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PBL教学法在医学机能实验学设计性实验中的应用 被引量:14
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作者 邹丹 吴敏范 +1 位作者 符文双 臧晋 《医学研究与教育》 CAS 2013年第1期95-98,共4页
PBL是以问题为基础的教学方法,倡导主动学习。培养学生创造性思维的关键是培养学生的问题意识,鼓励学生质疑已知、探索未知。医学机能实验学是融生理、药理和病理生理为一体的新兴实验学科。在医学机能实验学的设计性实验中运用PBL教学... PBL是以问题为基础的教学方法,倡导主动学习。培养学生创造性思维的关键是培养学生的问题意识,鼓励学生质疑已知、探索未知。医学机能实验学是融生理、药理和病理生理为一体的新兴实验学科。在医学机能实验学的设计性实验中运用PBL教学法有着得天独厚的条件,是培养学生的创新能力、逻辑思维能力、科研能力行之有效的方法。 展开更多
关键词 PBL 教学方法改革 医学机能实验学 设计性实验 创新能力
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链霉素致听性脑干反应阈值明显上移时豚鼠肾脏的病理学改变 被引量:2
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作者 苏禄晖 安玉香 万书 《中国临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2006年第14期123-125,共3页
目的:观察链霉素致听觉脑干反应阈值明显上移时豚鼠肾脏病理学改变,探讨听觉脑干反应检查作为链霉素耳肾毒副作用无损伤监测手段可行性。方法:①实验于2002-12/2003-05在中国医科大学听觉研究室和沈阳医学院机能研究中心完成。选用2月... 目的:观察链霉素致听觉脑干反应阈值明显上移时豚鼠肾脏病理学改变,探讨听觉脑干反应检查作为链霉素耳肾毒副作用无损伤监测手段可行性。方法:①实验于2002-12/2003-05在中国医科大学听觉研究室和沈阳医学院机能研究中心完成。选用2月龄的健康白色红目豚鼠25只,雌雄不拘。②将双耳阈值<5dB健康白色红目豚鼠分为链霉素组[腹腔注射链霉素(大连美罗大药厂生产,批号:20010905,0.5g/支)150mg/(kg·d),并每日测量体质量以调整药量]和正常对照组[腹腔注射生理盐水2.5mL/(kg·d)]。均均连续干预10d。③用6kHz单周正弦波短声连续测定听觉脑干反应阈值,待两耳阈值明显上移时留取肾组织,用光镜和电镜检测技术观察肾脏组织学改变。结果:大鼠25只均进入结果分析。①用6kHz单周正弦波短声连续测定听觉脑干反应阈值10d,链霉素组中,有10只豚鼠用药前后听觉脑干反应阈值上移明显(双耳听觉脑干反应阈值≥5dB),而另5只听觉脑干反应阈值无显著改变(双耳听觉脑干反应阈值<5dB)。听觉脑干反应阈值上移豚鼠用药10d后听觉脑干反应阈值明显高于正常对照组和用药前(t=37.12,38.44,P<0.01)。②用链霉素10d后,听觉脑干反应阈值上移不明显豚鼠肾脏病理学检测未见异常改变,而听觉脑干反应阈值明显上移豚鼠虽然光镜所见肾小球无明显改变,但电镜结果表明肾小球有改变,表现为肾小球轴突融合、内皮细胞有泡状结构和毛细血管内红细胞雍塞等现象,而链霉素未导致听觉脑干反应阈值上移者肾小球可保持其结构正常。听觉脑干反应阈值上移的豚鼠光镜和电镜均可见肾小管有不同程度的损伤,在近曲小管和远曲小管均可见凋亡细胞,而正常对照组和听觉脑干反应阈值未上移鼠肾小管结构基本正常。结论:①链霉素致耳毒性存在个体差异。②链霉素致听觉脑干反应阈值上移时对整个肾脏均有毒副作用,且对肾小管的损害比肾小球严重。链霉素致听功能有改变时肾脏已出现不同程度的损伤。听觉脑干反应检查可作为链霉素耳肾毒副作用的无损伤监测手段。 展开更多
关键词 链霉素/副作用 药物毒性 诱发电位 听觉 脑干
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帕立骨化醇抑制氧化应激减轻小鼠肝细胞紧密连接受损
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作者 张威威 谢婧 李丽华 《基础医学与临床》 2024年第3期317-324,共8页
