动物脑发育和学习记忆有密切关系,可能参与中枢可塑性的调节。

Caveolin-1、GPR30和Vimentin在甲状腺乳头状癌组织中的表达及意义

目的:探讨Caveolin-1、GPR30和Vimentin在人甲状腺乳头状癌(Papillary thyroid carcinoma,PTC)的表达及意义。方法:选取甲状腺乳头状癌76例和正常的甲状腺组织44例,采用免疫组织化学S-P法检测Caveolin-1、GPR30和Vimentin的表达,分析其与患者临床病理指标的关系,以及三者之间表达的相关性。结果:在PTC组织中,Caveolin-1、GPR30和Vimentin的阳性表达率分别为9.21%(7/76)、80.26%(61/76)、76.32%(58/76),其中Caveolin-1的阳性表达率明显低于正常组织81.82%(36/44),而GPR30、Vimentin的阳性表达率明显高于正常组织0(0/44)、0(0/44),差异具有统计学意义(P<0.001)。Caveolin-1、GPR30和Vimentin的表达与肿瘤的分期(P=0.005,P<0.001,P<0.001)以及颈部淋巴结转移(P≤0.001)显著相关。此外Caveolin-1与GPR30的表达呈负相关(rs=-0.528,P<0.001),Caveolin-1与Vimentin的表达呈负相关(rs=-0.572,P<0.001),GPR30与Vimentin的表达呈正相关(rs=0.812,P<0.001)。Caveolin-1联合GPR30或Vimentin表达的条件下:Caveolin-1阴性表达伴随GPR30或Vimentin阳性表达与颈部淋巴结转移更具有相关性(P<0.05);GPR30与Vimentin联合阳性表达较只有一种蛋白阳性表达与颈部淋巴结转移更具有相关性(P=0.005);Caveolin-1阴性表达伴随GPR30和Vimentin阳性表达与颈部淋巴结转移的相关性最强(P<0.001)。结论:Caveolin-1、GPR30和Vimentin在PTC组织中的表达与肿瘤分期,以及颈部淋巴结转移密切相关,且三者的表达密切相关,Caveolin-1、GPR30和Vimentin在PTC中的表达情况可作为检测PTC颈部淋巴结转移的指标。

Caveolae/caveolin-1/ERK_(1/2)信号通路在降钙素基因相关肽抑制血管平滑肌细胞增殖中的作用(英文)

业已证明,Caveolae及其蛋白caveolin-1参与了细胞膜的胆固醇转运和细胞膜的信号转导.我们前期工作发现降钙素基因相关肽(CGRP)抑制血管平滑肌细胞(VSMC)增殖的信号通路与抑制ERK1/2活性和上调caveolin-1表达有关.本文研究Caveolae及caveolin-1在CGRP抑制VSMC增殖中的作用,进一步研究caveolin-1表达增加是否有直接抑制ERK1/2信号激酶活性的作用.采用大鼠主动脉贴块法培养VSMC,取3～10代VSMC用于实验,10%小牛血清(FBS)用于刺激VSMC增殖,用β-环糊精(cyclodextrin)或菲律宾菌素(filipin)剥夺胆固醇破坏Caveolae结构;MTT法和流式细胞仪用于检测细胞增殖;蛋白质印迹和免疫共沉淀法分别用于检测目的蛋白的表达或蛋白质间相互作用.结果显示,CGRP呈时间和浓度依赖性显著抑制10%FBS诱导的VSMC增殖.细胞Caveolae结构的破坏能降低CGRP抑制VSMC增殖作用,同时也增加了ERK1/2的磷酸化;β-环糊精孵育细胞能降低caveolin-1的表达.免疫共沉淀发现10%FBS和/或CGRP共同孵育细胞对非磷酸化ERK1/2与caveolin-1的结合无差别,但10%FBS能降低磷酸化ERK1/2与caveolin-1的结合,CGRP预孵育细胞能增加这两者的相互作用.结果揭示,Caveolae及caveolin-1可以正调控CGRP抑制VSMC增殖作用,其机制可能与CGRP增加caveolin-1与p-ERK1/2在Caveolae的结合,并抑制p-ERK1/2核转位作用有关.

