子痫前期患者血清和胎盘的Fas与FasL的变化及意义

目的:比较子痫前期(PE)患者与正常孕妇血清和胎盘F as/F asL的表达,探讨F as/F asL系统的表达与子痫前期的关系。方法:选择40例子痫前期患者和39例正常孕妇作为研究对象,采用EL ISA方法测定血清sF as和sF asL水平;采用W estern B lot检测胎盘F as和F asL的蛋白含量。结果:子痫前期组血清sF as水平(2.11±0.95)m g/L高于正常对照组(1.57±0.60)m g/L,差异有显著性(P<0.05);子痫前期组血清sF asL水平(4.43±1.90)μg/L也显著高于正常对照组(3.48±1.53)μg/L,P<0.01;两组胎盘中均测得F as及F asL蛋白表达,但二者差异均无显著性(P>0.05)。结论:F as和F asL的改变与PE相关,血清游离F as和F asL增高对子痫前期的发生和发展可能起着重要作用,F as/F asL的异常表达导致妊娠免疫耐受不当可能是PE发病的重要机制之一。

扩张型心肌病血清sFas/sFasL水平及其与心肌细胞凋亡的关系

目的 :研究扩张型心肌病 (DCM)血清 s Fas/s Fas L 水平及其与心肌细胞凋亡的关系。方法 :用 EL ISA方法检测 30例DCM患者和 30例正常对照血清中可溶性 Fas(s Fas)、可溶性 Fas配体 (s Fas L)水平 ,并对其中 1 3例 DCM患者 (A组 )和 5例死于非心血管疾病的尸检患者 (B组 )的心肌组织进行原位细胞凋亡 (TU NEL 法 )检测和凋亡细胞的半定量分析。结果 :1DCM组血清 s Fas和 s Fas L 水平均明显高于对照组 (均 P<0 .0 1 ) ,并且血清的 s Fas和 s Fas L 水平随心力衰竭加重而明显升高 (P<0 .0 1 ) ;2 A组的凋亡指数 (AI)明显高于 B组 (P<0 .0 1 ) ,并且 A组中 6例心功能 、 级患者的 AI明显低于 7例心功能 、 级的 AI(P<0 .0 1 ) ,但仍明显高于 B组 (P<0 .0 1 ) ;3AI≥ 1的 DCM患者血清 s Fas和 s Fas L 水平均明显高于AI<1患者血清的 s Fas和 s Fas L 水平 (均 P<0 .0 1 )。结论 :Fas/Fas L 介导的心肌细胞凋亡在 DCM发病中起一定作用 ,凋亡是 DCM的心肌细胞丢失和心功能不全的重要机制 ,并且血清的 s Fas和 s Fas L 水平在一定程度上可反映

血清可溶性Fas-和FasL-mRNA检测方法的建立

目的建立可用于研究工作的血清学检测方法。方法按ＧｅｎＢａｎｋ的Ｆａｓ和ＦａｓＬ序列设计引物，以相应质粒作阳性材料，建立各自的ＲＴ－ＰＣＲ。结果２７例慢性乙型肝炎血清检出ｓＦａｓＬ－ｍＲＮＡ１３例（４８．２％），ｓＦａｓ－ｍＲＮＡ２１例（７７．８％）。结论目前尚无检测血清抗原的试剂、相关研究工作中可应用这一技术。

妊娠高血压综合征患者血清中可溶性Fas水平的测定及其临床意义

目的探讨妊高征孕妇血清中可溶性Fas(sFas)的水平及意义。方法采用ELISA法测定42例妊高征孕妇(轻度7例,中度16例,重度19例)血清sFas水平,并与同期30例正常足月妊娠妇女相比较。结果(1)轻度、中度、重度妊高征组和正常妊娠组血清sFas含量分别为676.264±1.312pg/ml、874.563±1.429pg/ml、1106.587±1.287pg/ml和659.354±1.648pg/ml;(2)轻、中、重度妊高征组与正常妊娠组相比较,血清sFas含量差异有非常显著性(P.<0.001);(3)妊高征各组间比较,血清sFas含量差异有非常显著性(P<0.001)。结论随着妊高征病情加重,孕妇血清sFas水平也显著增高。提示妊高征孕妇体内存在Fas/Fas-L介导的淋巴细胞激活诱导的细胞凋亡,导致母体时胚胎的免疫排斥增强或细胞免疫不适当激活,从而导致妊高征的发生。孕妇血清sFas可以作为妊高征的预测指标之一。

