调节白细胞内皮细胞黏附的活血化瘀中药的多靶点筛选

白细胞在严重感染、创伤、胰腺炎等导致的全身性炎症反应综合征（SIRS）、多脏器功能衰竭（MOF）以及缺血再灌注（I/R）损伤（心肌梗死、脑卒中）中的作用越来越受到重视。

黄芪甲苷对体外神经干细胞增殖作用影响的研究

目的探讨黄芪甲苷(astragaloside,AS)对神经干细胞增殖的影响。方法体外培养大鼠胎鼠神经干细胞,Nestin免疫化学染色鉴定NSCs,BrdU标记鉴定NSCs增殖。BrdU标记免疫细胞化学染色检测神经干细胞增殖能力。实时定量PCR技术探讨黄芪甲苷促进NSCs增殖的作用机制。结果Nestin鉴定为阳性,Brdu标记亦呈阳性;BrdU标记结果表明,黄芪甲苷高、中、低剂量组NSCs的增殖率明显提高(P<0.05,P<0.01)。实时定量PCR结果表明在诱导NSCs增殖过程中,黄芪甲苷高剂量组Hes5基因表达增加(P<0.05)。结论黄芪甲苷对NSCs增殖具有明显的诱导作用,其可能通过上调与细胞增殖相关基因Hes1、Hes5、cyclinD1表达而起作用,但也可能调节与其它增殖通路有关。

补骨脂4种组分对LPS诱导的RAW 264.7细胞炎症因子的影响

目的探讨补骨脂4种组分补骨脂素、corylifol A、新补骨脂异黄酮、补骨脂酚对巨噬细胞RAW264.7细胞炎症因子的影响。方法 ELISA法测定补骨脂4种组分对LPS刺激RAW264.7细胞TNF-a,IL-1β,IL-6分泌的影响及雌激素受体抑制剂(ICI 182.170)的拮抗作用。结果与正常对照组比较,脂多糖(LPS)组可以显著升高RAW264.7细胞表达TNF-α,IL-1β,IL-6(P<0.05);corylifol A、补骨脂酚在10μmol.L-1浓度下能显著降低TNF-α的分泌(P<0.05);补骨脂素、corylifol A、新补骨脂异黄酮在10μmol.L-1浓度下能显著降低IL-1β的分泌(P<0.05);corylifol A、新补骨脂异黄酮、补骨脂酚在10μmol.L-1浓度下显著降低IL-6的分泌。补骨脂4种组分的抗炎作用与补骨脂雌激素样活性无关。结论补骨脂4种不同组分对LPS刺激引起的炎症因子的释放有抑制作用,其抗炎作用与雌激素受体样活性无关。

补骨脂单体成分对体外培养成骨细胞和破骨细胞分化的影响

[目的]研究补骨脂单体成分异补骨脂素、异补骨脂查尔酮对体外培养破骨细胞抗酒石酸酸性磷酸酶(TRACP)及成熟破骨细胞形成数目、体外培养成骨细胞增殖与分化的影响。[方法]体外采用巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)和核因子κB受体活化因子配体(RANKL)诱导培养破骨细胞前体细胞,考察异补骨脂素、异补骨脂素查尔酮对破骨细胞前体细胞在分化过程中其标志性酶TRACP的活性和成熟破骨细胞产生数目的影响。对硝基苯磷酸盐法(PNPP法)测定破骨细胞TRACP活性,TRACP细胞染色法鉴定并检测成数破骨细胞数目。酶消化法体外培养新生小鼠成骨细胞,(CCK-8)(cell counting kit-8)法检测两成分对成骨细胞增殖的影响,磷酸苯二钠法测定两成分对成骨细胞标志性酶碱性磷酸酶(ALP)的影响。[结果]体外成功培养小鼠破骨细胞和成骨细胞,两细胞强表达各自的标志性酶TRACP和ALP。异补骨脂查尔酮在0.05μmol/L浓度下对成熟破骨细胞的形成有显著抑制作用。异补骨脂素在0.1μmol/L浓度下对成骨细胞增殖有显著促进作用。[结论]补骨脂单体成分异补骨脂素对成骨细胞有促进作用、异补骨脂查尔酮对破骨细胞有抑制作用,提示补骨脂可能作为抗骨质疏松或骨吸收的药物。

