细胞自噬与原发性肝癌相关研究进展

细胞自噬是一种“自我进食”现象,通过分解受损和多余的细胞蛋白、细胞器和其他细胞质成分,从而在细胞和组织的更新中起重要作用。细胞自噬与原发性肝癌的发生、发展密切相关,不仅参与原发性肝癌的癌前病变,而且在原发性肝癌的进展中起双重作用。该文主要阐述了细胞自噬的发生机制,及其在肝癌进展中的作用和自噬参与肝癌的治疗。

非酒精性脂肪性肝病发病机制的研究进展

非酒精性脂肪性肝病(non‑alcoholicfattyliverdisease,NAFLD)是一种以肝脏脂肪异位、脂肪变性为特征的肝脏疾病。为我国最常见的慢性肝脏疾病,其发病率在世界范围内逐渐增加,与肥胖的流行程度相伴行。此外,NAFLD与整体死亡率的增加,特别是心血管疾病死亡率的增加有关。至今,NAFLD的作用机制尚未十分清楚,本文旨在论述近年来关于NAFLD机制的各种研究进展。

外泌体在肝细胞癌发病中的研究进展

肝细胞癌(HCC)是世界上第三大常见的恶性肿瘤,占原发性肝癌的85%~90%[1]。HCC已发展成为全球范围内最具致命性、侵略性和恶性程度最高的癌症之一[2]。乙型肝炎病毒(HBV)感染被认为是中国HCC发病的主要危险因素[3]。虽然近年来研究出了新的HCC治疗方式,但只有根治性手术切除才有可能治愈早期HCC。对于中晚期HCC,虽然已经开发了如索拉非尼等药物来提高患者生存率,但是晚期肝癌患者的预后仍差,迄今为止尚无有效的治疗方法[4]。外泌体是可以在细胞间转运生物活性分子的膜结合囊泡,其大小约为40~100 nm[5]。通过多种生物分子调节细胞之间的微环境和免疫系统,不仅如此,这些外泌体还会通过“转运”方式在细胞内空间交换和传递遗传物质[6-8]。不仅如此,外泌体还参与肿瘤细胞的转移、血管生成与正常细胞向肿瘤细胞的转化。许多类型的细胞增加表明外泌体参与了肿瘤的发生、发展、转移、免疫逃逸和耐药性,其机理在于这些细胞如免疫细胞、间充质细胞和肿瘤细胞可能诱导了外泌体的释放[2]。此外,肿瘤来源的外泌体含有大量与癌症相关的血清学标志物,例如miRNA,可用于早期HCC的检测。迄今为止,外泌体生理功能的研究仍未完全明确,本文综述了外泌体的功能、结构及其对HCC的影响和临床应用。

细胞焦亡与原发性肝癌研究进展

细胞焦亡是一种不同于凋亡、自噬的程序性细胞死亡方式。其特征是在Gasdermin介导下,细胞膜发生破裂,之后释放细胞内容物和促炎因子,进而导致细胞死亡。细胞焦亡炎症通路包括由Caspase-1活化的经典通路和Caspase-4/-5/-11介导的非经典通路。细胞焦亡与原发性肝癌(primary liver cancer,PLC)的发生、发展联系密切,该文就细胞焦亡的发生机制及其在PLC的早期诊断、治疗、预后及药物开发等相关领域中的研究进展作简要综述。

细胞珠蛋白抑制NASH向原发性肝癌转化的研究进展

细胞珠蛋白是一种星状细胞特异性珠蛋白,最近因其与肝纤维化的关联而变成了一个热点蛋白。细胞珠蛋白在抑制非酒精性脂肪性肝炎(NASH)转化原发性肝癌中起着至关重要的作用。对国内外肿瘤研究的最新进展归纳总结发现,非可控性炎症在肿瘤发生、发展过程中发挥着相当重要的作用,同时“炎‑癌”转化的机制研究已成为肿瘤基础领域研究已成为新的前沿,以及有关“炎‑癌”转化的调控网络、分子机制及其信号通路已逐渐成为肿瘤预防和治疗的主要靶点。本篇综述主要概述了细胞珠蛋白的在肝脏中发挥潜在的功能包括氧化应激和信号通路传导,同时深入探讨了细胞珠蛋白抑制NASH向原发性肝癌转化主要体现在灭活肝星状细胞、增加脂肪转运和抵抗氧化应激三个方面,通过对“炎‑癌”转化的研究为原发性肝癌的预防、诊断和治疗找到新的突破口。