目的探讨帕立骨化醇(Pal)对氧化应激诱导的肝细胞紧密连接受损的影响及其机制研究。方法体内实验:采用胆总管结扎构建胆汁淤积性肝损伤模型。小鼠随机分为对照组(control)、模型组(BDL)、治疗组(BDL+Pal)。通过HE染色,探究各组小鼠肝组... 目的探讨帕立骨化醇(Pal)对氧化应激诱导的肝细胞紧密连接受损的影响及其机制研究。方法体内实验:采用胆总管结扎构建胆汁淤积性肝损伤模型。小鼠随机分为对照组(control)、模型组(BDL)、治疗组(BDL+Pal)。通过HE染色,探究各组小鼠肝组织病理形态变化。体外培养人肝癌细胞系HepG2,分为空白组、模型组(400μmol/L H_(2)O_(2))、治疗组(400μmol/L H_(2)O_(2)+20 nmol/L Pal)。Western blot检测各组紧密连接蛋白1(ZO-1)、闭合蛋白(occludin)、磷酸化p65(p-p65)、磷酸化ERK(p-ERK)、磷酸化肌球蛋白II调节轻链(p-MLC)蛋白水平。结果与对照组相比,模型组p-p65、p-ERK、p-MLC蛋白水平显著升高(P<0.0001或P<0.01或P<0.001);ZO-1、occludin蛋白表达水平显著降低(P<0.01);HE染色显示肝细胞坏死及炎性细胞浸润增多。而治疗组相对于模型组,上述水平呈相反趋势。结论Pal通过抑制胆汁淤积性小鼠及HepG2细胞中的氧化应激,从而减轻肝细胞紧密连接受损,其机制可能与抑制活性氧及NF-κB/p65、ERK信号通路有关。 展开更多
关键词 帕立骨化醇 氧化应激 胆汁淤积 肝损伤
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褪黑素受体与GABA_A受体在褪黑素延长小鼠睡眠时间中的作用 被引量:4
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作者 王芳 邹丹 +3 位作者 李经才 洪篪 陈礼彬 陈侠 《中国应用生理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期402-405,共4页
目的 :研究褪黑素受体和GABAA 受体在褪黑素延长小鼠睡眠时间中的作用。方法 :以翻正反射消失为睡眠开始的指标 ,至翻正反射恢复作为睡眠时间。观察不同受体激动剂或拮抗剂对褪黑素催眠作用的影响。结果 :褪黑素 3型受体拮抗剂盐酸哌唑... 目的 :研究褪黑素受体和GABAA 受体在褪黑素延长小鼠睡眠时间中的作用。方法 :以翻正反射消失为睡眠开始的指标 ,至翻正反射恢复作为睡眠时间。观察不同受体激动剂或拮抗剂对褪黑素催眠作用的影响。结果 :褪黑素 3型受体拮抗剂盐酸哌唑嗪对褪黑素延长小鼠睡眠时间的作用无明显影响。GABA受体内源性激动剂GABA能明显增强褪黑素延长小鼠睡眠时间的作用 ,而GABAA 受体上的印防己毒素结合位点的配基 ,即氯离子通道阻断剂印防己毒素能明显拮抗褪黑素的催眠作用 ,GABAA 受体上的GABA结合位点的拮抗剂荷包牡丹碱则对褪黑素延长小鼠睡眠作用无明显影响。结论 :褪黑素延长小鼠睡眠时间的作用与褪黑素 3型受体无关 ,而与GABAA 受体关系密切 。 展开更多
关键词 褪黑素 催眠 盐酸哌唑嗪 印防己毒素 荷包牡丹碱 吲哚类激素
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siRNA下调S100A4基因表达对人胶质瘤U251细胞增殖和凋亡的影响 被引量:4
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作者 沈薇 隋璐 +1 位作者 汤晓琳 吕鑫 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2018年第4期897-899,共3页
目的探讨应用小干扰RNA(siRNA)下调人胶质瘤U251细胞中S100A4基因表达和对U251细胞增殖及凋亡的影响。方法脂质体法U251细胞转染化学合成的针对S100A4基因的特异性siRNA,RT-PCR和Western印迹方法分别检测S100A4 mRNA和蛋白表达水平。分... 目的探讨应用小干扰RNA(siRNA)下调人胶质瘤U251细胞中S100A4基因表达和对U251细胞增殖及凋亡的影响。方法脂质体法U251细胞转染化学合成的针对S100A4基因的特异性siRNA,RT-PCR和Western印迹方法分别检测S100A4 mRNA和蛋白表达水平。分别应用CCK-8法、流式细胞术和酶标仪检测下调S100A4表达对U251细胞增殖、凋亡能力及细胞内含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(caspase)-3活性的影响。结果与正常对照组和阴性对照组比较,siRNA转染48 h后,siRNA-S100A4组细胞中S100A4 mRNA和蛋白表达水平明显降低(P<0.01),U251细胞的增殖受到抑制,细胞凋亡率明显增加(P<0.05),且沉默S100A4表达可以上调caspase-3活性(P<0.01)。结论 S100A4 siRNA能有效下调S100A4基因的表达,抑制U251细胞的增殖,诱导细胞凋亡,参与脑胶质瘤的生物学行为。 展开更多