疏肝健脾颗粒对大鼠乳腺癌癌前病变组织Fas、FasL表达的影响

目的:观察疏肝健脾颗粒对模型大鼠乳腺癌癌前病变组织Fas、FasL表达的影响,探讨其阻断乳腺癌癌前病变发展的机制。方法:90只SD大鼠,随机分为6组,正常对照组、模型组、三苯氧胺组及疏肝健脾颗粒低剂量组、中剂量组、高剂量组。以雌孕激素与DMBA联合诱导乳腺癌癌前病变模型,各组分别给予生理盐水、三苯氧胺、疏肝健脾颗粒不同剂量干预60 d后,进行组织病理学及Fas、FasL表达的免疫组化检测。结果:模型组大鼠乳腺癌前病变率为69.2%,疏肝健脾颗粒各剂量组及三苯氧胺组的癌前病变发生率均低于模型组(P<0.01),模型组和疏肝健脾颗粒中、低剂量组部分大鼠乳腺组织发生浸润癌。正常对照组大鼠乳腺组织Fas蛋白表达较高,FasL蛋白表达在模型组大鼠乳腺组织表达较高,疏肝健脾颗粒各剂量组和三苯氧胺组Fas蛋白表达增强,FasL蛋白表达减弱,与模型组比较差异显著(P<0.05或P<0.01)。结论:疏肝健脾颗粒可以显著降低DMBA诱导的大鼠乳腺癌癌前病变的发生率,调控乳腺癌癌前病变组织Fas、FasL的表达是其部分作用机制。

FasL、Caspase-9表达水平对肝细胞性肝癌患者介入治疗后预后的判断价值分析

目的 探讨介入治疗前后肝细胞性肝癌(HCC)患者Fas配体(FasL)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-9(Caspase-9)表达变化及意义。方法 选取68例接受介入治疗的HCC患者为研究对象。对比治疗前后HCC患者FasL、Caspase-9水平。统计HCC患者复发情况,并分为复发组和未复发组。对比复发组和未复发组临床资料、治疗前后FasL、Caspase-9水平。Logistic多因素回归分析影响HCC患者治疗后复发的危险因素。制作受试者工作特征曲线(ROC),以曲线下面积(AUC)评价FasL、Caspase-9对HCC患者治疗后复发的预测价值。结果 与治疗前相比,治疗后患者FasL水平降低(P<0.05),Caspase-9水平升高(P<0.05)。随访结束,介入治疗的HCC患者复发发生率为47.06%(32/68)。复发组肿瘤最大直径、肿瘤个数、治疗后FasL水平高于未复发组(P<0.05),治疗后Caspase-9水平低于未复发组(P<0.05)。多因素分析结果显示:肿瘤最大直径(OR=2.619,95%CI:1.126~6.092)、治疗后FasL(OR=2.134,95%CI:1.264~3.602)、治疗后Caspase-9(OR=0.975,95%CI:0.954~0.997)是HCC患者治疗后复发的相关因素(P<0.05)。ROC分析显示,治疗后FasL、Caspase-9及两者联合检测对预测HCC患者治疗后复发灵敏度分别为78.12%(95%CI:59.56%~90.06%)、71.87%(95%CI:53.02%~85.60%)、93.75%(95%CI:77.78%~98.91%),特异度分别为72.22%(95%CI:54.57%~85.21%)、80.56%(95%CI:63.43%~91.20%)、72.22%(95%CI:54.57%~85.21%),AUC分别为0.794(95%CI:0.679~0.883)、0.785(95%CI:0.668~0.875)、0.867(95%CI:0.763~0.937)。结论 介入治疗后HCC患者FasL水平降低、Caspase-9水平升高。治疗后FasL、Caspase-9可作为临床评估HCC患者治疗后复发的重要参考指标。

