心脑通络液对动脉粥样硬化兔LDL-mRNA和VCAM-1mRNA表达的影响

目的研究心脑通络液对动脉粥样硬化兔LDL-mRNA和VCAM-1mRNA表达的影响,探讨心脑通络液抗动脉粥样硬化作用。方法选取雄性新西兰兔40只,随机分为5组,即假手术组、模型组、心脑通络液液高剂量组(高剂量组)、心脑通络液低剂量组(低剂量组)、血脂康对照组,建立腹主动脉粥样硬化家兔模型。造模成功后,连续治疗2个月,RT-PCR法观察并检测不同时间点LDL-mRNA、VCAM-1mRNA的表达情况。结果高剂量组与血脂康组、低剂量组相比,LDL-mRNA表达升高,VCAM-1mRNA表达降低(P<0.05);高剂量组对动脉硬化家兔LDL-mRNA及VCAM-1mRNA表达的影响较血脂康组显著(P<0.05),且优于低剂量组(P<0.05)。结论心脑通络液可通过上调动脉粥样硬化兔腹主动脉细胞LDL-mRNA、下调腹主动脉细胞VCAM-1mRNA来改变动脉粥样硬化血管内皮基因表达失调,从而达到保护血管内皮细胞、抗动脉粥样硬化的作用。

参芪补心丸对心肌缺血模型大鼠ICAM-1、VCAM-1mRNA水平的影响

目的:通过观察参芪补心丸对心肌缺血模型大鼠ICAM-1,VCAM-1mRNA表达的影响,探讨参芪补心丸治疗冠心病的作用机制和疗效。方法:健康Wistar大鼠60只,雌雄各半。将其随机分为空白对照组、模型对照组、心通口服液组、参芪补心丸高、中、低剂量组,每组10只。利用原位杂交技术观察参芪补心丸对冠心病模型大鼠ICAM-1,VCAM-1mRNA表达的影响。结果:与空白对照组比较,除参芪补心丸高剂量组其余各组大鼠心肌组织ICAM-1和VCAM-1mRNA含量增高,有极显著差异(P<0.01);与模型对照组比较,参芪补心丸高、中剂量组均可降低大鼠心肌组织ICAM-1和VCAM-1mRNA含量,有极显著差异(P<0.01),心通口服液组有显著差异(P<0.05);与心通口服液组比较,参芪补心丸高剂量组ICAM-1的含量降低,有极显著差异(P<0.01),中剂量组ICAM-1含量降低,有显著差异(P<0.05);与心通口服液组比较,参芪补心丸高、中剂量组VCAM-1mRNA的含量降低,有极显著差异(P<0.01);与参芪补心丸中、低剂量组比较,参芪补心丸高剂量组ICAM-1的含量降低,有极显著差异(P<0.01)。结论:参芪补心丸通过降低心肌缺血模型大鼠ICAM-1,VCAM-1mRNA的表达,与对照组相比能够明显减轻血管内皮炎性反应,抗血管内皮损伤。

抵当汤对血脂异常大鼠ET-1 mRNA、VCAM-1 mRNA表达影响

目的:观察抵当汤不同剂量对血脂异常大鼠血脂、黏附因子及内皮功能影响。方法:采用经典喂养法复制大鼠血脂异常的模型,喂高脂饲料,同时每天灌胃抵当汤。连续喂养8周。实验结束断头取血,测定血清TC、TG、HDL-C、LDL-C。取主动脉采用RT-PCR方法测定组织中ET-1 mRNA、VCAM-1 mRNA表达。结果:血清TC、TG、LDL明显降低,HDL显著升高;主动脉组织ET-1 mRNA、VCAM-1 mRNA表达显著降低。结论:抵当汤具有调节血脂,保护内皮功能的作用,是防治血脂异常理想的药物。

