新疆部分地区规模化羊场羔羊多杀性巴氏杆菌、溶血性曼氏杆菌、绵羊肺炎支原体的调查与分析

为了阐明新疆昌吉、石河子、阿勒泰、塔城及喀什5个地区规模化羊场多杀性巴氏杆菌(Pm)、溶血性曼氏杆菌(Mh)、绵羊肺炎支原体(Mo)的流行情况,试验采集以上5个地区290份6月龄内羔羊鼻拭子样本,提取DNA后采用PCR方法检测Pm、Mh、Mo特异性基因,统计Pm、Mh、Mo的核酸个体总阳性率、单阳性率、双重阳性率和三重阳性率,对3种病原核酸个体总阳性率进行Spearman相关性分析,并分别统计3种病原在不同月龄、不同地区羔羊中的流行情况,采用卡方检验分别对有呼吸道症状和无呼吸道症状羔羊3种病原核酸的单阳性率、双重阳性率和三重阳性率进行差异显著性分析。结果表明:在290份鼻拭子样本中,Pm、Mh、Mo的核酸个体总阳性率分别为6.21%(18/290)、67.24%(195/290)、61.03%(177/290),核酸单阳性率分别为0(0/290)、14.48%(42/290)、8.97%(26/290);Pm-Mh、Pm-Mo、Mh-Mo核酸双重阳性率分别为0.68%(2/290)、0(0/290)和46.55%(135/290),Pm-Mh-Mo核酸三重阳性率为5.51%(16/290)。Pm与Mh的核酸个体总阳性率呈极显著正相关(P<0.01),Pm与Mo的核酸个体总阳性率呈显著正相关(P<0.05),Mh与Mo的核酸个体总阳性率呈极显著正相关(P<0.01)。Pm主要在4月龄羔羊中流行,而Mh和Mo在各月龄羔羊中均普遍流行;Pm主要在石河子市和昌吉市流行,Mh和Mo在各地区均普遍流行。有呼吸道症状的羔羊Pm、Mh核酸单阳性率及Pm-Mo、Pm-Mh核酸双重阳性率与无呼吸道症状的羔羊均差异不显著(P>0.05);有呼吸道症状的羔羊Mh-Mo核酸双重阳性率极显著高于无呼吸道症状的羔羊(P<0.01),Pm-Mh-Mo核酸三重阳性率显著高于无呼吸道症状的羔羊(P<0.05),Mo核酸单阳性率极显著低于无呼吸道症状的羔羊(P<0.01)。说明新疆地区羊群存在Pm感染,Mh和Mo呈普遍流行趋势,因此应加强对易感羊群的病原学检测,做好新疆地区羊呼吸道疾病的防控工作。

新疆部分地区集约化牛场牛呼吸道合胞体病毒的流行病学调查

为了解新疆部分地区集约化牛场牛呼吸道合胞体病毒(BRSV)的流行及分型情况,本研究从新疆7个地区14个集约化牛场采集了407头犊牛的血液及其对应的鼻拭子,分离血清,利用ELISA检测犊牛血清中的BRSV抗体,结果显示,犊牛血清中的BRSV抗体阳性率为82.1%(334/407),各地区BRSV抗体阳性率在70%~100%,其中克拉玛依和伊犁两地BRSV抗体阳性率高达100%。9周龄以内犊牛BRSV抗体阳性率较高,为86.1%~100%,但9周龄以后BRSV抗体阳性率呈下降趋势,且12周龄以上犊牛BRSV的抗体阳性率下降至31.8%。利用套式RT-PCR(F基因引物)对鼻拭子检测结果显示,仅伊犁、石河子两地共17份样品检测结果为BRSV阳性,阳性率分别为7.4%(2/27)和7.5%(15/200)。5周龄犊牛BRSV的阳性率最高为21.7%(5/23),且BRSV阳性的犊牛均在12周龄以内。上述结果表明,新疆部分地区牛场犊牛存在BRSV的感染,且BRSV抗体阳性率也较高,在不同地区犊牛BRSV及其抗体的阳性率均存在差异。采用套式RT-PCR扩增17份BRSV阳性样品的G基因并测序,利用MegAlign软件中的clustal W算法分析G基因的同源性,利用MEGA 7.0软件中的NJ法构建G基因的进化树,分析其遗传进化关系。结果显示,17份阳性样品均扩增到371 bp的G基因片段。同源性及遗传进化分析结果显示,17条G基因序列均与美国Ⅲ亚群BRSV参考株USII/S1 G基因的同源性最高,为91.6%~94.4%。且它们均与美国Ⅲ亚群BRSV参考株USII/S1位于同一大分支。上述结果表明,17条G基因序列可能均来自美国的BRSV USII/S1参考株,且均为Ⅲ亚群BRSV。本研究为新疆部分地区BRSV感染的防控提供了数据支持。

