固相萃取⁃高效液相色谱⁃三重四极杆质谱法分析饮用水处理厂水样中7种香豆素

本研究建立了一种固相萃取结合高效液相色谱-三重四极杆质谱法分析饮用水处理厂水样中7种香豆素类化合物的方法。样品前处理过程采用HLB小柱进行固相萃取,然后采用超纯水(含025%甲酸)淋洗,最后经甲醇(含025%甲酸)洗脱。萃取液用Phenomenex Luna C18柱(100 mm×20 mm,3μm)分离后,以甲醇-01%甲酸水溶液为流动相进行梯度洗脱,在电喷雾多反应监测模式下检测。以饮用水原水和出厂水为基质考察方法的基质效应、精密度和准确度。7种香豆素类化合物在各自的线性范围内呈现良好的线性关系,相关系数(r)均大于099,方法检出限(MDL)为067~112 ng/L。不同加标水平(20、50、100 ng/L)下7种香豆素类化合物回收率为614%~915%,相对标准偏差(RSD,n=6)均≤112%。利用该方法分析了饮用水处理厂不同处理阶段的水样,其中7-羟基香豆素、6,7-二羟基香豆素、香豆素的检出率为100%,含量为021~279 ng/L。6-羟基-4-甲基香豆素在原水、混凝后水样、炭滤后水样中均未检出,只在砂滤后水样和出厂水中被检出,而且出厂水中的含量(469 ng/L)高于砂滤后水样(179 ng/L)。8-氯-7-羟基香豆素只在出厂水中被检出(028 ng/L)。本方法分析时间短,精密度和准确度良好,在监测实际水样中香豆素的含量及评估饮用水处理过程对于水样中香豆素类化合物去除方面可发挥积极作用。

2011—2018年美国青少年全血5种重金属水平与内脏脂肪的关联研究

目的该研究旨在评估全血中镉(Cd)、铅(Pb)、锰(Mn)、汞(Hg)、硒(Se)5种重金属含量和内脏脂肪组织(VAT)累积之间的关联。方法基于2011—2018年美国国家健康和营养调查(NHANES)数据库,选取4668名8~19岁的青少年,进行人群横断面研究。应用广义线性回归估计全血5种金属水平和VAT累积之间的关联;应用限制性三次样条法(RCS)评估非线性关联;根据年龄、身体质量指数(body mass index,BMI)、文化程度和家庭收入-贫困比率(poverty income ratio,PIR)对研究人群进行分层分析。结果2011—2018年美国青少年全血Cd、Pb、Mn、Hg、Se的几何平均浓度为0.13μg/L、0.53μg/dL、10.34μg/L、0.41μg/L、183.67μg/L,VAT质量的中位数为186.89 g。VAT质量的分布具有明显的性别差异。在男性青少年中,全血Pb水平与VAT质量呈负相关(β=-0.037,95%CI:-0.052~-0.021),而在女性中,全血Cd水平与VAT质量呈正相关(β=0.041,95%CI:0.004~0.077)。男性和女性的全血Mn水平均与VAT具有正相关,且在女性中关联更强(男性:β=0.107,95%CI:0.079~0.136;女性:β=0.238,95%CI:0.180~0.295)。RCS分析发现,全血Cd水平和VAT质量之间的关联呈J型,男性的全血Pb水平和VAT质量呈反J型关联。结论美国青少年的全血5种金属水平与VAT质量有关。本研究有助于识别重金属暴露对代谢健康的危害,但未来仍需要开展进一步的研究来阐明重金属暴露对VAT毒性效应的潜在机制。

非靶标分析在饮用水消毒副产物鉴定中的研究进展

饮用水消毒副产物(disinfection by-products,DBPs)在消毒后的饮用水中广泛存在。饮用水中仍有大量未知DBPs,它们具有潜在毒性,危害人类健康。目前未知DBPs的鉴定主要由质谱来实现,分析方式有靶向分析和非靶向分析。靶向分析对于DBPs定量分析具有非常好的灵敏度,但是对于未知DBPs的涵盖范围有限。非靶标分析具有很宽的分析面,但是灵敏度低于靶向分析,更适合定性分析未知DBPs。本文从非靶标分析的流程出发,从样品前处理、质谱类型等角度对近5年来非靶标分析饮用水中未知DBPs的研究进展进行了综述,并展望了未来非靶标分析方式在饮用水中未知DBPs分析研究方面的作用。

