努力提高组织胚胎学绪论课的教学质量

组织胚胎学是医学科学中一门重要的基础学科,又是医学生最早接触到的医学基础课之一。本文深入分析了组织胚胎学绪论课的重要性,并探讨了上好绪论课的几点体会。

中药何首乌饮抗大鼠卵巢组织衰老的机理

目的探讨何首乌饮抗大鼠卵巢组织衰老的机理。方法36只SD大鼠随机分为3组:正常组、模型组、预防组。采用D-半乳糖连续腹腔注射法制造雌性大鼠亚急性衰老模型,预防组在造模的同时以中药方剂何首乌饮灌胃。应用逆转录聚合酶连反应(RT-PCR)方法检测各组大鼠卵巢组织p53、p19ARF、Rb及p16基因的表达,用Western blotting方法检测各组大鼠卵巢组织Rb及p16蛋白的表达情况。结果何首乌饮明显抑制了衰老大鼠卵巢组织中p53、p19ARF、Rb以及p16基因表达的上调趋势(P<0.05),且明显降低了衰老大鼠卵巢组织中Rb及p16蛋白的表达(P<0.05)。结论何首乌饮抑制衰老途径中关键的调节因子p53、p19ARF、Rb及p16的表达,从而起到抗大鼠性腺衰老的作用。

何首乌饮对运动性疲劳大鼠睾丸组织17β-羟基类固醇脱氢酶表达的影响

目的探讨何首乌饮对运动性疲劳大鼠睾丸组织17β-羟基类固醇脱氢酶(17β-HSD)的影响。方法 50只雄性SD大鼠随机分为5组,A组为安静对照组;B组为安静何首乌饮组;C组为模型组;D组为何首乌饮治疗组;E组为何首乌饮预防组,每组10只。C、D和E组大鼠复制运动性疲劳动物模型,其中E组每天训练前给予何首乌饮20g/(kg.d)(含生药9.6kg/L)灌胃作为预防。模型成功后D组大鼠给予何首乌饮20g/(kg.d)(含生药9.6kg/L)灌胃治疗60d。放射免疫法检测各组大鼠血清睾酮浓度,分别采用免疫组织化学法、Western blotting和RT-PCR检测各组大鼠睾酮合成催化酶的表达变化。结果 17β-HSD蛋白的阳性产物主要表达在睾丸间质细胞。17β-HSD mRNA及蛋白表达变化:与C组相比,D组和E组17β-HSD有显著性提高(P<0.05),而D组和E组无差异(P>0.05)。结论何首乌饮可以提高睾酮合成限速酶17β-HSD的表达。

三羟异黄酮对大鼠缺血性脑损伤神经组织的保护作用

目的探讨植物性雌激素三羟异黄酮(GST)对局灶性永久性脑缺血成年雄性大鼠大脑皮层神经组织的保护作用。方法实验分为假手术组、缺血组、GST组和溶剂对照组,采用HE染色、甲苯胺蓝染色和电子显微镜观察的方法,研究颈内动脉注射GST应急治疗对雄性大鼠局灶性永久性脑缺血模型中大脑皮层神经组织神经元,突触和血-脑脊液屏障的保护作用。结果GST组与缺血组比较,神经元、突触和血-脑脊液屏障的损伤均明显减轻。结论GST应急治疗对缺血性脑损伤的神经组织具有明显的保护作用。

糖尿病小鼠睾丸动脉的组织化学研究

糖尿病小鼠睾丸动脉的组织化学研究殷秀玲王更新赵春芳王朝宏杜心欣（河北医科大学组织胚胎学教研室）睾丸动脉纤细且呈螺旋状走行，血浆物质易于积聚，加之血流动力学的变化易导致动脉壁的损伤，是动脉硬化的易发部位。鉴于此，本实验应用光、电镜组化技术对自然发病性糖...

