北京协和医学院“精准治疗下的肿瘤学”课程教学实践

目的对北京协和医学院首次开设的“精准治疗下的肿瘤学”课程进行调研,以吸纳学生意见和建议、优化课程设置、提高教学质量。方法于2021年12月—2022年2月采用问卷调查和访谈两种形式调研,对问卷资料进行统计学分析,对访谈资料进行归类编码。结果共纳入问卷定量资料36份,访谈定性资料5份。提升专业知识和个人兴趣爱好成为学生选课的两大重要原因,对课程评价的不同方面偏重有统计学差异。医学研究生对课程总体评分9.22分,94.4%的学生认为课程达到预期效果,学生学习兴趣得到提高。学生对教师授课态度、课程内容的前沿性和实用性的评分分别为9.81、9.08和8.86分,未来希望增加病例分析实践和专题讨论活动,丰富教学形式。结论本课程作为研究生选修课程,首次开课受到学生的认可和接纳。未来可在了解学生核心诉求的前提下,优化课程设置、创新教学方法、提高教学质量,探索医学研究生教育的全新路径。

医学院校研究生学位管理系统的开发和应用

开发和应用研究生学位管理系统作为研究生管理系统中的一个子模块,有利于优化工作流程,实现科学管理,提高办公效率。本文简要介绍了该系统的设计原则、管理权限设置及主要功能模块,并总结了该系统的特点和应用的意义。

医学院校“一流学科”建设方案中国际交流与合作的经验总结与思考

国际交流与合作是提升学科水平、达成“双一流”建设目标的重要路径之一。在第一轮“双一流”学科建设期间,各入选学科依托高校平台,通过跨境培训、科研合作、人才引育等形式,充分发挥“后发”优势,实现学科水平的跨越式提升,为支撑学科及同类高校建设提供有益的经验借鉴。本文以北京协和医学院为研究对象,从建设成效、建设目标、建设任务等方面对各一流学科建设方案中的国际合作与交流的成功经验进行系统总结,为本校支撑学科在国际合作与交流方面提供有益的借鉴,并从发展的角度为同类高校的国际化建设提出参考建议。

医学研究生动物实验伦理认知考察:以雄性连体鼠受孕为例

动物实验是医学研究与教育中不可或缺的环节,也是培养其科研伦理意识的实践途径。对410名医学研究生的研究结果显示:56.8%的人称不应开展雄性连体鼠受孕实验,58.1%的人称此实验违背了3R原则,76.3%的人称此类研究需要接受伦理委员会的伦理审批。被调查医学研究生的动物实验伦理认知情况尚好。因此建议医学院校和科研院所要加强动物实验伦理教育,提高医学研究生和科研人员的伦理意识和伦理决策能力,健全伦理审查制度,优化医学科技伦理治理环境。

临床医学学术学位研究生核心课程的设计与探索

北京协和医院对临床医学学术学位研究生的核心课程建设进行了探索与设计。通过对核心课程的建设目标、内容构架以及课程大纲等进行介绍与分析,以期强化研究生课程改革,提高研究生的学术创新能力。

卵巢癌患者肿瘤细胞减灭术前低蛋白血症与围术期异体红细胞输注风险的相关性:单中心回顾性队列研究

目的分析行肿瘤细胞减灭术的卵巢癌患者术前低蛋白血症与围术期异体红细胞输注风险的相关性。方法回顾性纳入2014年1月—2018年12月北京协和医院接受肿瘤细胞减灭术的卵巢癌患者。收集患者一般资料、术前血浆白蛋白、美国麻醉医师协会分级、术中出血量、手术时间、围术期(术中及术后3 d内)异体红细胞输注情况等临床资料,采用多因素Logistic回归法分析术前低蛋白血症(血浆白蛋白<35 g/L)与异体红细胞输注风险的相关性。结果共入选符合纳入与排除标准的卵巢癌患者1001例,其中术前低蛋白血症64例(6.4%),围术期接受异体红细胞输注481例(48.1%)。术前低蛋白血症患者围术期异体红细胞输注率高于非低蛋白血症患者[84.4%(54/64)比45.6%(427/937),P<0.001]。多因素Logistic回归分析校正美国麻醉医师协会分级、术中出血量、手术时间等混杂因素后显示,术前低蛋白血症与围术期异体红细胞输注风险显著相关(OR=5.68,95%CI:2.56~13.57,P<0.001)。结论术前低蛋白血症可增加行肿瘤细胞减灭术卵巢癌患者围术期异体红细胞输注风险。

