水通道蛋白-9在缺氧缺血性脑病新生小鼠认知功能障碍中的作用

目的探讨水通道蛋白-9(AQP-9)在缺氧缺血性脑病(HIE)新生小鼠认知功能障碍中的作用及其机制。方法将90只昆明新生小鼠随机分为对照组、模型组和AQP-9组,每组30只。对照组小鼠正常喂养,不建立HIE模型,模型组和AQP-9组小鼠采用电凝法闭合颈总动脉建立HIE模型;建模成功后30 min,AQP-9组小鼠给予单次腹腔注射20μg AQP-9,对照组和模型组小鼠腹腔注射等量的生理盐水。分别于干预后第1、3、7天,每组选取10只小鼠颈椎脱臼处死,取海马组织。采用反转录聚合酶链反应法检测对照组和模型组小鼠海马组织中AQP-9 mRNA表达,免疫荧光法检测小鼠海马组织中AQP-9蛋白(对照组和模型组)和Ki-67蛋白(对照组、模型组和AQP-9组)表达,干预后第3~7天处死小鼠前进行Morris水迷宫实验检测3组小鼠空间学习记忆能力。结果干预后第1、3、7天对照组小鼠海马组织中AQP-9 mRNA和蛋白的相对表达量比较差异无统计学意义(P>0.05)。模型组小鼠干预后第3天时海马组织中AQP-9 mRNA和蛋白的相对表达量显著高于干预后第1、7天(P<0.05),模型组小鼠干预后第1天与第7天时海马组织中AQP-9 mRNA和蛋白的相对表达量比较差异无统计学意义(P>0.05);干预后第1、3、7天,模型组小鼠海马组织中AQP-9 mRNA和蛋白的相对表达量显著高于对照组(P<0.05)。对照组小鼠干预后第1、3、7天海马组织中Ki-67蛋白相对表达量比较差异无统计学意义(P>0.05);模型组和AQP-9组小鼠干预后第7天时海马组织中Ki-67蛋白相对表达量显著高于干预后第1、3天(P<0.05),模型组和AQP-9组小鼠干预后第1、3天时海马组织中Ki-67蛋白相对表达量比较差异无统计学意义(P>0.05);干预后第1、3、7天,模型组小鼠海马组织中Ki-67蛋白相对表达量显著高于对照组(P<0.05),AQP-9组小鼠海马组织中Ki-67蛋白相对表达量显著高于对照组和模型组(P<0.05)。干预后第3~7天,对照组和AQP-9组小鼠Morris水迷宫实验逃避潜伏期均逐渐缩短(P<0.05),而模型组小鼠Morris水迷宫实验逃避潜伏期无显著变化(P>0.05);干预后第3、4、5天,3组小鼠Morris水迷宫实验逃避潜伏期比较差异无统计学意义(P>0.05);干预后第6、7天时,模型组小鼠Morris水迷宫实验逃避潜伏期显著长于对照组(P<0.05);干预后第6天,AQP-9组与对照组小鼠Morris水迷宫实验逃避潜伏期比较差异无统计学意义(P>0.05);干预后第7天,AQP-9组小鼠Morris水迷宫实验逃避潜伏期显著短于模型组(P<0.05)。结论HIE小鼠海马组织中AQP-9表达上调,外源性AQP-9蛋白可以改善HIE小鼠的空间学习记忆能力,其机制可能与外源性AQP-9蛋白促进Ki-67表达有关。