大鼠角膜碱、酸、热烧伤后ICAM-1、VCAM-1、CD44及E-selectin mRNA的表达

目的利用RT-PCR法检测大鼠角膜烧伤后角膜局部ICAM-1、VCAM-1、CD44及E-selectin的mRNA表达情况,探讨黏附分子在角膜烧伤中的变化,以进一步完善角膜烧伤的免疫机制。方法制备Wistar大鼠角膜碱、酸、热烧伤模型。提取大鼠烧伤后3d和2周角膜RNA,反转录扩增ICAM-1、VCAM-1、CD44及E-selectin,根据DNA条带的光密度值确定DNA含量。观察烧伤后3d和2周以上各指标的变化。结果角膜烧伤后3d,与正常对照组(1.658±0.722)相比,3个烧伤组ICAM-1mR-NA表达量增加(5.699±0.934、3.182±0.830、3.403±0.916),差异均有显著统计学意义(均为P<0.01);2周时,3个烧伤组ICAM-1mRNA较3d时明显减少,其中碱烧伤组伤后3d和2周ICAM-1mRNA的表达量均较酸和热烧伤组明显增多,差异均有显著统计学意义(均为P<0.01)。同正常对照组(2.172±0.368)相比,烧伤后2周时,碱烧伤组VCAM-1mRNA表达量(8.591±1.021)增多,差异有极显著统计学意义(P<0.001),而酸和热烧伤组差异均无显著统计学意义。同正常对照组(1.402±0.439)相比,伤后3d时3个烧伤组CD44mRNA表达量无显著变化,2周时碱烧伤组CD44mRNA表达量(5.587±0.753)增加,与对照组比较,差异有显著统计学意义(P<0.01),酸和热烧伤组CD44mRNA表达量增加,但差异无统计学意义。3d时角膜各烧伤组E-selectin的表达量低于正常对照组,差异均有显著统计学意义(均为P<0.01);2周时各烧伤组E-selectinmRNA的表达量明显增加,高于正常对照组,差异均有显著统计学意义(均为P<0.01),3个烧伤组间差异无显著统计学意义。结论在角膜烧伤的急性期,ICAM-1介导中性粒细胞与血管内皮细胞的黏附,表达增加。CD44及其配体在角膜烧伤特别是角膜碱烧伤的愈合过程中发挥重要作用。作为介导白细胞与血管内皮细胞最初黏附过程的黏附分子,E-selectin在角膜烧伤的病理发生中的作用机制有待于进一步研究。

黄芪失笑散对实验大鼠主动脉和OX-LDL诱导下人脐静脉内皮细胞ICAM-1 VCAM-1 mRNA基因表达的影响

目的：探讨黄芪失笑散对动脉硬化大鼠主动脉和氧化低密度脂蛋（OX—LDL）刺激下人脐静脉内皮细胞（HUVECs）细胞间黏附分子-1（ICAM—1）、血管黏附分子-1（VCAM—1）mRNA基因表达影响。方法：采用高脂饲料喂饲和腹腔注射维生素D，建立大鼠AS模型，取48只雄性SD大鼠随机分为6组：正常对照组、模型组、氟伐他汀组、黄芪失笑散小剂量组、黄芪失笑散中剂量组、黄芪失笑散大剂量组。治疗12周后，用RT—PCR法检测大鼠主动脉ICAM—1、VCAM—1的表达；进行HUVECs原代培养，取第4～6代进行实验，随机分为6组：对照组、模型组、氟伐他汀组、黄芪失笑散小剂量组、黄芪失笑散中剂量组、黄芪失笑散大剂量组。OX—LDL刺激HUVECs6h后，大鼠药物血清与HUVECs共培养48h，用RT—PCR法检测大鼠主动脉ICAM—1、VCAM—1的表达。结果：黄芪失笑散大剂量可显著降低动脉粥样硬化大鼠主动脉、OX—LDL诱导的HUVECs的ICAM—1、VCAM—1 mRNA表达（P〈0．01），且黄芪失笑散对OX—LDL诱导的HUVECs的ICAM-1、VCAM-1 mRNA表达的抑制作用呈剂量依赖性。结论：黄芪失笑散的抗动脉粥样硬化的作用源于抑制ICAM-1、VCAM-1 mRNA的表达。

