基于不同卷积神经网络模型的陈皮、广陈皮图像的智能识别研究

目的:基于卷积神经网络算法建立一种能够快速、高效的识别出陈皮以及广陈皮的方法。方法:在体视镜下采集样品的外果皮图像并建立数据集。采用Imagenet预训练权重作为预训练模型,基于VGG、Inception、Resnet、DenseNet骨干模型进行训练,识别及比较,选取最优的模型进行运作。结果:Resnet与Inception网络对数据具有较好的适应性,而VGG与DenseNet存在一定的过拟合情况。通过对Resnet与Inception进行交叉验证,结果显示Resnet的准确率均高于Inception,最终选择Resnet建立一套有效识别陈皮、广陈皮的方法。结论:卷积神经网络可有效提取图像高级特征,能较为准确鉴别出陈皮与广陈皮。

黄芩汤治疗慢性复发型溃疡性结肠炎大肠湿热证小鼠的作用机制研究

目的探讨黄芩汤在慢性复发型溃疡性结肠炎大肠湿热证(UCM)中清热利湿的作用机理。方法将40只小鼠随机分为正常组、模型组及黄芩汤低、中、高剂量组。模型组小鼠使用人工气候箱、白酒、高脂饲料及不同浓度的葡聚糖硫酸钠(DSS)溶液联合诱导;黄芩汤组在造模第35天至第44天给予不同剂量黄芩汤干扰;实验期间,观察小鼠一般情况,包含体质量、饮食、粪便等,并进行湿热评分、疾病活动指数(DAI)评分;通过课题组研发的My color软件检测爪尾红色值占比变化;HE染色观察结肠及舌组织病理变化;检测小鼠血清中超氧化物歧化酶(SOD)和髓过氧化物酶(MPO)含量;Western Blot法检测结肠组织中水通道蛋白及NF-κB信号通路相关蛋白表达量;ELISA法检测干扰素γ(IFN-γ)、脂多糖(LPS)、巨噬细胞迁移抑制因子(MIF)、血栓素B2(TXB2)含量;qRT-PCR法检测结肠组织中白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)和Toll样受体4(TLR4)表达水平。结果与正常组比较,模型组体质量降低,DAI评分、湿热评分、爪尾红色值占比增加;舌组织丝状乳头紊乱、角质层增厚,结肠组织受损严重,长度缩短;结肠组织TXB2、IFN-γ含量、血清MIF含量增加,LPS水平增加;血清SOD活性降低、MPO活性增加;IL-6、IL-1β、TNF-α mRNA水平上升;结肠AQP1、AQP3、AQP8蛋白表达降低;IκB磷酸化增加,核外p65表达减少,核内p65表达增加,TLR4 mRNA水平上升,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。与模型组比较,黄芩汤高剂量组体质量下降幅度减少,DAI评分、湿热评分降低,爪尾图像红色比例下降,结肠长度增加,病理情况改善,血清中的MPO、MIF、LPS水平降低,SOD含量增加,结肠组织中的TXB2、IFN-γ水平减少,IL-6、IL-1β、TNF-αmRNA水平下调,结肠AQP1、AQP3、AQP8蛋白表达增高,TLR4 mRNA水平下降,IκB磷酸化减少,核外p65表达增加,核内p65表达减少,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论黄芩汤对慢性复发型UC大肠湿热证小鼠模型有明显的治疗作用,其清热利湿机理可能与抑制NF-κB信号通路介导的肠道水液紊乱相关。

