基于FRET成像探究棕榈酰化修饰调节Fyn激酶活性

目的探讨棕榈酰化修饰调节非受体酪氨酸激酶Fyn活性的分子机制。方法利用荧光共振能量转移(fluorescence resonance energy transfer,FRET)技术实时检测细胞中的Fyn活性,并结合棕榈酰化位点缺失和共转染蛋白质酪氨酸激酶(C-terminal Src kinase,CSK)表达质粒研究其分子机制。结果实验发现,(C3,C6)任一位点的棕榈酰化缺失能引起Fyn的高活性表达,且C6位点影响更显著。已知CSK激活后发生膜转移,FRET检测证实其对细胞中的Fyn活性有下调作用,但不能有效调控(C3,C6)棕榈酰化位点缺失的Fyn(GSS)活性。结论本文结果初步支持了Fyn活性受细胞内的物理空间定位分布的一种调控机制假设,即棕榈酰化缺失的Fyn(GSS)受细胞膜上CSK抑制性的调节作用被减弱,从而促进了组成性的高活性表达。

基于GSK-3β/Fyn/Nrf2信号通路探讨槲皮素对自发性高血压大鼠心肌纤维化的影响及内在机制

目的:探究槲皮素在自发性高血压大鼠(SHR)心肌纤维化中的作用机制。方法:50只SHR随机分为SHR组、卡托普利组、槲皮素低、中、高剂量组,每组10只;10只Wky大鼠为Wky组。卡托普利组灌胃给予卡托普利30 mg/kg,槲皮素低、中、高剂量组分别灌胃给予槲皮素20、50、100 mg/kg,Wky组、SHR组给予等量0.9%氯化钠溶液,每天1次,连续12周。尾袖法每2周测定大鼠尾动脉收缩压(SBP);给药结束,称定心脏质量,大鼠处死,称定其左心室质量(LVM),计算左心室肥厚指数(LVMI);比色法测血清超氧化物歧化酶(SOD)、总抗氧化能力(T-AOC)活性、丙二醛(MDA)含量;实时荧光定量-聚合酶链式反应法和Western blot法检测左心室组织中糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)、非受体酪氨酸激酶Fyn、核因子相关因子2(Nrf2)的mRNA、蛋白表达,以及Ⅰ型、Ⅲ型胶原(Collagen-Ⅰ、Collagen-Ⅲ)蛋白表达。结果:与Wky组比较,SHR组大鼠SBP、心脏质量、LVMI显著升高(P<0.01);血清SOD、T-AOC活性显著降低,MDA含量显著增加(P<0.01);左心室Collagen-Ⅰ、Collagen-Ⅲ表达显著升高(P<0.01),Nrf2、GSK-3β的mRNA、蛋白表达显著降低(P<0.01),Fyn的mRNA、蛋白表达显著升高(P<0.01)。与SHR组比较,卡托普利组、槲皮素低、中、高剂量组大鼠SBP、心脏质量、LVM、LVMI均显著降低(P<0.01);血清SOD、T-AOC活性显著升高,MDA含量显著降低(P<0.05,P<0.01);槲皮素中、高剂量组左心室中Collagen-Ⅰ、Collagen-Ⅲ蛋白表达显著降低(P<0.01);槲皮素低、中、高剂量组左心室中Nrf2、GSK-3βmRNA、蛋白表达显著升高,Fyn mRNA、蛋白表达显著降低(P<0.05,P<0.01)。结论:槲皮素可抑制SHR心肌纤维化,其机制可能是通过下调GSK-3β/Fyn信号通路,激活Nrf2诱导的抗氧化通路,减少SHR心肌组织氧化应激反应。