绵羊支原体肺炎病原巢式PCR检测方法的建立与应用

[目的]建立一种诊断绵羊支原体肺炎病原的巢式PCR方法,确定肺炎支原体感染的靶器官。[方法]根据GenBank网站上登录的绵羊支原体16S rRNA基因序列,设计并合成2对引物,以肺炎支原体菌株基因组DNA为模板,经过PCR反应条件的优化,通过测序验证扩增产物的正确性,建立了绵羊支原体肺炎病原的巢式PCR检测方法,进而应用建立的方法完成临床阳性病料肺脏、肺淋巴、心脏、肾脏、肝脏、脾脏、皮肤、小肠和外周血检测以及疑似样本肺脏组织的检测。[结果]建立的巢式PCR方法可扩增出864 bp的特异性目的片段,肺脏和肺淋巴为绵羊肺炎支原体感染的靶器官,临床样本巢式PCR检出率与支原体培养鉴定结果的符合率为100%。[结论]建立的绵羊支原体肺炎病原巢式PCR检测方法可用于临床样本的实验室诊断。

新疆牧区温性荒漠草原草群营养成分变化与放牧绵羊体重及产羔性能的关系

为了研究新疆牧区温性荒漠草原草群营养成分的变化对不同品种断奶母羊增重和繁殖性能的影响,试验以放牧的多胎萨福克羊、萨福克羊和中国美利奴羊(新疆军垦型)为研究对象,定期测量6—9月份断奶母羊的体重、牧草产量和草群营养成分(粗蛋白、粗纤维、粗脂肪、粗灰分、钙、磷、无氮浸出物等),记录母羊次年的窝产仔数及羔羊的初生窝重和断奶重,分析牧草产量、营养成分与母羊体重和繁殖情况之间的关系。结果表明:6—8月份,新疆牧区气温较高,降雨天数减少;进入9月份气温下降,降雨天数增多。6—9月份新疆牧区温性荒漠草原类沟羊茅、针茅和新疆绢蒿型草群牧草产量、干物质、粗灰分、粗脂肪和粗纤维含量均呈先下降后升高的趋势。多胎萨福克羊、萨福克羊和中国美利奴羊的体重从63.50 kg、91.33 kg、56.25 kg降至63.33 kg、86.00 kg、51.50 kg,分别下降0.27%、5.84%、8.44%。多胎萨福克羊的体重未恢复至初始体重与体重恢复至初始体重群体母羊的窝产仔数分别为1.83只、1.91只,萨福克羊为0.93只、1.00只,中国美利奴羊为0.95只、1.00只,均差异不显著(P>0.05)。多胎萨福克羊、萨福克羊和中国美利奴羊体重未恢复至初始体重群体母羊所产羔羊的初生窝重和断奶重均显著低于体重恢复至初始体重群体(P<0.05)。说明6—8月份随着气温的持续升高和降雨天数的减少,新疆牧区温性荒漠草原类沟羊茅、针茅和新疆绢蒿型草群牧草的产量呈下降趋势,进入9月份气温降低,牧草产量升高,多胎萨福克母羊放牧适应能力强,维持体重能力优于萨福克羊和中国美利奴羊。