斑蝥素固体脂质纳米粒的制备及促肝癌细胞凋亡的研究

目的制备斑蝥素固体脂质纳米粒,并对其进行质量评价及体内外抗肝癌研究。方法采用薄膜超声分散法制备斑蝥素固体脂质纳米粒,以粒径、PDI(Polydispersity Index)、Zeta电位和包封率等为指标,对制备工艺进行优化,通过透射电镜观察纳米粒的形态,并考察其体外释放度,以荧光实验考察肝癌细胞摄取固体脂质纳米粒,以CCK8法研究固体脂质纳米粒使斑蝥素增效减毒的作用、以流式细胞术研究斑蝥素固体脂质纳米粒促细胞凋亡及阻滞细胞周期的情况,以体内裸鼠实验验证斑蝥素固体脂质纳米粒的药效。结果斑蝥素固体脂质纳米粒呈粒径大小均一,形状规整的类球实体形,具有较好的稳定性和良好的药物缓释作用,细胞摄取实验结果显示与游离斑蝥素相比,固体脂质纳米粒更能有效递送药物到细胞。细胞毒性实验结果显示CTD-SLN(cantharidin solid lipid nanoparticles)和CTD(cantharidin)对HepG2细胞均具有显著浓度依赖性的毒作用,且CTD-SLN能够起到增效减毒的作用。流式细胞术的结果发现CTD-SLN能够促进细胞凋亡且使细胞停滞在S期。结论制备得到的斑蝥素固体脂质纳米粒能增强药物促肝肿瘤细胞凋亡效果,可用于进一步研究。

基于近红外光谱的陈皮炮制品快速质量评价研究

目的 基于近红外光谱技术建立陈皮定性判别模型和含量预测模型,用于评价陈皮及其炮制品的质量。方法 采用有监督识别方法及无监督识别方法对陈皮生品及制品进行定性判别。采用高效液相色谱法测定陈皮生品和制品中5种化学成分的质量分数,结合近红外技术建立各成分的偏最小二乘定量校正模型。结果 近红外光谱技术可以将陈皮生品与制品进行有效分开,5-羟甲基糠醛、川陈皮素和芸香柚皮苷含量预测效果良好。结论 基于近红外技术对陈皮生品及制品定性鉴别和含量预测的方法具有快速、高效、无污染等优点,为陈皮及其炮制品质量控制和临床应用提供参考。

基于近红外光谱的佛手及其炮制品快速质量分析研究

目的基于近红外光谱结合化学计量学快速判别佛手生、制品并对内在成分含量进行预测,为佛手饮片质量控制提供依据。方法利用高效液相色谱法测定佛手饮片中莨菪亭、橙皮苷、6,7-二甲氧基香豆素、白当归素、5,7-二甲氧基香豆素、佛手柑内酯含量,利用近红外光谱采集样品光谱信息,结合化学计量学方法建立佛手生、制品定性和定量模型,快速判别佛手生、制品和预测成分含量。结果近红外技术偏最小二乘法-判别分析对佛手及其炮制品的分类鉴别达到100%正判率;对含量测定的6种成分中的3种(莨菪亭、5,7-二甲氧基香豆素、白当归素)的含量预测精度高,其中莨菪亭定量模型的决定系数(R2)为0.8951,校正均方根误差(RMSEC)为0.0320,预测均方根误差(RMSEP)为0.0175,验证集R2为0.8463,交叉验证均方根误差(RMSECV)为0.0541;5,7-二甲氧基香豆素定量模型的R2为0.9080,RMSEC为0.0242,验证集R2为0.7937,RMSEP为0.0446,RMSECV为0.0387;白当归素定量模型R2为0.9184,RMSEC为0.0276,验证集R2为0.7714,RMSEP为0.0275,RMSECV为0.0404。结论基于近红外光谱技术对佛手及其炮制品的鉴别和含量预测的方法具有可操作性,且简单快速,对样品无损害。为佛手及其炮制品质量控制和临床应用提供参考。

