基于学习金字塔理论的同伴互助教学方法在神经内科临床实习中的应用

目的探讨基于学习金字塔理论的同伴互助教学方法在神经内科临床实习中的应用效果。方法选择2021年7月~12月在浙江大学医学院附属第一医院神经内科进行临床实习的2017级五年制临床医学专业76名学生作为研究对象,按照轮转批次采用随机数字表法将其分为试验组和对照组。试验组42名学生,采用同伴互助教学方法;对照组34名学生,采用传统教学方法。2周教学结束后,通过理论知识、临床技能考核成绩和问卷调查结果,比较两组教学效果。结果在理论知识上,试验组学生分数[(45.4±3.9)分]高于对照组学生[(41.8±5.1)分],其差异具有统计学意义(P<0.05);在临床技能总分上,试验组学生分数[(46.4±1.4)分]高于对照组学生[(44.9±1.6)分],其差异具有统计学意义(P<0.05)。问卷调查结果显示,在课前学习任务完成度、课堂讨论参与程度、教学内容掌握程度、学习积极性、团队协作能力、教学方法满意度等方面,试验组学生的评分均高于对照组学生,其差异均具有统计学意义(均P<0.05)。结论基于学习金字塔理论的同伴互助教学方法能够提高神经内科临床实习学生的理论知识、临床技能考核成绩和学习积极性等评分,获得了学生的好评,有助于提高神经内科临床实习的教学质量。

5种药敏方法检测产KPC酶肠杆菌科细菌对碳青霉烯类抗生素的耐药性

目的评价临床常用的5种药敏方法对KPC酶介导碳青霉烯类抗生素耐药性的检出率。方法36株经PCR证实产KPC酶的肠杆菌科细菌(包括32株肺炎克雷伯菌、1株大肠埃希菌、1株弗氏枸橼酸杆菌、1株产酸克雷伯菌和1株黏质沙雷菌),用琼脂稀释法、纸片扩散法检测各菌株对亚胺培南、美罗培南和厄他培南的耐药性,ATB G-5药敏卡检测亚胺培南、美罗培南耐药性,VITEK2AST-GN13药敏卡检测亚胺培南、厄他培南的耐药性,BD Phoenix NMIC-109药敏卡检测亚胺培南的耐药性。结果BD Phoenix、ATB、VITEK2、琼脂稀释法、纸片扩散法检测亚胺培南耐药率分别为11.1%(4株)、13.9%(5株)、13.9%(5株)、22.2%(8株)、68.6%(25株);ATB、纸片扩散法、琼脂稀释法检测美罗培南耐药率分别为22.2%(8株)、47.2%(17株)、55.6%(20株);VITEK2、琼脂稀释法、纸片扩散法检测厄他培南耐药率分别为69.4%(25株)、77.8%(28株)和88.9%(32株)。VITEK2和琼脂稀释法厄他培南对所有产KPC酶菌株MIC≥2μg/ml。结论纸片扩散法和琼脂稀释法比仪器法更能检出KPC酶介导的碳青霉烯类抗生素的耐药性,厄他培南可作为筛选产KPC酶菌株的指示药物。

SELDI-TOF MS技术及其在传染性疾病研究中的应用

SELDI-TOFMS(surface-enhancedlaserdesorptionionizationtime-of-flightmassspectrometry,表面增强激光解吸离子化飞行时间质谱)技术,是随着蛋白质组学的兴起而出现的新技术,是一种基于蛋白质芯片和质谱技术的蛋白质指纹图谱分析平台。本文就SELDI-TOFMS技术的原理、特点及其在传染性疾病研究中的应用进行综述。