孕期心理状况与无医学指征剖宫产的关联研究

目的:探讨孕期抑郁、焦虑和压力等心理因素对无医学指征剖宫产的影响。方法:采用前瞻性队列研究方法,以2016年10月—2019年1月在南京医科大学附属妇产医院纳入的1453例孕妇作为研究对象。采用焦虑自评量表、抑郁流行病学研究中心量表和压力知觉量表分别评估孕妇孕早、中、晚期的心理状况。根据产科病例获取分娩方式并判断是否具有剖宫产医学指征,在无剖宫产医学指征的孕妇人群中,采用广义估计方程分析孕期心理因素与剖宫产的关联。结果:本研究最终纳入1453例孕妇作为研究对象,其中516例孕妇有剖宫产医学指征。余937例无剖宫产医学指征的孕妇中,139例孕妇选择剖宫产。调整母亲分娩年龄、孕前体重指数、产次、妊娠合并糖尿病和分娩孕周后,发现孕妇孕晚期伴有任一不良心理症状(高压力、抑郁或焦虑)可增加无医学指征剖宫产发生的风险(OR=1.69,95%CI:1.04~2.73,P=0.034),孕晚期抑郁与无医学指征剖宫产呈正相关(OR=1.32,95%CI:1.03~1.69,P=0.028),焦虑和压力与无医学指征剖宫产的关联无统计学意义。结论:孕晚期抑郁与无医学指征剖宫产发生的风险增加有关。建议在未来产检护理中,应重视孕产妇的心理疏导,尤其是孕晚期的心理健康。

粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子对体外培养的大鼠海马神经元氧糖剥夺后凋亡的影响

目的探讨粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)对体外培养大鼠海马神经元氧糖剥夺(OGD)后凋亡的影响。方法体外培养乳鼠海马神经元并分为正常对照组、OGD组、GM-CSF1ng/ml、10ng/ml、20ng/ml和100ng/ml组;制备OGD模型,并给与相应剂量的GM-CSF干预。应用流式细胞仪及Annexin V/PI双染色法检测神经元凋亡率,测定上清液乳酸脱氢酶(LDH)活性了解神经元细胞膜损伤程度,RT-PCR法检测凋亡相关基因Bcl-2、Bax mRNA表达。结果与正常对照组相比,OGD组细胞凋亡率及LDH活性明显升高(均P<0.01);与OGD组相比,除GM-CSF1ng/ml组外,GM-CSF各浓度组神经元凋亡率及LDH活性明显降低(均P<0.01),其中GM-CSF20ng/ml组对神经元凋亡影响最显著。与正常对照组比较,OGD组Bcl-2 mRNA表达明显下降,Bax mRNA表达显著升高,Bcl-2/Bax降低(均P<0.01);与OGD组比较,GM-CSF20ng/ml组Bcl-2 mRNA表达升高,Bax mRNA表达降低,Bcl-2/Bax增加(均P<0.01)。结论 GM-CSF能够有效地抑制OGD后海马神经元的凋亡,20ng/ml抗凋亡的效果最佳。其神经保护作用机制可能与其调节凋亡蛋白Bcl-2、Bax表达有关。