利用冰冻切片和荧光成像技术研究接菌法沉香的显微结构

目的:利用冰冻组织切片和荧光成像技术对接菌法沉香不同显微特征进行比较,分析挥发油分布的规律,了解白木香结香过程中显微组织的变化。方法:显微观察接菌法沉香层、内含层及白木层(未结香)结构特征,测量不同结香部位内涵韧皮部和木射线的显微参数,检测不同结香部位的荧光平均光密度,并进行统计学分析。结果:接菌法沉香的沉香层、内含层与白木层相比,在晶体、树脂及挥发油分布数量发生变化,不同部位的显微参数差异显著(P<0.05)。沉香层和内含层的木间韧皮部、射线细胞及部分导管中存在黄棕色油状物,相同部位在荧光显微镜下存在绿色自发荧光。结论:冰冻切片结合荧光成像可准确显示沉香挥发油定位,不同结香部位显微结构及其显微参数存在差异,该结果为深入研究白木香结香的生理过程及机制积累了重要的实验基础。

黄芩汤通过调控内质网应激减轻小鼠溃疡性结肠炎

目的观察黄芩汤对小鼠溃疡性结肠炎(UC)细胞凋亡的影响并探讨其作用机制。方法将雄性Balb/c小鼠随机分为:正常组、模型组、美沙拉嗪组(5-ASA,200 mg/kg)、黄芩汤低、中、高剂量组(HQDL,2.275 g/kg;HQDM,4.55 g/kg;HQDH,9.1 g/kg),8只/组。各组自由饮食,除正常组自由饮用无菌水外,其余各组小鼠自由饮用3%DSS溶液,持续7d以建立UC模型。取结肠组织采用HE、AB-PAS和TUNEL染色分别观察结肠损伤和细胞凋亡情况,采用ELISA法检测炎症因子表达变化;采用Western blotting、免疫组化和qRT-PCR法分别检测肠道化学屏障、机械屏障、内质网应激等相关指标的蛋白或基因表达变化。结果与模型组相比,黄芩汤干预下的UC小鼠,DAI评分和宏观评分下降(P<0.01),TUNEL染色荧光强度下降(P<0.01)。促炎因子IL-6、TNF-α、IL-1β、IL-8表达减少(P<0.01),MUC2和TFF3的基因表达升高(P<0.05),Claudin-1、Occludin和E-cadherin的蛋白表达升高(P<0.05),GRP78、CHOP和Caspase-12的基因和蛋白表达下降(P<0.01)、PERK、eIF2α和IRE1α的磷酸化表达降低(P<0.05),Bcl-2/Bax蛋白表达比例升高(P<0.01)和Caspase-3的蛋白表达降低(P<0.01)。结论黄芩汤能够抑制UC小鼠的细胞凋亡反应并改善肠道屏障功能,其机制可能与PERK和IRE1α信号通路介导的内质网应激有关。

腹泻型肠易激综合征的人群特征信息及其远期预后的影响因素分析

【目的】研究腹泻型肠易激综合征(IBS-D)的人群特征信息、中医证型分布及其远期预后的影响因素,为IBS-D患者对应干预方案的制定提供数据参考。【方法】选取2020年7月至2022年8月项目组成员所在医疗机构收治的124例IBS-D患者进行研究分析,根据肠易激综合征专用生活质量量表(IBS-QOL)评分结果将所有患者分为预后良好组81例与预后不良组43例。探讨IBS-D患者的中医证型分布,比较预后良好组与预后不良组患者IBS-QOL量表评分结果的差异,并使用单因素分析与多因素Logistic回归分析方法明确IBS-D患者不良预后发生的主要危险因素。【结果】(1)人群特征信息:IBS-D患者男女比例差异不大,发病群体以中年人为主,病程区间跨度较大,疾病症状严重程度多表现为中度,均存在不同程度焦虑与抑郁情绪表现,机体营养水平普遍存在失衡状态。(2)中医证型分布:肝郁脾虚型78例,占62.90%;脾气虚弱型26例,占20.97%;脾肾阳虚型20例,占16.13%。(3)IBS-QOL量表评分:相比预后良好组,预后不良组IBS-QOL量表的负性情绪、躯体功能、行为障碍、健康状态、挑食、社会功能、性行为、人际关系等各项评分均明显降低(P<0.01)。(4)单因素分析结果显示,年龄、文化程度、病程、症状严重程度、焦虑状态、抑郁状态、中医辨证分型、急性生理学与慢性健康状况评分Ⅱ(APACHEⅡ)评分、合并神经系统疾病及血红蛋白水平、白蛋白水平、总蛋白水平改变均可能导致IBS-D患者不良预后风险增加(P<0.01)。(5)多因素Logistic回归分析结果显示,年龄、文化程度为初中以下、症状严重程度为重度、焦虑自评量表(SAS)评分、抑郁自评量表(SDS)评分、中医辨证分型为肝郁脾虚型及血红蛋白水平、白蛋白水平、总蛋白水平改变均属于IBS-D患者不良预后发生的危险因素(P<0.01)。【结论】较多的IBS-D患者存在远期不良预后情况,其远期预后情况受诸多因素影响,包括年龄、文化程度、症状严重程度、焦虑与抑郁状态、营养失衡情况以及中医证型为肝郁脾虚型等,明确其不良预后的危险因素可为临床干预方案的制定与调整提供数据参考。