蝉拟青霉多糖对老年大鼠免疫功能的调节作用

目的：研究蝉拟青霉水提物多糖对老龄大鼠免疫功能的调节作用。方法：以生理盐水处理的10～12周龄SD青年大鼠、18月龄SD老龄大鼠为对照组，实验组以不同剂量蝉拟青霉水提物多糖（50，100，200mg·kg^-1·d^-1）处理老龄大鼠3周，观察对照组、实验组大鼠腹腔、肺泡巨噬细胞对葡萄球菌的吞噬作用；以MTT法检测大鼠脾组织细胞分别在刀豆蛋白A（ConA），磷酸脂多糖（LPS）诱导下的淋巴细胞增殖活性；同时检测大鼠脾组织细胞内酸性磷酸酶（ACP），乳酸脱氢酶（LDH），精氨酸酶（ARG）等酶活力，并于透射电镜下观察大鼠脾组织超微结构。结果：与青年组比较，老龄组大鼠巨噬细胞的噬菌能力及脾组织淋巴细胞的增殖反应显著降低（P〈0．01），脾细胞内ACP，LDH，ARG等酶活力也显著低下（P〈0．01）。各种剂量蝉拟青霉多糖作用3周后老龄大鼠的这些指标均有改善，脾组织超微结构显示线粒体、内质网结构明显且数量增多。结论：蝉拟青霉水提物多糖能提高老龄大鼠腹腔、肺泡巨噬细胞吞噬功能和脾细胞免疫功能及增殖反应能力，使老龄大鼠低下的免疫功能得以改善，可能具有一定的抗衰老作用。

血小板活化因子反相高效液相色谱法测定及其在老年性疾病中的应用

目的 建立血小板活化因子 (PAF)的反相高效液相色谱 (rHPLC)检测法 ,与生物学检测法比较 ,探讨其在老年脑梗死、高血压、冠心病等疾病中的意义。方法 采用rHPLC对 10 0例健康对照者、2 3例脑梗死、2 8例高血压病、6 5例冠心病患者血PAF进行分析。结果 rHPLC法与生物学法相关性较好 ,操作简便 ,重复性好 ,灵敏度高 ,干扰因素少。脑梗死、冠心病患者血PAF值显著高于参考值 (P <0 0 1) ;高血压病组与对照组比较 ,无显著性差异 (P >0 0 5 )。结论 rHPLC法测定PAF更具可靠性 ,更能正确地反映血中PAF水平 ;有助于进一步推动PAF的临床与基础研究。

国产美罗培南对主要产β内酰胺酶的革兰阴性杆菌体外抗菌活性

目的:了解国产美罗培南对临床分离的主要产β内酰胺酶革兰阴性杆菌体外抗菌活性。方法:PCR 产物克隆测序及表型筛选试验检测大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌及阴沟肠杆菌中头孢菌素酶(AmpC酶)和超广谱β内酰胺酶;用琼脂稀释法或Etest法测定国产及进口美罗培南、亚胺培南、哌拉西林-三唑巴坦及头孢哌酮-舒巴坦对149株革兰阴性杆菌的最低抑菌浓度。结果:产超广谱β内酰胺酶的大肠埃希苗和肺炎克雷菌的基因型主要为CTX-M型,阳性率达92％。国产和进口美罗培南和亚胺培南对产酶大肠埃希菌、肺炎克雷菌和阴沟肠杆菌的敏感率均为100％,对鲍曼不动杆菌敏感率均为93％,对铜绿假单胞菌敏感分别为83％和 76％。结论:国产美罗培南对革兰阴性杆菌在体外有较强的抗菌活性。

郁金抗肿瘤作用的研究进展

总结国内外对郁金抗肿瘤作用的研究现状。概述郁金及其提取物对肿瘤细胞的影响、对荷瘤动物的影响以及在临床抗肿瘤中的作用。郁金及其提取物对肺癌、肝癌、结肠癌、黑色素瘤和胃癌等多种细胞系具有抑制作用,并诱导其凋亡。其机制可能是通过抗氧化、促进生长抑素(SS)的分泌、诱发肿瘤细胞凋亡、抑制肿瘤血管的生成、阻断肿瘤细胞的信号通路而实现的。郁金及其提取物具有很好的抑制肿瘤生长作用,并且毒副作用小,来源丰富,有待进一步开发。

