δ阿片受体激动剂DADLE对犬心肺复苏后血流动力学的影响

目的通过对犬心肺复苏后应用δ阿片受体激动剂,观察血流动力学的改变,了解δ阿片受体激动剂在心肺复苏中所起的作用。方法把18只犬随机平均分成3组:对照组,CPR组,DADLE组。采用电击诱发室颤模型,3min后复苏,对DADLE组应用δ阿片受体激动剂-DADLE,检测各时段心率(HR)、动脉收缩压(SAP)、动脉舒张压(DAP)、平均动脉压力(MAP)、心输出量(CO)、肺毛细血管楔压(PAWP)。结果DADLE组在室颤后15min内可见HR、SAP、DAP、MAP、CO有显著性下降(P<0.01),随着时间的延长各项指标均明显改善。实验结束时HR、SAP、DAP、MAP、PAWP与对照组比较差异无显著性。CO、SV与对照组比较仍有显著性降低(P<0.05),与CPR组比较也有显著性增高(P<0.01)。结论δ阿片受体激动剂可以显著改善CPR后心脏的收缩、舒张功能,提高心肌对缺血的耐受能力,改善复苏后的心脏功能。

DADLE对大鼠急性全脑缺血再灌注继发肺损伤的作用

目的:通过建立大鼠急性全脑缺血再灌注模型,观察肺组织超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量及肺组织光镜、电镜病理变化,探讨δ阿片受体激动剂DADLE对急性肺损伤的保护作用。方法:SD大鼠30只随机分为假手术(sham)组、模型(I/R)组和DADLE处理组。采用改良的二血管阻断加低血压法建立全脑缺血再灌注模型。DADLE处理组(n=10)于再灌注前经左侧颈静脉注射DADLE 5 mg/kg,再灌注120 min后,取肺组织,光镜、电镜观察其病理学改变及检测肺组织SOD活性、MDA含量。右侧股动脉取血测定氧分压,计算氧合指数。结果:I/R组与sham组比较,肺脏表现为肺泡间隔增宽,毛细血管扩张充血,肺胞腔内及血管周围中性粒细胞浸润,Ⅱ型上皮细胞表面微绒毛明显减少,肺胞腔及气管腔均有浆液渗出,大鼠肺组织SOD活性降低和MDA含量升高。DADLE处理组与I/R组比较肺脏充血减轻,肺组织损伤程度明显减轻,中性粒细胞浸润有所减少,SOD活性升高和MDA含量降低。DADLE处理组动脉血氧分压和氧合指数有升高趋势,与I/R组比较差异有统计学意义。结论:大鼠急性全脑缺血再灌注模型对肺有不同程度的损伤,DADLE可减轻急性肺损伤,对肺组织提供一定的保护作用。

δ-阿片受体激动剂DADLE对β-内啡肽和催乳素释放的影响

本工作给大鼠第三脑室微量注射δ-阿片受体相对选择性激动剂DADLE,增加血浆中β-内啡肽和催乳素的含量。结果表明,激活脑内δ-阿片受体,可同时兴奋上述垂体前叶激素的分泌。

δ阿片受体激动剂DADLE对脓毒症大鼠血清HMGB1表达的影响及其作用的研究

目的观察δ阿片受体激动剂DADLE对脓毒症大鼠血清HMGB1水平及器官功能的影响。方法 96只SD大鼠分为假手术组(SO)、脓毒症组(SEP)、DADLE组[制模后腹腔内注射DADLE(5 mg/kg)],各32只。盲肠结扎穿孔(CLP)建立脓毒症模型,制模后6、12、18、24 h各取8只处死取材。ELISA法检测血清HMGB1水平及24 h ALT、AST、BUN、Cr、CK及PaO2的变化。结果 HMGB1水平在SEP组、DADLE组12 h 18 h及24 h均较SO组高(P<0.05),DADLE组则显著低于SEP组(P<0.05)。24 h时DADLE组血ALT、AST、BUN、Cr、CK均较SEP组明显改善,PaO2明显升高(P<0.05),且各指标变化与HMGB1有显著相关性(P<0.05)。结论 DADLE抑制HMGB1释放,对脓毒症大鼠重要脏器功能有保护作用。