基于机器视觉系统佛手炮制前后的判别及颜色-成分相关性分析

目的 基于机器视觉系统探讨佛手炮制前后颜色判别及颜色-成分质量分数相关性,为佛手饮片质量控制提供依据。方法 利用高效液相色谱(HPLC)法测定佛手与蒸佛手饮片中橙皮苷、6,7-二甲氧基香豆素、莨菪亭3种成分的质量分数;采用机器视觉技术获得饮片图像并提取饮片RGB、L*a*b*、HSV 3个不同颜色空间的颜色特征,采用线性判别分析(LDA)、偏最小二乘法-判别分析(PLS-DA)和支持向量机(SVM)等机器学习方法对佛手炮制前后建立定性判别模型,利用Pearson相关性分析研究颜色特征值与测得的3种成分质量分数间的相关性。结果LDA、PLS-DA、SVM判别模型分类鉴别具有较高的预测精度和较低的预估错误率;佛手和蒸佛手中成分质量分数与颜色特征值间存在一定的相关性。结论 基于机器视觉系统对佛手炮制前后的判别效果良好,且该方法操作简单、高效准确,可为佛手及其炮制品的质量控制和临床应用提供参考。

基于网络药理学结合分子动力学模拟技术探讨愈梗通瘀汤治疗心绞痛的作用机制

目的:通过网络药理学、分子对接和分子动力学模拟技术,探讨愈梗通瘀汤治疗心绞痛的作用机制,通过体外实验进行验证。方法:通过查询TCMSP和TCMIP中药成分数据库,筛选愈梗通瘀汤的化学成分及相应的蛋白靶点,进一步通过UniProt数据库查询基因名称。根据数据库查询结果,构建“中药-有效成分-靶点”相互作用网络。同时,通过GeneCards和OMIM疾病靶点数据库筛选与心绞痛的疾病相关靶点,将愈梗通瘀汤的作用靶点与心绞痛疾病相关靶点取交集,获得两者的共同靶点。随后利用Cytoscape与STRING数据库分别构建了“活性成分-潜在作用靶点”及“药物-靶点-基因本体(GO)/京都基因与基因组百科全书(KEGG)”网络关系图。使用AutoDock Vina进行分子对接验证,利用OpenMM软件对分子对接后的蛋白-配体体系进行模拟验证,最后通过体外细胞实验进行了验证。结果:共筛选获得了265种活性成分及671个潜在作用靶点;进一步筛选出了182条信号通路;GO富集分析表明,主要涉及炎症反应、组织修复、氧化应激反应等;KEGG富集分析表明,主要涉及动脉粥样硬化、糖尿病并发症以及非酒精性脂肪性肝病等相关通路;分子对接结果显示,10对关键活性成分和核心靶点最小结合能均<-5.0 kJ/mol,同时小于靶点原配体的结合能,提示对接效果良好;分子动力学模拟中展示人参皂苷Rh2与磷脂酰肌醇-3-激酶催化亚单位α(PIK3CA)具有良好的结合稳定性和活性;体外细胞实验表明,人参皂苷Rh2具有明显的心肌保护作用,同时激活磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)-蛋白激酶B(AKT)通路。结论:通过网络药理学预测愈梗通瘀汤可能通过槲皮素、木犀草素、山柰酚、异黄酮、黄芩素、隐丹参酮、芦荟大黄素、人参皂苷Rh2、金黄紫堇碱、延胡索单酚碱等关键活性成分,调控低氧诱导因子-1(HIF-1)、肿瘤坏死因子(TNF)、PIK3CA、雌激素受体1(ESR1)等潜在通路靶点,这些通路与代谢性疾病中的炎症及氧化应激关系最为密切;且通过分子对接及分子动力学模拟和细胞实验表明人参皂苷Rh2的药理作用与激活PIK3-AKT通路关系密切;预测结果提示抗炎作用可能是愈梗通瘀汤治疗心绞痛的潜在作用机制之一。