大鼠肝缺血再灌注损伤中肝细胞凋亡的研究

目的:研究阻断门脉和肝动脉所造成的肝缺血再灌注(I/R)模型中肝细胞凋亡的发生率、空间分布规律及与凋亡发生相关的因素。方法:将60只SPF级SD大鼠分为正常对照组(18只)、假手术组(18只)、I/R组(24只,缺血20min,再灌注22h)。在实验终点时取各组大鼠的肝组织行HE染色、TUNEL法检测细胞凋亡、检测MDA含量及SOD活性;取血液检测TBIL、AST、ALT、ETX、TNF-α、IFN-γ、IL-4。结果:所有大鼠均检测到了凋亡的肝细胞,但只在I/R组有6只大鼠(6/24,25%)出现肝细胞坏死;I/R组大鼠的肝细胞凋亡较正常对照组、假手术组显著增加(P<0.05);正常对照组和假手术组的凋亡在肝内呈散在分布,各区的凋亡指数(AI)相近;I/R组包膜下区的肝细胞AI较中央静脉区、汇管区明显增高(P<0.05),细胞坏死区AI显著高于其它区(P<0.05);相关检测指标中ALT、AST、TNF-α、SOD/MDA与肝脏AI显著相关(P<0.05)。结论:肝脏I/R损伤中,存在凋亡与坏死2种细胞死亡方式,凋亡与坏死可在同一病灶中同时存在;肝包膜下区、坏死区AI较其它区域显著增加;肝脏总的AI与血液中ALT、AST、TNF-α水平及肝组织的SOD/MDA有相关性。

对亚胺培南耐药的鲍曼不动杆菌同源性及碳青霉烯酶基因型研究

目的探讨我省11个地区20家医院临床分离的对亚胺培南耐药的鲍曼不动杆菌耐药性、同源性和碳青霉烯酶基因型。方法收集我省11个地区20家医院2004年12月至2005年12月临床分离的271株对亚胺培南耐药的鲍曼不动杆菌。采用琼脂稀释法和浓度梯度法(Etest)测定亚胺培南耐药菌株对14种抗菌药物的最低抑菌浓度(MIC)值;采用脉冲场凝胶电泳法(PFGE)分析亚胺培南耐药菌株的同源性;采用PCR扩增及克隆测序分析碳青霉烯酶基因型。结果271株对亚胺培南耐药的鲍曼不动杆菌对多黏菌素E耐药率最低(11.8%),头孢哌酮/舒巴坦、氨苄西林/舒巴坦耐药率分别为55.4%和68.6%,米诺环素耐药率75.6%,其余抗菌药物耐药率均大于90.0%;PFGE分型发现271株对亚胺培南耐药的鲍曼不动杆菌中235株属于3个克隆株,在多个城市的医院内流行,另有13株属于2个克隆株,分别在一个城市的医院内播散;271株对亚胺培南耐药的鲍曼不动杆菌均携带OXA-51组基因,258株携带OXA-23组基因,未检测到金属酶基因。结论克隆播散是对亚胺培南耐药的鲍曼不动杆菌最主要的传播方式,OXA-23和OXA-66D类β-内酰胺酶基因是最主要的碳青霉烯酶基因型。

细菌性肝脓肿合并糖尿病与非合并糖尿病者临床及病原菌分析

细菌性肝脓肿是由于细菌经各种途径进入肝脏，肝实质发生炎症坏死，形成脓肿，是一种继发性感染性疾病。糖尿病是细菌性肝脓肿的重要危险因素，细菌性肝脓肿合并糖尿病（DLA）患者占糖尿病患者的14．9％～40．0％。近年来，细菌性肝脓肿的病原菌结构发生了改变，肺炎克雷伯杆菌已经成为细菌性肝脓肿的最主要致病菌本研究旨在探讨糖尿病及非糖尿病患者细菌性肝脓肿的差异，为其诊断、治疗及预后判断提供依据。

