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基于DIC及CPG技术的热冷循环后花岗岩Ⅰ型断裂特性 被引量:1
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作者 吴秋红 夏宇浩 +3 位作者 赵延林 翁磊 王世鸣 冯淦 《煤炭学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2024年第7期3102-3117,共16页
深部储层岩石的热力学特性,尤其是循环热冷作用下损伤破坏特性,对于增强型地热系统井壁稳定性分析及地热开采效率评估具有重要意义。针对中心直裂纹半圆盘(NSCB)花岗岩试样,首先进行不同热冷循环处理(加热温度400℃,最高循环次数13次),... 深部储层岩石的热力学特性,尤其是循环热冷作用下损伤破坏特性,对于增强型地热系统井壁稳定性分析及地热开采效率评估具有重要意义。针对中心直裂纹半圆盘(NSCB)花岗岩试样,首先进行不同热冷循环处理(加热温度400℃,最高循环次数13次),然后开展3点弯Ⅰ型断裂韧度特性试验。基于裂纹扩展计(CPG)和数字图像相关(DIC)测试技术,研究了热冷循环作用下花岗岩Ⅰ型断裂韧度、断裂过程区(FPZ)、裂纹扩展速率及断裂轮廓特征的影响规律。试验结果表明:当热冷循环次数达到10次以上,花岗岩试样脆性明显减弱,而峰前软化特性和峰后延性增强;花岗岩的断裂过程区由裂缝尖端开始逐步孕育,断裂过程区长度随荷载增大呈先增大后减小的趋势,Ⅰ型断裂韧度、最大断裂过程区长度及裂纹平均扩展速度随热冷循环次数增大而指数减小,Ⅰ型断裂面随热冷循环次数增大越来越不平整。最后,基于X-ray衍射(XRD)和扫描电镜(SEM)等微观测试技术,研究了热冷循环作用对花岗岩矿物成分及微观结构的影响规律,结果表明花岗岩4种矿物成分的峰值衍射强度及矿物质量分数均随热冷循环次数增大而降低,而微裂纹大小及数量随热冷循环次数增大而增大。热冷循环作用下花岗岩的损伤劣化机理包含了多次高温热损伤、水冷冲击及水弱化等3方面的联合作用结果。 展开更多
关键词 热冷循环 断裂韧度 断裂过程区 裂纹扩展速度 裂纹扩展计(cpg)技术 数字图像相关(DIC)技术
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人类胎盘基因CpG岛甲基化水平与自然流产的相关性
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作者 李慧 胡春霞 《实用临床医药杂志》 CAS 2024年第10期91-95,共5页
目的探讨人类胎盘基因CpG岛甲基化水平与孕妇自然流产的相关性。方法选取接受常规产前检查的孕妇55例为研究对象,其中25例自然流产(流产组),30例正常分娩(对照组)。收集入组孕妇的临床资料及人类胎盘组织样本。比较2组临床一般资料。分... 目的探讨人类胎盘基因CpG岛甲基化水平与孕妇自然流产的相关性。方法选取接受常规产前检查的孕妇55例为研究对象,其中25例自然流产(流产组),30例正常分娩(对照组)。收集入组孕妇的临床资料及人类胎盘组织样本。比较2组临床一般资料。分析相关胎盘基因的甲基化水平对孕妇自然流产结局的预测价值。采用Logistic回归分析法分析孕妇自然流产的影响因素。结果2组在孕妇年龄、流产儿/新生儿出生体质量、孕妇妊娠天数和流产儿/新生儿性别方面比较,差异有统计学意义(P<0.05)。MECP2-1、MECP2-4、HSD11B2、MECP2-3和MECP2-2基因甲基化与自然流产相关。流产组的MECP2-1、MECP2-4、HSD11B2和MECP2-3基因甲基化率高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。MECP2-1、MECP2-4、HSD11B2、MECP2-3和MECP2-2的曲线下面积(AUC)分别为0.773、0.737、0.700、0.663和0.627。Logistic回归分析结果显示,MECP2-1是孕妇发生流产的独立影响因素(P<0.05)。结论MECP2-1、MECP2-4、HSD11B2、MECP2-3和MECP2-2基因甲基化水平和孕妇的自然流产结局有关。MECP2-1基因是自然流产发生的独立影响因素。 展开更多
关键词 胎盘 甲基化 自然流产 MECP2基因 影响因素 cpg
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尾鳍驱动仿生机器鱼的CPG控制 被引量:1
3
作者 王洋 陈坤 袁亮 《机械设计与制造》 北大核心 2024年第1期231-235,241,共6页
随着人们对海洋资源关注度的增加,对仿生机器鱼的游动性能提出更高要求,为了使机器鱼游动更贴近真实鱼的游动效果,根据Light Hill的大摆幅细长体理论的鱼体波曲线对水下仿生机器鱼的游动模式进行了研究,并采用HOPF神经元振荡器模型建立... 随着人们对海洋资源关注度的增加,对仿生机器鱼的游动性能提出更高要求,为了使机器鱼游动更贴近真实鱼的游动效果,根据Light Hill的大摆幅细长体理论的鱼体波曲线对水下仿生机器鱼的游动模式进行了研究,并采用HOPF神经元振荡器模型建立非线性振荡器模型,运用最近相邻耦合关系构建了CPG控制网络拓扑图,建立了CPG控制模型,通过调节CPG控制参数实现了机器鱼多运动模态的控制与切换。针对鲹科仿生机器鱼的游动方式进行SolidWorks三维建模,在ADAMS中进行运动仿真,并搭建实体样机。实验结果表明,采用基于HOPF的链式耦合中枢模式发生器对舵机的驱动进行控制,机器鱼尾鳍的摆动具有很好的运动柔顺性,易于实现运动模态平滑切换,游动更加灵活。这为机器鱼在海洋执行更复杂任务的研究打下了坚实基础。 展开更多
关键词 多关节机器鱼 cpg HOPF振荡器 游动方式 多模态游动 虚拟样机
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血清胶质纤维酸性蛋白、甲基化CpG结合蛋白2对脑胶质瘤的诊断价值及其与病理特征的相关性分析
4
作者 刘亮 肖勇 +4 位作者 王栋 王冉 耿良元 邹元杰 刘宏毅 《临床和实验医学杂志》 2024年第15期1580-1583,共4页
目的探讨血清胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、甲基化CpG结合蛋白2(MeCP2)对脑胶质瘤的诊断价值及其与病理特征的相关性。方法回顾性选取2021年1月至2024年1月南京医科大学附属脑科医院(南京脑科医院)收治的80例脑胶质瘤患者,将其作为胶质瘤组... 目的探讨血清胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、甲基化CpG结合蛋白2(MeCP2)对脑胶质瘤的诊断价值及其与病理特征的相关性。方法回顾性选取2021年1月至2024年1月南京医科大学附属脑科医院(南京脑科医院)收治的80例脑胶质瘤患者,将其作为胶质瘤组,选取本院同期收治的80例非胶质瘤颅内良性肿瘤患者作为对照组。应用双抗体夹心法检测两组患者血清GFAP表达水平,应用荧光定量聚合酶链反应法检测肿瘤组织MeCP2表达水平。比较脑胶质瘤患者与对照组的GFAP、MeCP2表达水平,并建立ROC曲线分析GFAP、MeCP2对脑胶质瘤的诊断价值。分析不同病理特征脑胶质瘤患者GFAP、MeCP2表达水平,并采用Spearman相关性分析GFAP、MeCP2与脑胶质瘤病理特征的相关性。