DADLE对大鼠急性全脑缺血再灌注后海马区神经元ERK信号通路和Caspase-3表达的影响

目的:观察δ-阿片受体激动剂DADLE([D-Ala2,D-Leu5]enkephali)对大鼠急性全脑缺血再灌注后海马区神经元ERK信号通路和Caspase-3表达的影响。方法:将50只SD大鼠随机分为5组:假手术组(Sham)、模型组(I/R)、DADLE处理组(根据不同剂量可分为2mg/kg[A]、3mg/kg[B]、5mg/kg[C])。采用改良的二血管阻断加低血压法建立全脑缺血再灌注模型。于缺血15min后经颈外静脉注射DADLE并于再灌注120min后处死。开颅取其新鲜海马组织,采用westernblot检测海马组织Caspase-3的表达,以及采用免疫组织化学法检测非磷酸化ERK与磷酸化ERK(P-ERK)的表达状况。结果:Sham组ERK和P-ERK蛋白表达水平显著低于其他各组(P<0.05),DADLE处理组与I/R组相比,其ERK和P-ERK蛋白的表达量明显上调(P<0.05)。海马组织Caspase-3蛋白表达I/R组较Sham组表达明显上调(P<0.05),而DADLE处理组与IR组比较,海马组织Caspase-3蛋白表达明显下降(P<0.05)。结论:DADLE对大鼠急性全脑缺血再灌注后海马区神经元有保护作用,说明DADLE可通过上调ERK信号通路以及抑制Caspase-3的表达而起到保护脑组织的作用。

DADLE预处理对体外循环心肌缺血再灌注损伤的保护作用

目的通过建立猪体外循环（cardiopulmonary bypass，CPB）心肌缺血再灌注模型，探讨δ-阿片受体激动剂脑腓肽（[D-Ala2，D-Leu5]Enkephalin，[D-Ala2，D-Leu5]，DADLE）的心肌保护作用。方法将12只成年猪（30～35kg）随机分为对照组（常规CPB）（n=6）和DADLE组（CPB前1h静脉应用DADLE，1mg／kg）（n=6）。常规建立体外循环模型，主动脉阻断同时灌注改良st.Thomas停搏液。每组于CPB前、主动脉开放时、CPB结束时、主动脉开放后1h、主动脉开放后2h检测冠状静脉窦血肌钙蛋白（TnT）和肌酸激酶同功酶（CK-MB）含量，相应时间点监测左室收缩压（LVSP），左室舒张末期压（LVEDP）、左室内压最大变化速率（±dp／±dtmax），主动脉开放后2h取左心室心肌，测定心肌ATP含量。结果（1）和预处理组相比，对照组心功能指标明显下降；（2）对照组的TnT和CK-MB较预处理组明显升高，相反，其ATP含量明显降低。结论在猪心肌缺血再灌注中，非选择性δ-阿片受体激动剂DADLE具有明显的心肌保护作用。