木兰脂素调控Fyn-STAT5通路治疗变应性鼻炎

目的:探讨木兰脂素调控致密物酪氨酸激酶(dense tyrosine kinase Fyn, Fyn)/信号转导和转录激活因子5(signal transducers and activators of transduction 5,STAT5)通路治疗变应性鼻炎(allergic rhinitis, AR)的效果。方法:将58只豚鼠采用随机数字表法分为建模组(n=50)、空白组(n=8)。建模组采用卵清白蛋白抗原混悬液全身及局部攻击建立AR模型,将建模成功的豚鼠随机分为模型组、氯雷他定组(1.05 mg·kg^(-1))及木兰脂素低剂量组(20 mg·kg^(-1))、木兰脂素中剂量组(40 mg·kg^(-1))、木兰脂素高剂量组(80 mg·kg^(-1))。给予相应药物灌胃干预,模型组和空白组以等体积生理盐水灌胃,灌胃体积为10 mL·kg^(-1),每天1次,连续7 d。对比干预前后各组豚鼠鼻部症状评分;HE染色观察各组豚鼠鼻黏膜组织病理变化。体外分离并鉴定各组豚鼠鼻黏膜成纤维细胞,转化生长因子-β1干预各组成纤维细胞后采用Western Blot检测Fyn、STAT5、干细胞因子(stem cell factor, SCF)、白细胞介素-10(interleukin-10,IL-10)蛋白表达水平;RT-qPCR检测Fyn mRNA、STAT5 mRNA、SCF mRNA、IL-10 mRNA表达水平。结果:与模型组比较,木兰脂素各剂量组豚鼠鼻部症状评分显著降低(P<0.05),鼻黏膜病理变化明显减轻。各组鼻黏膜成纤维细胞中波形蛋白均呈强阳性表达,提示鼻黏膜成纤维细胞成功分离;与模型组比较,木兰脂素各剂量组Fyn、SCF蛋白与mRNA表达水平明显降低(P<0.05),STAT5、IL-10蛋白与mRNA表达水平明显升高(P<0.05),且呈剂量依赖性。结论:木兰脂素可减轻AR豚鼠的鼻部症状和鼻黏膜组织病理改变,其作用机制可能与调控Fyn-STAT5通路进而调节免疫反应有关。

FYN结合蛋白基因rs109262355突变对中国南方荷斯坦牛泌乳性能的影响

为探究FYN结合蛋白(FYN binding protein,FYB)基因突变对中国南方荷斯坦牛泌乳性能的影响,以785头中国南方地区荷斯坦牛为研究对象,收集其2014—2020年的泌乳性状数据,通过SNaPshot技术对FYB基因突变位点进行单核苷酸多态性检测,分析突变对FYB蛋白结构和理化性质的影响,并利用最小二乘法将突变与奶牛泌乳性状、血清生化指标进行关联分析。结果显示:在试验群体中,FYB基因rs109262355位点等位基因C和T的频率分别为0.36和0.64,符合哈代-温伯格(Hardy-Weinberg)平衡(P>0.05);该位点由C→T的突变会导致FYB蛋白对应区域形成1个额外的长度为3.34A的氢键,同时使该区域的蛋白疏水性和柔性降低;该位点CC和TT基因型个体的305 d产奶量、高峰产奶量及乳脂率均存在显著差异(P<0.05),等位基因T为产奶量优势等位基因,等位基因C为乳脂率优势等位基因;该位点CC和TT基因型个体血清中低密度脂蛋白(low-density lipoprotein,LDL)含量存在显著差异(P<0.05),碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性和总胆固醇(total cholesterol,TC)含量存在极显著差异(P<0.01)。FYB基因rs109262355突变能够影响奶牛产奶量及乳脂率,可作为候选遗传标记应用于中国南方荷斯坦牛泌乳性状的标记辅助选择育种。

原发性胆管细胞癌中Fyn的表达及其与患者预后的关系

目的:研究非受体酪氨酸激酶Fyn在原发性胆管细胞癌组织中的表达情况,分析Fyn与临床病理参数之间的关系及其和患者预后的关系。方法:收集113例胆管细胞癌患者的临床资料和病理标本,通过免疫组织化学染色法(免疫组化)检测患者肿瘤组织Fyn中的表达情况,分析患者的临床病理特征,采用卡方检验分析Fyn与临床病理参数之间的关系。Kaplan-Meier法绘制患者生存曲线,Log-rank检验和Cox比例风险模型分析患者预后及影响因素。结果:Fyn的表达水平与肿瘤直径、N分期、组织分化程度有相关性,差异具有统计学意义(P < 0.05)。Fyn高表达患者的总生存期(0S)较Fyn低表达患者短(P < 0.05)。多因素Cox比例风险模型分析显示,高Fyn表达、高龄、组织分化程度低、淋巴结转移皆为影响OS的独立危险因素。结论:癌组织中Fyn的表达会影响胆管癌患者预后,Fyn可能成为胆管癌患者临床诊疗过程中新的观察指标及治疗靶点。