新疆不同气候条件对绵羊血液生理生化指标和免疫因子含量的影响

为了了解新疆不同气候条件下绵羊血液生理生化指标和免疫因子含量的差异,试验以南疆图木舒克和北疆北屯养殖区养殖的周岁多胎萨福克羊为研究对象,采集绵羊颈静脉血和养殖区的气象数据,应用全自动血液细胞分析仪测定16项血液生理指标,全自动生化分析仪测定9项血液生化指标,ELISA方法测定7种免疫因子含量,并对气象数据及各指标进行分析。结果表明:气温为两个养殖区的关键气候因子。北屯养殖区的多胎萨福克羊血液中嗜碱性粒细胞数、中性粒细胞数、嗜碱性粒细胞百分比、中性粒细胞百分比、单核细胞百分比、平均红细胞血红蛋白含量、平均红细胞血红蛋白浓度、血小板总数、平均血小板体积、血小板压积及γ干扰素、白细胞介素-1β、白细胞介素-12、白细胞介素-8含量均极显著高于图木舒克养殖区(P<0.01),单核细胞数和免疫球蛋白G含量显著高于图木舒克养殖区(P<0.05),丙氨酸氨基转移酶、胆碱酯酶、α-羟丁酸脱氢酶、乳酸脱氢酶活性及白蛋白、血清磷和血清铁含量极显著低于图木舒克养殖区(P<0.01)。说明气温可影响多胎萨福克羊血液生理生化指标和免疫因子,绵羊为适应干旱和高温的气候,血液中部分生理指标和免疫因子含量降低,生化指标含量升高。

绵羊GSTA2基因克隆、生物信息学分析及真核表达载体构建

为阐明绵羊谷胱甘肽S转移酶α2(Glutathione S-transferase alpha 2,GSTA2)基因功能,利用牛GSTA2基因序列设计引物,提取绵羊皮肤组织总RNA,应用RT-PCR、基因克隆、生物信息学对GSTA2基因进行研究,构建真核表达载体,转染绵羊皮肤成纤维细胞,应用qPCR技术检测GSTA2基因的表达。结果表明,克隆到绵羊GSTA2基因672 bp编码区序列(GenBank登录号:OR440604.1),编码223个氨基酸,分子量为25.39 ku。氨基酸比对和系统进化树分析表明,绵羊与牛的GSTA2相似度最高,达87.39%。GSTA2的二级结构以α-螺旋和无规则卷曲为主。构建的真核表达载体pcDNA3.1-GSTA2转染绵羊皮肤成纤维细胞后,GSTA2基因表达量极显著上调(P <0.001)。说明成功克隆了绵羊新基因GSTA2的CDS序列,并成功构建了其真核表达载体。

绵羊MYL基因家族的鉴定与组织表达分析

为了解肌球蛋白轻链(myosin light chain,MYL)基因家族在绵羊中的分子进化关系及表达变化,本研究利用生物信息学方法对绵羊MYL基因家族进行鉴定和系统分析。各选取了3只军垦白肉羊、新疆细毛羊和湖羊成年公羊各组织样品,采用qRT-PCR方法验证家族成员MYL1、MYL6B和MYLPF基因的表达情况。结果显示,12个MYL基因分布在9条染色体上,编码由147~211氨基酸组成的亲水性蛋白质,无信号肽和跨膜结构域,二级结构以α-螺旋为主。根据基因结构、保守结构域和基序分布等特征,可以将这些基因家族成员分为3个组。共线性分析结果表明,MYL2和MYL10、MYL2和MYLPF存在片段复制,且这些片段受到较强的选择压力。蛋白互作网络显示MYH10与绵羊MYL家族成员均存在互作关系。MYLs的组织表达模式差异较大,其中MYL1、MYL2、MYL6B和MYLPF在骨骼肌组织中高水平表达。基因克隆测序结果显示,扩增得到目的基因的CDS全长,qRT-PCR结果表明,MYL1、MYL6B和MYLPF在军垦白肉羊肌肉组织中的表达水平显著高于其他组织(P<0.0001),并且在军垦白肉羊骨骼肌中的表达水平显著高于湖羊和细毛羊(P<0.0001)。以上结果为深入研究绵羊MYL基因家族的功能以及优化绵羊肉用性能提供了线索。

绵羊骨形态发生蛋白受体-1B基因研究进展

绵羊繁殖性能在绵羊产业中有着重要意义,除通过一些技术手段(如同期发情、人工授精、超数排卵等)之外,在目前已知的关于能够提高绵羊繁殖力的16个基因共20个突变体当中,以骨形态发生蛋白受体-1B(bone morphogenetic protein receptor type-1B,BMPR-1B)基因对绵羊繁殖力的影响最大。BMPR-1B基因是世界上第一个被发现的多羔主效基因,其编码区的A746G突变导致蛋白质序列中第249位的谷氨酰胺被置换为精氨酸(Q249R),最终能够引起绵羊排卵数和产羔数增加。作者介绍了绵羊多羔主效基因BMPR-1B及其突变体FecB(A746G)的发现与结构,简述了该基因分子方面的作用机理,对BMP/Smad信号通路的调控以及与绵羊繁殖之间的联系,并简单分析了FecB突变后对绵羊卵巢、卵泡等组织细胞功能,激素调节和相关基因表达的影响。进一步加深对BMPR-1B基因的了解,为研究人员探明该基因诱使绵羊等动物提高产羔数的调控机制,相关配体、调控因子和上下游信号蛋白的影响以及加快哺乳动物高效育种繁殖、扩大种群规模和多胎品系的建立,增加养殖人员的经济收入等提供一些参考和帮助。