关键词 S100A4 胶质瘤 RNA干扰 增殖 凋亡
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非小细胞肺癌p53蛋白表达量及倍体测定与预后关系 被引量:4
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作者 谢成耀 苏禄晖 +3 位作者 刘楠 李庆昌 李宗铉 王恩华 《解剖科学进展》 CAS 2005年第1期25-26,共2页
目的 通过非小细胞肺癌p53蛋白表达量及倍体测定,结合临床病理学特点,探讨患者预后的影响 因素。方法 应用流式细胞术检测120例非小细胞肺癌的p53蛋白表达量及DNA倍体。结果 淋巴结转移组 p53蛋白表达量高于无转移组,COX单因素... 目的 通过非小细胞肺癌p53蛋白表达量及倍体测定,结合临床病理学特点,探讨患者预后的影响 因素。方法 应用流式细胞术检测120例非小细胞肺癌的p53蛋白表达量及DNA倍体。结果 淋巴结转移组 p53蛋白表达量高于无转移组,COX单因素分析表明,p53蛋白表达量、倍体及临床TNM分期均与预后有关,COX 多因素分析发现,仅p53蛋白表达量是独立的预后因素。结论 p53蛋白高表达可能是非小细胞肺癌患者预后不 良的主要因素之一。 展开更多
关键词 P53蛋白表达 非小细胞肺癌 DNA倍体 预后不良 COX 患者 预后因素 结论 主要因素 特点
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PCNA表达及AgNOR检测对鉴别口腔良恶性病变的应用 被引量:2
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作者 谢成耀 徐红 +2 位作者 苏禄晖 刘楠 王恩华 《解剖科学进展》 CAS 2005年第2期138-140,i004,共4页
目的探讨增殖细胞核抗原(PCNA)及核仁组成区嗜银蛋白计数在诊断口腔良恶性病变中的意义。方法采用免疫组化SP方法及银染技术对40例口腔恶性肿瘤、6例交界性肿瘤及44例良性病变进行检测。结果PCNA在恶性肿瘤组、交界性肿瘤(临界组)及良... 目的探讨增殖细胞核抗原(PCNA)及核仁组成区嗜银蛋白计数在诊断口腔良恶性病变中的意义。方法采用免疫组化SP方法及银染技术对40例口腔恶性肿瘤、6例交界性肿瘤及44例良性病变进行检测。结果PCNA在恶性肿瘤组、交界性肿瘤(临界组)及良性病变组的阳性表达率分别为67.5%、16.7%及2.27%,AgNOR颗粒计数分别为3.95±0.32、2.75±0.25、1.42±0.26。恶性肿瘤中的PCNA强阳性表达率及AgNOR计数明显高于良性病变(P<0.05)。结论检测PCNA和AgNOR对口腔病变的良恶性鉴别诊断、恶性程度判定及预后评估有一定的临床应用价值。 展开更多
关键词 良恶性病变 AGNOR检测 增殖细胞核抗原(PCNA) 表达及 核仁组成区嗜银蛋白 AgNOR颗粒计数 AGNOR计数 良恶性鉴别诊断 交界性肿瘤 阳性表达率 口腔恶性肿瘤 良性病变 临床应用价值 银染技术 SP方法 免疫组化 口腔病变 预后评估
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有氧运动抑制高脂血症小鼠主动脉壁超微结构改变 被引量:3
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作者 齐金萍 邹丹 陈宁 《解剖科学进展》 CAS 2004年第1期20-22,共3页
目的 探讨有氧运动在动脉粥样硬化 (AS)形成过程中对血管壁的保护作用。方法 结合血脂水平的测定 ,对实验性高脂血症小鼠主动脉壁超微结构改变及有氧运动对其影响进行观察。结果 有氧运动(HE)组的甘油三酯 (TG) ,总胆固醇 (TC) ,低... 目的 探讨有氧运动在动脉粥样硬化 (AS)形成过程中对血管壁的保护作用。方法 结合血脂水平的测定 ,对实验性高脂血症小鼠主动脉壁超微结构改变及有氧运动对其影响进行观察。结果 有氧运动(HE)组的甘油三酯 (TG) ,总胆固醇 (TC) ,低密度脂蛋白 (LDL)均低于高脂膳食致动脉粥样硬化 (AS)组 (P<0 .0 1) ;高密度脂蛋白 (HDL)高于AS组 (P <0 .0 1)。透射电镜显示AS组小鼠内皮细胞严重受损 ,甚至出现核固缩 ,受损的内皮细胞间有含脂滴的白细胞向内皮下穿入 ,平滑肌细胞内粗面内质网及高尔基体增多 ,弹力纤维变形。而HE组仅出现弹力纤维的轻度变形及脂质沉积。结论 有氧运动除可降低血脂外 ,同时对血管壁具有保护作用 。 展开更多