提高跨区穿支皮瓣存活率的相关研究进展

跨区穿支皮瓣因具有最小化的供区损害、可获得最佳的受区外形和功能修复而广泛用于先天性疾病、创伤、肿瘤切除和糖尿病足溃疡等皮肤缺损的修复,但远端坏死发生率较高,是其临床应用的一大障碍。该文简述了跨区穿支皮瓣的特征,血流动力学和形态学变化、血管蒂选择、血管生成、缺血再灌注损伤、氧化应激、细胞凋亡、炎症反应和自噬对于跨区穿支皮瓣存活的影响,旨在为临床应用提供借鉴。

老年2型糖尿病住院患者合并肌少症相关因素研究

目的 探究住院老年2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)患者合并肌少症的影响因素。方法 采用病例对照研究,回顾性分析2020年1月至2023年5月在北京医院内分泌科住院的老年T2DM患者,根据亚洲肌少症工作组(Asian Working Group for Sarcopenia,AWGS)2019年诊断标准诊断肌少症,应用多因素Logistic回归分析探究糖尿病合并肌少症的影响因素。结果 住院老年T2DM患者共469例,男性发生率高于女性(65.3%比34.7%,P<0.05)。糖尿病合并肌少症组(T2DM+Sar组)年龄高于T2DM无肌少症组(T2DM组)(P<0.01)。T2DM+Sar组49例,T2DM组420例。倾向性评分匹配(propensity score matching,PSM)后纳入糖尿病无肌少症组153例(T2DM组),T2DM+Sar组45例,矫正性别、年龄混杂因素后,T2DM+Sar组体质指数(body mass index,BMI)显著低于T2DM组(P <0.01),T2DM+Sar组中,BMI<24kg/m2患者比例更高(53.6%比11.1%,P<0.01),合并脑血管病及糖尿病周围神经病变比例更高(P<0.05)。T2DM+Sar组较T2DM组,Morse跌倒评分更高,日常生活能力(activities of daily living,ADL)评分更低,5次坐站所需时间更长、优势手握力低(均P<0.05),T2DM+Sar组的优势侧上肢臂围更细,总瘦组织含量、骨矿物质含量、内脏脂肪面积均低于T2DM组(P<0.05)。多因素Logistic回归分析显示:合并糖尿病周围神经病变(OR=3.348,95%CI:1.252~8.955)、内脏脂肪面积(OR=1.042,95%CI:1.005~1.079)、血尿酸(OR=1.007,95%CI:1.002~1.012)是老年T2DM合并肌少症的危险因素,BMI (OR=0.512,95%CI:0.363~0.721)、骨矿物质含量(OR=0.037,95%CI:0.008~0.186)是老年T2DM合并肌少症的保护因素。在BMI<24kg/m2的老年T2DM患者群体中,血尿酸(OR=1.010,95%CI:1.003~1.017)为老年T2DM合并肌少症的危险因素,下肢平均腿围(OR=0.624,95%CI:0.447~0.870)、高密度脂蛋白胆固醇(OR=0.195,95%CI:0.040~0.945)、总瘦组织含量(OR=0.889,95%CI:0.797~0.990)为老年T2DM合并肌少症的保护因素。结论 在老年T2DM的管理中,不建议将BMI控制在过低水平,身体成分对于老年T2DM患者合并肌少症的预测作用可能比BMI更有意义。