新疆天山北坡两种草地类型放牧条件下多胎萨福克羊生产性能的对比分析

试验旨在探究新疆天山北坡温性荒漠草原和温性草原化荒漠两种草群产量、营养成分的月动态变化,以及两种草地类型条件下放牧的多胎萨福克羊母羊、断奶羔羊体重变化等。选择体重相近2岁多胎萨福克产后母羊、统一断奶后的羔羊各120只,随机各分为2组,每组3个重复,每个重复20只羊。。A组羔羊和C组母羊于温性荒漠草原试验区域(Ⅰ型草群,即沟羊茅、针茅、新疆绢蒿型)放牧,B组羔羊和D组母羊于温性草原化荒漠试验区域(Ⅱ型草群,即博乐绢蒿、木地肤、短柱苔草型)放牧。试验期120 d。结果显示,6月、9月Ⅰ型草群鲜草产量均显著高于Ⅱ型草群(P<0.05),9月Ⅰ型草群干草产量均显著高于Ⅱ型草群(P<0.05),6月Ⅰ型草群干鲜比显著低于Ⅱ型草群(P<0.05)。6月、9月Ⅰ型草群粗灰分含量显著低于Ⅱ型草群(P<0.05),7月Ⅰ型草群的粗蛋白含量显著高于Ⅱ型草群(P<0.05),9月Ⅰ型草群粗蛋白含量显著低于Ⅱ型草群(P<0.05),6月Ⅰ型草群的无氮浸出物含量显著高于9月(P<0.05),6月、7月和9月Ⅱ型草群磷含量显著高于Ⅰ型草群(P<0.05)。两种放牧草地类型放牧条件下,放牧母羊总增重、平均日增重和相对增重差异均不显著(P>0.05),断奶羔羊体重均呈持续增长趋势,次年母羊的窝产羔数、初生重、羔羊断奶重差异均不显著(P>0.05)。研究表明,随着气温的升高和降水量的减少,两种放牧草地类型的牧草产量呈先下降后上升的趋势,牧草营养水平呈下降趋势,多胎萨福克羊的放牧适应性和极端环境条件下的抗逆性较好。

多胎绵羊两年三产高频繁殖技术优化试验

为建立多胎绵羊两年三产高频繁殖技术,以404只多胎萨福克经产母羊为研究对象,通过CIDR+PMSG法同期发情、人工输精、B超早期妊娠诊断施行两年三产,比较分析子宫颈口输精和腹腔内窥镜输精母羊的妊娠率,优化操作流程,分析经济效益。结果表明:采用CIDR+PMSG法实施同情发情母羊的发情率为95%,腹腔内窥镜输精母羊的妊娠率为87%,子宫颈口输精母羊的妊娠率为80%,腹腔内窥镜输精优于子宫颈口输精。两年三产高频繁殖技术母羊的产羔率为318%,比一年一产(212%)提高106%;同期发情及子宫颈口输精处理的成本40元/只,只均经济效益334.04元。说明两年三产高频繁殖技术可进一步提高多胎绵羊的繁殖效率,增加养殖效益。

非遗传因素对羔羊早期生长性能的影响研究

为探索非遗传因素对羔羊初生重、断奶重和日增重的影响。以408只多胎萨福克羔羊为研究对象,对不同出生月份的羔羊初生重、断奶重进行测定,计算日增重,利用最小二乘方差分析方法分析全同胞数、出生月份、性别、断奶月份、断奶天数5个非遗传因素对羔羊早期生长性能的影响。结果表明,全同胞单羔初生重、断奶重和日增重极显著大于双羔、三羔、四羔和五羔(P<0.01),双羔初生重极显著大于三羔、四羔和五羔(P<0.01)。4月出生的羔羊初生重最大,3月和4月出生的羔羊日增重极显著大于9月、10月和11月(P<0.01)。公羔初生重和日增重极显著大于母羔(P<0.01)。30~40 d断奶的羔羊日增重极显著大于其他4个断奶期(P<0.01),41~60 d断奶的羔羊日增重极显著大于61~90 d、91~120 d、121~150 d(P<0.01)。说明全同胞数、性别、出生月份、断奶月份、断奶天数非遗传因素影响羔羊的初生重、断奶重和日增重,在羔羊早期生长的选择育种中要综合考虑非遗传因素,为准确制定育种方案和绵羊生产提供依据。