白细胞介素1β对兔主动脉平滑肌细胞MCP-1及VCAM-1蛋白及mRNA表达的影响

白细胞介素１β（ＩＬ－１β） 是一种参与动脉粥样硬化斑块形成的细胞因子。为了研究ＩＬ－１β在动脉粥样硬化斑块形成过程中的作用， 采用酶联免疫吸附试验 （ＥＬＩＳＡ） 和Ｎｏｒｔｈｅｒｎ Ｂｌｏｔ法观察ＩＬ－１β对培养的兔主动脉平滑肌细胞（ＳＭＣ） 单核细胞趋化蛋白１ （ ＭＣＰ－１） 和血管细胞粘附分子１ （ＶＣＡＭ－１） 蛋白分泌及ｍ ＲＮＡ表达的影响。结果表明，ＩＬ－１β对兔主动脉ＳＭＣＭＣＰ－１ 的蛋白分泌和ｍ ＲＮＡ 表达具有明显的诱导作用， 而对ＶＣＡＭ－１ 表达则无明显影响。说明ＩＬ－１β可能通过诱导ＳＭＣ表达ＭＣＰ－１

罗格列酮对IR大鼠血清visfatin、VCAM-1水平及内脏脂肪组织visfatin mRNA表达的影响

目的研究罗格列酮对胰岛素抵抗(IR)大鼠血清内脏脂肪素(visfatin)与血管细胞间黏附分子-1(VCAM-1)的水平,内脏脂肪组织visfatinmRNA表达的影响。方法雄性Wistar大鼠50只作为研究对象,高脂饮食4周,诱导IR模型成功后,给予罗格列酮组药物干预,继续喂养8周。ELISA测定空腹血清visfatin和VCAM-1,RT-PCR方法测定内脏脂肪visfatinmRNA表达。结果 (1)高脂喂养12周大鼠血清visfatin、VCAM-1升高(P<0.01,P<0.05)。(2)罗格列酮组血清VCAM-1下降(P<0.01);visfatin无明显变化(P>0.05)。(3)高脂喂养大鼠与正常对照组比较,内脏脂肪组织visfatinmRNA表达增强(P<0.05),罗格列酮组与高脂对照组比较,visfatinmRNA表达差异无统计学意义(P>0.05)。(4)相关分析显示血清visfatin与VCAM-1、TG、TC、内脏脂肪含量呈正相关(r值分别为0.910、0.499、0.367、0.446,P<0.05);多元逐步回归分析显示visfatin是VCAM-1的独立相关因素。结论罗格列酮可降低VCAm-1水平,可显著增强胰岛素敏感性,并改善血管内皮功能。

阿托伐他汀对AngⅡ诱导内皮细胞VCAM-1和ICAM-1 mRNA表达的影响

目的:观察阿托伐他汀对于血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的培养人脐静脉内皮细胞表达血管细胞粘附分子-1(VCAM-1)和细胞间粘附分子-1(ICAM-1)mRNA的影响,探讨阿托伐他汀的非降脂作用和潜在的治疗作用。方法:培养人脐静脉内皮细胞,取生长良好的第2、3代细胞进行实验。将细胞分为三组:对照组、AngⅡ组、阿托伐他汀干预组。对照组加培养液,AngⅡ组以不同浓度的AngⅡ与细胞共孵育24 h,干预组首先用不同浓度的阿托伐他汀(0.05μmol/L,0.1μmol/L,1.0μmol/L,10μmol/L)分别作用1 h,而后加1μmol/L AngⅡ与细胞共育24 h。半定量RT-PCR测定粘附分子ICAM-1和VCAM-1mRNA的表达。结果:AngⅡ能上调ICAM-1和VCAM-1的表达,阿托伐他汀在一定程度上可抑制上述作用。结论:阿托伐他汀可抑制粘附分子ICAM-1和VCAM-1 mRNA表达,可能具有增加粥样斑块稳定性和延缓动脉粥样硬化进程的作用。

辛伐他丁对2型糖尿病大鼠血管内皮VCAM-1和MCP-1 mRNA和蛋白表达的影响

目的了解辛伐他丁对2型糖尿病大鼠血管内皮细胞黏附分子-1(VCAM-1)和单核细胞趋化因子-1(MCP-1)的影响。方法30只SD大鼠随机分为正常组(NC)、糖尿病组(DMC)、辛伐他丁治疗组(DMT),每组各10只大鼠。喂养12周后抽血测定血脂全套,取主动脉标本以免疫组化和半定量RT-PCR法分别检测VCAM-1和MCP-1的mRNA和蛋白表达。结果DMT组大鼠血管内皮VCAM-1和MCP-1的mRNA和蛋白表达明显降低,与DMC组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论辛伐他丁可减少糖尿病大鼠血管内皮VCAM-1和MCP-1的表达,减轻血管内皮局部的炎症反应。