AI-HIP系统在全髋关节置换中的假体型号及联合偏心距和截骨的作用研究

目的:探讨AI-HIP辅助手术规划系统在初次单侧全髋关节置换术(total hip arthroplasty,THA)中的规划效果及其临床结果。方法:回顾性分析2022年3月至2022年11月连续性应用AI-HIP系统行初次单侧THA的36例患者的临床资料,男16例,女20例,年龄43~81(62.2±10.9)岁,将其纳入AI-HIP组;根据配对原则选择同期采用传统模板方法规划的患者36例,男16例,女20例,年龄40~80(60.9±12.1)岁,作为对照组。比较两组假体的准确率,以及术前规划和术后实际联合偏心距差值、下肢长度差值、距小转子上缘截骨高度和顶肩距以评价规划效果,采用Harris评分和疼痛视觉模拟评分(visual analogue scale,VAS)评价其临床疗效。结果:两组均获得随访,时间12~18(14.5±2.1)个月。AI-HIP组规划髋臼杯和股骨柄假体型号的完全准确率、近似准确率分别为72.2%、100%和58.3%、88.9%,均优于对照组的44.4%、83.3%和33.3%、66.7%(P<0.05);规划股骨头假体型号差异无统计学意义(P>0.05)。AI-HIP组术后实际联合偏心距差值、联合偏心距差值(实际-规划)分别为1.0(0.2,2.4)mm、1.1(-2.1,3.2)mm,优于对照组的3.0(1.4,4.9)mm、3.5(-1.6,6.5)mm(P<0.05)。两组间术后实际距小转子上缘截骨高度比较,差异无统计学意义(P>0.05)。AI-HIP组术后实际下肢长度差值、下肢长度差值(实际-规划)、距小转子上缘截骨高度(实际-规划)、术后实际顶肩距、顶肩距差值(实际-规划)分别为1.5(0.2,2.8)、1.1(-0.3,2.2)、2.1(-2.3,4.1)、(15.3±4.1)、-2.2(-4.8,0.3)mm,优于对照组的2.6(1.3,4.1)、2.5(0.3,3.8)、5.8(-2.4,7.7)、(13.0±4.3)、-5.7(-9.4,-2.2)mm(P<0.05)。末次随访,两组Harris评分中功能、疼痛、功能、畸形、总分及VAS比较,差异均无统计学意义(P>0.05);而AI-HIP组Harris评分中活动度评分(4.8±0.6)分,高于对照组(4.4±0.8)分(P<0.05)。结论:AI-HIP辅助手术规划系统较传统模板规划,在初次单侧THA中对髋臼杯和股骨柄假体型号的预测、恢复联合偏心距、规划下肢长度、截骨高度和顶肩距方面具有良好的准确性,临床效果满意。

临床医学专业学位硕士研究生指导模式的摸索

目的了解"医教协同"培养模式下,临床医学专业学位硕士生接受指导情况。方法对北京协和医学院总计584名临床医学专业型硕士进行了问卷调查。结果 "医教协同"政策的推行,带来了培养模式的改变和培养要求的提高。结论建议结合培训要求和学生需求,调整指导模式,建立指导教师团队,开展有针对性的培训,以期保证学员得到及时、有效的指导。

