扶金化积丸对环磷酰胺治疗Lewis肺癌荷瘤小鼠的化疗增敏作用及机制

目的探讨扶金化积丸对环磷酰胺治疗Lewis肺癌荷瘤小鼠化疗增敏的作用及机制。方法选取健康C57BL/6小鼠接种Lewis肺癌瘤株造模。小鼠随机分成正常组、荷瘤对照组、扶金化积丸组、环磷酰胺组、扶金化积丸+环磷酰胺组。各组药物干预后,检测荷瘤小鼠瘤重、瘤体体积、计算抑瘤率及器官指数。全自动血液分析仪进行血细胞计数及血红蛋白浓度检测。酶联免疫吸附试验检测血清中肿瘤坏死因子-α、白细胞介素2、γ干扰素的含量。苏木素-伊红染色观察瘤组织病理学改变。免疫组化法检测基质金属蛋白酶9、核因子κB的表达。结果与环磷酰胺组比较,扶金化积丸+环磷酰胺组瘤瘤重、瘤体体积显著减小(P<0.05);脾脏、胸腺指数显著增大(P<0.001);红细胞、白细胞、血小板数目及血红蛋白浓度均显著升高(P<0.01,P<0.001);肿瘤坏死因子-α及白细胞介素2含量均显著升高(P<0.05,P<0.001);瘤组织核固缩较多,有明显坏死及出血现象,出现细胞凋亡;基质金属蛋白酶9、核因子κB表达降低,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论扶金化积丸可增强环磷酰胺对Lewis肺癌荷瘤小鼠的抑瘤作用,其机制与增强机体免疫有关。

紫龙金联合埃克替尼对Lewis肺癌荷瘤小鼠免疫功能及肿瘤血管生成的影响

目的:探讨紫龙金联合埃克替尼对Lewis肺癌荷瘤小鼠免疫功能及肿瘤血管生成的影响。方法:选用无特定病原体(SPF)级C57BL/6雄性小鼠50只,随机取10只用于制备Lewis瘤细胞悬液,余40只于其右前肢腋窝皮下分别接种0.2 mL的Lewis瘤细胞悬液,建立Lewis肺癌荷瘤小鼠模型,并将其随机均分为模型组、紫龙金组、埃克替尼组、联合观察组,每组10只。对比各组肿瘤重量、肿瘤生长抑制率;用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测小鼠血管内皮生长因子、小鼠肿瘤组织白细胞介素2(IL-2)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、干扰素(IFN-γ)水平;流式细胞术检测小鼠脾脏免疫细胞比例。结果:与紫龙金组及埃克替尼组比较,联合观察组小鼠的肿瘤重量和小鼠肿瘤生长抑制率高(均P<0.05),血管内皮生长因子水平及微血管密度低(均P<0.05),CD4^(+)T、CD8^(+)T及B淋巴细胞比例高(均P<0.05),肿瘤组织的IL-2、TNF-α、IFN-γ水平低(均P<0.05)。结论:紫龙金和埃克替尼联合治疗具有协同作用,显著降低了Lewis肺癌荷瘤小鼠模型的肿瘤重量,抑制了血管生成,增强了免疫功能,减轻了炎症反应。