HSV-1即刻早期基因的5′UTR对报告基因mRNA翻译的影响

mRNA疫苗的5′非翻译区(5’untranslated regions,5′UTR)对其表达起着重要作用,报告基因增强绿色荧光蛋白基因(enhanced green fluorescent protein,EGFP)用于检测5′UTR调控mRNA表达已经是一个较为成熟的实验方法.为研究单纯疱疹病毒1型(herpes simplex virus 1,HSV-1)即刻早期基因的5′UTR作为报告基因EGFP mRNA的5′UTR对其翻译的影响,本研究将4个即刻早期基因的5’UTR以及表达能力较强的人β珠蛋白基因(humanβGlobin,hBg)5′UTR插入报告基因EGFP 5’端,通过观察绿色荧光强度研究不同即刻早期基因5′UTR对mRNA翻译的影响.结果表明:经mRNA转染试剂和纳米脂质体颗粒分别递送进293T细胞和小鼠体内;RL2的5′UTR作为报告基因EGFP 5′UTR的表达水平与hBg 5′UTR相近,RS1、US1、US12表达水平明显弱于hBg 5′UTR.因此,RL2基因的5′UTR有潜力作为mRNA疫苗的5′UTR.

血清HbA1c、VCAM-1、VEGF表达水平与后循环脑梗死的相关性

目的 探讨血清糖化血红蛋白(HbA1c)、血管细胞粘附分子1(VCAM-1)、血管内皮生长因子(VEGF)表达水平与后循环脑梗死的相关性。方法 选取80例后循环脑梗死患者作为观察组,依据椎基底动脉狭窄程度分为轻度组42例、中度组22例、重度组16例,同时选取同期50名健康体检者作为对照组。比较观察组和对照组血清HbA1c、VCAM-1、VEGF表达水平;不同程度后循环脑梗死患者血清HbA1c、VCAM-1、VEGF表达水平;血清HbA1c、VCAM-1、VEGF表达水平与椎基底动脉狭窄程度的相关性分析;血清HbA1c、VCAM-1、VEGF表达水平对脑梗死的诊断价值。结果 观察组血清HbA1c、VCAM-1、VEGF表达水平显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。轻度组、中度组和重度组后循环脑梗死患者血清HbA1c、VCAM-1、VEGF表达水平差异均有统计学意义(P<0.05)。重度组血清HbA1c、VCAM-1、VEGF表达水平显著高于中度组和轻度组,中度组血清HbA1c、VCAM-1、VEGF表达水平显著高于轻度组,差异均有统计学意义(P<0.05)。血清HbA1c、VCAM-1、VEGF表达水平与椎基底动脉狭窄程度均呈正相关(P<0.05)。血清HbA1c、VCAM-1、VEGF水平联合检测椎基底动脉狭窄程度AUC及敏感度均高于单独检测,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 血清HbA1c、VCAM-1、VEGF表达水平与后循环脑梗死病情严重程度呈正相关,三者对后循环脑梗死患者具有较好的诊断价值。

过表达miR-144-3p下调感染巨噬细胞 IL-6 mRNA抑制BCG的存活

探究miR-144-3p对巨噬细胞IL-6 mRNA表达量和巨噬细胞免疫能力的影响,为结核诊疗提供理论参考。方法(1)建立BCG感染THP-1巨噬细胞模型,qPCR检测感染不同时间miR-144-3p和IL-6 mRNA表达变化;(2)瞬转miR-144-3p模拟物/抑制剂来过表达/抑制miR-144-3p后,qPCR检测感染不同时间miR-144-3p和IL-6 mRNA表达变化;皮尔森相关系数分析miR-144-3p和IL-6 mRNA的相关性;(3)CCK-8检测瞬转miR-144-3p模拟物/抑制剂后,CCK-8检测BCG感染的巨噬细胞增殖能力;CFU检测BCG存活状态。结果显示:(1)巨噬细胞感染BCG后,miR-144-3p和IL-6 mRNA表达均显著上升(P<0.05),miR-144-3p表达量在12 h达到峰值,IL-6 mRNA表达量在24 h达到峰值;(2)巨噬细胞感染BCG后,过表达miR-144-3p使IL-6 mRNA表达显著下降(P<0.01);抑制miR-144-3p使IL-6 mRNA表达显著上升(P<0.01);皮尔森相关系数分析结果显示两者存在负相关性;(3)过表达/抑制miR-144-3p不影响巨噬细胞增殖能力,但过表达miR-144-3p能抑制巨噬细胞中BCG的存活。结论:BCG感染巨噬细胞后miR-144-3p和IL-6 mRNA表达均显著上升;过表达/抑制巨噬细胞miR-144-3p,miR-144-3p可能负调控IL-6 mRNA表达;过表达miR-144-3p能抑制BCG存活,进而增强巨噬细胞的先天免疫能力。