三种学制医学研究生科研训练与临床实践现状分析

目的了解不同学制医学研究生的科研训练与临床实践情况,分析各学制在医学博士培养模式上的优势与不足,以期为未来医学教育规划、调整、改革提供参考。方法采用问卷调查与个别访谈相结合的方法,收集北京协和医学院临床学院(北京协和医院)2021年临床医学专业高年级研究生,包括传统学制博士生(2018级博士生,2016级直博、转博生),2013级临床医学八年制本-博连读博士生,2018年和2019年入学的“4+4”试点班博士生科研训练与临床实践相关资料,进行分析、总结。结果共收集有效问卷55份,其中传统学制博士生33份(60.0%),临床医学八年制本-博连读博士生15份(27.3%),“4+4”试点班博士生7份(12.7%)。11人愿意接受访谈,包括6名传统学制博士生,3名临床医学八年制本-博连读博士生,2名“4+4”试点班博士生。传统学制博士生、临床医学八年制本-博连读博士生、“4+4”试点班博士生中毕业后拟投身于临床工作的比率分别为97.0%、93.3%、71.4%。关于科研动力,84.8%的传统学制博士生认为是源于事业发展需求,临床医学八年制本-博连读博士生持同样观点者占比53.3%,“4+4”试点班博士生为57.1%。科研训练中,传统学制博士生面临的最主要问题为研究设计能力弱(60.6%),临床医学八年制本-博连读博士生(73.3%)与“4+4”试点班博士生(71.4%)则主要为缺乏充足的科研时间。对当前科研状态感到满意或享受者的占比在“4+4”试点班博士生中最高(57.1%),其次为传统学制博士生(39.4%),临床医学八年制本-博连读博士生最低(26.7%);对科研产出满意者在传统学制博士生中占比最高(54.5%),其次为“4+4”试点班博士生(42.9%),临床医学八年制本-博连读博士生最低(33.3%)。传统学制博士生、临床医学八年制本-博连读博士生、“4+4”试点班博士生每周科研时间投入>20 h者的比率分别是63.7%、26.7%和14.3%,每周临床实践时间>40 h者比率分别为24.2%、20.0%和42.9%。84.8%的传统学制博士生、100%的临床医学八年制本-博连读博士生、85.7%的“4+4”试点班博士生的科研方向在导师指导下确立并开展;在科研进展遭遇困难时,3种学制博士生中需有赖于导师帮助的比率分别为48.5%、53.3%和42.9%,但每周与导师接触时间>8 h的比率分别为12.1%、20.0%和14.3%。3种学制博士生中,对当前临床实践感到满意或享受者的占比在“4+4”试点班博士生中最高(71.4%),传统学制博士生(42.4%)和临床医学八年制本-博连读博士生(40.0%)相对较低。结论科研思维和临床能力的培养是渐进的过程,需大量时间投入和导师引领。3种博士生培养学制互有优劣,应整合医院及医学院临床和科研资源,合理规划临床实践与科研训练时间分配,激发研究生能动性,以期培养出更多符合社会需求且具有国际视野的高层次拔尖创新型医学人才。

全胰切除术与胰十二指肠切除术治疗胰腺癌的手术疗效和生活质量对比分析:基于倾向性评分匹配的回顾性队列研究

目的探究全胰切除术(total pancreatectomy,TP)与胰十二指肠切除术(pancreaticoduodenectomy,PD)治疗胰腺癌患者的术后短期并发症与长期预后差异。方法回顾性收集北京协和医院2016年1月至2021年12月行TP(TP组)和2019年1月至2021年12月行PD(PD组)的胰腺癌患者临床资料。根据危险因素的不同,将PD组患者分为胰瘘高风险PD组和复发高风险PD组。采用倾向性评分法匹配后,比较TP组与胰瘘高风险PD组、复发高风险PD组术后短期手术疗效指标(术后并发症发生率、30 d死亡率、住院时间等)、长期手术疗效指标(总生存期)及生活质量差异。结果共入选符合纳入与排除标准的TP组患者32例,PD组174例(胰瘘高风险PD组99例,复发高风险PD组15例)。(1)TP组与胰瘘高风险PD组:经倾向性评分匹配后,最终纳入TP组患者29例、胰瘘高风险PD组患者56例。TP组无胰瘘发生,胰瘘高风险PD组胰瘘发生率为19.64%(P=0.027),两组其他术后并发症发生率、Clavien-Dindo分级、住院时间、ICU停留时间、30 d死亡率等短期手术疗效指标均无统计学差异(P均>0.05)。中位随访时间36个月时,两组生命质量核心量表(quality of life questionnaire-core 30,QLQ-C30)评分均无显著差异(P均>0.05)。(2)TP组与复发高风险PD组:由于两组基线资料均无统计学差异(P均>0.05),故TP组32例患者、复发高风险PD组15例患者均纳入分析。TP组无胰瘘发生,复发高风险PD组胰瘘发生率为20.00%(P=0.028),两组其他术后并发症发生率、Clavien-Dindo分级、住院时间、ICU停留时间、30 d死亡率等短期手术疗效指标亦无统计学差异(P均>0.05)。截至末次随访,与复发高风险PD组比较,TP组中位总生存期更长(37.68个月比15.24个月,HR=2.551,95%CI:1.144~5.689,P=0.018);多因素Cox回归分析显示,复发高风险PD、术前合并梗阻性黄疸是胰腺癌患者长期预后不良的独立危险因素。结论对于胰瘘高风险胰腺癌患者,TP可取得与PD相当的短期手术疗效和长期生活质量,且术后无胰瘘负担。对于复发高风险胰腺癌患者,TP可在保证手术安全性的基础上显著延长患者生存期。