结果胶质瘤组患者GFAP、MeCP2表达水平分别为(81.74±7.47)ng/L、2.31±0.31,均高于对照组[(5.35±1.32)ng/L、0.72±0.16],差异均有统计学意义(P<0.05)。绘制ROC曲线结果显示,GFAP、MeCP2、两者联合诊断脑胶质瘤的曲线下面积(AUC)分别为0.721、0.698、0.897。GFAP、MeCP2两者联合对脑胶质瘤的诊断AUC高于两者单一诊断。病理分级Ⅳ级、远处转移患者GFAP水平均高于其他分级、未远处转移,差异均有统计学意义(P<0.05)。病理分级Ⅳ级、肿瘤大小≥3 cm、远处转移患者MeCP2水平均高于其他分级、肿瘤大小<3 cm、未远处转移患者,差异均有统计学意义(P<0.05)。Spearman相关分析结果表明,GFAP与脑胶质瘤不同病理分级、远处转移均呈正相关(r=0.579、0.378,P<0.05);MeCP2与脑胶质瘤不同病理分级、远处转移、脑胶质瘤肿瘤大小均呈正相关(r=0.657、0.457、0.384,P<0.05)。结论胶质纤维酸性蛋白、甲基化CpG结合蛋白2对于脑胶质瘤均具有重要诊断参考价值,两者联合诊断敏感度、特异度更高,且两者与脑胶质瘤的病理分级、肿瘤大小、远处转移情况密切相关。 展开更多
关键词 胶质纤维酸性蛋白 甲基化cpg结合蛋白2 脑胶质瘤 诊断价值 病理特征 相关性
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基于Hopf振荡器的Spiking-CPG六足机器人步态运动控制
5
作者 罗疏桐 宋自根 《计算机应用研究》 CSCD 北大核心 2024年第10期3053-3058,共6页
中枢模式发生器(central pattern generator,CPG)在六足机器人的运动步态控制中起着至关重要的作用。为能够更高效、更低能耗地控制六足机器人的步态运动,提出了一种Spiking-CPG(SCPG)神经网络作为六足机器人的仿生控制系统,其结合Hopf... 中枢模式发生器(central pattern generator,CPG)在六足机器人的运动步态控制中起着至关重要的作用。为能够更高效、更低能耗地控制六足机器人的步态运动,提出了一种Spiking-CPG(SCPG)神经网络作为六足机器人的仿生控制系统,其结合Hopf振荡器与以时疏的spiking信号传递信息的仿生神经元LIF(leaky integrate-and-fire),采用环型拓扑结构,使用六组各2000个LIF神经元组成的集合相互连接而成。该SCPG控制系统能够生成六足机器人常见的波动步态、四足步态、三足步态,通过调节相位差参数实现快速、顺滑、稳定的切换运动步态,实时调整所需的频率、振幅,在面对外界干扰时能够在很短的时间内恢复原状,具有很好的鲁棒性。在Webots平台上搭建了一个三维的六足机器人模型,将SCPG的信号输出并经过关节映射函数变换后,来控制六足机器人的运动,验证了所设计六足机器人的运动稳定性和SCPG控制方案的可行性与有效性。最后,在Intel的Loihi芯片上移植了SCPG神经网络控制器,结果表明,其具备高效的执行速度和更低的能耗,在六足机器人的运动控制中具备良好的应用前景。 展开更多
关键词 六足机器人 运动步态控制 Spiking-cpg Hopf振荡器 LIF NEF
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Chi-CpG NP的制备及其对rNMB0315蛋白的免疫效果
6
作者 王雁 李振宇 《中南医学科学杂志》 CAS 2024年第1期31-35,共5页
目的制备黏膜免疫佐剂Chi-CpG NP,并检测其对重组B群脑膜炎奈瑟菌0315蛋白(rNMB0315)的免疫效果。方法用壳聚糖纳米颗粒(Chi NP)包裹免疫刺激分子(CpG-ODN)合成Chi-CpG NP,随后检测其理化性质和安全性。将不同黏膜免疫佐剂与rNMB0315充... 目的制备黏膜免疫佐剂Chi-CpG NP,并检测其对重组B群脑膜炎奈瑟菌0315蛋白(rNMB0315)的免疫效果。方法用壳聚糖纳米颗粒(Chi NP)包裹免疫刺激分子(CpG-ODN)合成Chi-CpG NP,随后检测其理化性质和安全性。将不同黏膜免疫佐剂与rNMB0315充分混合、吸附,滴鼻免疫雌性BALB/c小鼠,检测PBS组、rNMB0315组、rNMB0315+CpG组、rNMB0315+Chi NP组、rNMB0315+Chi-CpG NP组小鼠免疫42天后的体液免疫(IgG、IgG1、IgG2a、sIgA)、细胞免疫水平[白细胞介素(IL)-4、γ干扰素(IFN-γ)、IL-17A]、免疫保护效果以及血清体外杀菌活性。结果成功制备的Chi-CpG NP呈球形,大小均一,有较好的吸附性能和良好的安全性。小鼠免疫42天后,体液免疫和细胞免疫水平rNMB0315+Chi-NP组、rNMB0315+Chi-CpG NP组高于rNMB0315组(P<0.05);rNMB0315+Chi-CpG NP组高于rNMB0315+CpG组和rNMB0315+Chi-NP组(P<0.05)。致死剂量B群脑膜炎奈瑟菌攻击各组小鼠后,rNMB0315+Chi-CpG NP组小鼠存活率最高;血清体外杀菌抗体滴度为1∶4。结论成功制备了Chi-CpG NP。Chi-CpG NP能增强rNMB0315蛋白的免疫效果,提高小鼠的存活率。 展开更多
关键词 Chi-cpg NP B群脑膜炎奈瑟菌 rNMB0315蛋白 免疫佐剂
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CPG Human Motion Phase Recognition Algorithm for a Hip Exoskeleton with VSA Actuator
7
作者 Jiaxuan Li Feng Jiang +6 位作者 Longhai Zhang Xun Wang Jinnan Duan Baichun Wei Xiulai Wang Ningling Ma Yutao Zhang 《Journal of Signal and Information Processing》 2024年第2期19-59,共41页
Due to the dynamic stiffness characteristics of human joints, it is easy to cause impact and disturbance on normal movements during exoskeleton assistance. This not only brings strict requirements for exoskeleton cont... Due to the dynamic stiffness characteristics of human joints, it is easy to cause impact and disturbance on normal movements during exoskeleton assistance. This not only brings strict requirements for exoskeleton control design, but also makes it difficult to improve assistive level. The Variable Stiffness Actuator (VSA), as a physical variable stiffness