免疫毒理学在新药安全评价中的应用

新药对免疫系统毒性的研究一直是国内外的研究热点。本文从免疫毒理学的角度综述了这门学科在新药安全评价中的应用 ,包括新药对免疫系统的副作用、临床前研究中对免疫系统的检测方法和注意事项。

Beagle狗口服盐酸脂壬仲胺180天的安全性评价

目的 :评价Beagle狗口服盐酸脂壬仲胺 (ali phaticnonylsecondaryaminehydrochloride ,ANSA ) 6mon产生的毒性作用 ,提供毒性反应的靶器官及其损害的可逆性 ,确定无毒反应剂量。方法 :本试验设ANSA 8.0、2 .0和 0 .5mg·kg-13个剂量组 ,分别相当于人临床拟用剂量的 5 6、14和 3.5倍 ;相当于狗有效治疗剂量的 6 4、16和 4倍。另设空白对照组。每组Beagle犬 6只 ,雌雄各半。每周给药 6d ,每天口服 1次 ,连续 180d。结果 :8.0mg·kg-1组动物先后于给药后出现眼球向外眼角上方斜视 ,结膜下部充血 ,瞬膜呈半闭合状态 ,瞳孔对光反射迟纯 ,精神不振 ,严重者出现肌肉颤抖。这些症状约在药后4 0min开始出现 ,持续约 8h ,第 2天完全恢复正常。2 .0mg·kg-1组约 2 6动物出现同样症状 ,但症状较轻。 0 .5mg·kg-1组和对照组动物未见异常 ,病理组织学检查未见Beagle狗给予供试品后造成的直接脏器损伤。各组 13项血液学和 17项血液生化学指标均在正常范围之内。结论 :在本次试验条件下 ,盐酸脂壬仲胺的无毒反应剂量为 0 .5mg·kg-1。

抗EB病毒口服液对Beagle犬的长期毒性研究

目的评价抗EB病毒口服液的长期毒性作用,为临床实验提供安全性依据。方法将Beagle犬分为抗EB病毒口服液76.41、25.47、8.49g生药/kg3个剂量组及空白对照组,每组6只,♀♂各半,每天灌胃给药1次,每周连续给药6d,共26wk,检查各指标并进行恢复性观察。结果给药期间高剂量组犬出现明显呕吐症状,中剂量组犬也出现相同胃肠道刺激症状,但反应较轻。恢复期高剂量组1只犬出现尿蛋白强阳性,中剂量组1只犬出现尿潜血强阳性。各剂量组犬的体重、体温、食量和心电图、血液学、血液生化学、眼科、骨髓、尿常规、病理组织学检查等均未见与药物有关的明显毒性反应。结论抗EB病毒口服液对Beagle犬的无毒反应剂量为8.49g生药/kg。

表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂BPI-2009的抗肿瘤作用及其机制的研究

目的:探讨一种口服的表皮生长因子受体(epidermalgrowthfactorreceptor ,EGFR)酪氨酸激酶抑制剂(BPI 2 0 0 9)的抗肿瘤作用及其机制。方法:Westernblot方法检测BPI 2 0 0 9对酪氨酸激酶和EGFR自动磷酸化的抑制作用,MTT法检测BPI 2 0 0 9对多种肿瘤细胞的生长抑制作用,使用A4 31肿瘤模型的荷瘤裸鼠进行体内的肿瘤抑制试验。结果:通过对EGFR激酶抑制剂化学文库的筛选,发现BPI 2 0 0 9是一个有效的EGFR激酶抑制剂。BPI 2 0 0 9对EGFR激酶的半数抑制浓度(IC50 )为5nmol·L- 1,当其浓度达到6 2 .5nmol·L- 1的时候可以完全抑制EGFR激酶的活性,但在10 0nmol·L- 1时对Abl、Abl相关基因(Abl relatedgenes ,Arg)以及c- Src酪氨酸激酶都没有明显的抑制作用。BPI 2 0 0 9可以阻断EGFR介导的细胞内蛋白酪氨酸的磷酸化,IC50 为4 5nmol·L- 1。在肿瘤细胞生长抑制试验中,BPI 2 0 0 9对于肿瘤细胞的生长抑制作用与EGFR在细胞中的表达密切相关。人类肿瘤细胞A4 31移植瘤抑制试验的研究表明BPI 2 0 0 9经口给药每天1次在10 0mg·kg- 1,肿瘤抑制率达6 4% ,有明显的剂量效应关系,并没有发现明显的病态和体重下降。结论:BPI 2 0 0 9是一种有效的高选择性的以EGFR酪氨酸激酶为靶点的抗肿瘤药物。