DADLE对急性全脑缺血再灌注大鼠心肺肾损伤保护作用的研究

目的通过二血管阻断加低血压法建立大鼠急性全脑缺血再灌注模型,探讨在脑缺血再灌注情况下DADLE对于心肺肾的保护作用。方法将50只SD大鼠随机分为5组:假手术组(Sham)、模型组(I/R)、DADLE处理组(根据不同剂量可分为2 mg/kg[A]、3 mg/kg[B]、5 mg/kg[C])。采用改良的二血管阻断加低血压法建立全脑缺血再灌注模型。手术后立即取心肺肾,常规HE染色观察其形态学改变。结果 I/R组心肌细胞间有出血现象,心肌细胞有轻度萎缩,少量炎性细胞浸润;肺脏表现为肺泡间隔增宽,毛细血管扩张充血,肺胞腔内及血管周围中性粒细胞浸润,气管壁部分上皮脱落,肺胞腔及气管腔均有浆液渗出,肺大泡形成越来越多;肾脏表现为肾小球与肾间质有少量充血,肾小球毛细血管未见明显扩张。DADLE处理组心肌出血减少并逐渐被吸收(P<0.05);肺脏充血减轻,中性粒细胞浸润有所减少(P<0.05);肾脏可见肾小球无明显充血肿胀,间质亦无明显瘀血。DADLE处理组组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论改良的二血管阻断加低血压法建立大鼠全脑缺血再灌注模型对心肺均有不同程度的损伤,但对肾脏影响较小,并且DADLE对全脑缺血再灌注大鼠心肺损伤有一定的保护作用,但与剂量无明显相关。

δ阿片受体激动剂DADLE对犬血流动力学影响的研究

目的通过对犬心肺复苏后应用δ阿片受体激动剂-DADLE,观察血流动力学的改变,了解δ阿片受体激动剂在心肺复苏中所起的作用。方法把18只犬随机平均分成3组:对照组、CPR组、DADLE组,采用电击诱发室颤模型,3min后复苏,对DADLE组应用δ阿片受体激动剂-DADLE,检测各时段心率(HR)、动脉收缩压(SAP)、动脉舒张压(DAP)、平均动脉压力(MAP)、心输出量(CO)、肺毛细血管楔压(PAWP)。结果DADLE组在室颤后15min内可见HR、SAP、DAP、MAP、CO有显著性下降(P<0.01),随着时间的延长各项指标均明显改善。实验结束时DA-DLE组的HR、SAP、DAP、MAP、PAWP与对照组比较无显著性差异,CO、SV与对照组比较仍有显著性降低(P<0.05),但与CPR组比较则有非常显著性增高(P<0.01)。结论δ阿片受体激动剂可以显著改善CPR后心脏的收缩、舒张功能,提高心肌对缺血的耐受能力,改善复苏后的心脏功能。

DADLE对大鼠急性全脑缺血再灌注Bax、Bcl-2蛋白表达的影响

目的观察急性全脑缺血再灌注大鼠脑组织Bax、Bcl一2蛋白表达情况，研究8阿片受体激动剂DADLE对急性全脑缺血再灌注脑组织凋亡途径的影响以及其与脑保护作用的关系。方法将健康雌性sD大鼠50只（180—220g）随机分为5组：假手术组（Sham组，n=10）：只暴露血管而不夹闭；缺血再灌注组（I／R组，n=lO）：采用改良的二血管阻断加低血压法建立全脑缺血再灌注模型，缺血15min后给予再灌注；DADLE处理组分为DADLE2mg／kg组（A组，n=10）、DADLE3mg／kg组（B组，n=10）、DADLE5mg／kg组fc组，n=10）：在I／R组的基础上于再灌注前经颈外静脉注射DADLE。手术结束后，采用免疫组化法检测脑组织Bax、Bcl一2蛋白表达情况。结果Sham组Bax与Bcl-2阳性细胞数显著少于其他各组（P〈0．05），分别为（20．38±2．84）与（9．624-2．10）；I／R组Bax与Bcl-2阳性细胞数为（52．73±6．08）与（19．49±2．35）；而DADLE处理组中Bax阳性细胞数分别为：A组（43．71±3．85）、B组（37．92±4．08）、C组（36．20±3．94）；Bcl-2阳性细胞数分别为：A组（28．744-2．41）、B组（33．584-2．16）、C组（34．96士1．98）。Bcl-2／Bax的比值，Sham组显著高于I／R组[（49134-3．4）％VS．（35．84-3．2%，P〈0．05]；DADLE处理组中，A组为（66．4±6．8）％、B组为（85．7±7．3炀、C组为（92．6±6．9）％。结论在大鼠急性全脑缺血再灌注损伤中，Bax与Bel-2蛋白的表达均明显上调，而DADLE可以通过影响Bax与Bel一2的表达程度减少细胞凋亡，发挥脑保护的作用；由Bel-2／Bax的比值可发现，该作用与使用剂量呈现“S型剂量效应曲线”。