大承气汤对肠源性脓毒症小鼠的保护作用及机制

目的 研究大承气汤(DCQD)对肠源性脓毒症小鼠的保护作用,并从Toll样受体4/髓分化因子88(TLR4/MyD88)信号通路探讨其可能机制。方法 将SPF级雄性C57BL/6J小鼠分为假手术(Sham)组、假手术+大承气汤高剂量(Sham+DCQD-H)组、模型(CLP)组、大承气汤低剂量(DCQD-L)组、大承气汤高剂量(DCQD-H)组、阳性对照(Positive)组。CLP组、DCQD-L组、DCQD-H组和Positive组小鼠均以盲肠结扎穿刺法建立肠源性脓毒症模型;DCQD-L组和DCQD-H组小鼠在术前3 d和术后7 d每天分别按4、8 g/kg(按生药量计)灌胃给予大承气汤;Positive组在术前2 h腹腔注射乌司他丁1次,术后7 d每天腹腔注射乌司他丁1次,剂量均为50 000 U/kg。Sham组和Sham+DCQD-H组仅暴露盲肠,不做结扎及穿刺;Sham+DCQD-H组在术前3 d和术后7 d每天灌胃给予大承气汤(8 g/kg,按生药量计);Sham组和CLP组每天均灌胃和腹腔注射生理盐水各0.2 mL,连续10 d。术后7 d每天评估小鼠脓毒症严重程度,并评估小鼠7 d生存率;末次给药1 h后,检测小鼠血清和回肠组织中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)水平;观察小鼠肝、肺、肾、回肠组织的病理学形态变化;检测小鼠回肠组织中TLR4、MyD88 mRNA表达水平。结果 与CLP组比较,DCQD-L组、DCQD-H组小鼠脓毒症评分,血清和回肠组织中TNF-α、IL-6水平(DCQD-L组回肠组织中IL-6除外),肝、肺、肾、回肠组织损伤评分,回肠组织中TLR4、MyD88 mRNA表达水平均显著降低(P<0.05或P<0.01);7 d生存率(DCQD-L组除外)显著升高(P<0.05);小鼠肝细胞组织损伤明显改善,炎症浸润和凋亡减少;肺组织损伤有所缓解,肺泡萎缩、出血、水肿均有不同程度的改善;肾组织损伤改善,肾小管管腔扩张减弱;回肠组织损伤及水肿均有明显改善。结论 大承气汤对肠源性脓毒症模型小鼠具有保护作用,其作用机制可能与抑制全身炎症、减轻多器官损伤以及下调TLR4/MyD88信号通路有关。

