药食同源百合的资源分布与现代研究进展

百合是一种重要的药食同源植物,来源于百合科植物卷丹(Lilium lancifolium Thunb.)、百合(Lilium brownii F.E.Brown var.viridulum Baker)或细叶百合(Lilium pumilum DC.)的干燥肉质鳞叶,是湖南的“湘九味”药材之一。百合的化学成分复杂,主要含多糖、甾体皂苷、黄酮、氨基酸等活性成分,具有止咳祛痰、镇静催眠、抗氧化、抗炎、免疫调节、抗肿瘤、降血糖等多种药理作用。百合亦药亦食,具有较高的应用价值和广阔的开发前景。本文就百合的资源分布情况、化学成分、药理作用、开发与应用现状进行了总结,以期为百合进一步资源利用提供参考.

土牛膝总皂苷的提取、成分鉴定及抗炎活性研究

目的对土牛膝总皂苷进行体内外抗炎活性与分离鉴定研究,为其治疗炎症提供实验依据。方法采用十八烷基硅烷键合硅胶-AQ柱色谱法(ODS-AQ)纯化制备土牛膝总皂苷;建立氨水诱导的急性咽炎大鼠模型,灌胃给药评价粗毛牛膝提取物及总皂苷抗炎活性;采用柱层析、核磁共振谱、质谱等技术对土牛膝总皂苷中的主要化合物进行分离、纯化和结构鉴定;建立脂多糖诱导的巨噬细胞炎症模型,评价各皂苷单体化合物的抗炎活性。结果制备的粗毛牛膝总皂苷含量达到81.8%;在急性咽炎大鼠模型中,粗毛牛膝总皂苷及水煎液具有良好抗炎疗效,能显著降低血清IL-6、IL-1β、TNF-α细胞因子水平;总皂苷中鉴定出6个齐墩果烷型三萜皂苷,分别为竹节参皂苷Ⅳa(1)、竹节参皂苷Ⅳa丁酯(2)、金盏花皂苷E(3)、金盏花皂苷E丁酯(4)、竹节参皂苷I(5)、竹节参皂苷Ⅴ(6);体外炎症模型表明,分离得到的三萜皂苷类单体化合物均有不同程度的抗炎作用。结论首次系统证明了皂苷类成分是粗毛牛膝发挥抗炎活性的药效物质基础;从牛膝属植物中首次分离得到化合物2和4,并证实其具有抗炎作用。

地黄的研究进展及其质量标志物的预测分析

地黄是我国传统中药材,临床应用广泛,分布于河南、山东、山西、陕西等地。通过文献查阅总结,归纳了近10年国内外地黄化学成分及其药理作用的研究进展,以中药质量标志物(Q-marker)的新概念为指导,从植物亲缘学结合化学成分的生源途径、药效药性、化学成分的可测性、药动学及炮制因素等几个方面对地黄质量标志物进行预测分析,环烯醚萜类、苯乙醇苷类、糖类为主要参考对象,为地黄质量标准体系的进一步完善提供参考,促进地黄资源的开发利用。

基于网络药理学及实验验证探讨喉咽清治疗咽炎的作用机制

目的运用网络药理学并结合动物实验探究喉咽清治疗咽炎的物质基础及作用机制。方法通过中药系统药理学分析平台(TCMSP)数据库检索喉咽清的化学成分,并通过文献检索补充潜在活性成分,再经TCMSP及Swiss Target Prediction数据库预测成分作用靶点,建立靶点数据;通过Gene Cards数据库筛选出抗炎相关靶点;用Cytoscape 3.9.0软件构建“化合物-靶点(基因)”网络可视化关系图;采用STRING数据库对靶点进行蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络分析,使用Cytoscape 3.9.0软件中的Cyto NCA插件对STRING数据库导出的PPI网络进行degree值算法分析,将degree值排名前30的网络靶点作为喉咽清的抗炎核心靶点,并构建“核心靶点-活性成分”网络图;通过DAVID分析平台进行基因本体(GO)分析和基于京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析,探讨喉咽清抗炎的潜在生物过程及其通路;利用Autodock软件进行半柔性分子对接反向验证。在动物实验中,以15%的浓氨水诱导咽炎大鼠模型,经喉咽清灌胃处理后,ELISA法检测大鼠血清一氧化氮(NO)、肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素1-beta(IL-1β)的表达,HE染色观察大鼠咽部组织病理学变化。结果从喉咽清中共筛选得到65个活性成分,关键靶点涉及PTGS2、AKT1、MAPK3、STAT3、IL-6、TNF、NFKBIA等。KEGG通路富集结果显示喉咽清主要作用于Pathways in cancer、Hepatitis B、TNF signaling pathway等信号通路。分子对接结果显示β-蜕皮甾酮、齐墩果酸、山奈酚、竹节参皂苷IVa等核心化合物与关键靶点同时满足空间匹配与能量匹配。动物实验表明,与正常对照组相比,模型对照组大鼠咽部炎性改变明显,血清IL-6、IL-1β水平升高;与模型组相比,地塞米松5 mg·kg^(-1)组、喉咽清1.34 g·kg^(-1)、2.67 g·kg^(-1)组大鼠咽部炎症减轻,地塞米松5 mg·kg^(-1)组、喉咽清1.34 g·kg^(-1)、2.67 g·kg^(-1)组血清IL-6含有量降低(P<0.05)。结论喉咽清可能是通过调控肿瘤合成途径、乙型肝炎、肿瘤坏死因子等信号通路,对细胞代谢的多个过程产生影响,抑制炎症因子的表达,发挥抗炎作用。初步推测并验证了喉咽清治疗咽炎的主要靶蛋白与通路,为后续进一步验证喉咽清靶向抗炎提供新思路。