抑制Fyn可激活Nrf2信号通路减轻大鼠脑出血后氧化应激损伤

目的探讨抑制酪氨酸激酶Fyn(tyrosine kinase Fyn)对大鼠脑出血(intracerebral hemorrhage,ICH)后氧化应激的影响及其潜在机制。方法 96只雄性SD大鼠采用随机数字表法分为4组:假手术组(Sham组)、脑出血组(ICH组)、阴性对照组(ICH+Si-NC组)和Fyn敲低组(ICH+Si-Fyn组)。基底节注入50μL自体血建立ICH模型,侧脑室注射小干扰片段抑制Fyn的表达,ICH后24 h进行病死率统计、尼氏染色、神经功能评分、血脑屏障通透性检测,ELASA检测ICH大鼠血肿周围脑组织的SOD、GSH、GSH-PX、MDA、H2O2含量,Western blot检测脑组织中Fyn、核因子E2相关因子2(factor erythroid 2-related factor 2,Nrf2)及Nrf2下游血红素加氧酶-1(heme oxygenase-1, HO-1)和醌氧化还原酶1(quinine oxidoreductase 1, NQO1)的表达。结果与Sham组相比,ICH组脑组织中Fyn的表达增高(P<0.05),大鼠病死率增高、神经元变性坏死增多、改良Garcia评分减低、平衡木实验评分增加(P<0.05),血脑屏障通透性降低;脑组织SOD、GSH、GSH-PX活力减少(P<0.05),而MDA、H2O2含量增加(P<0.05);脑组织中Nrf2、HO-1、NQO1的表达增高(P<0.05)。ICH组与ICH+Si-NC组无明显差异。与ICH+Si-NC组相比,siRNA-Fyn可有效抑制Fyn的表达,ICH+Si-Fyn组大鼠病死率降低、神经元变性坏死减少、神经功能评分改善(P<0.05),血脑屏障通透性降低;脑组织血肿周围SOD、GSH、GSH-PX活力增加(P<0.05),而MDA、 H2O2含量减低(P<0.05);脑组织中Nrf2、HO-1、NQO1的表达增加(P<0.05)。结论抑制Fyn可减轻大鼠脑出血后氧化应激损伤,其机制可能与激活Nrf2信号通路有关。

新生期缺氧缺血大鼠脑白质损伤及脑内Fyn、p-ERK和MBP下调

目的检测新生大鼠缺氧缺血后脑内酪氨酸蛋白激酶Fyn、p-ERK及髓鞘碱性蛋白(myelin basic protein,MBP)表达的变化,探讨Fyn-ERK通路在缺氧缺血脑白质损伤中的作用。方法新生3日龄SD大鼠24只,随机分为对照组和缺氧缺血(HI)组。缺氧缺血后4周,应用HE染色法观察脑组织病理学改变;应用免疫荧光染色法和Western blot法观察Fyn、p-ERK及MBP在大鼠脑内的定位定量表达变化。结果 HE染色显示缺氧缺血大鼠出现缺氧缺血脑白质损伤病理改变;免疫荧光染色和Western blot检测显示脑内Fyn、p-ERK和MBP水平均明显下调。结论新生期缺氧缺血损伤4周后,可能通过Fyn与p-ERK水平的下调而使MBP减少,进而使少突胶质细胞成熟障碍,引起脑白质损伤。

酪氨酸蛋白激酶Src和Fyn对脑缺血再灌注大鼠海马CA_1区神经细胞损伤的影响

目的观察胞内可溶性酪氨酸蛋白激酶Src、Fyn蛋白对脑缺血再灌注后海马CA1区神经细胞存活的影响。方法采用Pulsinelli-Brierley4动脉阻塞(4-VO)大鼠全脑缺血模型,缺血前连续3d脑室注射Src、Fyn反义寡核苷酸(antisense oligodeoxy-nucletides,AS ODNs)抑制Src、Fyn蛋白的表达后缺血,复灌5d,石蜡切片,焦油紫染色,图像分析测定单位面积内焦油紫染色细胞面积总和,与缺血组及错义寡核苷酸组(missense oligodeoxy-nucletides,MS ODNs)比较进行形态学分析。结果Src、Fyn反义寡核苷酸对脑缺血再灌注后海马CA1神经细胞均有明显保护作用,以Src AS ODNs保护作用更明显,与缺血组比较约有50%细胞存活(P<0.05)。结论胞内可溶性酪氨酸蛋白激酶Src、Fyn蛋白的含量降低对脑缺血再灌注后海马神经细胞有明显保护作用,且以Src作用更为明显。