基于网络药理学和细胞实验探讨六味顺激方治疗肠易激综合征的作用

目的基于网络药理学和细胞实验探讨六味顺激方治疗肠易激综合征的关键靶点基因和信号通路。方法通过TCMSP数据库检索六味顺激方中药物活性成分和靶点基因,与DisGeNET、Pharm和CTD数据库中获取的肠易激综合征疾病靶点相映射,并基于GEO数据库筛选肠易激综合征与健康人差异基因,采用R语言和Cytoscape软件对关键靶点基因进行蛋白质相互作用网络(PPI)、基因本体(GO)功能注释和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析。基于脂多糖诱导的NCM460细胞模型,通过流式细胞术、免疫荧光、ELISA、Western blot、RT-qPCR法对关键靶点基因进行验证。结果检索得到六味顺激方活性成分85个,药物靶点274个,肠易激综合征相关靶点416个,药物和疾病交集靶点82个,其中人血管内皮生长因子A(VEGF-A)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子(TNF)、蛋白激酶(Akt1)、丝裂原活化蛋白激酶1(MAPK1)、原癌基因(JUN)、白细胞介素-1β(IL-1β)、细胞趋化因子8(CXCL8)、丝裂原活化蛋白激酶8(MAPK8)、细胞趋化因子2(CCL2)和细胞间黏附分子-1(ICAM-1)是六味顺激方治疗肠易激综合征的关键靶点,细胞对脂多糖的应答和TNF信号通路可能是六味顺激方治疗肠易激综合征的效应机制。细胞实验结果显示,六味顺激方在降低VEGFR表达的同时抑制MAPK信号通路的主要下游靶点蛋白(ERK、JNK和JUN),进而减少炎症因子、趋化因子、血管生成因子和黏附因子的释放,缓解细胞凋亡同时抑制炎症反应恶性循环,从而缓解肠易激综合征。结论六味顺激方能通过多靶点、多通路发挥治疗肠易激综合征的效应,其机制可能是通过靶向抑制VEGFR并抑制MAPK信号通路下游关键蛋白改善血管生成、炎症反应。

基于Nrf2/HO-1信号通路探讨黄芩汤对氟尿嘧啶致小鼠化疗性肠黏膜炎的保护作用及机制

目的探讨黄芩汤对氟尿嘧啶(5-FU)诱导的小鼠化疗性肠黏膜炎(CIM)的保护作用及机制。方法将72只雄性Balb/c小鼠随机分为6组:正常对照组、模型组、阳性药组(洛派丁胺,3 mg·kg^(-1))和黄芩汤低、中、高剂量组(2.275、4.550、9.100 g·kg^(-1)),每组12只。各组小鼠按剂量灌胃给予相应药物,每日1次,连续7 d。实验周期的前5 d,在给小鼠灌胃给药30 min后,腹腔注射5-FU(60 mg·kg^(-1))诱导建立CIM小鼠模型。每日监测小鼠进食量、体质量及腹泻评分;采用HE染色法观察回肠组织的病理变化;检测小鼠血清中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)的活性及丙二醛(MDA)含量;采用Western Blot法检测小肠组织中Keap1、细胞质Nrf2、细胞核Nrf2、Histone H3蛋白表达;qRT-PCR法检测小肠组织中HO-1、NQO1、COX-2 mRNA表达;ELISA法检测小肠中肿瘤坏死因子α(TNF-α)的含量;免疫组织化学法检测回肠组织中NF-κB p65的表达情况。结果与正常对照组比较,模型组小鼠的体质量、进食量显著下降(P<0.01),腹泻评分显著升高(P<0.01);回肠组织损伤严重;血清中的GSH-PX、CAT、SOD活性显著减弱(P<0.01),而MDA水平显著升高(P<0.01);小肠组织中的Keap1和细胞质Nrf2蛋白表达水平显著上升(P<0.01),细胞核Nrf2蛋白表达水平显著降低(P<0.01),NQO1、HO-1 mRNA表达明显下调(P<0.05,P<0.01),COX-2 mRNA表达显著上调(P<0.01),TNF-α含量显著上升(P<0.01);回肠组织中的NF-κB p65表达量显著增加(P<0.01)。与模型组比较,黄芩汤给药组小鼠的体质量、进食量显著增加(P<0.01),腹泻评分显著降低(P<0.01);回肠组织的病理损伤得到明显改善;血清GSH-PX、CAT、SOD活性显著增强(P<0.01),而MDA水平明显降低(P<0.05,P<0.01);小肠组织中的Keap1和细胞质Nrf2蛋白表达水平明显降低(P<0.05,P<0.01),细胞核Nrf2蛋白表达水平显著上升(P<0.01),NQO1、HO-1 mRNA表达明显上调(P<0.05,P<0.01),COX-2 mRNA表达显著下调(P<0.01),TNF-α含量显著下降(P<0.01);回肠组织中的NF-κB p65表达量明显降低(P<0.05,P<0.01)。结论黄芩汤对5-FU诱导的CIM小鼠肠黏膜具有明显保护作用,可能与其激活Nrf2/HO-1信号通路发挥抗氧化应激及抗炎作用有关。