探讨小鼠肌肉组织中老化淀粉样变纤维的传播性

目的探讨淀粉样变纤维AApoAII在小鼠肌肉组织中的传播性。方法本研究采用R1.P1-Apoa2c小鼠进行系统性淀粉样变诱导实验,诱导实验进行2个月后,判断从骨骼肌组织中提取淀粉样变纤维的沉积程度,并进行2次传播实验。结果从骨骼肌组织中提取淀粉样变纤维可诱发小鼠系统性淀粉样变。结论与prion蛋白质具有相似的特点,小鼠老化淀粉样变纤维可通过骨骼肌传播淀粉样变,而此结果为淀粉样变疾病的预防及发生机制的解析提供了新的理论依据。

子宫内膜容受性的评价及其改善措施

子宫内膜的容受性是指子宫内膜对胚胎的接受能力。部分不孕症患者的子宫内膜容受性存在缺陷,影响了胚胎的成功着床。因此,如何对其做出合理的评价和相应的改善措施以提高妊娠率,是世界生殖医学系统研究的焦点。本文分别从形态学、超声学和分子生物学三个角度对子宫内膜容受性做出了评价。激素调节、抗凝剂的使用和中医中药等药物干预方法可有效改善子宫内膜容受性。此外,机械刺激和对输卵管积水的患者行患侧输卵管切除术对提高患者的子宫内膜容受性也起到了积极的作用。

BALB/c小鼠乳腺癌4T1细胞株移植模型的建立

目的:应用来源于BALB/c小鼠的4T1乳腺癌细胞株建立BALB/c小鼠乳腺癌模型,选择最佳的模型制作方法。方法:90只BALB/c小鼠随机分为3组,每组30只,分别接种1×106ml-1、1×107ml-1、1×108ml-14T1乳腺癌细胞株细胞悬液。每组小鼠再随机分两组分别接种于胸壁和侧腹壁。比较各组的成瘤时间、成瘤率和8周存活率,并用C-erbB-2免疫组化法检查肿瘤病理状态。结果:细胞浓度为1×107ml-1时,肿瘤成瘤率高,生长稳定;4T1细胞不同部位接种不影响成瘤率及生长;C-erbB-2免疫组织化学检查均为阳性。结论:应用1×107ml-1浓度的4T1细胞进行接种是最佳的模型制作方法。

切除颌下腺对小鼠睾丸、精子计数和血清睾丸酮的影响

切除颌下腺对小鼠睾丸、精子计数和血清睾丸酮的影响范莉英，冷双英，赵春芳，赵岩（河北医科大学组织胚胎学教研室，石家庄，０５００１７）小鼠颌下腺是分泌表皮生长因子（Ｅｐｉｄｅｒ－ｍａｌＧｒｏｗｔｈＦａｃｔｏｒ，ＥＧＦ）的主要器官，也是血清中ＥＧＦ的主要来...

大鼠局灶性脑缺血再灌注中nNOS源性NO对Bcl-2、Bax表达的影响

为研究大鼠局灶性脑缺血再灌注早期神经元型一氧化氮合酶(nNOS)来源的一氧化氮(NO)和过氧亚硝基阴离子(ONOO-)对Bcl-2和Bax蛋白表达的影响,本实验闭塞大鼠左侧大脑中动脉造成局灶性脑缺血模型,给予选择性nNOS抑制剂-7硝基吲唑,应用免疫组化法检测Bcl-2和Bax蛋白表达的变化。结果表明:50mg/kg、25mg/kg剂量的7-硝基吲唑可使Bcl-2蛋白表达升高,Bax表达降低。提示:局灶性脑缺血再灌注早期,nNOS来源的NO可能通过下调Bcl-2、上调Bax促进细胞凋亡的发生。