椎管内麻醉后CD老年患者S100β、H-FABP、NLRP3mRNA、Caspase-1 mRNA表达意义

目的分析老年髋关节置换术(THA)患者椎管内麻醉后认知功能障碍(CD)发生的危险因素及中枢神经特异蛋白(S100-β)、核苷酸结合寡聚化域受体蛋白3信使核糖核酸(NLRP3 mRNA)、中心型脂肪酸结合蛋白(H-FABP)、天冬氨酸蛋白水解酶1信使核糖核酸(Caspase-1 mRNA)对其预测价值。方法将椎管内麻醉后发生CD的40例老年THA术患者纳入A组,另选取未发生CD的68例老年THA术患者纳入B组。比较两组临床资料、S100-β、H-FABP、NLRP3 mRNA、Caspase-1 mRNA,危险因素采用多因素Logistic回归分析法进行分析,S100-β、H-FABP、NLRP3 mRNA、Caspase-1 mRNA对老年THA术患者椎管内麻醉后CD发生的预测价值采用受试者工作特征(ROC)曲线进行分析。结果A组年龄大于B组,差异有统计学意义(t=13.674,P<0.05);有糖尿病、术中低血压的患者占比均高于B组,差异有统计学意义(χ^(2)=12.643、17.767,P<0.05)。A组血清S100-β、NLRP3 mRNA、H-FABP、Caspase-1mRNA表达均高于B组,差异有统计学意义(t=14.571、21.691、80.159、23.572,P<0.05)。老年THA术患者椎管内麻醉后CD发生的独立危险因素包括年龄大、糖尿病、术中低血压、血清S100-β、H-FABP、水平、NLRP3 mRNA、Caspase-1 mRNA高,差异有统计学意义(P<0.05)。S100-β、H-FABP、NLRP3 mRNA、Caspase-1 mRNA联合检查预测老年THA术患者椎管内麻醉后CD发生的曲线下面积(AUC)为0.915高于单一检测(P<0.05)。结论年龄大、糖尿病、术中低血压均为老年THA术患者椎管内麻醉后CD发生的独立危险因素,且S100-β、H-FABP、NLRP3 m RNA、Caspase-1 mRNA联合检测对CD的预测价值较高。

子痫前期孕妇血清中激活素A、抑制素A及VCAM-1的表达及与病情严重程度关系

探讨子痫前期(PE)孕妇血清中激活素A、抑制素A及血管细胞黏附因子-1(VCAM-1)的表达及与病情严重程度关系。方法 选取我院收治的PE孕妇为研究对象,分为轻度PE组(30人),严重PE组(15人),对照组为同期正常孕妇(30人)。收集血清后应用酶联吸附免疫法检测血清中激活素A、抑制素A及VCAM-1表达水平,并分析激活素A、抑制素A与VCAM-1表达相关性。结果 3 组孕妇血清中激活素A、抑制素A及VCAM-1的表达水平有显著差异( P<0. 05) 。重度PE组各血清指标水平显著高于轻度PE组和对照组,轻度PE组血清学各指标显著高于对照组(P<0. 05)。重度PE组和轻度PE组孕妇血清激活素 A和抑制素A与VCAM-1表达水平呈正相关 (P<0. 05 ) ,对照组血清各指标表达无相关性( P>0. 05)。结论 PE孕妇血清中激活素A、抑制素A和VCAM-1表达水平显著上调,且与PE严重程度密切相关,PE发生可能与激活素A和抑制素A诱导VCAM-1表达,进而影响内皮功能有关。