关键词 有氧运动 高脂血症 小鼠 主动脉壁 超微结构
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血脉舒颗粒剂对小鼠抗炎镇痛作用的实验研究 被引量:4
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作者 郝伟 隋璐 《中国医药导报》 CAS 2011年第20期29-30,共2页
目的:观察血脉舒颗粒剂对小鼠的抗炎及镇痛作用。方法:将昆明种小鼠随机分为5组,分别为空白对照组,血脉舒颗粒剂高、中、低剂量组和阿司匹林组。给小鼠灌胃(ig)给药5 d后,采用二甲苯致小鼠急性耳肿胀试验观察血脉舒颗粒剂的抗炎作用;采... 目的:观察血脉舒颗粒剂对小鼠的抗炎及镇痛作用。方法:将昆明种小鼠随机分为5组,分别为空白对照组,血脉舒颗粒剂高、中、低剂量组和阿司匹林组。给小鼠灌胃(ig)给药5 d后,采用二甲苯致小鼠急性耳肿胀试验观察血脉舒颗粒剂的抗炎作用;采用醋酸扭体法和热板镇痛法观察血脉舒颗粒剂对小鼠的镇痛作用。结果:血脉舒颗粒剂中、高剂量组对于二甲苯所致的小鼠急性耳肿胀和有显著的抑制作用,对小鼠醋酸所致的扭体及热板法致痛反应有较好的止痛作用,镇痛疗效呈剂量依赖关系。结论:血脉舒颗粒剂具有显著的抗炎、止痛疗效。 展开更多
关键词 血脉舒颗粒剂 抗炎作用 镇痛作用
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饥饿诱导胃癌细胞自噬发生及Beclin-1表达的变化 被引量:1
10
作者 沈薇 隋璐 +1 位作者 赵慧 王丽媛 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第24期6994-6996,共3页
目的探讨饥饿诱导胃癌细胞MKN1自噬的发生及自噬相关蛋白Beclin-1表达的变化。方法培养胃癌细胞MKN1至对数生长期后,以无氨基酸培养液EBSS代替RPMI1640培养液培养细胞,培养12h后收集细胞,应用Western印迹和定量PCR(qRT-PCR)方法分别检... 目的探讨饥饿诱导胃癌细胞MKN1自噬的发生及自噬相关蛋白Beclin-1表达的变化。方法培养胃癌细胞MKN1至对数生长期后,以无氨基酸培养液EBSS代替RPMI1640培养液培养细胞,培养12h后收集细胞,应用Western印迹和定量PCR(qRT-PCR)方法分别检测特异性标记自噬的微管相关蛋白1轻链3B(LC3B)以及自噬相关蛋白Beclin-1的蛋白和mRNA表达。免疫荧光检测饥饿诱导后细胞自噬体的产生。结果饥饿处理12 h后,Western印迹和qRT-PCR检测LC3B和Beclin-1蛋白和mRNA表达与对照组比较均明显增加(P<0.05)。免疫荧光下可见点状自噬体。结论饥饿可以诱导胃癌细胞MKN1发生自噬,Beclin-1与饥饿诱导胃癌细胞MKN1的自噬相关,为进一步研究Beclin-1在胃癌细胞自噬中的作用机制奠定了基础。 展开更多
关键词 微管相关蛋白1轻链3B 自噬 BECLIN-1 饥饿 胃癌
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有关猫交叉听力及其对检测耳影响的初步研究 被引量:1
11
作者 安玉香 汤浩 《中国应用生理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期289-292,共4页
目的 :研究猫的交叉听力现象及其产生机理 ,初步探讨交叉听力对检测耳ABR振幅的影响。方法 :用彻底破坏一侧耳蜗的方法 ,观察 16只听力正常家猫的交叉听力现象及其对检测耳的影响。结果 :①当短声强度≥ 75dB(SPL)时 ,开始出现交叉听力... 目的 :研究猫的交叉听力现象及其产生机理 ,初步探讨交叉听力对检测耳ABR振幅的影响。方法 :用彻底破坏一侧耳蜗的方法 ,观察 16只听力正常家猫的交叉听力现象及其对检测耳的影响。结果 :①当短声强度≥ 75dB(SPL)时 ,开始出现交叉听力波形 ,声强增至 95dB时 ,交叉听力波形最典型。② 95dB短声产生的交叉听力波形可被 40或 45dB (SPL)的稳态白噪声 (SWN)完全屏蔽掉。③在同一时间轴中比较 95dB短声诱发的ABR和交叉听力波形 ,发现交叉听力之波谷恰与ABR之pⅢ 、pⅣ 波峰相对应。④两耳均正常时对侧耳负荷的 40dBSWN可使 95dB短声诱发的ABR之pⅢ 、pⅣ 波振幅增大 ,且具统计学意义 (P <0 .0 1)。结论 :交叉听力对ABR振幅的影响取决于两者的波峰与波谷在同一时间轴上的对应情况 ,声强较大时记录到的ABR 。 展开更多