δ阿片受体激动剂DADLE对脓毒症大鼠神经内分泌免疫网络的影响

目的研究δ阿片受体激动剂DADLE对脓毒症大鼠神经内分泌-免疫网络的调节作用。方法选用72只SD大鼠随机分为假手术组(SO)、脓毒症组(SEP)、DADLE组[制模后腹腔内注射DADLE(5mg/kg)],每组24只。盲肠结扎穿孔(CLP)建立脓毒症模型,制模后于6小时,12小时,24小时各取8只处死取材,ELISA法检测血清ACTH、CORT浓度。CLP后24小时处死的8只大鼠,取脑组织进行α7nAChR定量检测。结果脓毒症组(SEP)及DADLE组6小时,12小时,24小时后血清ACTH水平均显著高于假手术组(SO)(P<0.05),DADLE组血清ACTH及CORT水平各时间点均低于脓毒症组(SEP)(P<0.05)。SEP组12小时、24小时血清ACTH及CORT均显著高于6小时(P<0.05),SEP组24小时血清ACTH浓度高于12小时,但CORT浓度较12小时降低(P<0.05)。DADLE组24小时血清ACTH、CORT浓度显著低于12小时,但仍高于6小时(P<0.05)。DADLE处理组α7nAChR量明显高于假手术组和脓毒症组(P<0.05)。结论DADLE激活胆碱能抗炎通路,增加α7nAChR的表达,减少炎症因子释放;并通过降低血清ACTH、CORT水平来干预下丘脑-垂体-肾上腺(HPA)轴,减轻脓毒症大鼠的过度应激状态。

DADLE对大鼠急性全脑缺血再灌注损伤脑组织ERK信号转导通路影响的研究

目的探讨DADLE对急性全脑缺血再灌注损伤大鼠脑组织中ERK信号转导通路的影响及其与脑保护作用的关系。方法将健康雌性SD大鼠50只（1800220g）随机分为5组：假手术组（Sham，n=10）：只暴露血管而不夹闭；缺血再灌注组（I／R，n=10）：采用改良的二血管阻断加低血压法建立全脑缺血再灌注模型，缺血15min后再灌注120min；DADLE处理组分为DADLE2mg／kg组（A，n=10）、DADLE3mg／kg组（B，n=10）和DADLE5mg／kg组（C，n=10）：在FR组的基础上于再灌注前经颈外静脉注射DADLE。HE染色观察各组海马CAl区神经元病理变化情况，westernblot测其脑组织内非磷酸化ERK与磷酸化ERK（P-ERK）的表达状况。结果Sham组ERK与P-ERK蛋白表达水平显著低于其他各组（P〈0．05）；DADLE处理组与I／R组相比，ERK、P-ERK蛋白的表达水平上调（P〈0．05），其中B组、C组ERK与P-ERK蛋白表达水平显著高于A组（P〈0．05），而B组、C组之间ERK、P-ERK表达则无显著性差异（P〉0．05）。结论在急性大鼠全脑缺血再灌注损伤中，ERK信号转导通路的活性明显上调，DADLE可以通过增加ERK的活化而达到降低神经元细胞的损伤，发挥脑保护的作用；同时，该作用呈剂量相关性和有“天花板效应”。