围手术期肺结节患者抑郁焦虑的影响因素:一项前瞻性研究

目的 研究围手术期肺结节患者抑郁焦虑状态的影响因素及评估手术对其的影响。方法 收集2023年1月至2023年9月北京医院胸外科就诊的肺结节患者共140例,于术前收集患者的一般情况、人格特点等信息,并通过抑郁自评量表(Self-rating Depression Scale SDS)、焦虑自评量表(Self-rating Anxiety Scale,SAS)、匹兹堡睡眠质量指数(Pittsburgh Sleep Quality Index,PSQI)、简明生活质量与满意程度问卷评定患者术前焦虑、抑郁、睡眠、生活质量等情况,并同时为之分级;术后1个月、3个月、6个月、12个月随访,通过上述量表评定患者术后焦虑、抑郁、睡眠质量、生活质量状态并分级,并与术前比较。结果 术前患者抑郁54例(38.6%),焦虑24例(17.1%),抑郁伴焦虑18例(12.9%)。经过多因素Logistic回归分析发现精神质(P=0.048)、神经质(P=0.009)是术前抑郁状态的危险因素,同时也是术前焦虑状态的危险因素(P=0.006,P=0.007)。术前与术后患者对比,患者的抑郁状态或焦虑状态的差异无统计学意义。而病理的良恶性对患者术后抑郁或焦虑与否无关。结论 典型的神经质和精神质的患者与抑郁、焦虑状态存在关联。

基于支持向量机的平稳期儿童哮喘诊断方法研究

哮喘是一种对儿童生活质量有重大影响的慢性呼吸系统疾病,它的及时预测和准确诊断对哮喘儿童的健康至关重要。但对处于哮喘平稳期的儿童而言,哮喘发作时儿童的呼吸音中不存在明显的喘鸣音等特征音,所以在听觉上处于哮喘平稳期儿童的呼吸音与健康儿童的呼吸音无明显区别,导致医护人员难以使用传统的听诊方法诊断哮喘。选用机器学习中的支持向量机算法(SVM)对儿童进行哮喘预测,研究结果表明,SVM在哮喘与健康儿童呼吸音的分类预测中表现出色,其对吸气相的预测准确率达到96.53%,而对呼气相的预测准确率达到91.66%。由此可见,SVM在儿童哮喘诊断中具有较好可行性,提高了儿童哮喘诊断的准确性和效率,为该领域提供了可靠的诊断工具。

棘白菌素类抗真菌新药瑞扎芬净研究进展

真菌感染给全球公共卫生事业带来了巨大负担,尤其是随着侵袭性操作和免疫功能受损患者的增多,侵袭性真菌感染的患病率和死亡率近年来呈现持续上升趋势,严重威胁患者健康[1]。据全球真菌感染行动基金组织估计,全球每年有超过3亿各年龄段的人患有严重真菌感染,且这些人中估计有150多万人因其死亡[2-3],约90%的死亡是由4个属的真菌引起:隐球菌属、念珠菌属、曲霉属和肺孢子菌[4],但是,病情严重需要重症监护的患者以及接受免疫抑制的患者增多也使得罕见霉菌、酵母的感染呈现上升趋势[5-6]。