mechanism, has the characteristics of dynamic stiffness adjustment and high stiffness control bandwidth, which is in line with the stiffness matching experiment. However, there are still few works exploring the assistive human stiffness matching experiment based on VSA. Therefore, this paper designs a hip exoskeleton based on VSA actuator and studies CPG human motion phase recognition algorithm. Firstly, this paper puts forward the requirements of variable stiffness experimental design and the output torque and variable stiffness dynamic response standards based on human lower limb motion parameters. Plate springs are used as elastic elements to establish the mechanical principle of variable stiffness, and a small variable stiffness actuator is designed based on the plate spring. Then the corresponding theoretical dynamic model is established and analyzed. Starting from the CPG phase recognition algorithm, this paper uses perturbation theory to expand the first-order CPG unit, obtains the phase convergence equation and verifies the phase convergence when using hip joint angle as the input signal with the same frequency, and then expands the second-order CPG unit under the premise of circular limit cycle and analyzes the frequency convergence criterion. Afterwards, this paper extracts the plate spring modal from Abaqus and generates the neutral file of the flexible body model to import into Adams, and conducts torque-stiffness one-way loading and reciprocating loading experiments on the variable stiffness mechanism. After that, Simulink is used to verify the validity of the criterion. Finally, based on the above criterions, the signal mean value is removed using feedback structure to complete the phase recognition algorithm for the human hip joint angle signal, and the convergence is verified using actual human walking data on flat ground. 展开更多
关键词 Variable Stiffness Actuator Plate Spring cpg Algorithm Convergence Criterion Human Motion Phase Recognition Simulink and Adams Co-Simulation
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基于CPG网络的机器人运动关节控制
8
作者 蔡宇翔 翁剑峰 张勇 《计算机产品与流通》 2024年第2期117-120,共4页
机器人技术在现代产业中的应用越来越广泛,如何适应复杂环境是当前机器人技术的一项热点研究,足式机器人由于其仿生特性能够较好地适应环境。本文研究了一种基于CPG(Certral Pattern Generators,中枢模型发生器)网络的机器人关节运动控... 机器人技术在现代产业中的应用越来越广泛,如何适应复杂环境是当前机器人技术的一项热点研究,足式机器人由于其仿生特性能够较好地适应环境。本文研究了一种基于CPG(Certral Pattern Generators,中枢模型发生器)网络的机器人关节运动控制,以Hopf振荡器作为CPG网络的振荡单元,并通过仿真验证了其在平面和上坡的控制有效性。仿真结果表明使用该控制方式能够较好地控制机器人各个关节,机器人在行走过程中较为平稳。 展开更多
关键词 机器人技术 足式机器人 cpg 关节控制 GENERATOR 关节运动控制 机器人运动
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Reduced non-CpG methylation is a potential epigenetic target after spinal cord injury
9
作者 Zhourui Wu Chen Li +3 位作者 Ran Zhu Yiqiu Cao Thomas C.Chen Liming Cheng 《Neural Regeneration Research》 SCIE CAS CSCD 2023年第11期2489-2496,共8页