补骨脂酚拮抗AR转录活性抑制雄激素诱导的前列腺癌细胞LNCaP的增殖

[目的]研究补骨脂酚对雄激素受体(AR)的亲和性和转录活性的调控在雄激素依赖的前列腺癌细胞LNCaP中的作用。[方法]用AR竞争性结合试剂盒检测补骨脂酚结合AR的能力;用荧光素酶报告质粒法检测补骨脂酚对睾酮诱导的AR转录活性的影响;用实时定量PCR法检测补骨脂酚对LNCaP细胞中雄激素应答的靶基因——前列腺特异抗原(PSA)表达的影响;用MTT法检测补骨脂酚对睾酮诱导的LNCaP细胞增殖的影响。[结果]补骨脂酚体外结合AR的能力与AR拮抗剂氟他胺相当;睾酮诱导的AR转录活性可以被补骨脂酚阻断;补骨脂酚可以抑制睾酮对LNCaP细胞PSA表达和增殖的上调作用。[结论]补骨脂酚经由AR抑制雄激素依赖的LNCaP细胞的增殖和基因表达,提示:补骨脂酚可以作为潜在的AR拮抗剂,用于雄激素依赖的PCa药物的开发。

千层纸素A内皮依赖性舒张大鼠离体血管的作用

目的:研究千层纸素A对离体大鼠胸主动脉的血管舒张作用及其内皮依赖性作用机制。方法:分离Wistar大鼠的胸主动脉,采用离体大鼠胸主动脉环张力测定法检测千层纸素A对1μmol/L去甲肾上腺素(norepinephrine,NE)或60mmol/L氯化钾预收缩的大鼠离体胸主动脉环的舒张效应,并观察去内皮或用一氧化氮合酶抑制剂N-硝基-L-精氨酸甲酯(NG-nitro-L-arginine methyl ester,L-NAME)预处理后千层纸素A舒张血管作用的变化。结果:千层纸素A(10、100μmol/L)可以舒张NE(1μmol/L)和氯化钾(60mmol/L)预收缩的内皮完整的离体血管,10、100μmol/L药物浓度组与溶剂对照组比较差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01);对去内皮血管的舒张作用显著低于内皮完整的血管(P<0.05,P<0.01);终浓度为100μmol/L的L-NAME可以显著降低100μmol/L千层纸素A的舒血管作用,加入L-NAME组与不加入抑制剂组比较差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论:千层纸素A可通过内皮依赖的一氧化氮途径发挥舒张血管的作用。

益气活血方药在肺炎治疗中的应用及其用药规律解析

肺炎为临床呼吸系统常见疾病,其症状的轻微或严重程度与引起感染的病原体种类、患者的年龄和整体健康等因素有关。若肺炎早期未能加以控制,可能引发呼吸衰竭甚至严重并发症而危及生命。根据现有研究,中医益气活血法治疗肺炎能够通过抑制炎症级联反应、提高血氧饱和度、改善微循环及提高机体免疫等作用,达到减轻患者肺部炎症,提高肺功能的疗效,进而减少肺炎由轻症向重症的转化,降低病死率,有效改善患者的生活质量。研究通过归纳益气活血法治疗肺炎的临床用药,总结了益气活血方药在肺炎治疗中发挥的作用机制及用药规律,以期为益气活血法在肺炎,尤其是当下新型冠状病毒所致的病毒性肺炎提供中医药治疗的科学依据。

杜仲不同提取部位对离体血管舒张作用的研究

[目的]寻找杜仲中具有血管舒张作用的提取部位。[方法]分离得到杜仲11个提取部位,采用大鼠胸主动脉环实验观察各提取部位的血管舒张作用。[结果]在11个组分中只有组分6和11(终浓度0.4,0.8,1.2,1.6,2.0 mg/mL)可浓度依赖性舒张去甲肾上腺素收缩的离体血管。[结论]杜仲提取部位6和11富含杜仲中舒张血管的有效成分。