CYP2B6对农药p,p’-DDT的代谢活性及代谢产物解析

目的:本研究选择细胞色素P450酶(cytochrome P450,CYP)2B6介导p,p’-滴滴涕(dichloro-diphenyl-trichloroethane,DDT)生物转化过程进行研究,为该类持久性有机污染物的风险评估和防治提供依据。方法:建立气相色谱/质谱联用仪(GCMS/MS)的检测方法以检测生物样本中的p,p’-DDT;利用重组酶CYP2B6构建体外代谢模型,采用米式方程计算代谢动力学参数;采用抑制剂8-MOP验证CYP2B6对p,p’-DDT的代谢能力;构建SD大鼠体内代谢模型(大鼠CYP2B1是人CYP2B6的同源酶),尾静脉注射p,p’-DDT和CYP2B6的特异性抑制剂KR-Ⅱ,收集血清(0、5、10、20、30 min)以及肝脏微粒体,比较对照组以及抑制剂组大鼠肝脏中CYP2B1活性以及肝脏和血清中p,p’-DDT原形及代谢产物p,p’-DDE、p,p’-DDD水平的变化。结果:成功建立了多种DDT及代谢产物的GC-MS/MS检测方法。体外代谢证实CYP2B6可代谢p,p’-DDT产生以p,p’-DDE为主的代谢产物,动力学参数K_(m)为15.12μmol/L,每纳摩尔P450酶的V_(max)为12.8nmol/min;抑制剂8-MOP可显著抑制CYP2B6活性,代谢产物p,p’-DDE的含量显著下降。CYP2B1表达被抑制后,大鼠肝脏中CYP2B1的酶活性显著下降,肝脏和血清中的代谢产物p,p’-DDE和p,p’-DDD含量也明显降低。结论:CYP2B6可以代谢p,p’-DDT生成以p,p’-DDE为主的代谢产物,是DDT的主要优势代谢酶。考虑到人群中CYP2B6的表达和活性存在差异,本研究可为DDT暴露危害的易感人群筛选及风险评估的优化提供依据。

2003~2016年国家自然科学基金预防医学学科卫生毒理领域资助情况分析

卫生毒理学是研究外源性理化及生物等有害因素对生物体和环境生态系统的损害效应及作用机制的综合性学科，为制订卫生标准及防治措施提供理论依据。

臭氧老化聚苯乙烯微塑料和标准聚苯乙烯微塑料小球短期经口暴露对小鼠肠道菌群结构和能量代谢相关激素影响的比较研究

微塑料污染日益严重,关于微塑料的健康风险的研究逐日增多。大多数微塑料研究使用标准微塑料作为暴露材料,而环境中的微塑料经过老化,物化性状发生改变,其相关不良效应值得进一步研究。本研究通过分析小鼠经口暴露老化微塑料和标准微塑料后结肠病理结构、血清能量代谢相关激素和肠道菌群变化,探讨老化微塑料和标准微塑料对能量代谢和肠道菌群影响的差异。15只C57BL/6小鼠随机分为3组,分别连续7 d暴露20μg·g^(-1)·d^(-1)10μm直径聚苯乙烯微塑料标品(标准PS-MPs组)、20μg·g^(-1)·d^(-1)50μm老化聚苯乙烯微塑料(老化PS-MPs组)和玉米油(对照组)。暴露结束后收集小鼠血清检测能量代谢相关激素(胰高血糖素样肽-1(GLP-1)、胆囊收缩素(CCK)、胃饥饿素(ghrelin)、YY肽(PYY))水平;收集小鼠结肠采取苏木精-伊红染色法(H&E)以及阿利新蓝与过碘酸雪夫氏染色方法(AB-PAS)进行肠道病理形态学观察。采集小鼠粪便,使用16S高通量测序法对粪便中微生物区系进行测序并对测序结果进行分析。结果显示,相比对照组,标准PS-MPs暴露显著降低小鼠肝脏脏器系数(P<0.05)。老化PS-MPs暴露组小鼠血清中GLP-1和胃饥饿素水平显著上升(P<0.01和P<0.05)。结肠切片观察结果显示,相比对照组,标准PS-MPs和老化PS-MPs暴露组小鼠的肠道都出现隐窝结构受损,杯状细胞数量减少,且老化PS-MPs暴露组小鼠隐窝结构受损更严重,杯状细胞数量减少更多,酸性黏液分泌更多,黏蛋白水平更低。老化PS-MPs暴露组小鼠肠道菌群的多样性显著下降(P<0.05)。从门水平分析,老化PS-MPs暴露可以显著增加拟杆菌门(P<0.001)相对丰度,显著降低厚壁菌门相对丰度(P<0.05);从科水平分析,老化PS-MPs暴露后肠道乳杆菌科显著减少(P<0.05),鼠杆菌科、普雷沃氏菌显著增多(两者P<0.05)。综上,本研究发现微塑料在臭氧老化后,相比标准微塑料,短期经口暴露显著干扰能量代谢相关激素水平,降低肠道菌群结构多样性,改变小鼠肠道菌群的菌种组成。因此,在进行微塑料相关毒性研究时,应当重视暴露材料物化性质对结果产生的影响。