升降理肺消瘤汤对Lewis肺癌小鼠免疫炎性反应和JAK2/STAT3信号通路的影响

目的探讨升降理肺消瘤汤对Lewis肺癌小鼠免疫和炎性反应的调控作用,以及对JAK2/STAT3信号通路的影响。方法适应性喂养C57BL/6J雄性小鼠1周,其中空白组8只,荷瘤组60只。荷瘤组小鼠注射Lewis肺癌细胞造模成功后,将瘤体肉眼可见的荷瘤小鼠分为模型组、PD-1抑制剂组、升降理肺消瘤汤(XLT)低剂量组、XLT中剂量组、XLT高剂量组、XLT中剂量联合PD-1抑制剂组(联合用药组),每组8只。空白组和模型组每日0.4 mL/20 g生理盐水灌胃;PD-1抑制剂组每3 d腹腔注射100μg信迪利单抗;XLT低、中、高剂量组每日0.4 mL/20 g相应浓度中药灌胃;联合用药组每日0.4 mL/20 g中浓度中药灌胃,每3 d腹腔注射100μg信迪利单抗,各组连续给药14 d。最后一次给药的24 h后,称量记录小鼠体质量,摘眼球取血,颈椎脱臼法处死小鼠,比较各组小鼠抑瘤率、去瘤体质量、胸腺指数和脾指数;ELISA法检测血清中白细胞介素-2(IL-2)、干扰素-γ(IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、IL-6浓度水平;Western Blot检测Janus激酶2(JAK2)、p-JAK2、信号转导和转录激活因子3(STAT3)、p-STAT3蛋白表达水平。结果与模型组比较,各用药组小鼠平均瘤重均较少,PD-1抑制剂组、XLT中、高剂量组瘤重明显减少(P<0.01);PD-1抑制剂组和XLT中剂量组去瘤体质量增加(P<0.01);各用药组小鼠胸腺指数和脾指数均显著增加(P<0.01);PD-1抑制剂组、XLT中剂量组及联合用药组IL-2水平显著升高(P<0.05),各用药组小鼠IFN-γ水平均明显升高(P<0.05);除XLT低剂量组,各用药组TNF-α和IL-6水平均明显降低,差异有统计学意义(P<0.05);各用药组小鼠JAK2蛋白相对表达量均降低(P<0.05),XLT高剂量组和联合用药组p-JAK2降低差异有统计学意义(P<0.05);除PD-1抑制剂对p-STAT3蛋白的表达抑制作用不明显外,各用药组小鼠STAT3、p-STAT3蛋白相对表达量均较模型组显著降低(P<0.05)。结论升降理肺消瘤汤能够抑制Lewis肺癌小鼠瘤体生长,可能与其增强瘤鼠抗肿瘤免疫反应,减轻炎性反应,抑制JAK2/STAT3信号通路的激活有关。

血府逐瘀胶囊联合顺铂对小鼠Lewis肺癌移植瘤血管新生及VEGFA、VEGFR2表达的影响

目的探讨血府逐瘀胶囊联合顺铂对小鼠Lewis肺癌移植瘤血管新生及血管内皮生长因子A(VEGFA)、血管内皮细胞生长因子受体2(VEGFR2)表达的影响。方法从75只C57BL/6小鼠中随机取15只作为正常组,其余小鼠均进行Lewis肺癌荷瘤造模。将造模成功的60只小鼠随机分为模型组、顺铂组、血府逐瘀胶囊组、血府逐瘀胶囊联合顺铂组,每组15只。血府逐瘀胶囊组给予血府逐瘀胶囊0.36 g/kg灌胃,模型组给予生理盐水灌胃,均2次/d;顺铂组给予2 mg/kg的顺铂腹腔注射,2 d 1次;血府逐瘀胶囊联合顺铂组给予0.36 g/kg血府逐瘀胶囊灌胃(2次/d)和2 mg/kg的顺铂腹腔注射(2 d 1次);正常组不给予任何干预。各组连续干预15 d后,统计存活率,摘取瘤组织并称量瘤重,计算抑瘤率,免疫组化法检测肿瘤组织中微血管数量,ELISA法测定血浆VEGFA、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)水平,免疫印迹法检测肿瘤组织中VEGFA、VEGFR2蛋白表达情况。结果顺铂组和血府逐瘀胶囊联合顺铂组小鼠存活率明显高于模型组和血府逐瘀胶囊组(P均<0.05);血府逐瘀胶囊联合顺铂组瘤重明显低于其他组(P均<0.05),抑瘤率明显高于顺铂组和血府逐瘀胶囊组(P均<0.05),肿瘤组织中微血管数明显少于模型组和血府逐瘀胶囊组(P均<0.05);顺铂组瘤重明显低于模型组和血府逐瘀胶囊组(P均<0.05),抑瘤率明显高于血府逐瘀胶囊组(P<0.05),肿瘤组织中微血管数明显少于其他组(P均<0.05)。顺铂组血浆VEGFA、bFGF水平和肿瘤组织中VEGFA、VEGFR2蛋白相对表达量均明显低于模型组(P均<0.05);血府逐瘀胶囊联合顺铂组血浆bFGF水平和肿瘤组织中VEGFR2蛋白相对表达量均明显低于模型组(P均<0.05)。结论血府逐瘀胶囊联合顺铂对Lewis肺癌荷瘤小鼠具有显著的抑瘤及抑制肿瘤血管新生的作用,其机制可能与VEGFA/VEGFR2信号通路相关。