子宫内膜癌组织中miR-145-5p、IGF2BP1 mRNA表达变化及与患者预后的关系

目的探讨子宫内膜癌(EC)组织中微小RNA-145-5p(miR-145-5p)、胰岛素样生长因子2 mRNA结合蛋白1(IGF2BP1)mRNA表达变化及与患者预后的关系。方法选取2018年5月—2021年5月于南通市肿瘤医院行手术切除的EC组织及对应癌旁组织标本115例份,采用实时荧光定量PCR法检测EC组织及癌旁组织中miR-145-5p、IGF2BP1 mRNA表达,Pearson相关法分析miR-145-5p与IGF2BP1 mRNA表达的相关性。根据EC组织中miR-145-5p、IGF2BP1 mRNA表达的中位数将患者分为高/低表达组,Kaplan-Meier法绘制高/低miR-145-5p、IGF2BP1 mRNA表达的EC患者生存曲线;多因素Cox回归分析影响EC患者预后的因素。结果与癌旁组织比较,EC组织中miR-145-5p表达降低,IGF2BP1 mRNA表达升高(t分别为-22.201、19.038,P均<0.05)。miR-145-5p与IGF2BP1 mRNA表达呈负相关(r=-0.748,P<0.05)。EC组织中miR-145-5p、IGF2BP1 mRNA表达与组织分化程度、国际妇产科联盟(FIGO)分期和淋巴结转移有关(P均<0.05)。115例EC患者3年总生存率为67.83%(78/115)。miR-145-5p高表达组3年总生存率高于miR-145-5p低表达组,IGF2BP1 mRNA高表达组3年总生存率低于IGF2BP1mRNA低表达组(χ^(2)分别为13.484、11.755,P均<0.05)。EC患者死亡的独立危险因素为组织分化程度低分化、FIGO分期Ⅲ期、有淋巴结转移、IGF2BP1 mRNA表达≥1.53(OR分别为5.434、6.092、4.327、5.339,95%CI分别为1.735~17.021、1.930~19.225、1.424~13.154、1.515~18.811),独立保护因素为miR-145-5p表达≥0.74(OR=0.298,95%CI:1.515~18.811)。结论EC组织中miR-145-5p低表达,IGF2BP1 mRNA高表达,与组织分化程度、FIGO分期、淋巴结转移和患者预后有关。

子宫内膜癌组织中IGF2BP1mRNA,PEG10mRNA表达及与增殖基因表达的相关性和预后研究

目的研究子宫内膜癌(endometrial carcinoma,EC)组织中胰岛素样生长因子2 mRNA结合蛋白1(insulinlike growth factor 2 mRNA binding protein 1,IGF2BP1)mRNA,父系表达遗传印记基因10(patrilineal expression of genetic imprinting gene 10,PEG10)mRNA表达及与增殖基因表达的相关性及预后。方法选取2017年1月~2019年1月湖北理工学院附属妇幼保健院诊治的100例EC患者。实时荧光定量PCR检测EC癌组织和癌旁组织中IGF2BP1 mRNA,PEG10 mRNA及增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)mRNA,细胞周期素D1(cyclin D1)mRNA,细胞周期蛋白依赖激酶4(cyclin dependent kinase 4,CDK4)mRNA表达。免疫组织化学检测IGF2BP1,PEG10蛋白表达。相关性采用Pearson相关分析。Kaplan-Meier曲线分析不同IGF2BP1,PEG10表达组EC患者的预后差异。COX回归分析EC患者的预后影响因素。结果EC癌组织中IGF2BP1 mRNA(1.84±0.33),PEG10 mRNA(2.12±0.40),PCNA mRNA(3.14±0.42),cyclinD1 mRNA(2.81±0.36),CDK4 mRNA(2.37±0.34)高于癌旁组织(0.78±0.21,0.91±0.25,0.74±0.13,0.67±0.21,0.59±0.18),差异具有统计学意义(t=25.652~54.588,均P<0.05)。癌组织中IGF2BP1(70.00%),PEG10(72.00%)蛋白阳性率高于癌旁组织(100%,9.00%),差异具有统计学意义(χ^(2)=75.000,82.363,均P<0.05)。EC中IGF2BP1 mRNA,PEG10 mRNA表达与PCNA mRNA,cyclinD1 mRNA,CDK4 mRNA表达呈正相关(r=0.562~0.625,均P<0.05)。EC中IGF2BP1 mRNA与PEG10 mRNA表达呈显著正相关(r=0.663,P<0.05)。FIGO分期Ⅲ期、并发淋巴结转移EC癌组织中IGF2BP1(86.49%,87.50%),PEG10(89.19%,90.63%)阳性率高于FIGO分期Ⅰ~Ⅱ期(60.32%,61.90%)、无淋巴结转移(61.77%,63.24%),差异具有统计学意义(χ^(2)=6.863~8.608,均P<0.05)。IGF2BP1阳性组患者三年总体生存率70.00%(49/70)低于阴性组的90.00%(27/30);PEG10阳性组患者三年总体生存率为69.44%(50/72),低于阴性组的92.86%(26/28),差异具有统计学意义(Log-rankχ^(2)=4.133,5.491,P=0.042,0.019)。FIGO分期Ⅲ期(OR=1.449,95%CI:1.148~1.830)、并发淋巴结转移(OR=1.442,95%CI:1.124~1.850),IGF2BP1阳性(OR=1.637,95%CI:1.239~2.163)及PEG10阳性(OR=1.576,95%CI:1.136~1.187)是影响EC患者生存预后的独立危险因素(均P<0.05)。结论EC中IGF2BP1,PEG10表达升高,两者与增殖基因表达呈正相关,是EC预后评估的肿瘤标志物。