甲状腺癌组织中凋亡相关蛋白Fas,FasL,Bcl-2和Bax的表达及意义

目的研究凋亡相关蛋白Fas,FasL,Bcl-2和Bax在甲状腺癌组织中的表达及意义。方法应用免疫组织化学,采用TUMEL法,检测34例甲状腺癌及10例结节性甲状腺肿、9例甲状腺腺瘤组织病理标本中的细胞凋亡指数(ApoptosisIndex,AI);并用通用型二步法对凋亡相关蛋白Fas,FasL,Bcl-2和Bax的表达进行检测。结果(1)对照组细胞平均AI(%)为12.39±2.21,甲状腺癌细胞平均AI(%)为20.17±2.68,即肿瘤组的细胞凋亡指数高于对照组,二者有显著性差异(t=4.138>t(0.05),P<0.05)。(2)甲状腺癌组织中Fas,FasL,Bcl-2和Bax蛋白表达显著高于对照组。(3)Fas,FasL,Bcl-2和Bax蛋白表达的阳性率与其病理类型、临床分期无明显关系(P>0.05)。结论甲状腺癌组织中有较高水平细胞凋亡,Fas,FasL,Bcl-2和Bax的表达均明显增强,并且通过参与调节细胞凋亡而与甲状腺癌的发生有关,但与病理类型、临床分期无明显关系。

Fas/FasL在复发性自然流产患者中的表达

【目的】探讨复发性自然流产(RSA)患者绒毛滋养细胞FasL的表达以及淋巴细胞Fas表达与正常者有无差异。【方法】应用免疫组化检测RSA患者和正常早孕妇女的绒毛滋养细胞FasL表达,应用流式细胞仪检测其外周血淋巴细胞Fas表达,并进行比较。【结果】免疫组化结果显示,绒毛合体滋养细胞和细胞滋养细胞的胞浆和胞膜上均有FasL表达,FasL在两组的定位无差异,但正常组滋养细胞FasL表达(PU=18.03±4.69)强于RSA组(PU=13.59±3.73),P<0.05。流式细胞仪检测结果表明,CD4+T淋巴细胞的Fas表达两组比较无统计学差异。RSA组CD8+T淋巴细胞的Fas表达为12.32%±2.78%,较正常组(7.78%±2.17%)高,(P<0.01)。RSA组NK细胞Fas表达为14.23%±3.67%,较正常组(8.87%±2.95%)高,(P<0.01)。【结论】不明原因RSA患者的绒毛滋养细胞FasL表达弱于正常者,并且其表达Fas的CD8+T淋巴细胞和NK细胞均较正常妇女增多,表明RSA患者存在CD8+T淋巴细胞和NK细胞的异常激活。Fas/FasL在RSA发病中可能起重要作用。