HBP介导的O-GlcNAc修饰在PFOS暴露致斑马鱼胚胎发育异常中的作用

目的通过构建全氟辛烷磺酸(perfluorooctane sulfonate,PFOS)斑马鱼染毒模型,探讨PFOS暴露对胚胎发育的影响及可能机制。方法基于人群内暴露浓度设置PFOS暴露浓度梯度(0、0.02、0.2、2和20μmol/L),对斑马鱼胚胎染毒至120 hpf受精后小时(hourspost-fertilization,hpf),检测斑马鱼胚胎的孵化率、畸形率、死亡率、心率及运动分析等基础指标;采用非靶向代谢组学技术分析PFOS暴露后斑马鱼胚胎整体代谢水平的变化,并结合实时荧光定量(RT-qPCR)和蛋白质免疫印迹(Western blot)观察差异代谢酶及蛋白表达水平。结果暴露于20μmol/L的PFOS导致斑马鱼胚胎畸形率升高(P<0.05)、心率升高(P<0.05)、行为分析异常(P<0.05);代谢组学结果发现20μmol/L PFOS暴露组斑马鱼胚胎中葡萄糖-6-磷酸(Glu-6-P)、乙酰氨基葡萄糖(GlcNAc)和N-乙酰氨基葡萄糖-6-磷酸(GlcNAc-6-P)水平显著升高(P<0.05),提示己糖胺生物合成途径(hexosamine-biosynthesis pathway,HBP)被过度激活;RT-qPCR结果显示20μmol/L PFOS组HBP关键代谢酶slc2a1b、hk1、gfat1基因表达水平显著上调(P<0.05);Western blot结果显示斑马鱼胚胎整体O-连接-N-乙酰葡萄糖胺糖基化(O-GlcNAc)水平在20μM PFOS暴露组与对照组之间存在差异。结论PFOS暴露可能通过干扰HBP途径,介导O-GlcNAc修饰水平改变导致斑马鱼胚胎发育畸形率升高及运动行为学异常,提示PFOS具有胚胎发育毒性。

急性硫化氢中毒合并中枢神经系统损伤的相关危险因素及其预测价值研究

目的:探讨急性硫化氢(hydrogen sulfide,H2S)中毒合并中枢神经系统(central nervous system,CNS)损伤的相关风险因素及其预测价值。方法:收集2018年1月1日—2023年4月30日多家医院就诊的急性H2S中毒中至重度患者。根据是否合并CNS损伤,分析性别、年龄、实验室检验结果以及30 d的死亡、神经功能预后等,探究急性H2S中毒合并CNS损伤的相关危险因素;采用受试者工作特征(receiver operating characteristic curve,ROC)曲线分析乳酸(lactate,Lac)和神经元特异性烯醇化酶(neuron specific enolase,NSE)预测急性H2S中毒合并CNS损伤的效能。结果:与非合并CNS损伤组相比,合并CNS组H2S暴露浓度更高,入院时收缩压、中位格拉斯哥昏迷评分(Glasgow coma scale,GCS)、氧合指数均显著下降,心率显著上升。CNS损伤组入院后并发急性呼吸窘迫综合征(acute respiratory distress syndrome,ARDS)、心肌损伤明显增多;30 d死亡率达50%,且改良Rankin量表>2分的患者数量显著增高。此外,通过分析发现合并CNS损伤组入院时Lac和NSE水平较非损伤组明显升高,差异均有统计学意义。ROC曲线显示联合Lac和NSE在预测急性H2S中毒合并CNS损伤的效能优于单个指标,曲线下面积(area under curve,AUC)达0.948。结论:急性H2S中毒合并CNS损伤患者并发ARDS、心肌损害增加,30 d死亡率增加和神经功能预后差;此外,急性H2S中毒联合早期血清Lac以及NSE水平的升高判断急性H2S中毒合并CNS损伤具有较高的临床价值。