HPLC指纹图谱结合化学计量法对比研究博落回不同器官化学组分

本研究采用HPLC法分别建立博落回根、叶、果、茎化学指纹图谱,并测定其原阿片碱、别隐品碱、血根碱、白屈菜红碱4种生物碱含量;采用正交偏最小二乘法-判别分析(OPLS-DA)对博落回根、叶、果进行质量评价。指纹图谱结果表明,17批根样品共标定10个共有峰,14批叶样品共标定9个共有峰,14批果样品共标定9个共有峰,10批茎样品共标定6个共有峰。博落回不同器官4种生物碱总含量高低顺序依次为:果>根>叶>茎;果中以上4种生物碱含量均较高,根和叶中原阿片碱、别隐品碱含量高,茎中以上4种生物碱含量均低;博落回根资源量大且原阿片碱、别隐品碱含量高于果和叶,可同博落回果、叶作为以上生物碱提取原料进行开发利用。OPLS-DA结果以VIP>1计,别隐品碱及白屈菜红碱可作为博落回根潜在质量标志物;血根碱、白屈菜红碱可作为博落回叶潜在质量标志物;原阿片碱、别隐品碱、血根碱可作为博落回果的潜在质量标志物。本研究结果为博落回根、叶、果、茎的鉴别评价及博落回根的开发利用提供了研究依据。

药用植物异黄酮类化学成分及其药理作用的研究进展

异黄酮类化合物的基本母核为3-苯基色原酮,具有良好的药理作用。对2013—2022年国内外报道的新异黄酮类化合物的化学结构进行综述;归纳其氢谱核磁共振及碳谱核磁共振数据的特点,对其δH-2位进行了重新归属;并对其抗肿瘤、抗氧化、抑菌等方面的药理作用进行总结,以期为异黄酮类化合物的开发应用提供理论参考。

莲生物碱生物合成途径及相关基因研究进展

莲的多个部位均可作药,其中苄基异喹啉类生物碱是荷叶、莲子心的主要活性成分。荷叶含有荷叶碱、莲碱等阿朴啡类生物碱,具有良好调脂减肥作用;莲子心中主要含有甲基莲心碱、莲心碱等双苄基异喹啉类生物碱,可抗心律失常。近年来,莲生物碱成分的显著药理活性及荷叶与莲子心的“同源异效”现象,激发越来越多研究工作者开展莲生物碱生源合成途径及关键酶研究。为此,本文综述了荷叶、莲子心生物碱成分类型、生物碱合成途径及关键酶基因研究进展,以期为解析莲的生物碱合成途径及荷叶、莲子心的药效分化分子机制提供参考。

灰毡毛忍冬UGTPg17、UGTPg36基因克隆及功能研究

克隆灰毡毛忍冬糖基转移酶UGTPg17、UGTPg36基因,并进行其不同花期表达量与皂苷含量相关性分析。根据灰毡毛忍冬转录组Unigene序列设计特异性引物进行UGTPg17、UGTPg36克隆;使用生物信息学网站对克隆的UGTPg17、UGTPg36编码蛋白进行理化性质、蛋白结构和进化关系等分析;实时荧光定量PCR(RT-qPCR)分析基因在不同花期表达情况;HPLC法测定灰毡毛忍冬皂苷含量;利用SPSS分析基因表达量与皂苷含量相关性。UGTPg17、UGTPg36基因开放阅读框长度分别为1410 bp、1428 bp,分别编码469、475个氨基酸,分别包含4、7个糖基化位点,均属于不稳定、亲水性蛋白,不具跨膜区域;UGTPg36蛋白不存在信号肽序列,UGTPg17蛋白平均S值>0.5,推测其可能含有信号肽。UGTPg17、UGTPg36在不同花期中表达均为上升趋势,皂苷含量在不同花期中存在波动,两者相关性分析得出,2个UGT基因与皂苷含量呈极显著负相关。成功从灰毡毛忍冬中克隆了UGTPg17、UGTPg36基因,其在不同花期表达存在差异性,且相关性分析表明UGTPg17、UGTPg36基因与灰毡毛忍冬皂苷生物合成相关,为进一步探索其具体功能奠定了基础。