关键词 交叉听力 听觉脑干电反应 稳态白噪声
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乙醇对小鼠认知能力的影响及其与海马M1受体的关系
12
作者 邹丹 吴敏范 +2 位作者 金戈 郑燕 陈凤梅 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第7期602-605,共4页
目的研究乙醇对小鼠认知能力的影响及其与小鼠海马结构M1毒蕈碱型乙酰胆碱受体(M1受体)含量变化的关系,进一步揭示乙醇引起脑损伤的机制。方法将60只雌性小鼠随机分为对照组、8%、16%、32%乙醇给药组,以0.2 m L/10 g给药8周后,Morris水... 目的研究乙醇对小鼠认知能力的影响及其与小鼠海马结构M1毒蕈碱型乙酰胆碱受体(M1受体)含量变化的关系,进一步揭示乙醇引起脑损伤的机制。方法将60只雌性小鼠随机分为对照组、8%、16%、32%乙醇给药组,以0.2 m L/10 g给药8周后,Morris水迷宫检测小鼠学习记忆能力,ELISA法检测各组小鼠海马结构中M1受体含量的差异。结果与各自第1天比较,各实验组小鼠第5天逃避潜伏期均值均明显缩短。各乙醇组小鼠第5天逃避潜伏期均值与对照组第5天均值比较,无统计学差异。16%、32%乙醇组小鼠在靶象限活动时间明显短于对照组。各乙醇组小鼠海马结构内M1受体含量与对照组比较明显下降,且与乙醇摄入量呈剂量依赖关系。结论海马结构M1受体含量降低是乙醇引起小鼠记忆能力下降的原因之一。 展开更多
关键词 乙醇中毒 海马结构 M1受体 认知
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胃癌细胞中BNIP3基因CpG岛甲基化及其调控作用
13
作者 沈薇 刘坤 +2 位作者 隋璐 邹丹 胡金瑶 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期221-225,共5页
目的观察胃癌细胞株MKN1中BNIP3基因启动子区的甲基化状态,探讨DNA甲基化调控BNIP3表达的机制。方法应用亚硫酸氢盐修饰后克隆测序法检测MKN1细胞中BNIP3基因启动子区的甲基化状态,应用甲基化抑制剂5-氮杂-2′-脱氧胞苷(5-Aza-Cd R)处理... 目的观察胃癌细胞株MKN1中BNIP3基因启动子区的甲基化状态,探讨DNA甲基化调控BNIP3表达的机制。方法应用亚硫酸氢盐修饰后克隆测序法检测MKN1细胞中BNIP3基因启动子区的甲基化状态,应用甲基化抑制剂5-氮杂-2′-脱氧胞苷(5-Aza-Cd R)处理MKN1细胞,观察给药前后BNIP3 m RNA表达及启动子区Cp G岛甲基化状态的改变。应用染色质免疫沉淀技术检测BNIP3基因与DNA甲基化转移酶1(DNMT1)的结合。结果 MKN1细胞中BNIP3基因启动子区呈高甲基化状态。应用5-Aza-Cd R处理细胞后,药物处理组(5-Aza-Cd R浓度为10μmol/L)和对照组甲基化率和BNIP3 m RNA表达的差异均有统计学意义(P<0.05)。5-Aza-Cd R抑制MKN1细胞中DNMT1与BNIP3基因的结合。结论 MKN1细胞中BNIP3基因表达受启动子区Cp G岛甲基化调控,DNA甲基化的发生与DNMT1和BNIP3基因结合有关。 展开更多
关键词 BNIP3基因 DNA甲基化 胃肿瘤 5-氮杂-2′-脱氧胞苷
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SFRP1基因沉默抑制人胃黏膜上皮GES-1细胞失巢凋亡
14
作者 汤晓琳 杨丹 +1 位作者 吕鑫 沈薇 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2019年第16期4034-4038,共5页