Lck和Fyn对T细胞发育过程的影响

胸腺中T细胞的发育及次级淋巴组织中成熟T细胞的活化均需要细胞能够对环境信号分子做出适应性的反应。在共刺激分子及细胞因子受体介导的信号参与下通过TCR(T cell receptor)及其辅助受体CD4和CD8与MHC/抗原肽复合物相互作用,可以诱导TCR信号通路激活并最终导致T细胞免疫反应的发生。Src家族激酶Lck(Lymphocyte-specific protein tyrosine kinase)和Fyn(Proto-oncogene tyrosine-protein kinase)的激活是启动TCR信号通路的关键因素。在T细胞的发育、阳性选择、初始T细胞的外周存活及由淋巴细胞缺失诱导的细胞增殖中都起着关键性的作用。研究显示,虽然这两种信号分子紧密相关,但在某些条件下Lck发挥着比Fyn更重要的作用,并且Fyn仅可以补充Lck的部分功能。文章针对这两个激酶在T细胞发育的整个过程中的作用机制进行了论述。

小鼠Fyn及其多种突变体的载体构建和蛋白生物活性预测分析

旨在构建小鼠Fyn及其多种突变体真核表达载体,预测突变后的蛋白质二级结构和功能改变。克隆小鼠大脑皮质的Fyn基因,构建克隆质粒pMD18-T-Fynwt,经测序验证后,以pMD18-T-Fynwt为模板,针对不同突变位点设计引物,构建不同突变体克隆质粒并验证,将Fyn不同的突变体克隆至真核表达载体pCAG-MCS,构建真核表达载体pCAG-MCS-Fyn**,将表达载体转染细胞进行检测,并对其进行生物信息学分析。测序结果显示pMD18-T-Fynwt核苷酸序列正确率100%,突变体完全达到预期设计;pCAG-MCS-Fyn**转染细胞后Fyn**表达量明显升高(P<0.01)。结果表明,Fyn突变体蛋白质的二级结构与野型相比有很大改变,可能影响其生物活性。

低氧对大鼠海马神经元酪氨酸蛋白激酶Fyn表达的影响

目的：探讨低氧对大鼠酪氨酸蛋白激酶Fyn表达的影响。方法：大鼠随机分为正常对照组和低氧组，低氧组大鼠进行6周常压缺氧饲养。低氧结束后，采用免疫组织化学、RT-PCR方法，分别观察大鼠海马的Fyn蛋白以及mRNA水平的变化。结果：Fyn在两组大鼠海马CA3区均有表达，与对照组相比，Fyn在低氧组大鼠海马CA3区辐射层表达比对照组降低；同时低氧组动物Fyn的mRNA水平降低。结论：低氧环境使大鼠海马中的Fyn蛋白及其mRNA表达均降低。

Tau蛋白调控Fyn信号通路在阿尔茨海默病大鼠发病机制中的作用

目的探讨Tau蛋白调控Fyn信号通路在阿尔茨海默病(AD)大鼠发病中的作用机制。方法雄性SD大鼠60只随机分为正常组,模型组及观察组。采用β淀粉样蛋白毒性片段(Aβ25～35)海马注射制备AD大鼠模型。10μmol/L SB216763(Tau蛋白抑制剂)注射至观察组大鼠脑组织。采用SABC法对大鼠脑组织中Tau蛋白进行免疫组化检测,Western印迹检测Fyn和Fak的表达。结果与正常组相比,模型组大鼠脑组织Tau蛋白含量及Fyn和Fak的表达显著增加(P<0.05);与模型组相比,观察组Tau蛋白含量及Fyn和Fak的表达显著增加(P<0.05)。结论 Tau蛋白可能通过调控Fyn信号通路参与了AD的发病过程,为AD的治疗提供了新的研究方向。