新冠肺炎寒湿疫小鼠模型的建立及其评价

目的为中医理论下新冠肺炎归属“寒湿疫”提供病理模型,本实验通过脂多糖诱导小鼠引发细胞因子风暴,结合寒湿刺激,旨在建立合理、实用的寒湿疫小鼠模型。方法24只雄性KM小鼠随机分为两个造模组和正常组。造模组1(脂多糖组)为腹腔注射5 mg/kg脂多糖生理盐水溶液,造模组2(脂多糖+寒湿刺激组)为腹腔注射5 mg/kg脂多糖生理盐水溶液+寒湿刺激,正常组给予等量生理盐水。造模8 d后,评价模型小鼠在中医理论下的相关外观行为表征,以及肺指数、脾指数、胸腺指数,ELISA检测肺组织细胞因子的水平,检测环氧化酶2(COX-2)、瞬时受体电位通道蛋白V1和A1(TRPV1和TRPA1)的表达量。结果与正常组比较,脂多糖+寒湿刺激组小鼠的外在状态和行为表现与中医理论定义的寒湿证相一致,包括活跃程度下降、精神状态不佳。模型组的肺指数,胸腺指数,脾指数高于正常组;脂多糖+寒湿刺激组TNF-α,IFN-γ,IL-6和PGE2的水平明显高于正常组及脂多糖组;HE染色显示,模型组肺组织损伤明显。模型组中COX-2和TRPA1蛋白表达显著升高,TRPV1蛋白表达显著降低。结论脂多糖+寒湿刺激小鼠模型可作为构建中医理论下新冠肺炎引起的“寒湿疫”病证较为理想的方法,模型组小鼠指标变化符合文献报导的新冠肺炎造成的机体损伤。

不同产地、等级砂仁及混淆品微量元素测定与分析

目的:测定不同产地、等级砂仁及混淆品中的15种微量元素含量,为砂仁的产地溯源、真伪鉴定等提供参考依据。方法:采用微波消解结合电感耦和等离子体质谱对样品中的微量元素含量进行测定,并运用SPSS软件对测定结果进行聚类分析。结果:正品砂仁中微量元素含量排序为Ca>Mn>Al>Fe>Zn>Cu>Ba>Sr>Cr>Ni>Pb>V>Co>As>Cd;比较不同等级砂仁的微量元素测定结果发现,大多数元素含量随着砂仁等级降低而逐渐升高;聚类分析结果可有效区分不同产地砂仁及其混淆品。结论:不同产地、等级砂仁及其混淆品中的微量元素含量存在一定的差异,本研究可为砂仁的产地溯源、真伪鉴别等提供一定的参考依据。