DNA methylation is a critical epigenetic regulator in the occurrence and development of diseases and is closely related to various functional responses in relation to spinal cord injury.To investigate the role of DNA ... DNA methylation is a critical epigenetic regulator in the occurrence and development of diseases and is closely related to various functional responses in relation to spinal cord injury.To investigate the role of DNA methylation in spinal cord injury,we constructed a library with reduced-representation bisulfite sequencing data obtained at various time points(day 0-42)after spinal cord injury in mice.Global DNA methylation levels,specifically non-CpG(CHG and CHH)methylation levels,decreased modestly following spinal cord injury.Stages post-spinal cord injury were classified as early(day 0-3),intermediate(day7-14),and late(day 28-42)based on similarity and hie rarchical cluste ring of global DNA methylation patterns.The non-CpG methylation level,which included CHG and CHH methylation levels,was markedly reduced despite accounting for a minor proportion of total methylation abundance.At multiple genomic sites,including the 5’untranslated regions,promoter,exon,intron,and 3’untranslated regions,the non-CpG methylation level was markedly decreased following spinal cord injury,whereas the CpG methylation level remained unchanged at these locations.Approximately one-half of the differentially methylated regions were located in intergenic areas;the other differentially methylated regions in both CpG and non-CpG regions were cluste red in intron regions,where the DNA methylation level was highest.The function of genes associated with differentially methylated regions in promoter regions was also investigated.From Gene Ontology analysis results,DNA methylation was implicated in a number of essential functional responses to spinal cord injury,including neuronal synaptic connection creation and axon regeneration.Notably,neither CpG methylation nor non-CpG methylation was implicated in the functional response of glial or inflammatory cells.In summary,our work elucidated the dynamic pattern of DNA methylation in the spinal co rd following injury and identified reduced nonCpG methylation as an epigenetic target after spinal cord injury in mice. 展开更多
关键词 cpg methylation cytosine fraction differentially methylated regions DNA methylation DNA methyltransferases dynamic signatures Gene Ontology non-cpg methylation single-cell RNA-Seq spinal cord injury
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RGD修饰的低分子量鱼精蛋白/CpG ODN复合物的制备及抗肿瘤活性 被引量:1
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作者 刘佳佳 苏秋东 +1 位作者 伊瑶 毕胜利 《医学研究杂志》 2023年第1期130-135,共6页
目的利用RGD修饰的低分子量鱼精蛋白(low molecular weight protamine,LMWP)包裹CpG寡聚脱氧核苷酸(CpG oligodeoxynucleotide,CpG ODN)制备复合物,评价其对CpG ODN抗肿瘤活性的影响。方法基于静电引力将RGD-LMWP与CpG ODN以不同质量比... 目的利用RGD修饰的低分子量鱼精蛋白(low molecular weight protamine,LMWP)包裹CpG寡聚脱氧核苷酸(CpG oligodeoxynucleotide,CpG ODN)制备复合物,评价其对CpG ODN抗肿瘤活性的影响。方法基于静电引力将RGD-LMWP与CpG ODN以不同质量比共孵育制备复合物,并利用凝胶阻滞实验分析RGD-LMWP对CpG的缩合能力;使用zeta电位/粒度仪对RGD-LMWP/CpG复合物的粒径和zeta电位进行表征;采用体外细胞实验评价RGD-LMWP/CpG复合物对肿瘤细胞的摄取效率和细胞毒性。结果采用共孵育法成功制备了RGD-LMWP/CpG复合物。当RGD-LMWP与CpG的质量比为3∶1时,RGD-LMWP能完全压缩CpG。此时,复合物的平均粒径和zeta电位分别为119.7±1.2nm和47.9±0.5mV。体外细胞实验表明,与游离CpG比较,RGD-LMWP/CpG(3∶1)复合物能显著提高人子宫颈癌细胞株(HeLa)细胞对CpG的摄取效率,抑制HeLa细胞的增殖。结论RGD-LMWP与CpG结合形成的复合物可以有效地将CpG递送至肿瘤细胞内并诱导肿瘤细胞凋亡,是一种具有研究前景的抗肿瘤给药方案。 展开更多
关键词 低分子量鱼精蛋白 RGD cpg寡聚脱氧核苷酸 抗肿瘤活性
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CpG DNA在寄生虫感染免疫中的作用 被引量:2
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作者 张正姬 夏超明 《中国血吸虫病防治杂志》 CAS CSCD 2003年第6期474-477,共4页
近年研究发现,细菌胞嘧啶鸟嘌呤二核苷酸(CpGDNA)和合成的含CpG序列的寡脱氧核苷酸(CpG 0DN)具有强烈的非特异性的免疫刺激作用,其共同特征为都含有一些具有免疫学活性的短核苷酸序列.