新疆食源性单增李斯特菌MLST分型及耐药性分析

目的研究新疆食源性单增李斯特菌分型和耐药情况。方法将62株食源性和1株羔羊脑炎分离株进行多位点序列分型(multilocus sequence typing,MLST)及耐药性实验。结果 63株单增李斯特菌分为20个ST型, 16个克隆群(clonal complex groups, CC),其中68.25%(43/63)属于谱系Ⅱ,其余属于谱系Ⅰ。优势ST型是ST8、ST9、ST121、ST87和ST378,优势CC群是CC8、CC9、CC1和CC121。对苄青霉素(penicillin, P)、氨苄西林(ampicillin, AM)、苯唑西林(oxacillin, OX1) 3种抗生素耐药率达100%;对庆大霉素(gentamicin, GM)、莫西沙星(moxifloxacin,MXF)、红霉素(erythromycin,E)、奎奴普丁/达福普丁(quinupristin,QDA)、利奈唑胺(linezolid, LNZ)、万古霉素(vancomycin, VA)、替加环素(tigecycline, TGC)、利福平(rifampin, RA)和诱导性克林霉素耐性(induced clindamycin resistance, ICR) 9种抗生素敏感率达100%;对呋喃妥因(furadantin, FT)耐药率61.90%(39/63),其中ST7、ST8、ST101、ST155和ST515对此次的3-4类药物表现出多重耐药性。结论新疆单增李斯特菌分子型别呈多样性,耐药谱变宽,存在较大的食品安全风险。

前列腺素D_(2)与F_(2α)对绵羊黄体退化的影响及其机理研究

旨在研究前列腺素(prostaglandins,PGs)D_(2)与F_( 2α)对绵羊黄体(corpus luteum,CL)组织形态、生殖激素及其关键基因与受体表达的影响,并解析其在黄体退化中的相互关系及机理,为保证母畜连续性繁育提供新的理论依据。将16只哈萨克绵羊随机分成4组,在发情周期的黄体期分别子宫肌内注射PGD_(2)、PGF_( 2α)、PGD_(2)+PGF_( 2α)及等量生理盐水(对照组),采用HE染色结合物理拍照对比处理前后黄体组织形态变化,ELISA法检测外周血清中P 4、E 2、PGD_(2)和PGF_( 2α)浓度变化;并利用qRT-PCR和Western blot检测关键合成酶基因HPGDS、PGFS及其受体DP1、CRTH2、FP的mRNA和蛋白表达水平。结果显示,与对照组相比,发现PGD_(2)+PGF_( 2α)组中黄体退化效果最明显,随后依次是PGF_( 2α)组明显大于PGD_(2)组。ELISA结果显示,随着处理后时间的推移,不同试验处理组中,P 4浓度均呈显著下降趋势(P<0.05),其中在PGD_(2)+PGF_( 2α)组中该变化趋势最显著(P<0.05);但E 2、PGD_(2)和PGF_(_( 2α))浓度均呈现不同差异性变化,其中,PGD_(2)+PGF_( 2α)组中PGD_(2)和PGF_( 2α)浓度呈显著下降(P<0.05),PGF_( 2α)组中E 2浓度呈显著升高(P<0.05)、PGD_(2)浓度呈显著下降(P<0.05),PGD_(2)组中E 2浓度呈显著下降趋势(P<0.05)、PGD_(2)浓度呈显著升高趋势(P<0.05)。qRT-PCR和Western blot结果显示,与对照组相比,PGD_(2)+PGF_( 2α)组中HPGDS mRNA和蛋白表达量显著下调(P<0.05),PGFS、CRTH2及FP mRNA和蛋白表达量显著上调(P<0.05);PGF_( 2α)组中HPGDS mRNA和蛋白表达量呈显著下调(P<0.05),其它基因mRNA和蛋白表达量呈显著上调(P<0.05);PGD_(2)组中HPGDS、DP1、PGFS及FP mRNA和蛋白表达量呈显著上调(P<0.05)。同时,在不同受体基因表达量检测时,发现PGD_(2)组中DP1受体表达量显著高于CRTH2受体(P<0.05),而PGF_( 2α)组中CRTH2表达量则显著高于DP1(P<0.05)。综上,PGD_(2)无论单独使用还是结合PGF_( 2α)使用,均能够促进CL的退化,尤其是二者结合时有明显的协同促溶效应,其作用机制可能与其体内激素水平、关键合成酶及受体类型的表达有关,这为全面认识哺乳动物CL退化的调控机制奠定了基础,也为进一步优化高效繁殖技术(尤其是PGs方案)提供了新的思路。