心肌缺血再灌注损伤及其潜在治疗靶点LCN2的研究进展

心肌缺血再灌注损伤(MIRI)是缺血性心脏病患者术后预后不良的关键,同时也是世界范围内严重的健康问题。该病的发生涉及自噬、坏死、凋亡、焦亡和铁死亡等多种细胞死亡方式。脂质运载蛋白-2(LCN2)通过与细菌铁载体结合发挥作用,调节趋化因子及其受体的表达和凋亡来影响再灌注移植物中的粒细胞浸润。大量文献研究发现LCN2可能是心肌梗死、肝损伤、癌症等疾病的生物标志物,因此,LCN2可作为MIRI的潜在治疗靶点。本文对MIRI发生的机制及相关信号通路进行归纳,并对其潜在靶点LCN2的结构、受体、表达等研究进行总结,为探索MIRI相关治疗靶点及方法提供新的思路。

湘产大宗道地药材质量影响因素及品质评价研究进展

通过对湘产大宗道地药材质量影响因素及现代品质评价技术进行文献研究,发现品种、种植、采收、产地初加工等因素对中药材质量影响较大。现代研究工作者在古代经验评价基础上增加红外指纹图谱、HPLC指纹图谱、DNA指纹图谱等现代技术用于湘产大宗道地药材品质评价,以全面反应湘产大宗道地药材内在信息。文献研究提示中药材生产实践中需甄别种苗基原种植良种、重视田间管理、适时采收、注重产地初加工,同时可利用红外指纹图谱、HPLC指纹图谱、DNA指纹图谱评价药材品质,从而提高湘产大宗道地药材质量、保证市场流通药材品质、扩大药农和企业经济效益。

不同来源虎杖指纹图谱研究

目的建立不同采收时间、生长年限、土地类型、产地虎杖指纹图谱,用于虎杖药材的质量评价。方法虎杖80%甲醇提取物的分析采用ZORBAX Eclipse XDB-C_(18)色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相采用乙腈-0.1%磷酸水,梯度洗脱;柱温为25℃;体积流量为1.0 mL/min;检测波长为287 nm。结果18批不同来源虎杖有10个共有峰,相似度0.941~0.999,表明不同来源虎杖化学成分无明显差异;聚类分析、主成分分析结果表明虎杖最佳种植条件为耕地种植3年,最佳采挖时间为8月至9月。结论该方法准确可靠,重复性好,可用于虎杖药材的质量控制。

龟甲胶研究发展探析

随着现代研究技术和方法的发展,龟甲胶在炮制和提取工艺方面有了新的进展,主要成分、药理作用以及临床应用方面也有了新的发现,但目前仍存在较多问题,建议如下:①拓宽药源途径。胶类中药需求量较大,药源紧张、价格昂贵,中华草龟是唯一的药用物种来源,闭壳龟、巴西龟、鳄龟、海龟等其他品种均不能作为龟甲的药用资源,一定程度上限制了龟甲胶的药源途径。因此,可在做好质量控制、药效研究的基础上,利用其他龟科动物为原料,拓宽龟甲胶的药源途径;②提高鉴别技术。龟甲胶真伪难辨,黄明胶、猪皮胶以及杂皮胶等均可冒充龟甲胶,应提高市场胶类药材鉴别技术。首先把控好动物源,应用光谱法快速检测,高效液相色谱法做定量分析;其次测定龟甲胶与其他类似饮片中的标志蛋白和多肽,以作为龟甲胶的特征性因子,应用荧光定量PCR、DNA条形码等新兴技术建立胶原蛋白特征肽段检测方法,为龟甲胶的专属性鉴定提供新的方法;③加强研究力度。龟甲胶的化学成分多为蛋白质、氨基酸和微量元素,但药效物质基础并不明确,应继续应用现代科学技术对其进行实验研究,阐明其药效基础,为药物研发及临床应用提供科学依据;引入质量标志物概念,基于新的质量评价标准建立具有动物药材特色的质量评价体系。