昆明小鼠Lewis肺癌细胞种植后对心率变异的影响

目的:研究Lewis肺癌小鼠心率变异性(HRV)指标的变化规律,探索与肺癌诊断相关的心率变异指标。方法:将70只雄性昆明小鼠随机分为对照组(正常小鼠)20只和实验组(Lewis肺癌建模组)50只,实验组在建模之后根据是否成瘤分为未成瘤组和成瘤组。在建模后分别记录各组小鼠的HRV指标数值和统计分析。结果:建模后成瘤组有36只小鼠,未成瘤组14只,包括对照组在内各组小鼠均存活。由单因素ANOVA检验和Kruskal-Wallis检验得到差异具有统计学意义(P<0.05)的指标有sdnn、rmssd、lf、hf,且在三组的两两比较中,sdnn的差异均具有统计学意义(P<0.05)。进行Spearman相关分析得:sdnn、rmssd、lf、hf与肿瘤都具有一定的负相关关系(P<0.05)。多项Logistic回归分析得sdnn和rmssd在对照组和成瘤组、未成瘤组和成瘤组中产生显著性影响(P<0.05)。在决策树模型中,sdnn的特征重要性在差异具有统计学意义的4个指标中都是最高的,rmssd次之。在三组中进行ROC曲线分析,sdnn和rmssd对于成瘤均有很高的诊断价值,得到sdnn截止水平为37.49 ms,敏感性为97.2%,特异性为91.2%;rmssd的截止水平为52.82 ms,敏感性为94.4%,特异性为79.4%。结论:低水平的sdnn和rmssd可能是Lewis肺癌移植瘤的独立危险因素,HRV中sdnn、rmssd、hf等下降能够反映自主神经紊乱,后者会影响肿瘤的进展。

复方蟾酥胶囊对小鼠Lewis肺癌移植瘤的药效学研究

目的:探讨不同剂量复方蟾酥胶囊对C57BL/6J小鼠Lewis肺癌的抑制作用。方法:选取60只SPF级雄性C57BL/6J小鼠,随机分为空白组10只和造模组50只。空白组单独饲养,造模组采用小鼠Lewis肺癌细胞株(LLC)进行肺癌肿瘤右侧腋窝皮下造模,造模成功后随机分为模型组、顺铂组和复方蟾酥胶囊低、中、高剂量组,每组各10只。顺铂组隔日腹腔注射顺铂,复方蟾酥胶囊低、中、高剂量组每天用不同剂量复方蟾酥胶囊溶液[0.1365、0.273、0.546 g/(kg·d)]灌胃,空白组不予处理;模型组灌胃生理盐水,14 d后处死小鼠并取出肿瘤组织及肺组织。采用ELISA法、实时荧光定量PCR、蛋白免疫印迹法、HE染色检测小鼠肿瘤组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量,半胱氨酸蛋白酶(Caspase-3)、血管内皮生长因子(VEGF)mRNA表达、蛋白表达及肺组织病理情况来测定肿瘤抑制情况。结果:与模型组比较,复方蟾酥胶囊中剂量组及顺铂组瘤重显著降低(P<0.05),TNF-α水平降低(P<0.05,P<0.01),显著上调Caspase-3 mRNA和蛋白的表达水平(P<0.05,P<0.01,P<0.0001),显著下调VEGF mRNA和蛋白的表达水平(P<0.01,P<0.001);模型组肺组织中多见肺泡壁增厚,伴有较多淋巴细胞与中性粒细胞浸润,局部支气管可见上皮细胞坏死,核碎裂,有明显肺水肿及出血,顺铂组和复方蟾酥胶囊各剂量组能明显改善上述情况,且肺泡腔内有嗜酸性浆液样物质渗出。结论:复方蟾酥胶囊具有抑制Lewis肺癌瘤体生长的作用。