关键词 细菌胞嘧啶鸟嘌呤二核苷酸 cpg DNA 寡脱氧核苷酸 cpg ODN 非特异性免疫刺激作用 免疫学活性 cpg基元 cpg免疫刺激序列 ISS 应用前景
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基于CPG的六足机器人运动控制方法研究综述
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作者 刘天成 卢振利 +7 位作者 陈勇 单长考 刘燕 赵宇 PENCIC Marko CAVIC Maja ROUMIANA Ilieva MARJAN Mernik 《高技术通讯》 CAS 2023年第7期762-771,共10页
以六足机器人为研究对象,分析了中枢模式发生器(CPG)的国内外发展现状,揭示其主要是以振荡器作为控制器进行信号输出。针对如何搭建CPG模型,以Hopf振荡器为例进行模型搭建和改进,搭建六足机器人实验平台验证CPG模型控制六足机器人步态... 以六足机器人为研究对象,分析了中枢模式发生器(CPG)的国内外发展现状,揭示其主要是以振荡器作为控制器进行信号输出。针对如何搭建CPG模型,以Hopf振荡器为例进行模型搭建和改进,搭建六足机器人实验平台验证CPG模型控制六足机器人步态运动是可行的。最后对基于CPG的六足机器人发展进行了展望。 展开更多
关键词 中枢模式发生器(cpg) 六足机器人 步态运动
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启动子上的增强子和CpG岛在转基因沉默和位置效应中的作用
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作者 肖捷 纪华 +4 位作者 王宵 王静 刘凌云 李美荃 王斌 《新乡医学院学报》 CAS 2023年第9期801-809,共9页
目的探讨哺乳动物细胞表达载体启动子上增强子和CpG岛调控元件在转基因沉默和位置效应中的作用。方法应用带增强子的八聚体结合转录因子4(OCT4)基因启动子、带CpG岛的性别决定区Y框蛋白2(SOX2)基因启动子、带增强子和CpG岛的巨细胞病毒(... 目的探讨哺乳动物细胞表达载体启动子上增强子和CpG岛调控元件在转基因沉默和位置效应中的作用。方法应用带增强子的八聚体结合转录因子4(OCT4)基因启动子、带CpG岛的性别决定区Y框蛋白2(SOX2)基因启动子、带增强子和CpG岛的巨细胞病毒(CMV)基因启动子以及不含近端增强子和CpG岛的NANOG基因启动子构建哺乳动物细胞表达载体,并分别转染中国仓鼠卵巢细胞株CHO-K1细胞和人胚胎肾细胞(HEK293)。应用Image J软件中Mean算法计算OCT4、SOX2、CMV和NANOG基因启动子在CHO-K1细胞和HEK293细胞介导的增强绿色荧光蛋白(EGFP)表达的荧光强度,应用Image J软件中Mininum、Maxentropy、Mean 3种算法分别计算OCT4、SOX2、CMV和NANOG基因启动子4种载体稳定转染CHO-K1细胞后形成的多个单细胞克隆混合生长样品在同一个样本中最大荧光强度的细胞、大于平均荧光强度的所有细胞和最小荧光强度的所有细胞的EGFP平均荧光强度;应用有限稀释法从G418筛选后获得的稳定转染的多个单克隆混合的CHO-K1细胞中,分别筛选含EGFP的pE-C1、pE-Oct4、pE-Sox2、pE-Nanog质粒稳定转染CHO-K1细胞的单克隆细胞,每个质粒载体随机筛选3个单克隆细胞,应用Image J软件分析EGFP平均荧光强度;应用酶联免疫吸附法检测转染第20、30天CHO-K1细胞中EGFP蛋白表达水平,应用实时荧光定量聚合酶链式反应法检测转染第20、30天CHO-K1细胞中EGFP mRNA表达水平。结果SOX2基因启动子在CHO-K1细胞和HEK293细胞中介导表达的EGFP平均荧光强度比较差异无统计学意义(t=0.770,P>0.05)。OCT4、CMV、NANOG基因启动子在CHO-K1细胞中介导表达的EGFP平均荧光强度显著高于HEK293细胞(t=7.000、11.100、4.900,P<0.05)。SOX2基因启动子于转染第20、30天在CHO-K1细胞中介导表达的EGFP蛋白水平比较差异无统计学意义(t=0.330,P>0.05)。CMV基因启动子于转染第20天在CHO-K1细胞中介导表达的EGFP蛋白水平显著低于转染第30天(t=3.770,P<0.05);OCT4基因启动子于转染第20、30天在CHO-K1细胞中介导表达的EGFP蛋白水平比较差异无统计学意义(t=2.500,P>0.05);NANOG基因启动子于转染第20、30天在CHO-K1细胞中介导表达的EGFP蛋白表达水平比较差异无统计学意义(t=0.014,P>0.05)。转染第20天与转染第30天SOX2、CMV、NANOG基因启动子在CHO-K1细胞中介导表达的EGFP平均荧光强度值比较差异均无统计学意义(t=0.130、0.830、0.210,P>0.05);转染第30天,OCT4基因启动子在CHO-K1细胞中介导表达的EGFP平均荧光强度值显著低于转染第20天(t=5.750,P<0.05)。SOX2、CMV、OCT4、NANOG基因启动子在CHO-K1细胞中介导表达的EGFP蛋白水平比较差异无统计学意义(F=4.070,P>0.05)。