口服抗凝治疗增加易栓症患者异常子宫出血的发生风险:一项单中心回顾性研究

目的 探讨女性易栓症患者口服抗凝治疗期间异常子宫出血(abnormal uterine bleeding,AUB)的发生率及其不良影响。方法 以2013年1月—2023年5月于北京协和医院血液内科出凝血疾病门诊就诊,并接受口服利伐沙班或华法林抗凝治疗的女性易栓症患者为研究对象。回顾性收集抗凝治疗前及治疗后患者的一般临床资料及AUB情况,并根据抗凝治疗药物不同将患者分为利伐沙班治疗组和华法林治疗组。采用广义估计方程分析女性易栓症患者抗凝治疗前后AUB的发生率,探讨不同抗凝治疗药物对AUB发生率的影响。结果 共入选符合纳入与排除标准的女性易栓症患者106例,相较于用药前,AUB的发生率显著增加(56.6%比26.4%,P<0.001),以月经过多(48.1%)和经期延长(21.7%)为主要临床表现。相较于华法林,利伐沙班更易导致AUB(OR=3.3,95%CI:1.5~7.4,P=0.003)。在发生月经过多和经期延长的54例患者中,72.2%(39/54)采取了干预措施,其中经期暂停服用抗凝药是主要干预措施(37.0%),相较于华法林治疗组,利伐沙班治疗组患者更易在经期停药(OR=10.4,95%CI:1.2~87.2,P=0.019)。结论 口服抗凝治疗可显著增加女性易栓症患者AUB的发生风险,且利伐沙班相关AUB的发生风险明显高于华法林。

青少年肌阵挛癫痫认知功能与白质关系的研究进展

青少年肌阵挛癫痫(juvenile myoclonic epilepsy,JME)是常见的特发性全面性癫痫综合征亚型,常规磁共振成像无器质性异常,既往被认为是一种良性癫痫。近年来,神经心理学研究发现,JME患者存在执行功能障碍等认知功能障碍。随着神经影像技术的发展,研究结果显示JME患者大脑存在结构及功能的异常。目前JME认知障碍的机制尚未明确。本文综述JME患者的认知功能特点及与脑白质改变关系的研究进展,以进一步阐明JME的潜在病理生理学机制,为早期预测和干预JEM患者认知功能提供参考。

早发型胰腺癌临床病理特征、治疗策略和预后研究

背景近年来早发型胰腺癌(≤50岁)发病率逐年上升,但对这一人群临床病理特征、治疗策略与预后的关系研究较少。目的分析早发型胰腺癌患者的临床病理特征及其治疗策略与预后的关系。方法回顾2017年1月—2020年12月解放军总医院第一医学中心诊治的18~50岁胰腺癌患者临床病理资料和治疗方案,分析其与生存的关系。结果共纳入272例早发型胰腺癌患者,中位年龄46(范围:23~50)岁,男性、胰头部肿瘤、低分化腺癌分别占70.6%、55.9%和50.3%,Ⅰ~Ⅳ期患者分别占22.8%、28.3%、18%和30.9%。接受手术切除、化疗、放疗、免疫治疗和靶向治疗的患者分别占57.0%、86.8%、27.9%、38.6%和31.6%。全组中位总生存期(overall survival,OS)为26.5(95%CI:24.2~30.8)个月,1年、2年、5年生存率分别为78.0%、57.1%和24.3%。局限期单纯手术组和辅助治疗组中位OS分别为30.7个月和36.4个月(P=0.885);局部晚期放疗为主综合治疗组、手术切除组和单纯化疗组中位OS分别为29.9个月、16.9个月和15.7个月(P=0.207);转移性患者全部接受了化疗,单纯化疗组、放疗组和手术切除组中位OS分别为8.3个月、18.8个月和22.5个月(P=0.109);术后复发放疗为主综合治疗组和单纯化疗组复发后中位OS分别为15.9个月和15.4个月(P=0.415),中位无进展生存期分别为10.5个月和6.3个月(P=0.204)。多因素Cox回归分析表明CA19-9(>1000 U/mL vs≤1000 U/mL;HR=1.80,95%CI:1.16~2.81)、病理分级(中-高分化vs低分化;HR=0.66,95%CI:0.41~0.95)、临床分期(Ⅳ期vsⅠ期;HR=2.36,95%CI:1.12~4.99)、根治性手术(有vs无;HR=0.39,95%CI:0.22~0.69)和化疗周期数(>6周期vs≤6周期;HR=0.44,95%CI:0.29~0.67)是独立预后因素。结论早发型胰腺癌以男性患者为主,分期较早,分化较差,局限期患者单纯手术与术后辅助化疗生存相似,局部晚期和转移性患者接受放疗为主的综合治疗有改善生存趋势,术后复发患者采用放疗可取得较好无进展生存。