目的观察RNA干扰沉默分泌型卷曲相关蛋白(SFRP)1基因对人胃黏膜上皮细胞(GES)-1失巢凋亡的影响,并探讨其分子机制。方法应用SFRP1基因小干扰RNA(siRNA)转染处理GES-1后,分别采用Realtime RT-PCR和Western印迹检测SFRP1 mRNA和蛋白表达... 目的观察RNA干扰沉默分泌型卷曲相关蛋白(SFRP)1基因对人胃黏膜上皮细胞(GES)-1失巢凋亡的影响,并探讨其分子机制。方法应用SFRP1基因小干扰RNA(siRNA)转染处理GES-1后,分别采用Realtime RT-PCR和Western印迹检测SFRP1 mRNA和蛋白表达。细胞悬浮培养应用Poly-HEMA方法。采用流式细胞术和Calcein AM/EthD-1荧光双染法检测细胞失巢凋亡,软琼脂集落实验检测细胞非锚定生长状态,免疫荧光和Western印迹实验检测SFRP1沉默后Wnt通路中β-catenin的定位及表达,Realtime RT-PCR检测β-catenin靶基因c-Myc和CyclinD1 mRNA表达。结果与对照组比较,siRNA-891组中SFRP1 mRNA和蛋白表达明显被抑制。siRNA-891组细胞失巢凋亡率明显下降(P<0.05),EthD-1荧光染色的失巢凋亡细胞数目明显减少(P<0.05),软琼脂集落形成数目明显增多(P<0.05)。siRNA-891组中β-catenin蛋白表达水平明显增加,其靶基因c-Myc mRNA和CyclinD1 mRNA表达明显增高(P<0.01)。结论SFRP1siRNA可抑制GES-1细胞失巢凋亡,使其失巢凋亡敏感性下降,激活Wnt分子通路可能是其机制之一。 展开更多
关键词 分泌型卷曲相关蛋白(SFRP)1 失巢凋亡 RNA干扰 Wnt/β-catenin信号通路
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Survivin小干涉RNA和GRIM-19共表达质粒的构建
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作者 文连姬 高丽芳 +4 位作者 汲坤 富东娜 金春顺 管国芳 赵雪俭 《中国耳鼻咽喉头颈外科》 北大核心 2011年第2期63-66,共4页
目的构建survivin小干涉RNA和干扰素/维甲酸联合应用诱导细胞凋亡相关的基因(gene associated with retinoid interferon induced mortality-19,GRIM-19)共表达质粒为探讨联合基因对喉癌细胞凋亡和增殖的影响奠定基础。方法以survivin... 目的构建survivin小干涉RNA和干扰素/维甲酸联合应用诱导细胞凋亡相关的基因(gene associated with retinoid interferon induced mortality-19,GRIM-19)共表达质粒为探讨联合基因对喉癌细胞凋亡和增殖的影响奠定基础。方法以survivin小干涉RNA重组质粒pGCsilencer-siRNA-survivin(简称psi-survivin)为模板设计PCR引物,PCR产物经测序后与线性化pCDNA3.1-GRIM-19(简称p-GRIM-19)连接,构建survivin小干涉RNA和GRIM-19共表达质粒pCDNA3.1-siRNA survivin/GRIM-19(简称p-siRNA survivin/GRIM-19)。将质粒用脂质体lipofetamine2000包裹转入人喉癌Hep-2细胞中,用半定量RT-PCR检测survivin和GRIM-19 mRNA的含量。结果构建的survivin小干涉RNA和GRIM-19共表达质粒p-siRNA survivin/GRIM-19经酶切电泳和测序证实碱基序列的正确性,p-siRNA survivin/GRIM-19转染人喉癌Hep-2细胞,从mRNA水平能降低survivin的表达,抑制率55.9%,同时增加GRIM-19表达,表明共表达质粒的构建是成功的。结论构建的siRNA survivin和GRIM-19共表达质粒从mRNA水平能降低survivin的表达,同时增加GRIM-19表达,为进一步实验奠定了基础。 展开更多
关键词 RNA干扰 喉肿瘤 凋亡抑制蛋白类 生存素 GRIM-19基因
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呼吸系统课程整合的构建及实施初探
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作者 邹丹 冯秀艳 +1 位作者 金戈 吴敏范 《中国校外教育》 2018年第3期116-117,共2页