Fas/FasL信号传导途径在启动尘肺中的作用机制

目的探讨Fas/FasL信号传导途径在尘肺发生发展中的作用机制。方法以中国煤炭工人北戴河疗养院无其他肺部疾病的0+接尘工人及Ⅰ期、Ⅱ期尘肺患者为研究对象,将支气管肺泡灌洗液(BALF)中的肺泡巨噬细胞(AMs)分5组培养(分别在信号传导途径的不同环节进行抑制),即对照组(未抑制任何途径介导的细胞凋亡过程)、SOD组(在AMs凋亡过程上游保护AMs,抑制AMs细胞膜脂质过氧化过程从而抑制凋亡过程,观察SOD对凋亡细胞的保护作用)、Fas/FasL组(抑制三条传导途径中的另两条即TNFR/TNF-α、TRAILR/TRAIL途径,观察Fas/FasL信号传导途径介导的细胞凋亡情况)、FasL抑制组(同时抑制TNFR/TNF-α、TRAILR/TRAIL和Fas/FasL三条途径,观察Fas/FasL信号传导途径上游抑制后的细胞凋亡情况),caspase-8抑制组(同时抑制TNFR/TNF-α、TRAILR/TRAIL途径和Fas/FasL途径的下游蛋白caspase-8的活性,观察Fas/FasL信号传导途径下游抑制后的细胞凋亡情况)。分别采用Western blot(WB)、琼脂糖凝胶电泳(AGE)和TDT介导的dUTP缺口末端标记技术(TUNEL)方法检测肺泡巨噬细胞(AMs)的凋亡情况、DNA片段的改变、信号蛋白Fas、FasL、caspase-8、caspase-3的表达水平。结果SOD组、FasL抑制组、caspase-8抑制剂组的凋亡指数均低于对照组,差异均有统计学意义。对照组的AMs出现凋亡细胞特征性"梯状带",SOD组未出现,FasL抑制组、caspase-8抑制剂组的DNA条带明显弱于对照组。SOD组的Fas、FasL、caspase-8、caspase-3蛋白的表达均低于对照组,差异均有统计学意义(P<0·05);FasL抑制组的caspase-8、caspase-3的表达低于Fas/FasL组与对照组,差异均有统计学意义(P<0·05);caspase-8抑制组的caspase-3表达低于对照组,差异有统计学意义(P<0·05)。结论尘肺的发生发展可能与Fas/FasL信号传导途径介导的AMs凋亡有关。

Fas/FasL与消化道肿瘤的相关性

Fas,FasL均是细胞表面受体。正常情况下,Fas分子主要分布于人体各个组织器官及病变细胞表面,FasL广泛分布于活化的T细胞等免疫细胞表面。Fas与FasL的结合可导致表达Fas的细胞凋亡,平衡机体免疫反应。当机体发生肿瘤时,肿瘤细胞表面Fas表达下调,有时甚至出现FasL的表达,不但削弱了Fas阳性淋巴细胞的攻击能力,而且赋予了肿瘤细胞杀伤免疫细胞的能力,即肿瘤免疫逃逸的新机制—Fas反击。就这一新机制与消化道肿瘤尤其胃部肿瘤的相关性做一综述。

Fas系统介导的细胞凋亡与冠心病的关系研究进展

细胞凋亡是一种基因调控下的生理死亡方式。本文综述了近年来Fas/Fas鄄L介导的细胞凋亡与动脉粥样硬化、急性冠脉综合征及心肌缺血再灌注损伤的关系,借以更新人们对冠心病的认识,探讨冠心病的一种新的可能发生发展机制。

基于Fas/FasL介导的凋亡信号通路研究通管方对输卵管炎性不孕模型大鼠的作用机制

目的:探讨通管方对输卵管炎性不孕(SI)模型大鼠输卵管组织中Fas/FasL通路的影响。方法:采用经阴道内接种混合菌液的方法,建立输卵管炎性不孕大鼠模型。造模后,77只SD雌性大鼠随机分成空白组、假手术组、模型组、妇可靖胶囊组(0.29 g·kg^(-1)·d^(-1))、通管方低剂量组(7.515 g·kg^(-1)·d^(-1))、通管方中剂量组(15.03 g·kg^(-1)·d^(-1))、通管方高剂量组(30.06 g·kg^(-1)·d^(-1)),各组大鼠分别灌胃给药28 d后处死并取材。采用蛋白免疫印迹法(WB)检测SI模型大鼠输卵管组织中Fas、FasL蛋白及Caspase-1的表达水平,酶联免疫吸附法(ELISA)检测SI模型大鼠血清IL-4、IL-10、Caspase-1的表达变化。结果:与空白组比较,模型组血清中IL-4和IL-10的水平均明显降低,血清和输卵管组织中的Caspase-1水平明显升高(P<0.01);与模型组比较,通管方各剂量组和妇可靖胶囊组降低了血清和输卵管组织中的Caspase-1的表达(P<0.01),上调了血清中IL-4和IL-10水平、输卵管组织中Fas和FasL蛋白的表达(P<0.05,P<0.01)。其中,通管方高剂量组的作用均明显优于其他剂量组和妇可靖胶囊组(P<0.05,P<0.01)。结论:通管方可能通过调控Fas/FasL凋亡信号通路而消除SI模型大鼠输卵管炎症。