血清CXCR4水平与颅内动脉粥样硬化性狭窄的相关性研究

目的探讨血清中C-X-C基序趋化因子受体4(C-X-C motif chemokine receptor 4,CXCR4)水平与颅内动脉粥样硬化性狭窄(intracranial atherosclerotic stenosis,ICAS)的关系。方法该研究为病例对照研究。连续性纳入自2022年3月至2023年4月于北京医院神经内科住院治疗的缺血性脑血管病患者。应用颅内动脉检查(MRA、CTA或DSA)评估患者颅内动脉粥样硬化情况,将患者分为ICAS组(颅内动脉狭窄≥50%)和对照组(颅内动脉狭窄<50%),检测两组患者的血清CXCR4水平,通过多因素分析探讨CXCR4水平与ICAS的相关性。根据颅内动脉狭窄程度将ICAS组患者进一步分为中度狭窄组(50%≤颅内动脉狭窄<70%)及重度狭窄组(70%≤颅内动脉狭窄≤100%),比较各组间CXCR4水平的差异。结果共纳入患者264例,其中ICAS组173例〔男125例;年龄(69.05±11.06)岁〕,对照组91例〔男56例;年龄(66.96±11.12)岁〕。ICAS组CXCR4水平高于对照组〔(320.00±46.90)ng/L比(304.00±51.54)ng/L,t=2.472,P=0.014〕。校正相关混杂因素后,Logistic回归分析结果提示CXCR4水平升高〔OR(95%CI):1.007(1.002~1.013),P=0.011〕是ICAS的独立影响因素。ICAS中、重度狭窄组及对照组间CXCR4水平差异有统计学意义(F=5.527,P=0.004),且ICAS重度狭窄组患者血清中CXCR4水平明显高于对照组〔(324.82±45.87)ng/L比(304.00±51.54)ng/L,t=3.132,P=0.002〕及ICAS中度狭窄组〔(324.82±45.87)ng/L比(307.47±47.72)ng/L,t=2.118,P=0.035〕。结论血清CXCR4水平在ICAS患者中升高是ICAS的独立影响因素,有作为评估ICAS潜在生物标志物的潜力。

应用C-to-G碱基编辑器对PCSK9基因靶向敲除的研究

目的:使用C-to-G碱基编辑器(CGBE)Td-CGBE-NG靶向敲除huh-7肝癌细胞系前蛋白转化酶枯草溶菌素9(PCSK9)基因,以CBE(AncBE4max)为参照,评价Td-CGBE-NG对该基因的敲除效果。方法:使用引入终止密码子的策略敲除huh-7肝癌细胞系PCSK9基因。构建碱基编辑器Td-CGBE-NG和AncBE4max,构建重组质粒sg386和sg555,将Td-CGBE-NG和sg386,AncBE4max和sg555分别共转染huh-7细胞,实现c.1447C>G和c.1953C>T的转换,在两位点引入终止密码子S386X(TGA)和Q555X(TAG),使用sanger测序和T载体克隆验证编辑效率;实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)和蛋白免疫印迹法(Western blot)检测PCSK9基因mRNA和蛋白表达水平的变化。结果:sanger测序和T载体克隆结果显示,Td-CGBE-NG和AncBE4max的编辑效率分别为c.1447C>G 33%和c.1953C>T 25%;RT-qPCR结果显示,Td-CGBE-NG使PCSK9 mRNA的表达量降低(t=17.29,P<0.0001);Western blot结果表明,两组huh-7细胞蛋白表达量均明显下降(AncBE4max:t=5.57,P<0.01;Td-CGBE-NG:t=4.912,P<0.01)。结论:Td-CGBE-NG可以有效敲除huh-7肝癌细胞系的PCSK9基因,抑制该基因mRNA和蛋白的表达,为后续Td-CGBE-NG的应用奠定基础。