氧化三甲胺与心血管疾病关系的研究进展

随着经济的发展及生活水平的提高,心血管疾病已成为世界范围内导致人类死亡的首要危险因素,造成社会负担的加重及生命质量的下降[1-2]。心血管疾病包括冠心病、心肌梗死、心绞痛、心力衰竭和卒中等,其主要发病机制为脂质代谢异常导致动脉血管壁内泡沫细胞形成,进而进展为动脉粥样硬化[3]。虽然有证据显示,遗传变异是发生心血管疾病的重要风险因素[4-5],但只有约11%的冠状动脉疾病归因于此[6]。人类最大的环境暴露来自于饮食摄入,食物影响着肠道菌群的代谢和组成,而随着对肠道菌群研究的深入,人们逐渐意识到肠道菌群不仅参与了营养素的代谢,还可影响宿主疾病的发生[7-8]。

双酚S的环境污染现状及对脂质代谢紊乱的影响

双酚S(Bisphenol S,BPS)是双酚A(Bisphenol A,BPA)的替代品,被广泛用于制造各种聚合物。由于其广泛的使用,造成的环境污染已经严重威胁生态环境和人体健康。近年来,BPS所引起的脂质代谢紊乱逐渐引起大家的关注。本文对BPS导致环境污染的现状及人群暴露风险进行总结,并从其对脂质合成、转运和降解基因的表达,代谢组学以及对过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)的作用等方面来探讨BPS所致脂质代谢异常的潜在机制。

肺泡Ⅱ型上皮细胞在空气污染致特发性肺纤维化中的作用及潜在运用前景

特发性肺纤维化(idiopathic pulmonary fibrosis,IPF)是一种以细胞外基质过度沉积和肺组织结构不可逆性重塑为特征的慢性肺病,空气污染物的吸入暴露可增加IPF的发病风险。肺脏结构复杂,多种细胞参与肺纤维化过程,而肺泡Ⅱ型上皮细胞(alveolar typeⅡepithelial cell,AT2)损伤和功能障碍在IPF的发病过程中起到了关键作用。本文围绕IPF相关的空气污染物,侧重阐述AT2细胞在IPF发生发展中的作用及重要机制,并分析了AT2细胞作为IPF诊断生物标志物及干预靶点的可能性,为大气污染防治及人群健康风险评估提供线索。

颅缝早闭的病因学机制和治疗靶标

颅缝早闭是一种先天性颅面疾病,其特征是一条或多条颅缝过早融合。重度颅缝早闭患者常见的并发症包括颅内压升高和神经认知功能障碍。颅缝早闭可单独发生或与多种综合征相关。不同类型的颅缝早闭与特定的基因突变有关。此外,表观遗传改变和环境因素也被认为在颅缝早闭的病理生理过程中起着重要作用。该文综述了近年来关于颅缝早闭的类型、临床表现、病因及关键分子信号通路调控的研究进展,并探讨了在动物模型中开发的治疗靶标,为颅缝早闭的发生、发展及治疗提供全面且系统的认识。

大气PM_(2.5)中重金属研究进展

近年来大气PM_(2.5)污染及其危害受到全球关注,我国污染现状尤其严重。作为重要的大气污染物成分,PM_(2.5)富集的重金属对生态环境和人体健康有较大威胁。该文分析总结了我国大气PM_(2.5)中重金属的研究现状,包括污染水平、时空分布特征、来源解析、化学形态、生物有效性和毒理健康效应等方面,提出了现阶段研究的不足,并对今后大气颗粒物污染及其成分研究进行展望,以利于环境空气质量的合理评价及其标准完善,为大气污染防治决策提供科学依据。

砷化物所致细胞恶性转化的信号通路研究进展

众多研究证实，长期摄人砷化物可引起多种癌症，因此，砷化合物已被国际癌症协会确认为人类确定致癌物，但由于砷化物致癌的实验动物模型一直未能成功建立，从而导致其致癌机制研究长期滞后。虽已提出一些砷化物致癌作用的分子机制假说，如氧化应激、细胞增殖与凋广异常、DNA甲基化异常、DNA损伤及信号通路改变等，但目前还没有一个被广泛认可且具有说服力的砷化物致癌机制。近年来，

空气颗粒物致心肺损害的基础研究

中国工业化和城镇化的不协调发展对生态环境造成了巨大压力，并威胁着国民的健康。据报道，我国每年因室外空气污染所致的过早死亡人数约35~50万例[1]，而颗粒物是我国城市大气首要污染物，其污染水平已远超全球平均水平。据WHO估计，全球每年有240万人的过早死归因于室内外空气颗粒物的暴露，其中65%的过早死亡者分布在中国以及其他颗粒物污染较重的亚洲国家和地区[2]。