PMA特异性抑制K562细胞BCR/ABL和Fyn mRNA的表达

目的:研究12-肉豆蔻酸-13-乙酸佛波酯(PMA)对K562细胞BCR/ABL与Fyn mRNA表达的影响及两者之间的关系。方法:1～250μg/L PMA刺激K562细胞24 h后,应用实时荧光定量PCR技术检测各组BCR/ABL和Fyn mRNA的水平。结果:PMA明显抑制BCR/ABL和Fyn mRNA的水平,该下调作用均具有显著的量效关系,且BCR/ABL和Fyn的mRNA表达水平下调表现出明显的相关性。比较刺激Molt-4细胞株的结果,PMA抑制作用具有细胞选择性。K562细胞株经诱导后出现伪足样的形态改变。结论:PMA通过抑制BCR/ABL融合基因的转录下调Fyn转录水平。

Src家族酪氨酸激酶Fyn在肺鳞状细胞癌组织中的表达及意义

目的探讨肺鳞状细胞癌组织中Fyn的表达水平及其意义。方法采用免疫组织化学法和免疫印迹法分析肺鳞状细胞癌组织及正常肺组织Fyn蛋白表达水平的变化。结果免疫组织化学染色显示肺鳞状细胞癌组织中Fyn蛋白表达水平(12.54±2.45)高于癌旁正常肺组织中染色指数(4.34±1.27),差异有统计学意义(P<0.01)。免疫印迹结果亦显示肺鳞癌组织中Fyn蛋白表达强于癌旁正常肺组织。结论 Fyn蛋白在肺鳞状细胞癌组织中过度表达,提示Fyn基因在肺鳞状细胞癌的发生发展过程中起重要作用。

NO引起Fyn酪氨酸激酶巯基亚硝基化的体外研究

目的 探讨离体情况下一氧化氮（NO）对酪氨酸蛋白激酶Fyn蛋白巯基亚硝基化的影响.方法 HEK293细胞转染pcDNA3.1-Fyn质粒后,用S-亚硝基谷胱甘肽（GSNO）刺激,或共转染神经型一氧化氮合酶（nNOS）-Fyn质粒,再用A23187和7-硝基吲唑（7-NI）刺激,生物素转换法（biotin-switch method）和Western blotting检测Fyn巯基亚硝基化情况.结果 GSNO以及 nNOS在A23187存在的情况下,都能够引起Fyn巯基亚硝基化.结论外源性和内源性NO都能够使Fyn巯基亚硝基化.

大鼠脑缺血/再灌注诱导的海马CA1区Fyn亚硝基化

目的 观察大鼠脑缺血/再灌注诱导海马CA1区酪氨酸蛋白激酶Fyn的巯基亚硝基化水平变化,并探讨其变化的可能机制.方法 采用Pulsinelli-Brierley四动脉阻断法制作大鼠全脑缺血/再灌注模型,生物素转化法检测亚硝基化的Fyn.结果 大鼠脑缺血/再灌注可以引起Fyn的巯基亚硝基化,亚硝基化的Fyn随再灌注时间延长逐渐增加,再灌注6 h增加最为明显;缺血前20 min注射神经元型一氧化氮合酶的抑制剂7-硝基吲唑可以明显抑制Fyn的巯基亚硝基化.结论 大鼠脑缺血/再灌注早期可以通过神经元型一氧化氮合酶产生的一氧化氮诱导Fyn的巯基亚硝基化.

Fyn信号通路参与β-淀粉样蛋白对大鼠皮层神经元的毒性损伤作用

目的探讨β-淀粉样蛋白(Aβ)对原代培养皮层神经元的毒性损伤以及Fyn信号转导通路在此过程中的作用。方法孕17～18 dSD大鼠,体外分离培养皮层神经元,培养7 d后加入Aβ1～42,孵育8 h建立毒性损伤模型,采用生化方法检测神经元细胞培养上清中的乳酸脱氢酶(LDH)释放率,以免疫荧光法、Western印迹法分别检测Fyn和Fak的表达情况。结果与对照组比较,经终浓度5μmol/L的寡聚体Aβ1～42诱导损伤8 h,神经元细胞培养上清中的LDH释放增加,免疫荧光和Western印迹法分别检测到Fyn和Fak的表达增加。结论 A可明显诱导原代培养皮层神经元的毒性损伤,Fyn信号通路参与这一毒性损伤作用。