一种新型1型单纯疱疹病毒mRNA疫苗的制备

制备用于防治1型单纯疱疹病毒感染的新型mRNA疫苗,并检测其免疫效果。利用同源重组技术构建HSV1糖蛋白gD胞外域(HSV1-gD^(Ectodomain))重组质粒,经PCR反应扩增HSV1-gD^(Ectodomain)基因模板,体外转录反应得到HSV1-gD^(Ectodomain)mRNA,利用LNP包封HSV1-gD^(Ectodomain)mRNA得到mRNA-LNP疫苗复合物,小鼠大腿肌肉接种mRNA-LNP疫苗复合物。ELISA法检测小鼠血清HSV1-gD抗体效价;TCID50法检测HSV1-gD血清中和效价。结果显示:经HSV1-gD^(Ectodomain)mRNA疫苗接种后,小鼠血清抗体滴度达到1∶12800,中和实验表明抗体可保护Vero细胞不受HSV1病毒感染。成功制备一种新型HSV1 mRNA疫苗,用其接种小鼠可诱导产生特异性免疫应答,并具有良好的保护作用。

基于mRNA高通量测序初探雷帕霉素联合鞭毛蛋白体外抑制4T1乳腺癌细胞的机制

目的:利用mRNA高通量测序初步探讨雷帕霉素(Rapa)联合鞭毛蛋白(FliC)体外抑制4T1乳腺癌细胞的机制。方法:将4T1乳腺癌细胞分为对照(control)组、Rapa组、FliC组、Rapa+FliC组等4组,CCK-8法与流式细胞术检测细胞活力、凋亡的变化情况。同时,通过mRNA高通量测序,对差异表达基因(DEGs)进行KEGG通路分析;此外,通过STRING分析Rapa+FliC组与Rapa组两组间的DEGs,构建DEGs的蛋白相互作用(PPI)网络、筛选Hub基因。结果:CCK-8和流式细胞术检测结果显示,Rapa+FliC对4T1乳腺癌细胞的活力抑制率和凋亡率都显著高于Rapa和FliC(P<0.05)。转录组测序结果显示,Rapa组和control组之间共有579个DEGs,主要富集于PI3K/Akt等信号通路;FliC组和control组之间的DEGs主要富集于Nod样受体等信号通路;Rapa+FliC组与Rapa组之间共有150个DEGs,主要富集于mTOR等信号通路。从PPI网络中,成功筛选出Atm、Itga2等10个Hub基因。结论:Rapa+FliC可能通过PI3K/Akt/mTOR信号通路,在体外抑制4T1乳腺癌细胞活力,促进细胞凋亡;Atm和Itga2基因可能是两者联合作用的关键基因。

