甲状旁腺激素受体1在糖尿病合并乳腺浸润性导管癌患者的表达及意义

目的观察甲状旁腺激素受体1(PTH1R)在糖尿病合并乳腺浸润性导管癌组织中的表达及其临床意义。方法应用免疫组织化学法检测32例糖尿病合并乳腺浸润性导管癌患者及71例非糖尿病合并乳腺浸润性导管癌患者组织PTH1R表达,并结合临床预后进行对比分析。结果乳腺浸润性导管癌组织中,糖尿病患者PTH1R阳性表达率高于非糖尿病患者(P<0.05)。PTH1R表达水平随着糖尿病合并乳腺浸润性导管癌患者预后不良而升高。结论糖尿病状态下PTH1R表达水平与乳腺浸润性导管癌预后有关,抑制PTH1R表达可能为糖尿病合并乳腺癌治疗有效靶点之一。

高糖状态下晚期糖基化终产物诱导NRK-52E细胞氧化应激及普罗布考干预研究

目的探讨高糖状态下晚期糖基化终产物(AGEs)诱导大鼠肾小管上皮细胞株NRK-52E氧化应激及普罗布考干预作用。方法作用72 h后,用Western Blot检测空白对照组(0 mmol/L葡萄糖)、高糖组(25 mmol/L葡萄糖)、AGEs组(100mg/L AGEs)、高糖AGEs组(100 mg/L AGEs加25 mmol/L葡萄糖)、普罗布考预处理高糖AGEs组(100μmol/L普罗布考加100 mg/L AGEs加25 mmol/L葡萄糖)中核因子κB(NF-κB)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)在NRK-52E细胞的表达。用CM2H2DCFDA试剂检测活性氧(ROS)含量。结果高浓度葡萄糖及AGEs均上调NF-κB及TNF-α表达。普罗布考显著抑制调高浓度葡萄糖状态下AGEs诱导NF-κB及TNF-α表达,以及抑制ROS生成。结论普罗布考能抑制高浓度葡萄糖状态下AGEs诱导细胞氧化应激。

甲状旁腺激素相关肽在高糖诱导NRK-52E细胞转分化中的作用

目的探讨甲状旁腺素相关肽在高糖诱导大鼠肾小管导管上皮细胞株NRK-52E转分化作用。方法应用RT-PCR及Western blot检测无糖组(无糖培养基培养),正常葡萄糖组(含5mmol/L葡萄糖DMEM培养基培养)组及高浓度葡萄糖组(含16.7mmol/L葡萄糖DMEM培养基培养)中甲状旁腺素相关肽(parathyroid hormone-related peptide,PTHrP)及其受体1在大鼠肾小管导管上皮细胞株NRK-52E表达。10pmol/L PTHrP及16.7mmol/L葡萄糖分别干预72h,应用Western blot检测转化因子β、金属蛋白酶2、Ⅰ型胶原及α平滑肌肌动蛋白表达情况。ROS含量应用CM2H2DCFDA试剂盒检测。结果与空白组和正常葡萄糖组相比,高浓度葡萄糖能显著上调PTHrP(P<0.05,P<0.01)和甲状旁腺激素受体1(Type1receptor parathyroid hormone-related protein,PTH1R)(P<0.01,P<0.05)蛋白及PTHrP mRNA(P<0.01)表达,PTH1R mRNA在高浓度及正常葡萄糖浓度组的表达高于空白组(P<0.01)。对比空白组,PTHrP能显著上调NRK-52E细胞转化因子β1(P<0.01)、Ⅰ型胶原(P<0.01)及α平滑肌肌动蛋白(P<0.01)表达,而在高浓度葡萄糖状态下,其表达上调更显著(P<0.05,P<0.01)。金属蛋白酶2在PTHrP及高浓度葡萄糖共同干预下表达上调(P<0.01)。PTHrP及高血糖均可以升高NRK-53E细胞ROS含量(P<0.01,P<0.01)。结论高浓度葡萄糖可能通过调控PTHrP/PTH1R的水平从而影响肾小管导管上皮转分化。