胃癌组织中Caveolin-1，nm23及MMP-2的表达及其意义

目的：探讨正常胃黏膜、不典型增生胃黏膜及胃癌组织中Caveolin-1，nm23及MMP-2蛋白的表达．方法：应用免疫组化S—P法检测25例正常胃黏膜，65例不典型增生胃黏膜及71例胃癌组织中的Caveolin-1，nm23及MMP-2蛋白的表达．结果：正常胃黏膜、不典型增生胃黏膜及胃癌组织中，Caveolin-1和nm23阳性率有递减趋势，组间差异性有统计学意义（x^2=106．303，P〈0．05；x^2=64．254，P〈0．05）；MMP．2蛋白阳性表达率有递增趋势，组间差异性有统计学意义（x^2=35．247，P〈0．05）．Fisher精确概率检验显示在不同的浸润深度和淋巴结转移Caveolin-1，nm23及MMP-2阳性表达率组内差异有统计学意义（P〈0．05），而在年龄、性别和脉管侵犯组内差异无统计学意义（P〉0．05）．Spearman等级相关分析显示Caveolin-1与nm23表达呈正相关（r=0．957，P〈0．05），Caveolin-1与MMP-2表达呈负相关（r=-0．975，P〈0．05），nm23与MMP-2表达呈负相关（r=-0．987，P〈0．05）．结论：Caveolin-1与nm23的缺失以及MMP-2的过表达可能是胃癌发生、发展以及浸润转移的重要原因之一，Caveolin-1可以作为一种候选抑癌基因．

Daxx通过上调caveolin-1的表达介导Ox-LDL诱导巨噬细胞胆固醇蓄积和凋亡(英文)

为探讨Daxx对氧化型低密度脂蛋白(oxidized low-density lipoprotein,Ox-LDL)诱导巨噬细胞胆固醇蓄积和凋亡的介导作用及其可能的分子机制,用高效液相色谱法检测细胞内胆固醇含量,油红O染色观察细胞内脂滴的形成情况,流式细胞术和吖啶橙/溴化乙锭(AO/EB)染色法研究Ox-LDL对细胞凋亡的影响,Realtime RT-PCR检测细胞内Daxx mRNA的表达水平,Western blot检测caveolin-1蛋白的表达,用特异性siRNA沉默Daxx在RAW264.7细胞中的表达.Ox-LDL上调Daxx mRNA和caveolin-1的表达、增加细胞内胆固醇含量、促使RAW264.7细胞凋亡,用特异性siRNA干扰Daxx在RAW264.7细胞中的表达能降低caveolin-1的表达、减少细胞内胆固醇含量、以及抑制细胞凋亡.上述结果表明,Daxx对Ox-LDL诱导RAW264.7巨噬细胞胆固醇蓄积和凋亡具有介导作用,这一作用可能与Daxx上调caveolin-1的表达有关。

Caveolin-1表达对血管平滑肌细胞胆固醇逆转运的调节作用

通过观察天然和氧化型低密度脂蛋白对细胞内胆固醇转运蛋白caveolin 1表达的影响 ,探索动脉粥样硬化发生过程中血管平滑肌细胞胆固醇逆转运的分子机制。运用Western印迹、逆转录—聚合酶链反应等方法观察天然和氧化修饰的低密度脂蛋白对血管平滑肌细胞caveolin 1表达的影响及其差异 ;运用反义寡核苷酸技术和高效液相色谱、放射性胆固醇标记法等方法初步判断下调caveolin 1表达对血管平滑肌细胞胆固醇流出的影响 ;运用外源基因导入技术观察caveolin 1过度表达对氧化型低密度脂蛋白诱导血管平滑肌细胞内胆固醇聚集的调节作用。结果发现 :①以正常的未修饰低密度脂蛋白 (5 0mg L)与血管平滑肌细胞孵育 96h ,caveolin 1表达增加 6 0 .2 %± 3.9% ,胆固醇流出率为 81.7%± 4 .3% ;而在相同量的氧化型低密度脂蛋白刺激下 ,caveolin 1表达减少了 5 4 .7%± 5 .8% ,胆固醇流出率下降至 2 6 .8%± 5 .1%。②caveolin 1反义寡核苷酸预处理血管平滑肌细胞 ,再予 5 0mg L的正常低密度脂蛋白处理 ,细胞胆固醇流出率下降至 4 5 .3%± 7.3%。③抗氧化剂普罗布考显著对抗氧化型低密度脂蛋白对血管平滑肌细胞caveolin 1表达的抑制作用。④外源导入caveolin 1表达质粒显著促进氧化型低密度脂蛋白损伤后的细胞胆固醇转运 ,?

