细胞外基质磷酸糖蛋白在小鼠牙齿发育过程中的表达

目的:观察细胞外基质磷酸糖蛋白(MEPE)在小鼠牙齿发育过程中牙胚和牙周组织中的表达变化,初步探讨MEPE在小鼠牙齿发育过程中可能发生的作用。方法:免疫组织化学染色法观察MEPE在小鼠牙齿发育过程中牙胚和牙周组织的表达变化。结果:牙胚发育早期,MEPE在成釉细胞、成牙本质细胞和牙髓组织中均有表达。随着牙胚的发育,MEPE在上述细胞中的表达逐步减弱,在牙周膜中逐渐表达。在前期牙本质中表达。牙胚发育完成后,MEPE在牙周膜,特别是成熟牙槽骨骨陷窝中的骨细胞中呈现高表达。结论:细胞外基质磷酸糖蛋白可能在牙齿硬组织形成、牙周膜的形成和稳定等方面发挥重要作用。

表皮生长因子在牙齿萌出通道形成中的作用研究

目的:研究表皮生长因子(EGF)在牙齿萌出过程中,是否参与软、硬组织通道的形成。方法:①免疫组化法检测表皮生长因子及其受体在出生后13、15 d以及成年小鼠下颌第一磨牙萌出部位口腔黏膜的表达变化;②原代培养Wistar大鼠牙囊细胞,选择生长良好的第3代细胞,MTT法筛选EGF作用于牙囊细胞的较佳效应浓度。将第3代牙囊细胞以1×105/孔接种到培养皿中,加入最佳浓度的EGF孵育0.5、1、3、6 h后,Trizol一步法分别提取总RNA,采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测同一浓度的EGF作用不同时间后,牙囊细胞MCP-1 mRNA的表达变化。结果:①牙萌出时,EGF在萌出牙齿冠方黏膜的上皮层呈弱阳性表达,表皮生长因子受体(EGFR)在口腔上皮全层呈强阳性表达。而牙萌出后,EGF的表达集中于口腔黏膜的固有层,EGFR的表达集中于上皮基底层;②在EGF浓度为5～10 ng/mL时,对牙囊细胞的增殖具有明显促进作用(P<0.05),其中10 ng/mL促进作用最强。牙囊细胞与10 ng/mL的EGF共同孵育0.5、1、3、6 h均能明显促进牙囊细胞MCP-1 mRNA的表达(P<0.05),其中3 h时促进作用最强,以后逐渐恢复,但仍比对照组高(P<0.05)。结论:EGF及其受体可能促进萌出牙齿冠方实性上皮团的形成;适当浓度的EGF能显著增加牙囊细胞的增殖活性,并上调牙囊细胞中MCP-1 mRNA的表达。

细胞外基质磷酸糖蛋白在大鼠牙周组织缺损愈合过程中的表达

目的:观察细胞外基质磷酸糖蛋白(matrix extracellular phosphoglycoprotein,MEPE)在大鼠牙周组织缺损愈合过程中的表达,初步探讨MEPE在牙周组织再生中可能发生的作用。方法:24只成年健康雄性Wistar大鼠随机分2组:术后14 d组和术后28 d组各12只,行左侧下颌骨开窗术,制备牙周组织缺损模型,HE染色观察牙周组织缺损愈合情况,免疫组织化学染色法观察MEPE在牙周组织缺损愈合过程中各组织的表达。结果:术后14 d,术区有部分新生牙槽骨形成,部分牙周纤维附着于根面牙本质上;术后28 d,术区完全被新生牙槽骨覆盖,在新生牙槽骨和牙本质之间可见牙周膜和部分牙骨质生成,牙周膜大部分附着于根面上;牙周组织缺损愈合过程中,MEPE在健康对照侧仅呈弱阳性表达,而在缺损区牙槽骨和牙周膜相关细胞中均呈阳性表达。结论:在牙周组织缺损愈合过程中,细胞外基质磷酸糖蛋白参与牙槽骨以及牙周膜的再生。

表皮生长因子对牙囊细胞增殖活性的影响

目的:研究表皮生长因子(EGF)对体外培养的大鼠牙囊细胞增殖活性的影响。方法:原代培养Wistar大鼠牙囊细胞,选择生长良好的第3代细胞,分别加入不同浓度的EGF(0.5、1、5、10、50 ng/mL)与牙囊细胞共孵育5 d,MTT法对比观察不同浓度的EGF对牙囊细胞增殖活性的影响。数据采用SPSS 13.0软件包进行方差分析。结果:在EGF浓度为5～10 ng/mL时,牙囊细胞的增殖活性显著增高(P<0.05),10 ng/mL时达到最高(P<0.01)。结论:EGF可作用于牙囊细胞,合适浓度的EGF能显著增加牙囊细胞的增殖活性。