灰毡毛忍冬bZIP25基因的克隆及其表达模式分析

目的克隆灰毡毛忍冬bZIP25基因序列全长,并进行生信分析及表达模式分析,以初步探索其在灰毡毛忍冬中的生物学功能。方法通过逆转录PCR技术克隆bZIP25基因的序列全长,采用生物信息学分析方法对bZIP25及其编码的蛋白进行分析。运用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术测定其在茎、叶及七个花期花中的表达水平。结果克隆得到LmbZIP25基因(OR551766),其编码191个氨基酸,具有典型的bZIP家族结构,在bZIP结构域中与其他植物同源性较高。LmbZIP25基因具有组织特异性,在茎中的表达量显著高于花和叶,在七个花期中黄色花蕾期的表达量最高。结论克隆得到LmbZIP25基因全长,分析其在不同器官和不同花期的表达差异,为进一步探索其在灰毡毛忍冬中花发育中的功能奠定了研究基础。

单味中药有效部位新药研究进展

单味中药有效部位新药是从单一植物、动物、矿物等物质中提取的一类或数类成分提取物及其制剂。近年来,在国家政策的支持下,单味中药有效部位新药的注册申请数量在一定程度上有所提高,而关于中药有效部位新药总结鲜少。本文针对中药有效部位新药在2013-2023年注册申请的数量、应用领域、结构类型方面进行了全面总结分析,提出了发展过程中所面临的困难与挑战,为后续中药新药研究及开发提供参考。

灰毡毛忍冬MADS-box基因家族鉴定与CMB1基因克隆

目的鉴定灰毡毛忍冬Lonicera macranthoides MADS-box家族基因并进行生物信息学分析与表达模式验证,克隆湘蕾型和野生型灰毡毛忍冬MADS-box家族成员CMB1全长。方法基于转录组数据,利用在线工具对灰毡毛忍冬MADS-box进行生物信息学分析,并利用qRT-PCR验证MADS-box基因在不同品种中的表达模式,通过RT-PCR、RACE技术克隆湘蕾型和野生型灰毡毛忍冬CMB1基因全长。结果28个灰毡毛忍冬MADS-box蛋白长度为89~359 aa,碱性蛋白占比85.7%,不稳定蛋白占比96.4%,亲水性蛋白占比96.4%,均定位于细胞核,均为无跨膜结构的非分泌蛋白。转录组显示,与野生型比较,湘蕾型中28个MADS-box基因有17.86%表达下调,MIKCC型基因中有18.75%表达下调。克隆得到在两个品种的灰毡毛忍冬花中高度特异性表达的CMB1基因全长,均包含一个738 bp的ORF,编码245个氨基酸。CMB1基因在两个品种的花中表达量存在显著差异(P<0.01),且与茎、叶相比,在花中高度特异性表达(P<0.01)。结论基于灰毡毛忍冬转录组数据,鉴定了28个MADS-box家族基因,克隆得到湘蕾型与野生型灰毡毛忍冬CMB1基因全长,为进一步研究灰毡毛忍冬花发育、优良表型形成的分子机制提供研究基础与理论依据。

人SLC15A3基因及蛋白质的生物信息学分析

目的:研究SLC15A3调控和功能的完整机制。方法:通过生物信息学软件对人SLC15A3基因启动子元件和蛋白结构、理化和定位特性及其进化关系进行表征。结果:人SLC15A3基因受多种转录因子(YY1、AP-1、c-Fos、c-Jun、Sp1、NF-κB)调控。SLC15A3蛋白是由581个氨基酸残基组成的疏水不稳定蛋白,在哺乳动物中氨基酸序列有高保守性,与CD6、TYROBP、CD5、NOD2等蛋白相互作用。结论:本研究生物信息学分析结果有助于深入研究SLC15A3在炎症反应发生发展中的作用机制。

百合非药用部位的资源利用现状与展望

百合是一种重要的药食两用植物,也是我国重要的野生资源,在我国具有悠久的栽培和应用历史,因其出色的观赏、食用和药用价值而在世界范围内广泛种植,但长期以来产量巨大的非药用部位,却被当作废料大量丢弃,不仅污染环境,也在一定程度上造成了资源浪费。研究表明百合非药用部位富含酚酸、黄酮和多糖等化合物,具有抗氧化、抗炎、保肝和降血糖等功效,因此,为促进资源的有效利用和可持续发展,本文就百合茎、叶、花、珠芽的活性成分和资源利用现状等进行综述,旨在为其深入研究、资源产业化开发利用提供参考,同时为中药生态农业的生态功能提升及通过生态功能助力经济功能发展提供思考和借鉴。