苗药吉祥草配伍余甘子抗Lewis肺癌细胞增殖组分的筛选

目的:探索吉祥草和余甘子配伍后治疗非小细胞肺癌的药效物质,为吉祥草配伍余甘子在抗肿瘤制剂开发方面的研究提供实验依据。方法:采用鲜药榨汁、传统水煎、渗漉为提取方法制得吉祥草配伍余甘子的不同提取物,以Lewis肺癌细胞体外实验模型作为评价手段,优选药材的最佳提取方法;通过膜分离技术,将最佳提取方法的提取物分段截留得到不同分子量区间段组分,以Lewis肺癌细胞体外实验模型作为评价手段优选最佳的分子量区间段。结果:吉祥草配伍余甘子对Lewis肺癌细胞增殖抑制作用的最佳提取方法为95%乙醇渗漉法。95%乙醇渗漉提取物对Lewis肺癌细胞增殖抑制作用的最佳分子量区间段组分为分子量10~30 KD与分子量≤1 KD组分。结论:苗药吉祥草配伍余甘子对Lewis肺癌细胞具有增殖抑制作用,抑制作用最佳组分为95%乙醇渗漉的分子量10~30 KD与分子量≤1 KD组分。

川芎嗪和丹参对小鼠Lewis肺癌生长的抑制作用与抑制血管生成的关系

目的 观察川芎嗪注射液 (TMP)、丹参注射液对小鼠 L ewis肺癌生长和转移及肿瘤血管生成的影响。方法 用 C57BL小鼠 L ewis肺癌模型 ,分别 ip TMP 5 0 ,10 0 ,2 0 0 mg/(kg· d) ,丹参注射液 5 ,10 ,2 0 g/(kg· d) ,共2 1d,检测小鼠 L ewis肺癌移植瘤体积、质量、肺转移灶数、肿瘤微血管密度 (MVD)和血管内皮生长因子 (VEGF)的表达。结果 与模型组相比 ,TMP组小鼠 L ewis肺癌移植瘤的体积、质量、肺转移灶数、肿瘤 MVD和 VEGF的表达均显著降低 ;丹参组与模型组比较差异无显著性。结论 TMP可抑制小鼠 L ewis肺癌移植瘤的生长和转移 ,其作用机制与抑制 VEGF的表达、抑制血管生成有关。丹参对小鼠 L ewis肺癌移植瘤的生长和转移无明显影响。

黄芪多糖联合顺铂处理降低Lewis肺癌移植瘤CD44表达并降低血清Ⅳ型胶原蛋白和透明质酸的水平

目的观察黄芪多糖(APS)联合顺铂(cisplatin)对小鼠Lewis肺癌移植瘤生长、血清Ⅳ型胶原蛋白(Col4)和透明质酸(HA)含量及移植瘤细胞CD44表达的影响。方法 90只C57BL/6 J小鼠,设空白对照组10只,其余80只依次造模为荷瘤小鼠,并随机分为8组:模型组(等体积生理盐水)、顺铂阳性对照组(6 mg/kg顺铂)、(50、100、200)mg/kg APS组,联合用药组(顺铂剂量减半,APS各剂量同上)。于造模次日起各组分别腹腔注射等体积的药物0.3 m L。顺铂每周1次,其余药物每天1次,连续20 d。于第21天眼球取血,采用放免法测定血清Col4、HA的含量,采用免疫组织化学染色和图像分析方法检测移植瘤细胞中CD44的表达,并计算各组抑瘤率。结果顺铂组、(50、100、200)mg/kg APS组及联合用药组,小鼠Lewis肺癌移植瘤的抑瘤率分别为49.30%、17.21%、39.68%、42.98%、51.02%、57.21%、65.11%。各治疗组均可降低小鼠血清中Col4和HA含量,抑制移植瘤细胞CD44的表达。结论 APS能抑制小鼠Lewis肺癌细胞的生长,降低移植瘤细胞CD44的表达,减少血清中Col4和HA含量;与顺铂减半剂量联合使用后作用增强,说明APS对顺铂有一定的增效减毒功能。