Caveolin-1基因mRNA和蛋白在胃癌组织的表达

目的:通过研究Caveolin-1mRNA及蛋白在胃不同病变组织中的表达,对mRNA及蛋白表达的相关性及与胃癌临床病理参数间的关系进行分析.方法:25例正常胃黏膜、65例不典型增生胃黏膜及71例胃癌组织,采用免疫组化SP法检测蛋白的表达情况;依据GenBank中Caveolin-1基因序列(NC-000007),设计并合成全长21bp的寡核苷酸探针,运用原位杂交技术对Caveolin-1mRNA的表达进行检测.结果:Caveolin-1mRNA和蛋白在正常胃黏膜、不典型增生胃黏膜及胃癌细胞胞浆中的阳性表达率呈递减趋势,阳性率分别为:92.0%,83.1%,38.2%和88.0%,83.1%,28.2%.Caveo-lin-1mRNA和蛋白表达在不同浸润深度、有无淋巴结转移组、有无脉管侵犯组内表达率的差异有统计学意义(P<0.05),在年龄及性别组内表达率的差异无统计学意义(P>0.05).Caveolin-1mRNA和蛋白表达呈正相关(rs=0.967,P<0.05).结论:Caveolin-1mRNA和蛋白在正常胃黏膜、不典型增生胃黏膜、胃癌中阳性表达率均逐渐降低,两者在不同病变组织中表达的一致性提示该基因在癌组织中的低表达发生于转录或以上水平的抑制.

Caveolin-1对胃癌细胞系MGC803细胞生长的影响

目的:研究Caveolin-1对胃癌细胞增殖、分化的影响,以探讨Caveolin-1作为基因治疗的候选基因的可能性．方法:运用基因重组技术,将人全长 Caveolin-1基因稳定转染胃癌细胞系MGC803．建立能稳定表达Caveolin-1的胃癌细胞系．同时建立空载体转染的MGC803细胞系作为空白对照,另用PD98059处理48 h作为阳性对照．以重组细胞系作为研究模型,通过免疫细胞化学及Western blot确认Caveolin-1蛋白在被转染细胞中的稳定表达．运用光学显微镜观察转染前后MGC803细胞形态的变化;另运用细胞计数检测了Caveolin-1对MGC803细胞生长的影响,流式细胞术分析了Caveolin-1对MGC803 细胞周期分布的影响．结果:Western blot结果显示,基因转染组及阳性对照组细胞中Vaveolin-1表达比未处理组细胞中明显增强(P<0．001,q值分别为23．067 与13.3376),且基因转染组中Caveolin-1表达比阳性对照组更强(P<0．00l,q=9．7294);基因转染后的MGC803细胞形态发生明显变化,由异形性明显、核大、胞质很少、核分裂明显变得形态较一致、胞质丰富、核／质比明显变小、核分裂相很少见;基因转染后细胞的群体倍增时间明显延长,由46．67 h延长至65．46 h,差异有统计学意义(P<0．05,q =4．8695):基因转染后细胞周期分布发生了明显变化,G0／G1期细胞数明显增多(P<0．01, q=9．1824),S期细胞数明显减少(P<0．01,q= 7．827),G2／M期细胞数无明显变化(P>0．05), Caveolin-1基因转染组与阳性对照组间细胞周期分布的变化也有明显差异性(其中G0／G1期 P<0．01,q=4．9323;S期P<0．05,q=3．3295)．结论:Caveolin-1既能诱导MGC803细胞分化又能将其阻滞于G0/G1期,通过延长细胞群体倍增时间而抑制胃癌细胞的体外增殖．