CMV、OCT4、NANOG基因启动子在CHO-K1细胞中介导的EGFP mRNA相对表达量显著高于SOX2基因启动子(t=5.440、5.000、5.740,P<0.05);CMV、OCT4基因启动子在CHO-K1细胞中介导的EGFP mRNA相对表达量显著高于NANOG基因启动子(t=3.220、4.270,P<0.05);CMV基因启动子在CHO-K1细胞中介导的EGFP mRNA相对表达量高于OCT4基因启动子,但差异无统计学意义(t=1.270,P>0.05)。SOX2基因启动子介导表达的EGFP在转录水平和转录后水平差异最大(t=16.900,P<0.05);NANOG基因启动子介导表达的EGFP在转录水平和转录后水平差异次之(t=14.930,P<0.05);OCT4和CMV基因启动子介导表达的EGFP在转录水平和转录后水平差异最小(t=2.060、0.430,P>0.05)。应用Mininum、Maxentropy、Mean 3种算法计算OCT4基因启动子在多克隆下介导表达的EGFP的荧光强度比较差异无统计学意义(F=3.720,P>0.05),SOX2、CMV和NANOG基因启动子在多克隆下介导EGFP表达的荧光强度比较差异均有统计学意义(F=516.400、428.500、28.120,P<0.05)。不同单克隆细胞中的差异分析显示,4种载体在不同单克隆细胞中介导表达的EGFP荧光强度值的标准误差相比,从高到低依次为NANOG基因启动子在不同单克隆细胞中介导表达的EGFP荧光强度值标准误差、SOX2基因启动子在不同单克隆细胞中介导表达的EGFP荧光强度值标准误差、OCT4基因启动子在不同单克隆细胞中介导表达的EGFP荧光强度值标准误差、CMV基因启动子在不同单克隆细胞中介导表达的EGFP荧光强度值标准误差,且OCT4基因启动子与SOX2、CMV基因启动子在单克隆细胞中介导表达的EGFP平均荧光强度比较差异有统计学意义(t=3.070、4.360,P<0.05)。结论带CpG岛的启动子能在转录后克服转基因沉默效应,带增强子的启动子具有克服位置效应的作用;二者的恰当组合可用于设计在哺乳动物细胞中高效稳定表达的启动子。 展开更多
关键词 增强子 cpg 转基因沉默 位置效应 哺乳动物细胞表达载体
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CpG甲基化与癌变原理研究 被引量:4
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作者 邓大君 《中国肺癌杂志》 CAS 2005年第3期239-242,共4页
关键词 cpg甲基化 原理研究 癌变 低甲基化 cpg位点 基因组水平 终致癌物 肿瘤细胞 高甲基化 cpg 形成机制 DNA
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自制ISCOMATRIX与CpG联合的HCA587蛋白疫苗的制备及其免疫效应评估
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作者 谭媛芳 陈惠媛 +4 位作者 焦薇 范秋颖 邵国青 熊祺琰 陈娟娟 《南昌大学学报(医学版)》 2023年第5期1-7,F0003,共8页
目的确定自制免疫刺激复合物(ISCOMATRIX)作为HCA587蛋白疫苗佐剂的有效剂量,并探讨其与CpG联合作为HCA587蛋白疫苗佐剂的免疫效力和肿瘤治疗效果。方法应用透析法将Quil A、胆固醇和磷脂制备成ISCOMATRIX,经磷钨酸负染并采用透射电子... 目的确定自制免疫刺激复合物(ISCOMATRIX)作为HCA587蛋白疫苗佐剂的有效剂量,并探讨其与CpG联合作为HCA587蛋白疫苗佐剂的免疫效力和肿瘤治疗效果。方法应用透析法将Quil A、胆固醇和磷脂制备成ISCOMATRIX,经磷钨酸负染并采用透射电子显微镜观察自制ISCOMATRIX的结构。建立小鼠免疫模型,将联合CpG的HCA587蛋白疫苗与不同剂量的自制ISCOMATRIX佐剂混合,经尾根部皮下免疫小鼠;采用酶联免疫斑点试验(ELISpot)检测产生IFN-γ的脾细胞频数,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清HCA587特异性抗体水平。在小鼠右侧胁腹部皮下接种B16-HCA587肿瘤细胞建立荷瘤小鼠模型,按照处理方式不同将小鼠分为HCA587蛋白疫苗治疗组(接种100μL包含CpG与最佳剂量的自制ISCOMATRIX的HCA587蛋白疫苗)与PBS对照组(注射100μL的无菌PBS),使用游标卡尺测量肿瘤大小。结果自制ISCOMATRIX佐剂呈典型的蜂窝状结构,直径20~30 nm,大小均一。12、36μg(QuilA浓度分别为0.012%、0.036%)的自制ISCOMATRIX组小鼠脾细胞分泌IFN-γ的频数与商品化ISCOMATRIX阳性对照组比较,差异无统计学意义(均P>0.05),且显著高于CpG+36μg ISCOM对照组与PBS组(均P<0.0001);5μg与18μg自制ISCOMATRIX组小鼠分泌IFN-γ的脾细胞频数,高于CpG+36μg ISCOM对照组与PBS组(均P<0.0001),但低于商品化ISCOM组(P=0.004)。12、18与36μg自制ISCOMATRIX组的血清HCA587抗体水平与商品化ISCOM阳性对照组比较,差异无统计学意义(均P>0.05);与PBS组相比,12μg自制ISCOMATRIX组1×10^(4)倍稀释血清的抗体滴度显著升高(P=0.0062)。与PBS对照组相比,HCA587蛋白疫苗治疗组肿瘤生长速度减缓,且第35天测量时肿瘤大小显著较小(P=0.0181)。结论以12μg自制ISCOMATRIX作为佐剂联合CpG制备的HCA587蛋白疫苗能诱导有效的免疫应答,并抑制荷瘤小鼠的肿瘤的生长,具有一定的肿瘤治疗作用。 展开更多