肺瘤平膏及其拆方对Lewis肺癌小鼠树突状细胞影响的实验研究

目的观察中药复方肺瘤平膏及其拆方对Lewis肺癌荷瘤小鼠血中、脾中及瘤体中的树突状细胞(DC)含量的影响,以期阐明不同治则方药对机体免疫调节功能可能的作用机制。方法观察肺瘤平膏及其各拆方对Lewis肺癌小鼠血中及脾中DC含量的影响,并用免疫组化观察各组瘤组织中S-100蛋白的表达情况。结果 Lewis肺癌荷瘤小鼠的外周血及脾中DC含量(‰)较正常组明显降低(P<0.01),分别为:0.43±0.26vs4.68±0.90,0.32±0.16vs3.68±1.58,瘤组织中S-100蛋白的表达较弱;肺瘤平膏可明显提高其外周血及脾中DC含量(P<0.01),分别为:2.55±0.29,2.70±0.63,并明显上调S-100蛋白表达水平;拆方研究表明,肺瘤平膏中的益气类方药对Lewis肺癌荷瘤小鼠DC含量及表达的升高作用最为显著。结论在扶正培本为主要治则的肺瘤平膏抗肿瘤作用明确,其作用机制可能是通过提高荷瘤小鼠DC含量及表达,增强机体的抗肿瘤免疫功能,进而发挥抑瘤作用。

黄芪多糖联合顺铂对小鼠Lewis肺癌细胞肺转移的影响

目的观察黄芪多糖(APS)联合顺铂(DDP)对小鼠Lewis肺癌细胞肺转移、核因子(NF)-κB、P38、P53及Caspase-9表达的影响。方法将90只Lewis小鼠随机分为模型组、顺铂组(6mg/kg DDP)、APS组(50、100、200)mg/kg,联合用药组[1/2 DDP+APS,即:(3+25、3+50、3+100)mg/kg]。各组均于造模第2天起用药,APS每日1次,DDP每周1次,连续20d。观察肿瘤肺转移情况,采用Real-time PCR法和Western blotting法检测肿瘤组织中NF-κB、P38、P65蛋白和基因,并用免疫组织化学检测Caspase-9的表达。结果与模型组相比,各治疗组均可降低肺转移灶数目(P<0.05或P<0.01);除P38外,APS中、高剂量组可使小鼠Lewis肺癌组织中NF-κB p65、P53表达降低,Caspase-9表达增高;联合用药高剂量组作用则接近DDP组。结论 APS可抑制小鼠Lewis肺癌细胞的转移,抑制NF-κB和丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路的激活,这可能是其抑制肿瘤转移的机制之一;APS与减半剂量的DDP铂类化疗药物联合使用时,作用增强,APS对DDP有增效减毒作用。

全蝎、蜈蚣水煎剂抗小鼠Lewis肺癌及其对免疫器官的影响

目的探讨虫类中药全蝎、蜈蚣水煎剂对小鼠Lewis肺癌的抑制作用及其对免疫器官的影响。方法复制C57BL小鼠Lewis肺癌模型并随机分为8组(每组10只):全蝎高、中、低剂量组(1600,800,400 mg·kg-1),蜈蚣高、中、低剂量组(1200,600,300 mg·kg-1),环磷酰胺组(20 mg·kg-1)和氯化钠对照组,分别每日给予0.2m L相应药液腹腔内注射,共14 d。其中,全蝎和蜈蚣中剂量组的剂量约相当于成人每日4 g和3 g的常规用量。实验结束时处死动物,记录体质量、瘤质量、脾脏及胸腺质量,分析、比较各组的瘤质量及脾脏指数、胸腺指数。结果全蝎、蜈蚣各剂量组均有一定的抑瘤作用,抑瘤效应与剂量相关,随着药物剂量的增大,抑瘤率相应增高。其中,全蝎高、中剂量组和蜈蚣高剂量组的抑瘤作用较为明显(抑瘤率分别为36.5%、29.0%和27.5%),3组瘤质量均明显低于氯化钠对照组(P<0.05,P<0.01);各剂量组平均瘤质量(除全蝎高剂量组外)均明显高于环磷酰胺组(P<0.001);全蝎低剂量组和蜈蚣中、低剂量组虽有一定的抑瘤作用(抑瘤率分别为20.0%、18.0%、14.0%),但平均瘤质量与氯化钠对照组比较无统计学意义(P>0.05);在脾脏指数和胸腺指数方面,环磷酰胺组及全蝎高、中剂量组均明显低于氯化钠对照组(P<0.05,P<0.01)。结论全蝎、蜈蚣水煎剂对小鼠Lewis肺癌的生长有一定的抑制作用,且抑瘤效应与剂量之间有一定的相关性,其中以全蝎高、中剂量组和蜈蚣高剂量组的抑瘤作用较为明显,全蝎高剂量组最为明显。全蝎高、中剂量组及环磷酰胺组对小鼠脾脏和胸腺有较为明显的抑制效应,而全蝎低剂量组及蜈蚣各剂量组则无明显影响。