人用H5N1禽流感裂解疫苗的制备工艺

目的设计3种工艺,制备不同裂解程度的禽流感疫苗,并观察其免疫效果。方法用禽流感毒种R1203株制备3种禽流感疫苗(全病毒、裂解-1和裂解-2),并分别以不同剂量免疫大鼠和家兔,肌肉接种2针(间隔14d),初免后14d和28d静脉采血,检测动物血清中血凝抑制抗体和中和抗体。结果两种动物在疫苗接种1针后14d,血抑抗体和中和抗体滴度均较低;接种2针后14d,均显著高于1针;裂解-2疫苗接种两种动物后的抗体反应均高于其他两种疫苗,且家兔的中和抗体量-效反应明显。结论裂解-2疫苗的工艺优于其他两种疫苗,其中和抗体能正确反映疫苗的质量。

ampD-ampR调节基因与阴沟肠杆菌AmpC酶表达关系的研究

为了解ampD ampR调节基因与阴沟肠杆菌AmpC酶表达的关系 ,对 58株阴沟肠杆菌采用表型筛选法初筛 ,PCR法扩增AmpC酶的调节基因ampD和ampR ,并对部分PCR产物进行克隆测序。表型筛选结果显示 :去阻遏高产突变株为 50株 ,高度诱导产酶株为 3株。PCR法扩增目的基因片段显示 ,4 9株携带ampD基因 ,51株携带ampR基因。对其中 15株细菌的ampD基因和ampR基因进行克隆测序 ,发现 3株高度诱导型中 2株ampD基因存在 95位氨基酸的突变位点 ,而ampR基因未发现突变位点 ;12株去阻遏高产型中 ,8株ampD基因存在羧基端可疑的突变位点 ,5株ampR基因存在可疑的突变位点。结果提示 :ampD蛋白羧基端的氨基酸缺失或替代可能与AmpC酶的去阻遏表达有关 。

注射用阿奇霉素和头孢呋辛钠治疗下呼吸道感染临床对照研究

目的 :比较国产注射用阿奇霉素和头孢呋辛钠治疗下呼吸道感染的疗效及安全性。方法∶采用前瞻性多中心随机单盲平行对照临床试验 ,用国产注射用阿奇霉素治疗革兰阳性菌及革兰阴性菌下呼吸道感染性疾病 6 0例 ,以进口注射用头孢呋辛钠治疗 6 0例作对照药物 ,观察疗效及安全性。结果∶试验药组临床有效率、临床痊愈率、细菌阴转率和细菌消除率依次为91.7%、6 3.3%、91.3%和 87.5 % ,对照药组依次为 90 .0 %、6 1.7%、85 .7%和 85 .7% ,无统计学差异。不良反应发生率试验药组 6 .6 % ,对照药组 3.3% ,无统计学意义。结论∶注射用阿奇霉素是一个安全、有效的治疗下呼吸道感染的抗菌药物。

应用PCR-SSCP技术检测痰中结核分枝杆菌katG、rpoB、embB基因突变的研究

目的应用PCR-SSCP技术检测痰样本中结核分枝杆菌katG、rpoB、embB基因突变,探索其临床应用价值。方法以结核分枝杆菌标准株H37RV为对照,应用套式PCR扩增目的基因,并使用SSCP技术直接检测100例耐药患者和10例敏感患者痰样本中结核分枝杆菌katG、rpoB、embB基因突变并进行基因测序,将SSCP结果及测序结果与细菌培养药敏结果进行比较分析。结果PCR-SSCP直接检测痰样本中的结核分枝杆菌katG基因突变的敏感性和特异性分别是55.9%和70.0%,rpoB为76.0%和90.0%,embB为46.4%和60.0%。结论PCR-SSCP操作快速、简单,敏感性和特异性较高,可用来直接检测临床痰样本中结核分枝杆菌katG、rpoB、embB基因突变。

慢性重型肝炎患者氨基酸谱研究

目的 通过检测慢性重型肝炎患者的血清氨基酸浓度 ,分析其血清氨基酸谱的特点 ,为临床治疗慢性重型肝炎提供理论基础。方法 使用4400型氨基酸自动分析仪测定50例慢性重型肝炎患者血清氨基酸浓度 ,对其氨基酸谱进行分析。 结果 慢性重型肝炎患者血清蛋氨酸、酪氨酸、苯丙氨酸浓度显著增高 ,亮氨酸、异亮氨酸、缬氨酸浓度和芳香氨基酸/支链氨基酸比值显著下降 (均P<0.001)。Ⅲ期肝性脑病患者较无肝性脑病患者13种血清氨基酸浓度明显升高 (均P<0.05)。死亡者6种血清氨基酸浓度较好转者明显增高 (均P<0.05) ,尤以蛋氨酸为著。结论 慢性重型肝炎患者血清大部分必需和非必需氨基酸浓度均显著高于正常人。肝性脑病的程度与氨基酸浓度有正相关关系。血清蛋氨酸、酪氨酸浓度增高能间接反映肝细胞损害程度 。