新疆阿勒泰垦区规模化羊群弓形虫病血清流行病学调查

为摸清新疆阿勒泰垦区兵团第十师北屯市规模化羊群的弓形虫感染情况,采用间接血凝试验(IHA),对采集自第十师所属7个团场的890份羊血清进行了弓形虫血清抗体检测。结果显示:该地区规模化羊群的弓形虫血清抗体平均阳性率为6.18%(55/890);不同羊群均有感染,表明感染分布广泛;母羊群感染率较高,为9.36%;羊群感染率随羊年龄增加而升高。这些情况需引起足够重视。

新疆生产建设兵团第十师羊小反刍兽疫抗体监测与评价

为了评估新疆生产建设兵团第十师北屯市(以下简称师市)羊群小反刍兽疫强制免疫效果,应用酶联免疫吸附试验(ELISA)对2017-2020年全师8个农牧团场采集的4 010份血清进行小反刍兽疫抗体检测,并按单位、年份、类别对检测结果进行了统计分析。结果表明,2018-2020年全师8个农牧团场小反刍兽疫血清抗体平均合格率为84.69%(3 396/4 010),均符合国家农业农村部相关规定,高于平均值的三家单位是E 87.22%(157/180)、G 86.45%(268/310)、H 88.67%(798/900),合格率最低的是D 76.11%(137/180);养殖合作社的抗体合格率为84.81%(1 340/1 580),养殖大户为84.65%(2 057/2 430)均接近于平均合格率,两者差异不显著(P>0.05)。总体来看,师市羊群小反刍兽疫免疫效果较好,为确保师市辖区内重大动物疫病免疫无疫提供技术保障。

单核细胞增生李斯特菌lmo0732基因克隆、分子特征及遗传进化分析

为揭示单核细胞增生李斯特菌(LM)lmo0732基因的分子特征及生物学功能,对LM lmo0732基因进行扩增、克隆和测序,利用在线软件对其进行分子特征及遗传进化分析。结果表明,lmo0732基因全长为1 917 bp,编码638个氨基酸;氨基酸序列分析发现,该蛋白为稳定的亲水性蛋白,含有1个跨膜区域,存在信号肽结构;蛋白结构域预测发现该蛋白含有Big 3、MucBp和LRR保守结构域;二、三级结构分析发现,该蛋白为无规则卷曲连接多段延伸链及α-螺旋所形成的三维立体结构。遗传进化分析显示,不同地域分离株可分为两个基因群,表现出一定的遗传多样性。

绵羊肺源大肠杆菌cyaA基因缺失对小鼠肺泡巨噬细胞感染的影响

为研究cyaA基因编码的腺苷酸环化酶(AC)在绵羊肺源大肠杆菌XJ10感染小鼠肺泡巨噬细胞(MH-S)中的作用,本研究以绵羊肺源大肠杆菌XJ10野毒株(XJ10WT)为对照,通过荧光定量PCR检测XJ10 cyaA基因缺失株(XJ10ΔcyaA)在感染MH-S细胞过程中与黏附侵袭相关的motA、crl、fimH、pap基因的m RNA转录水平,结果显示,与XJ10WT相比,XJ10ΔcyaA在感染MH-S细胞过程中与黏附侵袭相关的motA、crl、fimH、pap基因的m RNA转录水平在感染后0和6 h时均极显著降低(P<0.001),crl和pap基因的m RNA转录水平分别在2 h和12 h时均极显著上调(P<0.001)。进一步通过吉姆萨染色观察XJ10WT和XJ10ΔcyaA黏附MH-S细胞情况,采用细胞和细菌共培养方式分析XJ10ΔcyaA对MH-S细胞的黏附及侵袭能力,并通过CCK-8法分析细菌对MH-S细胞增殖的抑制情况。结果显示,XJ10ΔcyaA和XJ10WT在感染后3 h黏附MH-S细胞的活菌数量达峰值并持续至5 h,随后逐渐下降,在感染后1 h~5 h的时间段内,XJ10ΔcyaA黏附MH-S细胞的活菌数量均极显著低于XJ10WT(P<0.001)。XJ10ΔcyaA和XJ10WT侵袭MH-S细胞的活菌数量随着感染时间的延长逐渐升高,5 h时达到峰值,后持续下降,XJ10ΔcyaA在感染后1 h~10 h侵袭MH-S细胞的活菌数量均显著或极显著低于XJ10WT。在感染MH-S细胞后的3 h~6 h,XJ10ΔcyaA对细胞增殖的抑制率均极显著低于XJ10WT(P<0.001)。上述结果首次表明,cyaA基因表达的AC可以显著上调绵羊肺源E.coli与黏附侵袭相关基因的转录水平,并参与绵羊肺源E.coli对MH-S细胞的黏附与侵袭,抑制MH-S细胞增殖。本研究为绵羊肺源E.coli致病机制的研究奠定了基础。