基于网络药理学和分子对接技术探讨桂枝茯苓丸治疗肝硬化的作用机制

探究桂枝茯苓丸治疗肝硬化潜在的作用机制。利用TCMSP、ETCM和HERB数据库获得桂枝茯苓丸的化学成分及作用靶点,Genecards、OMIM和TTD数据库收集肝硬化相关靶点,并运用Venn图获取药物和疾病交集靶点。通过STRING在线数据库对交集靶点蛋白构建蛋白相互作用网络(PPI),采用Cytoscape 3.9.1软件对结果进行可视化分析。使用Metascape数据平台进行GO功能分析和KEGG通路富集分析,AutoDock Tools 1.5.7和Discovery Studio 2021软件进行分子对接验证。共获得桂枝茯苓丸的有效成分56个,PPI包含靶点蛋白121个,关键蛋白包括TNF、AKT1和TP53等。GO功能分析,得到桂枝茯苓丸治疗肝硬化主要通过对活性氧的反应、对脂多糖的反应和对细菌来源的分子反应等发挥作用。KEGG通路富集分析结果显示,桂枝茯苓丸治疗肝硬化的机制可能与AGE-RAGE信号通路、TNF信号通路和IL-17信号通路等有关。分子对接发现药物核心活性成分与靶点基因之间的结合活性良好。本文初步揭示了桂枝茯苓丸治疗肝硬化的多成分、多靶点和多通路的作用机制,为桂枝茯苓丸的进一步研究提供了理论基础。

内质网应激对大鼠肝星状细胞HSC-T6活化的影响

目的探索内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)作用对肝星状细胞活化的影响及可能机制。方法利用衣霉素(tunicamycin,Tun)对正常培养的大鼠肝星状细胞HSC-T6进行处理,处理浓度分别为0(空白对照组),0.1,0.5,1.0,2.0,4.0μg/ml。处理24 h,收集细胞,提取RNA和蛋白质,分别利用real-time PCR和Western blot检测内质网应激相关基因分子伴侣葡萄糖调节蛋白78(glucose-regulated protein 78,GRP78)、CCAAT增强子结合同源蛋白(CCAAT/enhancer-binding homologous protein,CHOP),肝纤维化相关基因α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)、组织金属蛋白酶抑制剂1(tissue inhibitor of metalloproteinases 1,TIMP1)、Ⅰ型胶原蛋白(collagen typeⅠalpha 1,Col1A1),及TGF-β/Smad通路相关基因TGF-β1、Smad4在RNA转录或蛋白表达水平的变化。结果real-time PCR检测结果表明,与空白对照组相比,Tun处理能够显著上调内质网应激相关基因Grp78、CHOP的转录水平(P<0.01);肝纤维化相关基因α-SMA、TIMP1的转录水平在Tun浓度为2.0μg/ml最高,但Col1A1的转录水平在Tun处理后有所下降(P<0.01或P<0.05);TGF-β/Smad通路相关基因TGF-β1在Tun浓度为2.0μg/ml和4.0μg/ml显著上升(P<0.01或P<0.05)。Western blot检测表明,Tun处理后,与空白对照相比内质网应激相关基因Grp78、CHOP的蛋白水平显著升高(P<0.01或P<0.05);α-SMA的蛋白水平在Tun浓度为1.0μg/ml和2.0μg/ml时明显上调(P<0.01或P<0.05);TGF-β1/Smad通路相关基因Smad4在Tun处理后亦明显上调(P<0.01或P<0.05)。结论内质网应激可促进肝星状细胞的活化,其机制可能与TGF-β1/Smad信号通路相关。