甘草对H2O2诱导大鼠H9c2心肌细胞损伤保护作用的研究

[目的]探讨甘草对双氧水(H_2O_2)诱导大鼠H9c2心肌细胞损伤的保护作用。[方法]建立H_2O_2诱导心肌细胞损伤模型(100μmol/L,4h),甘草(800、400μg/mL)作用4 h,检测心肌细胞活力、乳酸脱氢酶(LDH)释放量、超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)含量、细胞内氧自由基(ROS)含量、钙离子含量、线粒体膜通透性转换孔(mPTP)的开放及心肌细胞凋亡率。[结果]甘草能够不同程度提高心肌细胞活力和SOD活力,减少LDH、MDA、细胞内ROS和钙离子含量,抑制mPTP开放、降低细胞凋亡率(P<0.05或P<0.01)。[结论]甘草对H_2O_2诱导的大鼠H9c2心肌细胞损伤具有保护作用。

心脑舒通及其单体成分对小鼠脑微血管内皮细胞缺氧复氧炎症损伤的影响

目的探讨心脑舒通(XNST)及其单体成分对小鼠脑微血管内皮细胞株b End.3缺氧复氧损伤后炎症相关因子TNF-α、IL-6、IL-1β的影响。方法通过建立b End.3细胞缺氧复氧损伤模型,检测不同浓度心脑舒通(0.1、1.0、10.0、50.0μg/ml)或单体成分(10.0μmol/ml)对b End.3细胞活力的影响,用酶联免疫吸附试验(ELISA)定量检测炎症相关因子肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-6、IL-1β的表达。结果心脑舒通对b End.3细胞胞质TNF-α的合成具有明显抑制作用,对细胞上清IL-6的分泌量有抑制作用但差异无统计学意义(P>0.05),而在b End.3细胞中IL-1β的表达不明显。结论心脑舒通通过抑制炎症因子TNF-α的合成,可能是其发挥治疗脑缺血炎症损伤的途径之一。

中药干预肠道菌群改善肠黏膜屏障功能的研究进展

肠黏膜屏障是指肠黏膜阻止肠腔内有害物质如致病微生物、多种生物大分子和抗原进入血液循环而形成的屏障,以维护人体健康。正常菌群在人体某一特定部位黏附、定植和繁殖,形成一层"菌膜屏障",能够抵抗外源微生物定植,对机体组织免受外来病原菌的侵袭具有重要作用。肠黏膜在休克、缺血、胰腺炎等情况下,其通透性增高引起细菌和内毒素移位、促炎因子释放,加重原发疾病的发生,激发炎症反应,引发胰岛素抵抗、中枢神经系统损伤,甚至诱发多脏器功能衰竭等。中药在治疗肠黏膜屏障功能紊乱疾病方面具有明确的优势,但中药药效成分大多生物利用度低,中药经口服后可先与肠道菌群接触并发生相互作用,进而调节人体相关机能。从肠黏膜机械屏障、免疫屏障、微生物屏障及化学屏障4个角度,系统总结了中药通过调控肠道菌群改善肠黏膜屏障的作用,以期对中药调控肠道菌群治疗肠黏膜屏障功能紊乱相关疾病的研究提供一定线索。

牙痛停滴丸治疗口腔溃疡的药效学研究

目的研究牙痛停滴丸对大鼠口腔溃疡的治疗效果,并设计小鼠耳肿胀实验验证其抗炎作用。方法 SD大鼠随机分为对照组、模型组、牙痛停滴丸组(86.4 mg/kg,4倍临床等效剂量)、甲硝唑组(16.2 mg/kg,临床等效剂量,阳性药),每组10只。除对照组外,以80%冰醋酸溶液灼烧颊侧口腔黏膜的方法建立口腔溃疡模型,造模24 h开始给药,连续ig给药10 d,模型组和对照组给予等量蒸馏水。观察溃疡大体形态;于造模1 d和给药4、10 d,利用游标卡尺测量大鼠口腔溃疡的直径大小,进行口腔溃疡评分;于给药第4天,取每组2只大鼠溃疡处口腔黏膜做病理组织学观察。ICR小鼠随机分为模型组、阿司匹林(195 mg/kg,临床等效剂量,阳性药)组、牙痛停滴丸(124.8 mg/kg,4倍临床等效剂量)组,每天给药1次,连续ig 3 d。于末次给药1 h后,以二甲苯致小鼠耳肿胀为炎症模型,考察小鼠耳片的肿胀度。结果大体观察显示,给药10 d,模型组溃疡表面仍存在假膜,牙痛停滴丸组基本愈合,甲硝唑组溃疡面积减小并伴有假膜;与模型组比较,给药4、10 d时,牙痛停滴丸和甲硝唑组溃疡直径显著减小(P<0.05),口腔溃疡评分显著降低(P<0.05);HE染色显示,牙痛停滴丸组假膜较模型组小,且鳞状上皮细胞坏死程度较低。与模型组比较,牙痛停滴丸及阿司匹林组的小鼠耳片肿胀度均显著降低(P<0.05、0.01)。结论牙痛停滴丸可以治疗炎症、促进口腔溃疡的愈合,缓解溃疡表面的红肿情况,对口腔溃疡有一定的治疗作用。