上皮生长因子对小鼠的致畸胎作用研究

目的 :了解上皮生长因子 (epidermalgrowthfactor,EGF)的致畸作用和胚胎毒性作用。方法 :EGF设 2 ,1 2 ,72 μg·Kg- 1 3个剂量组 ,分别相当于人临床拟用剂量的 3 ,1 8,1 0 8倍。于小鼠妊娠第 6～1 5d连续灌胃给药 ,每天 1次。结果 :EGF 72 μg·kg- 1 对小鼠活胎率 (4 9% )和吸收胎率 (5 0 % )有影响 ,与溶剂对照组比较有显著性差异 (P <0 .0 5 )。 2和 1 2 μg·kg- 1 组及溶剂对照组的活胎率、吸收胎率、死胎率和骨骼畸形率均在正常范围 ,与各给药组比较无显著的统计学意义 (P >0 .0 5 )。阳性对照组用环磷酰胺 2 0mg·kg- 1 ,外观畸形率达 90 % ,表明本次试验结果可靠。结论 :EGF相当于人临床拟用剂量的 1 0 8倍有明显的胚胎毒性 。

TCDD对斑马鱼胚胎发育毒性机制的研究进展

二恶英类化合物具有致癌、致畸作用以及心血管神经内分泌毒性。2,3,7,8_四氯二苯并对二恶英(TCDD)是二恶英类化合物中毒性最强的一种。本文以二恶英_芳香烃受体为主线,从TCDD诱导斑马鱼胚胎下颌发育短小、神经元缺失、抑制总主静脉退化、抑制红细胞生成、心脏形态和功能缺陷、血液循环障碍、水肿、致死等方面概述了TCDD对斑马鱼胚胎发育毒性机制的研究现状。

大鼠静脉注射虎杖苷注射剂致畸敏感期毒性试验

目的:观察虎杖苷能否在大鼠胚胎发育时期引起永久性的肉眼可见的形态改变及其他胚胎毒性,为评价其安全性提供参考依据。方法:雌雄大鼠1:1同笼交配,次日晨查阴栓,有阴栓者确定为已交配。将孕鼠随机分为5组,即低(15mg/kg)、中(30mg/kg)、及高(60mg/kg)3个实验组,1个阴性溶剂对照组和1个环磷酰胺(7.0mg/kg)阳性对照组。所有动物均于妊娠d6开始给药,静脉注射,每日1次,连续给药至受孕d15。阳性对照组于妊娠d11肌肉注射环磷酰胺,每天1次,连续3d。按《中药新药研究指南》中的有关要求,检测孕鼠和胎鼠的相关指标。结果:孕鼠静脉注射虎杖苷,连续给药10次未见动物出现与给药相关的异常反应。大鼠孕期无阴道流血、无流产等异常现象。30mg/kg及60mg/kg剂量组受孕d15后(给药第10次)体重明显低于阴性对照组(P<0.05),15mg/kg组动物体重未见明显变化。阳性对照组给药后受孕d18开始体重明显低于阴性对照组(P<0.05)。计算孕鼠体重净增长结果显示各给药组及阳性对照组与阴性对照组间无明显差异。3个剂量组孕鼠的平均着床数、窝平均活胎数、平均黄体数、活胎率、吸收胎率、死胎率及平均胎盘重与溶剂对照组比较,均无显著差别(P>0.05)。但3个剂量组子宫联胎重明显低于对照组(P<0.05)。阳性对照组孕鼠的窝平均着床数减少。

GLP实验室资料档案的管理

原始资料系指记载研究工作的原始观察记录和有关文书材料,包括工作记录、各种照片、缩微胶片、缩微复制品、计算机打印资料、磁性载体和自动化仪器记录材料等.档案是指非临床安全性评价研究机构在从事非临床研究以及其它各项活动时直接形成的对机构和社会具有保存价值的各种文字、图表、声像等不同形式的历史记录.档案是安全性评价实践活动的真实记录,是社会的宝贵财富,应由资料档案室集中统一保管.档案工作是非临床安全性评价研究机构管理工作的组成部分,是反映和追溯安全性评价工作真实历史面貌的一项重要工作,是做好非临床研究的重要基础工作之一.