子宫内膜微创术对薄型子宫内膜容受性的影响

目的观察子宫内膜微创术对薄型子宫内膜容受性的影响。方法选择用子宫内膜微创术治疗的薄型子宫内膜不孕患者15例,分别在手术前、后经阴道超声测定排卵日子宫内膜的厚度和分型,排卵后第7天(植入窗期)行子宫内膜活检,免疫组织化学SP法检测子宫内膜整合素αvβ3和骨桥蛋白(OPN)的表达情况。结果子宫内膜微创术前、术后子宫内膜厚度分别为(6.66±0.93)、(8.63±1.76)mm,术后明显厚于术前(P<0.05);子宫内膜微创术后的子宫内膜分型无明显改善(P>0.05);术前子宫内膜整合素αvβ3和OPN表达的光密度(OD)值为0.175±0.018、0.171±0.015,术后分别为0.248±0.011和0.282±0.010。与术前相比,术后植入窗期子宫内膜整合素αvβ3和OPN的表达均明显升高(P均<0.01)。结论子宫内膜微创术可显著增加薄型子宫内膜厚度,促进子宫内膜整合素αvβ3和OPN的表达,改善子宫内膜容受性。

大鼠脑缺血后突触超微结构的变化

目的:探讨脑缺血损伤对突触的影响。方法:采用大鼠,制成脑缺血模型,应用透射电镜观察大脑顶叶皮质突触的变化。结果:随着缺血时间的延长,神经毡内突触数目逐渐减少;突触结构中突触小泡、线粒体也发生改变。缺血48 h,突触小泡减少,甚至消失;线粒体变性、减少乃至消失,嵴减少或消失呈空泡状。突触前后膜被破坏,典型的突触结构已不存在。结论:脑缺血后,随缺血时间延长,突触结构异常,突触密度下降。

大鼠骨髓间充质干细胞体外诱导分化为心肌样细胞

目的采用骨髓间充质干细胞(MSCs)体外诱导为心肌样细胞,为干细胞移植治疗心衰提供一种新的细胞材料。方法取SD大鼠四肢骨骨髓,分离培养MSCs,分别用终浓度为5、10、15、20μmol/L的5-氮胞苷(5-aza)定向诱导,相差显微镜观察细胞形态学变化,应用免疫细胞化学、激光扫描共焦显微镜技术检测结蛋白(desmin),α-横纹肌肌动蛋白(α-sarcomeric actin)、心肌特异性肌钙蛋白(C-TnT)的表达,透射电镜鉴定。在诱导后7d、21d和28d,3个时间点以半定量RT-PCR方法检测细胞心肌早期转录因子GATA4和心肌特异性肌凝蛋白重链αMHC的表达。结果MSCs体外经5-aza诱导后分化的细胞desmin、α-sarcomericactin、C-TnT均表达阳性,5μmol/L组阳性表达较高,透射电镜下可见到平行排列的肌丝。RT-PCR结果显示,GATA4于诱导后7d弱表达,21d表达增强,28d表达减弱。αMHC在诱导后7d不表达,2ld弱表达,28d表达明显。结论骨髓间充质干细胞能够在体外被诱导分化为心肌样细胞,是自体心肌细胞一种良好的供体来源。

应用二甲基亚砜体外诱导P19细胞分化为心肌细胞

目的观察P19细胞经二甲基亚砜(DMSO)诱导及不同培养方法,培养形成细胞聚集体并向心肌分化的过程。方法将P19细胞接种于Petri塑料培养皿或铺有0.5%软琼脂的培养皿中,DMSO诱导悬浮培养7 d形成细胞聚集体,将聚集体用生长培养基黏附培养至19 d。观察细胞跳动情况,用-αsarcomeric actinc、ardiac Troponin T(cTnT)抗体进行免疫组织化学染色,鉴定细胞分化。结果经DMSO诱导7d,将形成的细胞聚集体用生长培养基黏附培养至15 d,在聚集体周围的生长晕中出现自发性节律跳动的细胞团片,-αsarcomeric actin及cTnT染色阳性,至19d,阳性率分别可达26%和15%。结论DMSO诱导结合聚集体形成培养方法可诱导P19细胞向心肌细胞分化,并出现自发性有节律跳动。