新的质粒介导的碳青霉烯酶IMI-3传播机制研究

目的明确新的质粒介导的碳青霉烯酶IMI-3传播机制。方法采用E试验测定抗菌药物MIC,接合试验、酶切克隆筛选及鸟枪法测序对编码基因IMI-3传播机制进行研究。结果发现阳性克隆菌E.colipT103有5个开放读码框(ORF)。在编码基因IMI-3的两侧各有一相同的插入序列,氨基酸序列与IS903有71%的同源性。鸟枪法测序显示IMI-3与染色体介导的IMI-1有99%的同源性。结论IMI-3编码基因是由位于染色体上的IMI-1经点突变通过转座酶Tn903转移至可接合性质粒上。

结核分枝杆菌rpoB基因突变特征的初步探讨

目的了解浙江省耐利福平结核分枝杆菌rpoB基因突变特征。方法对65株临床分离菌株rpoB基因509-631位点分别进行PCR-SSCP检测和DNA序列测定,观察不同耐药株rpoB基因突变的规律。结果耐利福平分离株96.4%(27/28)存在rpoB基因突变,其中526位突变率64.3%(18/28),513位突变率21.4%(6/28),531位突变率7.1%(2/28),529位突变率3.6%(1/28);耐其他抗结核药18.5%(5/27)存在rpoB基因突变,突变位点具有随机性。所有敏感菌株均无突变。结论rpoB基因突变与利福平耐药密切相关,浙江省rpoB基因突变主要以526位突变为主,其次为513位,两者占总数的86%(24/28),而耐其他抗结核药菌株也存在rpoB基因的突变,但没有明显规律,且均对利福平敏感。

冬虫夏草对兔急性呼吸窘迫综合征的抗脂质氧化作用

目的探讨冬虫夏草水提液对兔急性呼吸窘迫综合征(ARDS)模型的抗脂质氧化作用。方法将实验动物随机分为对照组、模型组、治疗组,用静脉注射油酸的方法建立兔ARDS模型,观察各组超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)的差异。结果模型组SOD水平为(325.68±18.20)Uml,明显低于对照组(370.12±33.58)Uml(t=3.29,P<0.01);模型组MDA水平为(9.083±2.46)nmolml,明显高于对照组(1.708±0.98)nmolml(t=7.854,P<0.01)。治疗组SOD水平(362.06±12.34)Uml,明显高于模型组(t=4.875,P<0.05);治疗组MDA水平为(5.852±1.14)nmolml,明显低于对照组(t=3.535,P<0.05)。结论冬虫夏草水提液在兔ARDS模型中具有抗脂质氧化作用。

重型乙型肝炎血清HBV特异性循环免疫复合物的检测及其意义

目的通过检测重型乙型肝炎(乙肝)病人血清HBV特异性循环免疫复合物的含量,探讨HBV特异性循环免疫复合物与重型乙肝的关系。方法采用聚乙二醇穴PEG雪沉淀法制备HBV特异性免疫复合物阳性对照品,并对80例重型乙肝患者血清HBV特异性循环免疫复合物含量进行检测。结果80例重型乙肝患者血清解离前后HBsAg-IC阳性率最高穴56.25%雪。HBsAg-IC阳性与阴性者的年龄、HBsAg阳性率、ALT、TB水平等之间差别无显著性意义穴P>0.05雪,而HBVDNA、HBeAg阳性率之间差别有显著性意义(P<0.05)。结论PEG沉淀法检测HBV特异性循环免疫复合物简便、可靠,可用于临床检测;HBsAg-IC是重型乙肝患者循环免疫复合物的主要形式鸦HBsAg-IC阳性可能与病毒复制能力有关。