课程整合是医学教学改革的重要举措。以器官系统为中心将多门学科有机融合,其目的是减少交叉学科的重复学习,实现学科间的联系性、连续性、整体性,培养学生的逻辑思维、综合分析及自主学习能力。沈阳医学院已对2014及2015级临床医学专... 课程整合是医学教学改革的重要举措。以器官系统为中心将多门学科有机融合,其目的是减少交叉学科的重复学习,实现学科间的联系性、连续性、整体性,培养学生的逻辑思维、综合分析及自主学习能力。沈阳医学院已对2014及2015级临床医学专业部分学生开展呼吸系统整合的试点教学。介绍了学院呼吸系统整合课程改革的设计、组织、初步实施情况,并分析了目前存在的问题,提出了改进措施。 展开更多
关键词 整合课程 教学改革 PBL 基础医学 思维导图
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实验性高乳酸血症家兔心电图动态变化
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作者 商丽宏 江敏 王学林 《心电学杂志》 1997年第1期19-21,共3页
为了解高乳酸血症对家兔心肌电生理的影响,将8.5%乳酸溶液0.3ml/kg体重在5min(缓注组,n=20)与45s(急注组,n=4)内分别注入家兔静脉内,作注射前后心电图动态变化自身对照。结果(1)慢注组注入后10、20、30min时心率减慢(P<0.05),R波电... 为了解高乳酸血症对家兔心肌电生理的影响,将8.5%乳酸溶液0.3ml/kg体重在5min(缓注组,n=20)与45s(急注组,n=4)内分别注入家兔静脉内,作注射前后心电图动态变化自身对照。结果(1)慢注组注入后10、20、30min时心率减慢(P<0.05),R波电压降低(P<0.05),QRS时限增宽(P<0.05)。(2)急注组注入后心率变慢,T波双相、倒置或低平,出现房室及室内传导阻滞。提示高浓度乳酸对心肌自律性和传导性均有明显抑制作用,并使心肌受损。 展开更多
关键词 高乳酸血症 心电图
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大肠癌组织中p53蛋白和增殖细胞核抗原表达的临床意义 被引量:2
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作者 徐红 苏禄辉 谢成耀 《中国肿瘤临床与康复》 2006年第2期111-113,共3页
目的探讨增殖细胞核抗原(PCNA)和p53蛋白在大肠癌中的表达及临床意义。方法应用免疫组化S-P方法检测60例大肠腺癌中的PCNA及p53蛋白的表达。结果大肠癌中p53蛋白阳性表达率为63.3%,PCNA增殖指数为(78.2±24.5)%,p53蛋白表达阳性者... 目的探讨增殖细胞核抗原(PCNA)和p53蛋白在大肠癌中的表达及临床意义。方法应用免疫组化S-P方法检测60例大肠腺癌中的PCNA及p53蛋白的表达。结果大肠癌中p53蛋白阳性表达率为63.3%,PCNA增殖指数为(78.2±24.5)%,p53蛋白表达阳性者其细胞增殖活性为(83.1±18.6)%,明显高于p53蛋白阴性组(61.2±11.3)%(P<0.01)。p53蛋白阳性表达率与PCNA增殖指数随着大肠癌病理分级的上升而增加,且与预后呈负相关。结论同时检测p53蛋白、PCNA对大肠癌的诊断、病理分级及预后的评估有重要的指导意义。 展开更多
关键词 结直肠肿瘤 P53蛋白 PCNA 免疫组织化学
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沉默survivin抑制喉癌细胞Hep-2生长的实验研究 被引量:2
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作者 文连姬 高丽芳 +7 位作者 汲坤 张赫佳 富东娜 杨景朴 徐艳萍 陈国威 金春顺 赵雪俭 《中华耳鼻咽喉头颈外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第8期674-679,共6页
目的 探讨沉默survivin对喉癌细胞Hep-2生长的影响.方法 将重组质粒(psi-survivin)和阴性对照质粒(psi-scramble)用脂质体包裹转染人喉癌细胞株Hep-2,分别用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白免疫印迹(Western blot)从mRNA和蛋... 目的 探讨沉默survivin对喉癌细胞Hep-2生长的影响.方法 将重组质粒(psi-survivin)和阴性对照质粒(psi-scramble)用脂质体包裹转染人喉癌细胞株Hep-2,分别用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白免疫印迹(Western blot)从mRNA和蛋白水平检测survivin的表达.