关键词 免疫刺激复合物(ISCOMATRIX) 自行制备 cpg HCA587蛋白疫苗 免疫效应
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BCG-CpG-DNA佐剂人用狂犬病疫苗(MRC-5细胞)在食蟹猴体内的免疫原性
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作者 黄帅 王汀 《中国人兽共患病学报》 CSCD 北大核心 2023年第12期1146-1150,共5页
目的 评价BCG-CpG-DNA佐剂人用狂犬病疫苗(MRC-5细胞)在食蟹猴体内的免疫原性。方法 将食蟹猴随机分为对照组、3针组及4针组,经后肢肌肉免疫,1.0 mL/剂。3针组及4针组均接种BCG-CpG-DNA佐剂人用狂犬病疫苗,3针组于0 d、7 d、21 d各接种1... 目的 评价BCG-CpG-DNA佐剂人用狂犬病疫苗(MRC-5细胞)在食蟹猴体内的免疫原性。方法 将食蟹猴随机分为对照组、3针组及4针组,经后肢肌肉免疫,1.0 mL/剂。3针组及4针组均接种BCG-CpG-DNA佐剂人用狂犬病疫苗,3针组于0 d、7 d、21 d各接种1剂,4针组于0 d、3 d、7 d、14 d各接种1剂;对照组接种市售国产同类疫苗,于0 d注射2剂、7 d及21 d各1剂。初免前(0 d)及初免后7 d、14 d、28 d、35 d、49 d、63 d后肢隐静脉采血,分离血清及外周血淋巴细胞。快速荧光灶抑制实验(Rapid Fluorescent focus Inhibition Test, RFFIT)及酶联免疫斑点检测技术(Enzyme-linked Immunospot Assay, ELISPOT)分别检测血清中抗狂犬病病毒中和抗体水平和外周血淋巴细胞中细胞因子IFN-γ、IL-2的表达水平。结果 食蟹猴血清中和抗体水平于免疫前均呈阴性(抗体效价<0.5 IU/mL),3针组和对照组在初免后7~28 d呈上升趋势,于28 d达最高,4针组在14 d达最高;在初免后28 d,对照组、3针组中和抗体水平显著高于4针组;初免后35 d,3针组中和抗体水平显著高于4针组,其余时间点同时间各组间差异均无统计学意义(P均>0.05)。3针组及4针组外周血淋巴细胞中IL-2及IFN-γ水平在7~14 d呈上升趋势,于14 d达最高,且3针组IFN-γ水平显著高于对照组,其余时间点同时间各组间差异均无统计学意义。结论 BCG-CpG-DNA佐剂人用狂犬病疫苗(MRC-5细胞)具有良好的免疫原性,具有优化狂犬病免疫接种程序的应用价值。 展开更多
关键词 狂犬病疫苗 BCG-cpg-DNA佐剂 MRC-5细胞 食蟹猴 免疫原性
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急性脑梗死患者静脉溶栓前后闭锁蛋白、甲基CpG结合蛋白2、钙调蛋白表达与功能结局的关系 被引量:1
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作者 何健萍 彭国斌 《医学理论与实践》 2023年第1期10-13,共4页
目的:分析急性脑梗死(ACI)患者静脉溶栓前后闭锁蛋白(Occludin)、甲基CpG结合蛋白2(MECP2)、钙调蛋白(CAM)表达与功能结局的关系。方法:选取2020年1月-2022年1月我院收治的ACI患者134例作为ACI组,同期进行健康体检的健康志愿者50例作为N... 目的:分析急性脑梗死(ACI)患者静脉溶栓前后闭锁蛋白(Occludin)、甲基CpG结合蛋白2(MECP2)、钙调蛋白(CAM)表达与功能结局的关系。方法:选取2020年1月-2022年1月我院收治的ACI患者134例作为ACI组,同期进行健康体检的健康志愿者50例作为NC组。使用酶标仪测定Occludin、MECP2、CAM水平,在ACI患者静脉溶栓后90d时,使用日常生活活动能力量表评价功能结局,根据ACI患者静脉溶栓后功能结局分为结局不良组、结局良好组两个亚组。分析ACI患者静脉溶栓前后Occludin、MECP2、CAM表达变化及与功能结局的关系。结果:ACI组Occludin水平低于NC组,MECP2、CAM水平高于NC组,差异具有统计学意义(P<0.05)。ACI患者溶栓后90d Occludin水平高于溶栓前,MECP2、CAM水平低于溶栓前,差异具有统计学意义(P<0.05)。结局不良组Occludin水平低于结局良好组,MECP2、CAM水平高于结局良好组,差异具有统计学意义(P<0.05)。由Pearson相关性分析发现,Occludin、MECP2、CAM与ACI患者静脉溶栓后功能结局相关(均P<0.05)。ROC曲线显示,相比于Occludin、MECP2、CAM单项预测,三项联合预测效能最佳,三项联合预测的AUC为0.912(95%CI=0.828~1.036),敏感度为89.00%,特异度为81.50%,P<0.001。结论:ACI患者Occludin水平降低,MECP2、CAM水平升高,静脉溶栓可改善Occludin、MECP2、CAM水平,而溶栓功能结局不良与Occludin、MECP2、CAM异常有关。 展开更多
关键词 急性脑梗死 闭锁蛋白 甲基cpg结合蛋白2 钙调蛋白 功能结局