康莱特注射液对Lewis肺癌小鼠免疫功能的影响

目的观察康莱特注射液(KLT)对Lewis肺癌小鼠模型免疫功能的影响。方法将40只C57BL/6小鼠制成Lewis肺癌模型,随机分为模型组和KLT高、中、低剂量组,每组10只。建模第2天起,KLT高、中、低剂量组每天分别给予腹腔注射KLT25、12.5、6.25mL/kg,连续14d;模型组不予任何处理。第16天,处死小鼠,称取体质量、肿瘤和脾脏质量,计算肿瘤抑制率和脾脏指数;MTT法检测脾脏中T细胞增殖活力;ELISA检测脾细胞中IL-2的表达;Western blot检测脾脏组织中NF-κB和IκBα蛋白的表达。结果KLT高、中、低剂量组的肿瘤抑制率逐渐降低;KLT高、中剂量组的脾脏指数高于模型组(P<0.05或P<0.01)。与模型组比较,KLT高、中、低剂量组脾脏中T细胞增殖活力明显升高,KLT高、中剂量组脾细胞中IL-2的表达水平明显升高(P<0.05或P<0.01)。与模型组比较,KLT高、中、低剂量组胞核中NF-κB蛋白表达随给药剂量增加而升高;胞质中NF-κB和IκBα蛋白表达随给药剂量增加而下降。结论KLT在抗肿瘤的同时能通过提高T细胞增殖活力,调节IL-2、NF-κB、IκBα等因子的表达,达到增强机体免疫功能的目的。

苏木 苏木+黄芪对Lewis肺癌荷瘤鼠脾树突细胞的干预作用

目的:观察苏木、苏木+黄芪对荷瘤小鼠脾树突细胞的干预作用。方法:复制C57BL/6小鼠Lewis肺癌动物模型,动态观察苏木、苏木+黄芪对抑瘤率、肺转移抑制率、荷瘤小鼠体重、生存期的影响,接种后第15天分离纯化脾树突细胞,流式细胞仪检测树突细胞表型。结果:荷瘤晚期各中药组小鼠体重均高于对照组,但各组比较无统计学差异;各实验组各时间点小鼠瘤重均低于对照组,其中苏木组第6天、黄芪+苏木组第10天瘤重与荷瘤对照组相比存在差异(P<0.05),各实验组抑瘤率随荷瘤天数的增加总体呈降低趋势;各中药组小鼠20天肺转移抑制率均优于对照组,其中黄芪+苏木组肺转移抑制率为77.75%;中位生存期分别为黄芪+苏木组(39天)>苏木组(35天)>荷瘤对照组(24天);各组小鼠脾DCCD11c、CD80、CD86百分比由低至高为荷瘤对照组<苏木组<黄芪+苏木组<正常对照组,正常对照组(51.64±3.08、64.65±4.05、73.00±2.92)各指标均明显高于荷瘤对照组(27.11±4.24、29.14±5.92、5.41±2.11)(P<0.01)。黄芪+苏木组CD80(56.45±20.20)与荷瘤对照组相比存在差异(P<0.05),CD11c(43.69±6.34)与荷瘤对照组相比差异显著(P<0.01),荷瘤对照组、苏木组、黄芪+苏木组CD86表达无差异。结论:荷瘤小鼠脾DCCD11c、CD80、CD86表达均明显低于正常对照组,中药干预能上调DC表面标志表达,益气活血组方苏木+黄芪作用优于单纯活血药苏木。