基于SCoT分子标记分析白术种质资源遗传多样性及DNA指纹图谱构建

【目的】采用SCoT分子标记技术对17份白术种质资源进行遗传多样性分析及DNA指纹图谱构建,为白术种质的鉴定、保存和新品种选育提供一定的理论依据。【方法】从92条SCoT引物中筛选得到13条核心引物用于白术分子标记,利用Popgene1.32软件和NTSYS-pc 2.10e软件进行白术种质资源多样性分析和聚类分析,以核心引物SCoT-9、SCoT-12和SCoT-41组合构建白术DNA分子指纹图谱。【结果】13条SCoT核心引物扩增17份白术样品共得到192条条带,其中,多态性条带165条,平均百分率85.94%;遗传相似系数(GS)和遗传距离(GD)分别介于0.5781-0.8750和0.1335-0.5480,白术种质的观测等位基因数(Na)为1.8594,有效等位基因数(Ne)为1.4180,Nei's遗传多样性指数(He)为0.2563,Shannon信息指数(I)为0.3968,聚类分析得到白术栽培品一类,而大围山野生品被单独聚为一类;所构建的17份白术种质资源DNA指纹图谱,可以将样品区分并准确鉴定。【结论】白术种质资源具有较为丰富的遗传多样性,但不同产地白术栽培品之间遗传差异低,表明地理位置并不是判断白术亲缘关系远近的决定性因素。

基于多元统计分析的山银花抗氧化与抑菌质量标志物预测

目的建立灰毡毛忍冬抗氧化和抑菌谱-效关系质量评价系统,初步筛选出与抗氧化和抑菌药效相关的质量标志物。方法收集湖南各产地灰毡毛忍冬样品共20份,采用HPLC建立指纹图谱,并测定各样品的抗氧化和抑菌效果,通过SPSS 23.0软件对药效指标和共有峰面积进行偏最小二乘法回归、灰色关联度和相关性分析。结果关联度法分析得出3、12号峰与抗氧化和抑菌均有很强的相关性,偏最小二乘法回归系数可知2、3号峰与抗氧化效果相关性强,2、3、5、7、9、13、17、18号峰成分与抑菌效果相关性强,由双变量相关性分析可知3号峰与抗氧化效果显著相关,4、11和12号峰与抑菌效果显著相关,经对照品指认3号峰为绿原酸,7号峰为咖啡酸,11号峰为异绿原酸B,12号峰为异绿原酸A,17号峰为灰毡毛忍冬皂苷甲,18号峰为川续断皂苷乙,2、5、9、13号峰成分有待进一步确认。结论多种分析方法分析了山银花抗氧化和抑菌的“谱-效”和“量-效”关系,结果一致,预测有机酸类为抗氧化药效的质量标志物,皂苷和有机酸类为抑菌的质量标志物。

基于入血成分的芍药甘草汤治疗溃疡性结肠炎的网络药理学分析及分子对接验证

目的 基于网络药理学探讨芍药甘草汤入血成分治疗溃疡性结肠炎的作用机制。方法 制备芍药甘草汤含药血清,运用UPLC-MS进行分析,通过数据库进行化合物匹配。使用Swiss Target Prediction和Herb数据库筛选芍药甘草汤入血成分的靶点。借助GeneCards、GenCLiP3和OMIM数据库收集溃疡性结肠炎的作用靶点,并通过Venny 2.1在线工具筛选出药物-疾病共同作用靶点。通过STRING数据库和Cytoscape 3.8.2软件得到PPI网络图,通过CytoNCA进行拓扑网络分析筛选出重要靶点。将筛选得到的靶点导入DAVID数据库,以P<0.05进行筛选,进行基因本体(GO)分析和基因组百科全书(KEGG)信号通路富集分析。根据PPI网络,利用AutoDock软件对化学成分及其靶点进行分子对接验证。结果 UPLC-MS分析共匹配到芍药甘草汤入血成分42个,成分靶点727个,筛选到疾病靶点4 984个,PPI网络共有92个核心靶点。GO富集分析显示芍药甘草汤治疗溃疡性结肠炎机制涉及的生物过程、细胞成分和分子功能分别包含898、91和170个条目。KEGG信号通路分析共富集到126条通路,其中FoXO、TNF和PI3K-Akt信号通路排在前列。分子对接结果显示,芍药甘草汤入血成分与检测的靶点之间结合效能较低,具较好的亲和力。结论 本研究针对入血成分的网络药理学分析展现了芍药甘草汤治疗溃疡性结肠炎的复杂网络,并为深入研究芍药甘草汤抗溃疡性结肠炎的作用机制提供了科学依据。