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CpG-ODN对重离子辐射所致脾脏损伤的救治作用
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作者 张超 傅华 +2 位作者 易永华 蔡建明 高福 《辐射研究与辐射工艺学报》 CAS CSCD 2023年第4期43-50,共8页
本次研究主要探讨CpG-ODN对重离子辐射所致脾脏损伤的救治作用。实验中C57BL/6L小鼠受到5 Gy12C6+离子全身照射,在照射后急性期计算小鼠脾脏指数,苏木精-伊红(Hematoxylin-Eosin staining,HE)染色观察脾脏组织结构变化。另外,免疫组化... 本次研究主要探讨CpG-ODN对重离子辐射所致脾脏损伤的救治作用。实验中C57BL/6L小鼠受到5 Gy12C6+离子全身照射,在照射后急性期计算小鼠脾脏指数,苏木精-伊红(Hematoxylin-Eosin staining,HE)染色观察脾脏组织结构变化。另外,免疫组化法检测γ-H2AX蛋白含量以判断脾脏细胞DNA发生双链断裂(Double-strand break,DSB)情况,末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标(Terminal deoxynucleotidyl transferase-mediatedd UTPnickandlabeling,TUNEL)法检测脾脏细胞凋亡水平,荧光标记法检测外周血CD19+B细胞数量。结果显示,经12C6+离子照射后CpG-ODN处理,小鼠脾脏指数提高,脾脏红髓萎缩程度减轻,白髓面积增大,其内淋巴B细胞排列密度提高,发生DSB和凋亡的细胞数量减少,外周血CD19+B细胞数量增加。这些表明CpG-ODN能减轻12C6+离子照射后脾脏损伤,其原因可能与CpG-ODN抑制细胞发生DSB和凋亡有关。 展开更多
关键词 碳离子辐射 cpg-ODN 脾脏 凋亡 双链断裂
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体外筛选对鸡具有免疫刺激活性的CpG寡脱氧核苷酸 被引量:8
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作者 朱鸿飞 朱建中 +4 位作者 李光富 卢春 邵国青 范红结 陈溥言 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期83-86,共4页
分别用有丝分裂原和CpG寡脱氧核苷酸 (CpGODN)对SPF鸡全血 ,经低速离心分离的外周血单个核细胞(PBMC)和脾脏细胞 ,用淋巴细胞分离液分离的PBMC和脾脏细胞进行刺激 ,用3 H TdR掺入法测定并比较上述鸡免疫细胞在不同培养温度和细胞浓度下... 分别用有丝分裂原和CpG寡脱氧核苷酸 (CpGODN)对SPF鸡全血 ,经低速离心分离的外周血单个核细胞(PBMC)和脾脏细胞 ,用淋巴细胞分离液分离的PBMC和脾脏细胞进行刺激 ,用3 H TdR掺入法测定并比较上述鸡免疫细胞在不同培养温度和细胞浓度下的转化效果 ,从而建立了适用于大批量筛选对鸡具有免疫刺激活性CpGODN的淋巴细胞转化方法。进一步用该方法筛选自行设计合成的 38条ODN。结果表明 ,用低速离心法分离的鸡PBMC ,在细胞含量为10 7mL-1、 37℃、 5 %CO2 条件下 ,经CpGODN刺激 6 4~ 6 6h后 ,可以得到稳定的高效转化 ;不含CpG模体的ODN不具有免疫刺激活性 ;CpGODN 10、 11和 14具有最佳的免疫刺激活性 ,刺激指数大于 10。 展开更多
关键词 cpg寡脱氧核苷酸 cpg模体 淋巴细胞转化 免疫刺激活性
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一种基于TIN-CPG混合空间数据模型的精细三维地质模型构建方法 被引量:19
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作者 唐丙寅 吴冲龙 李新川 《岩土力学》 EI CAS CSCD 北大核心 2017年第4期1218-1225,共8页
精细三维地质模型的构建是实现地质体真三维可视化分析的难题之一。提出一种基于不规则三角网(TIN)和角点网格(CPG)的混合空间数据模型来构建三维精细地质模型的方法。首先建立基于TIN的构造-地层格架三维地质模型,然后进行TIN面元模型... 精细三维地质模型的构建是实现地质体真三维可视化分析的难题之一。提出一种基于不规则三角网(TIN)和角点网格(CPG)的混合空间数据模型来构建三维精细地质模型的方法。首先建立基于TIN的构造-地层格架三维地质模型,然后进行TIN面元模型到CPG体元模型的转换,将基于TIN的构造-地层格架模型转换为基于CPG的精细网格体元地质模型,从而实现"表达上"精细三维地质模型的构建。在转换过程中首先要进行地层序列的定义,然后对空间格网进行划分,在此基础上计算格网中各个单元格的空间坐标和各个网格的有效性,并将计算结果存储为GRDECL格式文件,最后通过QuantyView3D系统读取该文件实现精细地质属性模型的展示。利用该方法对沿海某城市一个重点区域进行精细水文地质模型的构建,验证了其方法的可行性。 展开更多
关键词 不规则三角网(TIN) 角点网格(cpg) TIN-cpg混合空间数据模型 精细三维地质建模
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