δ阿片受体激动剂DADLE对脓毒症大鼠急性肺损伤的保护作用

目的探讨δ阿片受体激动剂DADLE对脓毒症性急性肺损伤(ALI)的保护作用。方法采用盲肠结扎穿孔法(CLP)制作脓毒症急性肺损伤模型,将模型随机分为ALI组、假手术组(SHAM组)、糖皮质激素(GC)治疗组和DADLE治疗组。分别于建模3、6和12h后开腹抽血行动脉血气分析,ELISA法检测血浆中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)和核因子-κB(NF-κB)的含量,观察与比较各组肺组织病理改变。结果 DADLE组中PaCO2、PaO2、HCO2-和BE与GC组相比较差异无统计学意义(P>0.05),但均高于ALI组(P<0.05);GC组和DADLE组血浆中TNF-α、IL-6和NF-κB水平均明显低于ALI组(P<0.01);DADLE组和GC组肺组织病理学变化均较ALI组轻。结论 DADLE对脓毒症大鼠的肺组织有明确的保护作用,具有抑制炎性细胞因子释放作用,其抗炎作用与GC相似。

Delta阿片受体激动剂DADLE在大鼠缺血性脑损伤中的作用

目的研究delta阿片受体激动剂DADLE([D-Ala2,D-Leu5]-enkephalin)在大鼠全脑缺血性脑损伤中的作用。方法 60只成年健康雄性Sprague-Dawley大鼠被随机分入6组,每组10只:假手术对照(Sham)组、人工脑脊液(ACSF)组、DADLE0.2mmol/L(DADLE0.2)组、DADLE2mmol/L(DADLE2)组、DADLE20mmol/L(DADLE20)组和DADLE2mmol/L+纳曲吲哚2mmol/L(联合用药)组。应用立体定位技术分别对各组大鼠的左侧侧脑室注射相应剂量的实验药物10μL。45min后对大鼠行全脑缺血10min,5d后进行运动功能和水迷宫检测,最后处死动物进行脑组织病理学检查。结果 ACSF组的运动功能评分显著低于其他5组(P值均<0.05);3个不同剂量DADLE组间差异均有统计学意义(P值均<0.05),DADLE20组最高,联合用药组显著低于DADLE2和DADLE20组(P值均<0.05)。术后7、8d,ACSF组的水迷宫检测潜伏期均显著长于同时间点的其他5组(P值均<0.05);3个不同剂量DADLE组间同时间点潜伏期的差异均有统计学意义(P值均<0.05),DADLE20组最短,联合用药组均显著长于同时间点的DADLE20组(P值均<0.05)。同时间点各组间及同组各时间点间游泳速度的差异均无统计学意义(P值均>0.05)。术后6、7、8d,ACSF组的目标象限游泳时间均显著短于同时间点的其他5组(P值均<0.05);3个不同剂量DADLE组同时间点目标象限游泳时间的差异均有统计学意义(P值均<0.05),DADLE20组最长,联合用药组均显著短于同时间点的DADLE20组(P值均<0.05)。ACSF组海马CA1区的存活神经元数目显著少于其他5组(P值均<0.05),DADLE剂量依赖性地增加海马CA1区的存活细胞数,3个不同剂量DADLE组同时间点的差异均有统计学意义(P值均<0.05),联合用药组显著少于DADLE2组(P<0.05)。结论 DADLE侧脑室注射具有明显减轻缺血性脑损伤的效应,其作用呈剂量依赖性,其机制主要是激活delta受体,同时亦可能有其他机制参与。