应用5-氮胞苷体外诱导P19细胞分化为心肌细胞

目的探讨P19细胞体外经5-氮胞苷(5-aza)诱导向心肌细胞分化的特征。方法将P19细胞接种于铺有琼脂的培养皿中,用含不同浓度5-aza的培养基诱导培养7d,细胞悬浮生长形成类胚体(EBs)。将EBs用生长培养基黏附培养,观察细胞收缩情况;免疫细胞荧光检测α-横纹肌肌动蛋白(α-sarcomeric actin)、心肌肌钙蛋白(cTnT)的表达;RT-PCR检测GATA-4、α-MHC基因表达,鉴定细胞分化。结果将5-aza诱导形成的EBs黏附培养后,在EBs周围的生长晕中出现自发性节律收缩的细胞团片,α-sarcomeric actin及cTnT染色阳性,表达GATA-4、α-MHC基因。10μmol/L 5-aza处理组心肌细胞分化率较高。结论5-aza暴露结合悬浮培养可诱导P19细胞向心肌细胞分化,其分化与5-aza浓度有关。

老年大鼠肝脏超微结构加龄变化的研究

对雄性18月、25月、28月及31月龄大鼠肝脏超微结构的加龄变化进行了透射电镜的观察.发现从25月龄开始肝细胞核有的出现异染色质增多、边集,粗面内质网逐渐减少.线粒体基质深浅不一,凡基质变深者其嵴亦由板状变为泡状,最深者嵴消失.在有脂肪变性的肝细胞,其线粒体大小悬殊,形态多样,基质增深,嵴多变为泡样;内质网消失.胆小管内与窦周隙中的微绒毛减少,而窦周隙中的胶原原纤维则增多.31月龄大鼠除上述现象外,窦周隙中不但微绒毛消失,而且内皮细胞结构不清,在其外与肝细胞膜的窦周隙面均出现不规则的基膜样结构.

整合素α_vβ_3和骨桥蛋白在多囊卵巢综合征患者植入窗期子宫内膜的表达

目的探讨整合素α_vβ_3和骨桥蛋白(OPN)在多囊卵巢综合征(PCOS)患者植入窗期子宫内膜的表达。方法选取15名典型PCOS患者(其中7例为自主排卵,8例为促排卵)为PCOS组,同期选择15例月经周期规律妇女为对照组。阴道超声监测排卵,排卵日测定子宫内膜分型及厚度;免疫组织化学技术测定植入窗期的子宫内膜整合素α_vβ_3和骨桥蛋白的表达;放射免疫法测定内膜活检当天的血清雌二醇(E_2)和孕酮(P)的浓度。结果与对照组比较,PCOS组植入窗期子宫内膜整合素α_vβ_3和OPN表达均显著下调(P<0.01),两者之间不伴有比例的失调;排卵日子宫内膜厚度两组无显著差异(P>0.05);子宫内膜分型有显著性差异(P<0.05);血清E_2水平显著高于对照组(P<0.01),E_2/P比值亦显著高于对照组(P<0.05),而P显著低于对照组(P<0.01)。结论 PCOS患者植入窗期子宫内膜整合素α_vβ_3和OPN表达均下调,子宫内膜容受性降低,影响了胚泡着床。

人胰岛素样生长因子-1基因的克隆、表达和活性检测

目的 克隆人胰岛素样生长因子Ⅰ型 (hIGF 1) ,构建真核表达载体并进行表达及活性检测 ,为IGF 1基因治疗糖尿病奠定基础。 方法 提取胎儿肝脏总RNA ,RT PCR法扩增IGF 1cDNA片段 ,重组于pUCM T载体 ,测序正确后构建表达载体 ,转染猴肾成纤维细胞系COS 7,用原位杂交和免疫组织化学检测表达 ,收集培养上清以胰岛素刺激释放实验进行活性测定。 结果 扩增得到 710bp带有Kozak序列的IGF 1cDNA片段 ;成功构建了真核表达载体pCI neo hIGF 1;IGF 1在COS 7细胞得到了表达 ,并具有刺激胰岛素分泌的活性。 结论 新构建的载体pCI neo hIGF 1能在COS 7细胞中表达、分泌 ,且所分泌的IGF 1具有生物活性。