二苯甲酮-3对绒毛外滋养层细胞的增殖及miR-17-92基因簇表达的影响

目的研究二苯甲酮-3(benzophenone-3,BP-3)对绒毛外滋养层(HTR-8/Svneo)细胞的增殖及miR-17-92基因簇表达的影响。方法将HTR-8/Svneo细胞分别暴露于含终浓度0(溶剂对照)、0.01、0.1、1 mg/L BP-3的培养基中培养24 h。采用CCK-8法检测细胞活性,采用流式细胞仪检测细胞凋亡情况,采用Real-time PCR方法检测细胞miR-17-92基因簇的表达水平。结果与溶剂对照组相比,1 mg/L BP-3染毒组HTR-8/Svneo细胞的存活率和miR-17、miR-19a mRNA的表达水平均降低,差异有统计学意义(P<0.05);而各剂量BP-3染毒组HTR-8/Svneo细胞的凋亡率及miR-18a、miR-19b、miR-20a、miR-92a mRNA的表达水平均无明显变化。且随着BP-3染毒剂量的升高,HTR-8/Svneo细胞的存活率呈下降趋势,凋亡率呈上升趋势。与抑制剂对照组相比,抑制miR-17和miR-19a表达后HTR-8/Svneo细胞存活率均降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 BP-3可通过抑制miR-17-92簇中miR-17、miR-19a的表达,抑制HTR-8/Svneo细胞增殖。

非编码RNA H19在二苯甲酮-3抑制绒毛外滋养层细胞增殖中的作用

目的研究二苯甲酮-3(benzophenone-3,BP-3)对绒毛外滋养层(HTR-8/Svneo)细胞的H19及mi R-675 m RNA表达的影响,并探讨非编码RNA H19在BP-3抑制HTR-8/Svneo细胞增殖中的作用。方法将处于对数生长期的HTR-8/Svneo细胞分别暴露于含终浓度为0(溶剂对照)、0.01、0.1、1 mg/L BP-3的培养基或转染试剂(脂质体2000和mi R-675抑制剂或H19抑制剂)中培养24 h。采用Real-time PCR检测H19、mi R-675 m RNA的表达水平;CCK-8法检测HTR-8/Svneo细胞的存活率。结果与溶剂对照组相比,1 mg/L BP-3染毒组HTR-8/Svneo后H19及mi R-675的表达水平均降低,差异均有统计学意义(P<0.01);且随着BP-3染毒剂量的升高,HTR-8/Svneo细胞的H19及mi R-675的表达水平均呈下降趋势。与抑制剂对照组相比,加入H19抑制剂后HTR-8/Svneo细胞的存活率和mi R-675 m RNA的表达水平均降低;加入mi R-675抑制剂后HTR-8/Svneo细胞的存活率均降低,差异有统计学意义(P<0.01)。结论 H19通过mi R-675在BP-3抑制HTR-8/Svneo细胞增殖中的发挥作用。

二硫化碳对作业人员心血管系统的影响

目的探讨二硫化碳(CS2)对作业人员血管功能的影响。方法以某厂511名在岗的CS2作业人员为研究对象,将长丝车间和短丝车间的作业人员归为高浓度暴露组,其余车间的工人归为低暴露组。用动脉脉搏分析仪(VP-1000PWV/ABI)检测作业人员的四肢血管收缩压(SBP)、舒张压(DBP)、平均动脉压(MAP)、脉压(PP)、心率(HR)、肱-踝动脉段脉搏波传导速度(brachial ankle pulse wave velocity,baPWV)、输出踝臂指数(ABI)、血清胆固醇(TC)和甘油三酯(TG)及血糖。结果低暴露组平均体重指数(23.6 kg/m2)高于高暴露组(22.9 kg/m2),差异有统计学意义(P<0.01);低暴露组平均PP及血清TG水平均高于高暴露组(P<0.05),ABI低于高暴露组(P<0.05),差异均有统计学意义;血清TG、baPWV在两组间差异无统计学意义;高血压、高血糖、高血脂、baPWV和ABI异常检出率在高暴露和低暴露两组之间差异无统计学意义。结论在目前的劳动条件下,CS2长期暴露对作业人员心血管功能无明显影响。