姜黄素通过EZH2/PPARγ途径抑制肝星状细胞活化

目的 研究姜黄素抑制肝星状细胞(hepatic stellate cells,HSCs)活化的分子机制。方法 大鼠肝星状细胞HSC-T6分为对照组、转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)组、姜黄素组、EZH2过表达组、EZH2敲降组和EZH2抑制剂组。对照组正常培养,TGF-β1组用TGF-β1处理,姜黄素组用TGF-β1与姜黄素共处理,EZH2过表达组用TGF-β1处理同时转染EZH2真核表达载体,EZH2敲降组用TGF-β1处理同时转染EZH2干扰RNA,EZH2抑制剂组用TGF-β1与EZH2抑制剂DZNep共处理。提取RNA和蛋白质,采用real-time PCR和Western blot技术检测肝纤维化相关基因α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)、Ⅰ型胶原蛋白a1(typeⅠcollagen a1,Col1a1)、组织金属蛋白酶抑制剂1(tissue inhibitor of metalloproteinase 1,Timp1)、组蛋白甲基转移酶EZH2和纤维化抑制因子PPARγ的表达,免疫荧光技术检测细胞内H3K27me3水平。结果 与对照组相比,TGF-β1组HSC-T6细胞中α-SMA、Col1a1、Timp1和EZH2的表达升高(P<0.01),H3K27me3水平升高,PPARγ的表达下降(P<0.01);而姜黄素组的结果与TGF-β1组相反(P<0.01或P<0.05)。与TGF-β1组相比,EZH2过表达组PPARγ的表达降低(P<0.05);而EZH2敲降组和EZH2抑制剂组PPARγ表达上调(P<0.05)。结论 姜黄素可通过抑制EZH2表达进而上调PPARγ表达水平,从而起到抑制HSCs活化的作用。

干涉HOTAIR对HepG2肝癌细胞增殖和周期的影响

目的探讨干涉HOX转录物反义RNA(HOX transcript antisense RNA,HOTAIR)对HepG2肝癌细胞增殖和周期的影响。方法以人正常肝细胞系Chang liver为对照,采用RT-PCR分析HepG2、SMMC-7721、Bel-7402和MHCC97肝癌细胞中HOTAIR的表达水平,以HOTAIR表达显著增高的肝癌细胞系为模型,分两组进行实验,阴性对照组(NC组)转染阴性对照siRNA,干涉HOTAIR组(siHOTAIR组)分别转染3种siHOTAIR(siRNA#1、siRNA#2、siRNA#3),通过RT-PCR确定干涉效果最显著的siHOTAIR,然后MTT检测细胞增殖能力的变化,流式细胞术检测细胞周期的改变。结果与Chang liver相比,HepG2、SMMC-7721、Bel-7402和MHCC97细胞中HOTAIR的表达均增高,以HepG2增高最显著(P<0.01)。与NC组比较,siHOTAIR组中siRNA#2的干涉效果最明显(P<0.01),且siHOTAIR组(siRNA#2)HepG2细胞增殖能力显著降低,并发生G1期阻滞(P<0.01)。结论干涉HOTAIR能够抑制HepG2细胞增殖并诱导G1期阻滞。

激活蛋白1调控肝细胞癌侵袭转移的研究进展

肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)侵袭转移的机制问题一直是医学界近年来研究的重点。研究发现,HCC中癌细胞的扩散可能与非可控性炎症形成、上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)、免疫逃逸以及微血管生成等过程密不可分。大量研究证明激活蛋白1(activating protein 1,AP-1)是哺乳动物体内重要的转录因子,当机体受到内源性或外源性刺激后可促使其过度激活。过度激活的AP-1在DNA结合域、转录调控域、寡聚化位点和核定位区等结构的紧密配合下促进细胞增殖、分化、凋亡以及癌性转化。本文就AP-1在HCC侵袭转移中的调控作用及其治疗策略的研究进展进行综述。

代谢相关性脂肪肝病相关肝细胞癌代谢重编程的研究进展

肝癌是一种常见恶性肿瘤,近年来其发病率和死亡率呈下降趋势,但代谢相关性脂肪肝病相关肝细胞癌的发病率却呈上升趋势。全文主要讨论代谢相关性脂肪肝病相关肝细胞癌的形成机制,重点就三种关键细胞代谢途径(糖代谢、脂肪酸代谢和氨基酸代谢)与代谢相关性脂肪肝病相关肝细胞癌的研究现状进行分析。