黄芪-莪术配伍对Lewis肺癌生长转移及血管生成的抑制作用及机制研究

目的通过检测黄芪-莪术配伍对Lewis肺癌瘤组织微血管密度(MVD)和血管内皮生长因子(VEGF)的表达,探讨其通过调控肿瘤血管生成抑制肿瘤生长及转移的作用机制。方法腋下接种Lewis肺癌细胞,建立Lewis肺癌荷瘤小鼠模型,然后随机分成模型组、顺铂组、低中高剂量黄芪-莪术配伍组,自接种后第2天起低、中、高剂量黄芪-莪术配伍组分别予4,8,16 g/(kg·d)生药灌胃1 d,连续15 d;顺铂组腹腔注射顺铂2 mg/kg,1/2 d,共8次。于接种后第16天处死小鼠,称瘤重计算抑瘤率并计数肺转移灶,免疫组化法检测肿瘤组织中微血管密度(MVD)及血管内皮生长因子(VEGF)表达。结果各中药配伍组均可抑制肿瘤生长及转移,低、中、高剂量黄芪-莪术配伍组的抑瘤率分别为20.9%、37.70%、40.42%,且瘤重和肺转移灶计数均低于模型组,差异有统计学意义(P<0.01)。与模型组相比,各中药组瘤组织的MVD平均计数和VEGF蛋白平均光密度显著降低(P<0.01),且高剂量黄芪-莪术配伍组降低最为显著。结论黄芪-莪术配伍应用可降低瘤组织微血管密度,抑制瘤组织VEGF表达,发挥抑肿瘤生长及转移的作用。

苏木对C57BL/6小鼠Lewis肺癌不同时间生长和转移的影响

目的动态观察苏木对Lewis肺癌生长和转移的影响并研究其部分作用机制。方法建立Lewis肺癌C57BL/6小鼠肿瘤模型,随机分为模型组,苏木低、高剂量组,化疗组,化疗加苏木低、高剂量组共6组,连续灌胃给药21天。于第7、14、21天分3批处死小鼠,动态观察各组抑瘤率、抑转移率,流式细胞仪检测小鼠移植瘤细胞CD44的表达,酶联免疫吸附法(ELISA)检测小鼠血清P-选择素浓度。结果除苏木低剂量组外,其余各给药组在3个时间点瘤重均低于模型组(P<0.05,P<0.01);且化疗加苏木高剂量组低于同期化疗组(P<0.05,P<0.01)。瘤细胞CD44^+表达:第7天,苏木高剂量组、化疗组均显著低于模型组(P<0.01);第14天,化疗加苏木低、高剂量组低于模型组(P<0.01,P<0.05);第21天,化疗加苏木低、高剂量组显著低于模型组(P<0.01)。P-选择素浓度:第7天,各给药组低于模型组(P<0.05,P<0.01);第14天,用药各组与模型组比较差异无统计学意义(P>0.05);第21天,化疗加苏木高剂量组低于模型组(P<0.05)。结论苏木及苏木联合化疗可以抑制Lewis肺癌的生长,并可以抑制小鼠瘤细胞CD44、血清P-选择素等黏附因子的表达。其抑制转移的机制可能与降低CD44、P-选择素的表达有关。