牙周组织再生术联合替硝唑对慢性牙周炎患者Notch1 mRNA表达影响及疗效观察

目的分析牙周组织再生术与替硝唑联合治疗慢性牙周炎(CP)对患者Notch1 mRNA表达的影响。方法选取丽水市人民医院CP患者130例,根据随机数字表法将其分为对照组(n=65)和观察组(n=65),两组均接受常规治疗,对照组开展牙周组织再生术治疗,观察组开展牙周组织再生术和替硝唑联合治疗,比较两组牙周袋深度(PD)、龈沟出血指数(SBI)、临床附着水平(CAL)、菌斑指数(PLI)的变化,Notch1 mRNA表达、Th17细胞、IL-17水平的变化,以及视觉模拟评分(VAS)、临床疗效、不良反应等。结果治疗后,两组患者PD、SBI、CAL、PLI指数均降低,与对照组相比,观察组PD、SBI、CAL、PLI指数降低更明显,具有统计学差异(P<0.05),治疗后,两组Notch1 mRNA、Th17细胞、IL-17水平均降低,与对照组相比,观察组治疗后Notch1 mRNA、Th17细胞、IL-17水平降低更明显,具有统计学差异(P<0.05),治疗后,两组VAS均有所降低,与对照组相比,观察组VAS降低(P<0.05),与对照组相比,观察组治疗后总有效率高,具有统计学差异(P<0.05),与对照组相比,观察组治疗不良反应略高,但无统计学差异(P>0.05)。结论对CP患者开展牙周组织再生术与替硝唑联合治疗,可降低Notch1 mRNA表达以及疼痛程度,对临床症状治疗效果显著,可以推广使用。

lncRNA HOXC-AS1和IGF2BP2 mRNA在胃癌组织中的表达及临床意义

目的:探究胃癌(GC)组织中长链非编码RNA HOXC反义RNA1(lncRNA HOXC-AS1)、胰岛素样生长因子2 mRNA结合蛋白2(IGF2BP2)mRNA表达水平与患者临床病理特征及术后5年内生存的关系。方法:选取我院2015年5月至2018年4月收治的GC患者139例,手术收集GC组织及癌旁组织。荧光定量PCR法检测lncRNA HOXC-AS1和IGF2BP2 mRNA表达。对GC患者进行术后随访5年,记录GC患者生存情况,分为生存组88例,死亡组51例。比较GC组织和癌旁组织中lncRNA HOXC-AS1和IGF2BP2 mRNA表达水平、不同临床病理特征患者GC组织中lncRNA HOXC-AS1和IGF2BP2 mRNA表达情况、生存组和死亡组临床病理特征和GC组织中lncRNA HOXC-AS1和IGF2BP2 mRNA表达水平。分析GC组织中lncRNA HOXC-AS1和IGF2BP2 mRNA表达水平的相关性、GC组织中lncRNA HOXC-AS1和IGF2BP2 mRNA表达情况与术后5年生存的关系、影响GC患者术后5年内生存的危险因素。结果:与癌旁组织相比,GC组织中lncRNA HOXC-AS1和IGF2BP2 mRNA表达水平均显著升高(P<0.05);GC组织中lncRNA HOXC-AS1和IGF2BP2 mRNA表达水平呈正相关(P<0.05);GC组织中lncRNA HOXC-AS1和IGF2BP2 mRNA表达水平与淋巴结转移、TNM分期、肿瘤分化程度相关(P<0.05);lncRNA HOXC-AS1高表达组、IGF2BP2 mRNA高表达组患者术后5年总生存率分别显著低于lncRNA HOXC-AS1低表达组、IGF2BP2 mRNA低表达组(P<0.05);生存组和死亡组淋巴结转移、TNM分期、肿瘤分化程度比较差异有统计学意义(P<0.05);死亡组患者GC组织中lncRNA HOXC-AS1和IGF2BP2 mRNA表达水平显著高于生存组(P<0.05);TNM分期为III期、肿瘤低分化、lncRNA HOXC-AS1高表达、IGF2BP2 mRNA高表达是影响GC患者术后5年内生存的独立危险因素(P<0.05)。结论:GC患者癌组织中lncRNA HOXC-AS1及IGF2BP2 mRNA表达水平均显著升高,且术后5年内死亡的GC患者较存活患者更高,二者与淋巴结转移、TNM分期、肿瘤分化程度密切相关,二者高表达是影响GC患者术后5年内生存的独立危险因素。