四甲基偶氮唑蓝(MTT)观察喉癌细胞增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡.建立裸鼠喉癌移植瘤模型,将psi-survivin和psi-scramble注射于肿瘤周围,观察其抗肿瘤的效果.免疫组化法和Western blot法检测重组质粒对肿瘤Survivin蛋白表达的影响.末端脱氧核苷酸转移酶介导的d-UTP缺口末端标记技术(Tunel)观察肿瘤细胞的凋亡.结果 psi-survivin不仅在mRNA水平(抑制率为54.4%),而且蛋白水平也抑制Survivin表达,抑制率为37.0%.MTT证实psi-survivin明显抑制喉癌细胞的增殖,抑制率达71.7%.流式细胞仪结果显示psi-survivin组细胞凋亡明显增加,凋亡率达(13.05±0.56)%((-x)±s,下同).体内实验表明,质粒注射后第32天,盐水组瘤体积为(1443.9±230.5)mm3,psi-scramble组为(1348.5±198.4)Rim3,而psi-survivin组为(624.6±188.4)mm3,与对照组相比,差异有统计学意义(t=-5.917,P<0.01).psi-survivin能明显抑制肿瘤survivin的表达,抑制率为41.8%,与对照组相比,差异有统计学意义(t=-80.343,P<0.01).Tunel染色结果显示psi-survivin组肿瘤组织中出现较多凋亡细胞,而对照组未见凋亡细胞.结论 沉默survivin能明显抑制喉癌细胞Hep-2的生长. 展开更多
关键词 基因沉默 微管相关蛋白质类 喉肿瘤 细胞系 肿瘤
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慢性乙醇中毒对雌雄小鼠海马mTOR通路相关蛋白影响 被引量:2
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作者 邢阳 邹丹 +5 位作者 廖海清 张雅婷 于桉国 唐小雨 吕鑫 李晓成 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2018年第6期834-838,共5页
目的探讨慢性乙醇中毒对雌雄小鼠认知影响的差异,明确m TOR信号通路相关蛋白的变化,揭示慢性乙醇中毒引起脑损伤的机制。方法将120只8周龄昆明种雌雄小鼠随机分为对照组(蒸馏水灌胃)、12.5%、25%、50%乙醇给药组(0.1 m L/10 g),给药9周... 目的探讨慢性乙醇中毒对雌雄小鼠认知影响的差异,明确m TOR信号通路相关蛋白的变化,揭示慢性乙醇中毒引起脑损伤的机制。方法将120只8周龄昆明种雌雄小鼠随机分为对照组(蒸馏水灌胃)、12.5%、25%、50%乙醇给药组(0.1 m L/10 g),给药9周。Morris水迷宫检测小鼠学习记忆能力,Western blot法检测各组小鼠p-m TOR及p-Akt蛋白表达。结果 Morris水迷宫定位航行结果表明:雌鼠及雄鼠对照及低中高剂量乙醇实验组第5 d逃避潜伏期分别为[(24.49±8.20),(28.34±9.88),(29.13±12.55),(34.46±13.13),(24.46±5.05),(36.02±9.17),(38.76±6.63),(43.06±8.06)s]较第1 d[(54.64±5.23),(55.22±4.62),(56.25±3.43),(58.33±0.85),(54.16±3.91),(55.69±4.16),(56.89±2.80),(58.34±1.44)s]明显缩短(P<0.05)。空间探索结果表明:50%乙醇组雌鼠及25%、50%乙醇组雄鼠有效区停留距离分别为[(20.88±2.73),(20.19±3.07),(10.33±3.07)cm]较其对照组[雌(37.72±1.78)cm;雄(37.65±6.31)cm]明显缩短(P<0.05)。50%乙醇组雄鼠有效区停留距离[(10.33±3.07)cm]较同浓度组雌鼠[(20.88±2.73)cm]明显缩短(P<0.05)。Western blot结果表明:50%乙醇组雄鼠海马p-Akt(2.75±0.42)、p-m TOR(0.59±0.10)蛋白水平较对照组(1.20±0.51,0.34±0.14)明显升高(P<0.05),但雌鼠却没有明显变化。结论慢性乙醇中毒对学习记忆的影响存在性别差异,m TOR信号通路可能参与此过程。 展开更多
关键词 乙醇 海马 学习记忆 MTOR信号通路
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