δ阿片受体激动剂DADLE对脓毒症大鼠肺组织高迁移率族蛋白1水平的影响

目的研究δ阿片受体激动剂DADLE(D-Ala2-D-Leu5-enkephalin)对脓毒症大鼠肺组织高迁移率族蛋白1(HMGB1)的水平的影响。方法将96只SD大鼠分为假手术组(SO)、脓毒症组(SEP)、DADLE组[制模后立即给药DADLE(5mg/kg,腹腔内注)],每组32只。采用改良盲肠结扎穿孔方法(CLP)建立大鼠脓毒症模型,于制模后6h、12h、18h和24h每组各取8只处死取材,Western Blot法检测肺组织HMGB1水平。结果 12h时SEP组和DADLE组HMGB1水平与SO组相比均明显升高(P<0.05),且DADLE组明显低于SEP组(P<0.05);18h时,SEP组和DADLE组HMGB1水平达到最高,同样,DADLE组明显低于SEP组(P<0.05);24h时SEP组和DADLE组HMGB1水平较18h有所降低,但DADLE组仍明显低于SEP组(P<0.05)。结论 DADLE能明显降低脓毒症大鼠肺组织HMGB1水平。

δ阿片受体激动剂DADLE对脓毒症大鼠肝组织高迁移率族蛋白1水平的影响

目的研究δ阿片受体激动剂DADLE(D-Ala2-D-Leu5-enkephalin)对脓毒症大鼠肝组织高迁移率族蛋白1(HMGB1)水平的影响。方法将96只Sprague-Dawley(SD)大鼠分为假手术组(SO)、脓毒症组(SEP)、DADLE组[制模后立即给药DADLE(5mg/kg,腹腔内注)],每组32只。采用改良盲肠结扎穿孔方法(CLP)建立大鼠脓毒症模型,于制模后6 h,12 h,18 h,24 h每组各取8只处死取材,Western Blot法检测肝组织HMGB1水平。结果 12 h时SEP组和DADLE组HMGB1水平与SO组相比均明显升高(P<0.05),且DADLE组明显低于SEP组(P<0.05);18 h时SEP组和DADLE组HMGB1水平达到最高。同样DADLE组明显低于SEP组(P<0.05);24 h时SEP组和DADLE组HMGB1水平较18 h有所降低,但DADLE组仍明显低于SEP组(P<0.05)。结论 DADLE能明显降低脓毒症大鼠肝组织HMGB1水平。

δ阿片受体激动剂DADLE对脓毒症大鼠血浆高迁移率族蛋白1水平的影响

目的研究δ阿片受体激动剂DADLE(D-Ala2-D-Leu5-enkephalin)对脓毒症大鼠血浆高迁移率族蛋白1(HMGB1)水平的影响。方法将96只Sprague-Dawley(SD)大鼠分为假手术组(SO)、脓毒症组(SEP)、DADLE组[制模后立即给药DADLE(5mg/kg,腹腔内注)],每组32只。采用改良盲肠结扎穿孔方法(CLP)建立大鼠脓毒症模型,于制模后6h,12h,18h,24h每组各取8只处死取材。ELISA法检测血浆HMGB1水平。结果 12h时SEP组和DADLE组HMGB1水平与SO组相比均明显升高(P<0.05),且DADLE组明显低于SEP组(P<0.05);18h时,SEP组和DADLE组HMGB1水平达到最高。同样DADLE组明显低于SEP组(P<0.05);24h时SEP组和DADLE组HMGB1水平较18h有所降低,但DADLE组仍明显低于SEP组(P<0.05)。结论 DADLE能明显降低脓毒症大鼠血浆HMGB1水平。

DADLE模拟冬眠对休克大鼠血流动力学的影响

目的:探讨DADLE(冬眠诱导触发物类似物)对失血性休克大鼠血压和心功能的影响。方法:36只健康雄性SD大鼠,随机分成假手术对照组、休克对照组和DADLE实验组(分成1mg/kg组和5mg/kg组),制成失血性休克大鼠模型,监测复苏后3小时内各时点动脉血压(MAP)和心功能指标(±dp/dtmax)。结果:DADLE实验组(包括1mg/kg组和5mg/kg组)复苏后5分钟MAP和±dp/dtmax开始升高,30分钟达高峰,复苏后同一时点各项指标均显著高于休克对照组(P<0.05),其中1mg/kg组和5mg/kg组没有显著差异。结论:DADLE能改善失血性休克大鼠的血压和心功能。