基于代谢组学分析金芪降糖片改善2型糖尿病大鼠脂代谢紊乱的作用机制

目的：从代谢组学角度探究金芪降糖片改善2型糖尿病大鼠脂代谢紊乱的作用机制。方法：雄性Wistar大鼠45只,采用高脂饲料喂养联合3次小剂量腹腔注射链脲霉素（STZ,35 mg·kg^（-1））复制2型糖尿病模型,造模成功后随机分为正常组、模型组、金芪降糖片组。金芪降糖片组连续给药4周,给药结束后腹主动脉取血,利用半自动生化分析仪检测血脂水平,苏木精-伊红（HE）染色观察肝脏病理变化;采用UPLC-Q-TOF-MS对不同组别的血液样本进行检测,运用主成分分析（PCA）和偏最小二乘法-判别分析（PLS-DA）筛选正常组、模型组和金芪降糖片组之间的差异代谢物,结合质谱信息和公共数据库检索对差异代谢物进行鉴定并进行京都基因与基因组百科全书（KEGG）代谢通路分析。结果：与正常组比较,模型组大鼠血脂水平明显升高,金芪降糖片组血脂较模型组明显下降,模型组肝脏出现明显的脂肪粒细胞,金芪降糖片组肝细胞脂肪粒明显减少。模型组和正常组大鼠有12种内源性物质发生了显著性变化,经金芪降糖片干预后花生四烯酸,左旋肉碱,溶血磷脂酰胆碱（LysoPC）（17∶0）,LysoPC（P-18∶0）,LysoPC[22∶4（7Z,10Z,13Z,16Z）],硬脂酰肉碱这6种代谢物水平出现了不同程度的回调,得到1条关键代谢通路——花生四烯酸代谢通路。结论：金芪降糖片对2型糖尿病脂代谢紊乱大鼠体内的差异代谢物有一定的回调作用,其作用机制主要与花生四烯酸代谢通路有关。

药物干预类风湿性关节炎骨代谢紊乱的研究进展

类风湿性关节炎(RA)骨代谢紊乱可导致骨密度降低及骨脆性增加,一方面可能是由于疾病本身的炎症环境及免疫异常引起,另一方面糖皮质激素等药物的干预也可能加重骨质疏松的发生。RA骨代谢紊乱随着病程进展及炎症反应呈进行性加重,早期可表现有关节软骨破坏及骨端骨质疏松,晚期可累及四肢、腰椎的骨密度降低脆性增加,甚至全身性骨质疏松的发生。明确RA骨破坏特点对RA骨代谢紊乱的诊断及针对性防治具有重要作用,对改善风湿病患者的生活质量及疾病控制具有重要意义。综述了近年RA骨代谢异常及药物干预相关研究进展,首先从骨代谢紊乱的发病率、累及的不同骨组织以及可能发病机制对RA骨代谢紊乱的表现进行了总结,在此基础上从缓解RA病情药物、生物制剂以及中医药防治RA骨代谢紊乱作用进行了药物干预现状的总结,以期为RA骨破坏的治疗提供一定参考。

肺芯片的构建及其在肺疾病中的仿生应用

随着微工程的快速发展,多学科交叉产物—微流控器官芯片以其能高度模拟体内微环境、便捷测定生理参数等优点,成为最具价值的动物替代模型之一。新冠疫情肆虐,使得肺芯片的构建及应用越来越广泛,其高度模拟了体内肺组织微环境,包括可溶性细胞因子的表达和细胞-细胞间、细胞-细胞外基质间的相互作用,通过体外诱导及给药可探究多种相关细胞因子的表达,达到快速筛药的目的。该文主要阐述了两种类型的肺芯片,即肺泡芯片和小气道芯片,总结其在肺疾病的仿生应用和快速药物筛选中的现况,期望为肺芯片的精准、广泛使用提供有效的科学定位和依据。