水晶兰苷对双侧卵巢摘除诱导骨质疏松模型大鼠的作用研究

目的研究巴戟天提取物水晶兰苷对绝经后骨质疏松模型大鼠的治疗作用。方法采用随机分组方法,将SD大鼠平均分为正常组、模型组、E2组、水晶兰苷组和巴戟天组。通过双侧性腺摘除法建立绝经后骨质疏松模型,给药组分别给予水晶兰苷和巴戟天灌胃。十二周后给药结束,解剖大鼠,之后测定血清生化指标、股骨组织形态及相关指标和氧化应激指标。结果与正常组比较,模型组大鼠血清中钙、磷、碱性磷酸酶、骨钙素和成骨特异性转录因子的水平升高,骨小梁数量减少,骨体积分数、骨表面积骨体积比、骨小梁厚度降低,骨小梁分离度增加。而水晶兰苷、巴戟天和17β雌二醇(E2)给药干预后,大鼠骨质疏松血清关键指标均显著降低,大鼠股骨组织及骨小梁指标得到明显的改善,进一步发现水晶兰苷、巴戟天和E2能够明显升高SOD、GSH-px和CAT的水平,同时能显著降低血清中MDA酶的活性。结论水晶兰苷对绝经后骨质疏松模型大鼠有较好的改善作用,其作用效果与巴戟天、E2阳性药相似,可能是巴戟天抗骨质疏松的主要活性成分。

基于中医动态思维探讨外泌体对胃癌前病变“虚瘀毒”病机的影响

脾虚为本、瘀毒致病是阐释胃癌前病变(GPL)发生、发展的重要理论,“虚瘀毒”病机的形成是GPL发生、癌性转化的关键。外泌体作为微环境重要组成部分,可促进病变细胞的恶性增殖、癌性改变。中医动态思维与外泌体合成、分泌有许多相同之处。基于中医动态思维,研究外泌体对GPL“虚瘀毒”病机的影响。笔者发现,“虚瘀毒”病机的形成过程符合现代医学对恶变细胞源外泌体的认识,外泌体是GPL胃黏膜局部微环境的重要生物学内容。通过深入探究外泌体与微环境成分的交互作用,希冀促进现代医学与中医学在GPL发展过程及防治策略上的融合和发展。

中药产品在南非的注册路径与策略研究

对中药产品在南非的注册法规与指南进行分析,总结中药产品在南非的注册路径,并从质量可控性、安全性和有效性方面分析注册所要求的通用技术文件(CTD)资料,基于此探讨中药产品在南非注册策略,认为可采取的策略包括中药企业应有效管控中药注册风险,稳步推进产品上市;可先对低风险中药产品进行注册,进而打开南非中药市场,在积累一定经验后,推进高风险中药产品注册;需具备推动中药传承创新发展的意识,加大对中药产品临床试验的投入,并完善中药产品临床有效性和安全性数据;加强中药质量控制,打造中药国际品牌。

非洲草药注册管理办法及中药在非洲注册策略研究

非洲草药使用广泛且历史悠久,草药在较多非洲国家已陆续合法化并建立注册上市机制。本研究简述中非中药历史交流与现代贸易,从草药管理法规与指南、注册管理机构简述非洲国家草药注册管理体系,从申报资料、注册路径、质量控制与生产、有效性证据、食品补充剂等方面比较分析非洲各国注册制度的差异,归纳非洲草药注册管理共同点。中药注册策略包括评估注册投资风险,构建中非多边多元化合作网络,坚持守正创新,推动中药国际化发展,以期形成中药在非洲的标准化注册路径,开拓非洲中药市场。

中药产品在加纳的监管体系与注册路径研究

加纳重视对传统医药的利用,多年来陆续出台关于传统医药的法律及政策措施,为草药产品研发、注册与销售奠定了良好的法律基础。本文简述加纳草药与食品补充剂监管体系,梳理中药产品以草药和食品补充剂等不同类型在加纳注册的路径,并通过简要分析注册资料,认为中药产品可首先作为食品补充剂打开加纳市场,从而推进草药注册;需把控中药产品注册风险,同时强化中国与加纳的政府间合作;还需发挥中医药理论与经验优势,加强与加纳传统医药的合作。本文为中药产品在加纳注册上市提供参考,以期扩大中药在当地的市场,进而辐射至西非乃至整个非洲地区。