Delta阿片受体激动剂DADLE对神经元转录的影响

目的:观察Delta阿片受体激动剂DADLE([D-Ala2,D-Leu5]enkephalin)对大鼠原代皮层神经元转录的影响。方法:体外培养皮层神经元,免疫荧光法鉴定其纯度,以不同浓度的DADLE与神经元共培养不同的时间,应用[3H]标记脲嘧啶掺入法测定神经元的转录水平,MTT法检测细胞活力。结果:DADLE在不同浓度均能抑制神经元的转录,但是其抑制率与浓度不呈线性关系,当浓度增加到1nmol以上时其抑制率绝对值稳定在40%～60%左右。DADLE的转录抑制率与作用时间也不呈线性关系,当时间超过24h后,其抑制率绝对值维持在40%～60%。将DADLE洗脱72h后其抑制效果完全消失。MTT检测显示各个浓度的DADLE对神经元的活力影响无显著差异。结论:DADLE能可逆、无损伤抑制神经元的转录。

缺氧过程中DADLE对心肌收缩力和收缩长度的影响

目的通过建立人心室肌缺氧模型,研究DADLE[de lta op io id peptide(D-A la2,D-L eu5)enkepha lin]对心肌的保护作用。方法15例标本均来自体外循环心脏手术患者的心肌组织,将其随机分成两组:组1(6例),为单纯缺氧;组2(9例),为缺氧条件下加入DADLE。实验第一步:两组均给氧,将心肌条浸浴在连续充入氧气的T yrode's灌注液中;第二步:组1用氮气代替氧气、组2氮气加DADLE(10nm o l)代替氧气。在相应的刺激频率下测量心肌收缩力和收缩长度的变化并衡量DADLE的心肌保护作用。结果缺氧条件下无论是否给予DADLE,不同刺激频率下的心肌收缩力和心肌收缩长度都明显低于给氧状态下相应值(P<0.05);给氧时,如果组1、组2在15、20、30、45、60、90和120次/分刺激频率下的心肌收缩力和收缩长度为100%,缺氧时组2在相对应刺激频率下心肌收缩力和收缩长度的百分比明显高于组1,差异有统计学意义(P<0.05)。结论DADLE在缺氧过程中对心肌收缩力和收缩长度有明显的影响,对心肌有一定的保护作用。

DADLE对SH-SY5Y细胞缺氧复氧损伤的保护作用

目的:探讨[D-Ala2,D-Leu5]enkephalin(DADLE)对人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y细胞的缺氧复氧的保护作用。方法:将体外培养的SH-SY5Y细胞分别缺氧6、12、24 h和48 h,均复氧4 h后观察细胞形态改变,采用MTT法检测细胞生存率,评估细胞损伤程度。在此基础上,于缺氧12 h期间首先给予DADLE 100 pmol/L作用于细胞,评价DADLE能否减轻神经细胞缺氧复氧损伤;继而分别用10 pmol/L、100 pmol/L、1 nmol/L、10 nmol/L和100 nmol/L不同浓度的DADLE溶液处理细胞,研究DADLE保护作用是否具有剂量效应关系。结果:SH-SY5Y细胞缺氧6、12、24 h或48 h,复氧4 h后,细胞生存率分别为(68.1±4.3)%、(52.6±2.8)%、(26.7±1.5)%或(3.5±1.7)%。SH-SY5Y细胞缺氧12 h期间给予DADLE 100 pmol/L处理可使细胞生存率上升到(58.7±0.46)%。5个给药浓度中,10 pmol/L和100 pmol/L DADLE可使神经细胞生存率上升,而1、10 nmol/L和100 nmol/L则变化不明显。结论:DADLE对SH-SY5Y的缺氧复氧损伤具有保护作用,且其保护效果呈现出较小剂量优于较大剂量的量效关系,本实验中最佳保护剂量为10 pmol/L。