FecB 基因在绵羊繁殖性能上的研究进展

绵羊的繁殖性能是一种十分重要的经济性状,绵羊产羔数与每次的排卵数直接相关,绵羊卵子的生长发育受到卵巢内分泌及旁分泌的相互作用。FecB基因是羊上首个被发现的多胎主效基因,携带该基因的绵羊卵巢中BMP信号通路受到损害而活性降低,TGF-β家族部分成员失活,抑制GCs增殖并提高FSH的敏感性,有效提高绵羊的排卵率和产羔率,有利于扩大养殖规模,提高经济效益。本文对FecB基因的发现、作用机制及其对卵泡发育、繁殖能力和后代生长发育的影响,以及育种方面的应用进行综述,以期为绵羊繁殖性能提升的机理研究和育种工作等提供参考和借鉴。

绵羊肺源致病性大肠杆菌的分离鉴定及耐药性研究

为了查清新疆石河子部分规模场引起羔羊死亡的原因,本研究对采集的病羊肺脏组织进行细菌分离,同时对分离菌株进行小鼠致病性试验、特异性基因PCR检测、药物敏感性试验和耐药基因PCR检测.结果显示:从病变肺脏组织分离得到10株细菌,分离菌为大肠杆菌,致病性强;分离菌株呈现多重耐药现象,对诺氟沙星、复方新诺明、氟苯尼考等17种抗生素耐药;检测到iutA、fyuA、ireA、hlyD和afa 5种毒力因子,strA、strB、aadA1/aadA2、Bla(TEM1)、Bla(OXA1)、Tet A和Tet B 7种耐药基因.本研究为该地区规模场绵羊感染大肠杆菌的防控和临床用药提供依据.

新疆某地区3个牧场布鲁氏菌病流行状况调查及分析

为调查新疆某地区牛、羊布鲁氏菌感染情况,收集该地区3个牧场共3223份样本,其中牛血液样本1404份、羊血液样本1590份、牛流产胎儿样本66份、羊流产胎儿样本75份、牛生鲜乳样本65份及羊生鲜乳样本23份。血液样本经血清分离后进行虎红平板凝集试验(RBPT),流产胎儿样本的部分脏器及生鲜乳样经DNA提取后进行聚合酶链反应(PCR).将PCR结果为阳性的样本进一步进行PCR扩增及系统进化树分析。RBPT结果显示,3个牧场RBPT平均阳性率为牛6.8%,羊9.5%;其中牧场A阳性率为牛7.1%,羊9.1%;牧场B阳性率为牛11.7%,羊10.8%;牧场C阳性率为牛4.2%,羊9.1%。经PCR共鉴定出54份布鲁氏菌阳性样本,其中包括牛流产胎儿22份、羊流产胎儿30份、羊生鲜乳1份及牛生鲜乳1份,其余均为阴性。从上述PCR阳性样本中共鉴定出38份为羊种布鲁氏菌,其中包括牛流产胎儿16份、羊流产胎儿20份、牛生鲜乳1份及羊生鲜乳1份。系统进化树分析表明,鉴定出的羊种布鲁氏菌与内蒙古地区、挪威及印度等国分离的羊种布鲁氏菌生物3型菌株亲缘关系非常接近。综上所述,羊种布鲁氏菌是引起该地区牛、羊布鲁氏菌病的主要病原菌。研究结果为新疆地区控制和预防布鲁氏菌的感染提供了流行病学依据。