疏肝健脾方对乳腺增生大鼠sFas及Fas/FasL表达的干预作用

目的观察疏肝健脾方对乳腺增生大鼠血清sFas、乳腺组织Fas、FasL的影响。方法 60只大鼠随机分为空白对照组、疾病模型组、三苯氧胺组、疏肝健脾方小剂量组、疏肝健脾方大剂量组5组,每组12只,采用苯甲酸雌二醇和黄体酮肌注造模的同时,分别以蒸馏水、三苯氧胺、疏肝健脾方灌胃干预治疗30天后,观察乳腺增生大鼠血清sFas浓度和乳腺组织Fas、FasL的表达。结果 Fas在乳腺增生病模型大鼠中表达较低,FasL表达较高,经药物干预后,均能够增加Fas在乳腺组织中的表达(P<0.01),降低FasL中的表达(P<0.01),接近空白对照组,各组药物之间无显著性差异(P>0.05)。sFas在大鼠乳腺增生病模型血清中的浓度增高,经药物干预后能够降低sFas在大鼠血清中的浓度(P<0.01或0.05),各药物组之间无显著性差异(P>0.05)。结论疏肝健脾方对大鼠乳腺增生组织Fas/FasL系统有显著的干预作用,通过提高Fas降低FasL蛋白的表达,降低sFas在大鼠血清中的浓度,从而抑制/逆转乳腺增生,降低增生程度。

移植肾AR时病理诊断与细胞凋亡和Fas/FasL的表达

目的:探讨移植肾急性排斥(AR)时细胞凋亡与Fas和Fas配体(FasL)表达的作用及其临床意义。方法:分别用原位末端标记技术(TUNEL法)和免疫组织化学方法检测26例移植肾AR标本中细胞凋亡和Fas/FasL表达情况。结果:细胞凋亡和Fas/FasL表达主要在AR移植肾小管上皮发生,且凋亡指数和Fas/FasL表达与肾组织病理损伤程度平行,与正常肾对照组和移植肾功能稳定组比较差异显著。结论:肾小管上皮细胞凋亡在AR所致的移植肾损伤中起重要作用,Fas/FasL系统可能参与移植肾AR,是造成肾小管上皮细胞凋亡的重要因素。TUNEL法检测细胞凋亡可作为判断移植肾病理变化和预后的重要指标。

桥本甲状腺炎UGRP1与Fas介导的凋亡通路的相关性研究

目的探讨桥本甲状腺炎(HT)中子宫球蛋白相关蛋白1(UGRP1)与Fas介导的凋亡通路的相关性。方法免疫组化(IHC)法检测正常人、HT患者甲状腺细胞UGRP1的表达。在体外用质粒转染大鼠甲状腺细胞(FRTL-5细胞),分别为空载体质粒组、UGRP1质粒组、Fas质粒组,采用实时荧光定量逆转录PCR(RT-qPCR)方法检测各组细胞Fas、UGRP1基因表达水平的变化。结果HT患者甲状腺细胞UGRP1表达呈阳性,正常人甲状腺细胞UGRP1表达呈阴性。转染UGRP1质粒组的Fas基因表达水平较空载体质粒组无明显变化(1.0850±0.1249 vs1.0210±0.1139),转染Fas质粒组的UGRP1基因表达水平较空载体质粒组显著升高(P<0.0001,5.8070±0.3232 vs0.7527±0.0760)。结论桥本甲状腺炎UGRP1高表达可能与Fas介导的凋亡通路相关。