酪氨酸蛋白激酶Fyn突变体FynY531F与FynK299M活性的鉴定

Fyn是Src酪氨酸蛋白激酶家族(Src family of protein tyrosine kinases;SrcPTKs)中的一员,在神经元的增殖、分化和存活中起着重要作用.本文利用分子克隆手段构建Fyn突变体FynY531F(酪氨酸突变为苯丙氨酸)和FynK299M(赖氨酸突变为甲硫氨酸)的真核表达载体,并通过检测突变体对NMDA受体亚基NR2A的磷酸化作用以鉴定其激酶活性.根据GenBank提供的大鼠Fyn的cDNA序列(NM-012755),采用RT-PCR扩增野生型Fyn(wFyn)目的基因,应用定点突变技术扩增活化型Fyn(FynY531 F)目的基因,并用重叠延伸PCR定点突变技术扩增失活型Fyn(FynK299 M)目的基因,分别克隆入真核表达载体pcDNA3.1(+).免疫印迹分析显示,wFyn、FynY531F及FynK299M重组体均能在COS-7细胞表达.将构建的3个重组体分别与NMDA受体亚基NR2A的表达质粒共转染COS-7细胞.结果显示,活化型Fyn能够使NR2A酪氨酸磷酸化,而失活型Fyn则没有表现出激酶活性.结果表明,本文成功构建了野生型、活化型及失活型Fyn的真核表达载体,为进一步揭示Fyn在中枢神经系统中的病理生理意义奠定了基础.

Fyn诱导Bcl-X选择性剪切调控胰腺癌细胞凋亡的机制研究

目的:明确非受体酪氨酸激酶Fyn在胰腺癌侵袭转移中的作用;探究Fyn是否参与Bcl-X基因的选择性剪切的调控,并阐明其分子机制。方法:对三种侵袭转移能力不同的胰腺癌细胞进行Fyn激酶活性测定,明确Fyn活性与胰腺癌侵袭转移能力之间的关系。将携带激酶活性缺失的KD-Fyn(Kinase Dead-Fyn)的腺病毒转染Bx PC3胰腺癌细胞,Transwell侵袭实验、TUNEL法分别检测抑制Fyn活性前后Bx PC3侵袭能力以及凋亡水平的改变。RT-PCR检测Bcl-X基因两种剪切体比例的变化。结果:转染KD-Fyn以后,Fyn激酶活性明显下降,降低至正常水平的1/2以下。抑制Fyn活性,转染组穿膜细胞数由原来的108±14降为54±7,明显降低了Bx PC3胰腺癌细胞侵袭运动能力,促进凋亡。RT-PCR证实,抑制Fyn活性明显改变了凋亡相关基因Bcl-X的选择性剪切方式。Bcl-X(s)/Bcl-X(L)的剪切比例由0.57±0.08改变为2.12±0.15。在裸鼠成瘤实验中,转染Fyn的裸鼠成瘤能力为100%(12/12),而转染KD-Fyn的裸鼠成瘤能力降低为16.7%(2/12),抑制Fyn活性可以明显抑制Bx PC3胰腺癌细胞在裸鼠中的成瘤能力。结论:抑制Fyn的激酶活性,可以下调胰腺癌细胞的侵袭转移能力,而这种作用是通过影响Bcl-X基因选择性剪切方式改变,进而影响胰腺癌细胞凋亡实现的。

Src、Fyn激酶对脑缺血/再灌注大鼠海马NMDA受体NR2A亚基磷酸化水平的影响

目的观察脑缺血再灌注后海马Src家族酪氨酸蛋白激酶(Src family of protein tyrosine kinase,SrcPTKs)成员Src、Fyn激酶对NMDA受体(N-methyl-D-aspartate receptors,NMDAR,NR)NR2A亚基磷酸化水平的影响。方法采用Pulsinelli-Brierley四动脉阻断(four-vessel occlusion,4-VO)大鼠全脑缺血模型,缺血前连续3天脑室注射Src、Fyn反义寡核苷酸(antisense oligode oxynucletides,AS-ODNs)及错义寡核苷酸组(missenseoligodeoxynucletides,MS ODNs)后缺血15 min,用免疫沉淀和免疫印迹法检测NR2A亚基酪氨酸磷酸化水平的变化。结果Fyn反义寡核苷酸使脑缺血再灌注海马NR2A亚基磷酸化水平下降,而Src反义寡核苷酸对脑缺血/再灌注海马NR2A亚基磷酸化水平影响更加明显。结论脑缺血/再灌注过程中NMDA受体NR2A亚基的磷酸化主要是由Src激酶介导的。