小鼠灌胃植物提取物一般生殖毒性试验

目的:通过在小鼠生殖细胞成熟周期给予不同剂量植物提取物,观察AS植物提取物对小鼠生殖能力及生殖系统的影响,为评价AS植物提取物的安全性提供依据。方法:KM种小鼠240只,随机分为4组,每组60只,雌雄各半。设1个溶剂对照组和3个给药组,给药剂量分别为100 mg/kg、300 mg/kg和900 mg/kg,分别相当于人临床拟用剂量的10倍、30倍和90倍。交配前雄鼠连续给药60 d,雌鼠连续给药14 d,雌雄鼠按1:1合笼交配,发现阴栓之日定为受孕d 0。交配后雌鼠给药至受孕d 6。观察指标包括:小鼠一般状况、体重变化;对生殖功能的影响。结果:雄鼠在给药后第2周3个剂量组体重均明显低于对照组(P<0.01);给药3周后低剂量组体重增长恢复至对照组水平,但中高剂量组体重仍显著低于对照组(P<0.05,P <0.01),并持续到给药结束。雌性小鼠在给药期间各组体重增长无明显差异。各组动物在3个发情周期内交配率均在90%以上,受孕率在70%以上,对照组生育率为86.7%,三个给药组分别为66.7%、73.3%及83.3%。发现阴栓平均天数对照组为2.9 d,低、中、高三个给药组分别为2.8 d、2.7 d、3.4 d。精子数目及精子形态异常率各组间无明显差异。观察精子活力发现各组均以Ⅱ、Ⅲ级居多。大体解剖检查未见明显的与给药相关的病理改变。睾丸、附睾、前列腺、精囊腺脏?

静脉注射福大赛因对昆明小鼠的皮肤光毒性

背景与目的:研究福大赛因对小鼠的皮肤光毒性。材料与方法:将昆明小鼠随机分为5组,分别为生理盐水组(给予生理盐水0.02ml/g),溶剂对照组(给予溶剂0.02ml/g),福大赛因低剂量组(2mg/kg)和高剂量组(5mg/kg)以及阳性对照组(给予血卟啉15mg/kg)。均采用静脉注射1次性给药。小鼠于给药后的不同时间接受不同强度模拟太阳光照射60min。用6mm打孔器取左、右耳廓各1耳片,并称重,通过小鼠耳片重量和肿胀率的变化评价皮肤光毒性。结果:福大赛因高、低剂量组于给药后1、3及24h接受模拟太阳光(40mW/cm2)照射后,耳片重量与对照组相比显著增加(P<0.05),而低剂量组于给药后48h照射后无明显异常,高剂量组则给药后7d经照射无明显异常。给药后1、3h不同强度模拟太阳光照射(10、20、30、40mW/cm2),各组小鼠均出现毒性反应;10mW/cm2组耳片重量与20、30、40mW/cm2组间差异具有统计学意义(P<0.01)。结论:福大赛因2mg/kg体重给药48h后光照无明显光毒性反应;5mg/kg给药7d后光照无明显光毒性反应。福大赛因产生光毒性的饱和光强度约为20mW/cm2。

小鼠灌胃西格列羧围产期毒性试验

目的:探讨对围产期小鼠母胎的毒性影响。方法:雌雄小鼠2:1同笼交配,次日晨查阴栓,有阴栓者为妊娠d1。将受精鼠分为4组,即分别为低(20 mg/kg-1)、中(60 mg/kg)、高(180 mg/kg)3个剂量组和1个溶剂对照组。均于妊娠d 15开始灌胃给药,每日1次,连续给药至分娩后21d。按《新药(西药)临床前研究指导原则汇编》中的有关要求,观察孕鼠及仔鼠相关指标。结果:⑴实验组孕期无阴道流血、无流产等异常现象。⑵各组孕鼠体重均呈增长趋势,给药组与对照组比较无显著性差异。但从分娩1周后至分娩3周哺乳期结束,中、高剂量组体重均低于对照组(P<0.01)。⑶哺乳期,中剂量分娩后d7和d14、高剂量d14摄食量低于对照组(P<0.05,P<0.01)。⑷对照组与各给药组受孕率分别为83%、83%、87%、90%,生产率皆为100%,母鼠死亡率均为0,平均妊娠期分别为19.1d、18.9d、19.0d、18.6d,各组间经统计学处理均无显著差异。⑸哺乳期结束处死母鼠解剖检查,未见各组孕鼠有特征性内脏畸形和异常。对未孕雌鼠进行剖检,心、肝、脾、肺、肾、子宫等主要脏器亦未见异常。⑹未见仔鼠(F1代)头部、四肢、躯干及尾部有异常。⑺出生死仔数对照组为0,给药组分别为1,1,37,出生死亡率分别为0%,0.4%,0.4%,14.5%,高剂量组明显高于对照组(P<0.01);仔鼠出生四日死亡数对?