益肺清化颗粒对Lewis肺癌小鼠VEGF、bFGF、Angiostatin、Endostatin影响的研究

目的观察中药益肺清化颗粒对Lewis肺癌小鼠瘤组织中的血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)、血管抑素(Angiostatin)、内皮抑素(Endostatin)的影响,探讨益肺清化颗粒的抑瘤机制。方法 70只小鼠随机分为模型组,中药低、中、高剂量组,吉非替尼组,吉非替尼加中药中剂量组,以及环磷酰胺(CTX)组,每组10只。所有小鼠右腋皮下接种Lewis瘤细胞进行造模。模型组给予纯净水0.4mL灌胃,每天1次;中药低、中剂量组分别给予益肺清化颗粒5、10g/kg灌胃,每天1次;中药高剂量组给予益肺清化颗粒10g/kg灌胃,每天2次;吉非替尼组给予吉非替尼100mg/kg灌胃,每天1次;吉非替尼加中药中剂量组上午给予吉非替尼100mg/kg灌胃,下午给予益肺清化颗粒10g/kg灌胃。上述各组均从小鼠接种肿瘤细胞的第2天开始给药,连续14天。CTX组在实验第3、7天给予CTX60mg/kg腹腔注射。第15天处死小鼠,取瘤,免疫组化法检测肿瘤组织中VEGF、bFGF、Angiostatin、Endostatin的表达。结果与模型组比较,各给药组VEGF表达均显著降低(P<0.01),Angiostatin、Endostatin表达显著增加(P<0.01),且吉非替尼组bFGF表达明显降低(P<0.05)。各给药组间VEGF比较,差异无统计学意义(P>0.05)。CTX组Angiostatin表达显著高于中药低剂量组(P<0.01)。中药高剂量组、吉非替尼加中药中剂量组Endostatin表达明显高于中药低、中剂量组(P<0.01);吉非替尼加中药中剂量组Endostatin表达明显高于吉非替尼组(P<0.05)。结论益肺清化颗粒可能通过降低血管生成促进因子VEGF的表达,升高血管生成抑制因子Angiostatin、Endostatin的表达,进而发挥抑瘤作用。

红景天提取物对Lewis肺癌小鼠移植瘤中CD4^+CD25^+Treg的抑制作用

目的:观察红景天提取物(sachalin rhodiola rhizome extract,SRR)对Lewis肺癌小鼠移植瘤中CD4+CD25+调节性T细胞(regulatory T cell,Treg)的抑制作用,初步探讨其抑制肿瘤生长的机制。方法:建立小鼠Lewis肺癌移植瘤模型,随机分为3组:SRR组,紫杉醇(paclitaxel,PTX)阳性对照组和PBS组,记录各组小鼠移植瘤体积变化,计算抑瘤率并观察小鼠生存期。流式细胞术检测移植瘤组织中CD4+CD25+Foxp3+Treg的比例,荧光定量PCR检测移植瘤组织中Foxp3和TGF-βmRNA的表达水平。结果:在建模第20天,SRR组小鼠移植瘤体积明显小于PBS组[(719.6±2.4)vs(1030.5±3.1)mm3,P<0.05],但与阳性对照PTX组无显著差异(P>0.05)。SRR组小鼠生存期较PBS组显著延长[(36.0±1.0)vs(22.0±2.0)d,P<0.01],而与PTX组无显著差异(P>0.05)。SRR治疗组小鼠移植瘤组织中CD4+CD25+Foxp3+Treg占CD4+T细胞的比例显著低于PBS组[(8.5±0.3)%vs(11.2±0.2)%,P<0.01],但与PTX组无显著差异(P>0.05)。SRR组小鼠移植瘤组织中Foxp3 mRNA[(1.2±0.2)vs(2.1±0.2),P<0.05]、TGF-βmRNA[(1.2±0.1)vs(2.1±0.2),P<0.05]表达均明显低于PBS组,而与PTX组无显著差异(P>0.05)。结论:SRR可能通过下调肿瘤组织中CD4+CD25+Treg比例、Foxp3和TGF-βmRNA的表达,增强机体的抗肿瘤免疫应答。

泽漆汤对小鼠Lewis肺癌抑制作用及survivin蛋白表达的影响

目的:观察泽漆汤对Lewis肺癌荷瘤小鼠瘤体的抑制作用及其对survivin蛋白表达的影响,探讨其作用机理。方法:C57BL/6小鼠在右前腋皮下接种Lewis肺癌细胞造模,观察低、中、剂量泽漆汤对荷瘤小鼠抑瘤率、胸腺指数和肿瘤细胞增殖周期的影响,并通过免疫组化染色观察泽漆汤对Lewis肺癌荷瘤小鼠肿瘤组织sur-vivin蛋白的表达。结果:低、中、高剂量泽漆汤对Lewis肺癌荷瘤小鼠的瘤重抑制率分别为24.55%、28.74%和35.93%;与模型组比较,泽漆汤能抑制肿瘤细胞的增殖周期,下调Lewis肺癌荷瘤小鼠肿瘤组织凋亡抑制蛋白survivin的表达水平(P<0.01)。结论:泽漆汤在体内具有明显的抗肿瘤作用,这一作用可能与其能下调肿瘤细胞的凋亡抑制蛋白survivin的表达相关。