甲醛灭活猪圆环病毒2型基因工程亚单位疫苗抗原液的最佳条件研究

为探究甲醛对猪圆环病毒2型基因工程亚单位疫苗抗原液最佳的灭活条件,本试验采用10%的甲醛溶液与猪圆环病毒2型基因工程亚单位疫苗抗原液混匀,使甲醛终浓度分别达到0.05%、0.07%、0.10%、0.15%、0.20%,在4~8℃下经过不同时间的灭活,通过对灭活液不同时间点的无菌检验及灭活检验,综合判定灭活效果。结果显示:猪圆环病毒2型基因工程亚单位疫苗抗原液在甲醛终浓度为0.07%时灭活72h,或甲醛终浓度为0.10%和0.15%时灭活60h,或甲醛终浓度为0.20%时灭活48h,均取得可靠的灭活效果。考虑到甲醛的毒副作用,笔者认为4~8℃下用0.07%甲醛终浓度灭活72h是比较理想的灭活条件。

2种佐剂在猪圆环病毒2型基因工程亚单位疫苗中的效果比较

为给猪圆环病毒2型基因工程亚单位疫苗选择一种理想的佐剂,以增强机体对抗原的适应性免疫应答,协同提高动物免疫力。实验用水包油Merckinade SDA 25佐剂和双向Montanide ISA 206佐剂,分别按各自说明制备猪圆环病毒2型基因工程亚单位疫苗,再对两种佐剂的疫苗进行稳定性、黏度、安全及效力检验,比较评价出猪圆环病毒2型基因工程亚单位疫苗的理想佐剂。结果表明,两种佐剂疫苗的稳定性、黏度、安全均合格,无明显差异;但Montanide ISA 206佐剂疫苗较Merckinade SDA 25佐剂疫苗诱导抗体效价更高。据此,笔者认为,Montanide ISA 206佐剂是猪圆环病毒2型基因工程亚单位疫苗比较理想的佐剂。

鸡传染性喉气管炎重组鸡痘病毒基因工程疫苗冻干工艺探索

为筛选出理想的鸡传染性喉气管炎重组鸡痘病毒基因工程疫苗的冻干工艺,保证疫苗产品质量及免疫效果,更好地服务于畜牧业。本试验从冻干保护剂配方与冻干曲线入手,将含有0.8%、1.0%、1.2%、1.5%的明胶5%蔗糖保护剂分别与表达鸡传染性喉气管炎病毒gB基因的重组鸡痘病毒(rFPV_ILTVgB)抗原按规定配比,分别在21、24.5、28 h的冻干曲线下完成冻干,并对冻干后的制品检测其效价、真空度、剩余水分及物理性状。结果表明,有1.0%明胶5%蔗糖保护剂24.5 h或28 h冻干曲线和1.2%明胶5%蔗糖保护剂28 h的冻干曲线三种冻干工艺,其制品效价、真空度、剩余水分、物理性状均符合标准。因而采用1.0%明胶5%蔗糖的保护剂配方及24.5 h的冻干曲线是该制品较为理想的冻干工艺。

2017年中国普通人群H5和H9亚型流感病毒抗体水平检测分析

了解我国各省区人体H5和H9亚型流感病毒抗体水平变化,为我国流感防控政策的制定提供科学依据。2017年3月~4月份分批采集了来自中国大陆31个省市自治区18岁~94岁之间普通人群血样3 145份,采用微量血凝抑制试验检测H5和H9亚型流感病毒抗体水平。结果表明,我国人群中H5亚型流感病毒抗体总阳性率60.48%,阳性主要集中在18~29岁和70岁~99岁年龄段;H9亚型流感病毒抗体总阳性率为3.78%,阳性主要集中在30岁~39岁年龄段。从性别来看,H5和H9亚型流感病毒抗体阳性率女性显著的高于男性。就地域而言,我国东北部分省市及沿海省市流感病毒抗体阳性率偏高,其中吉林省人群中H5亚型流感病毒抗体阳性率78.57%,海南省人群中H9亚型流感病毒抗体阳性率为28.57%;我国中部及西北地区H5和H9流感病毒抗体阳性率较低。我国大部分省市人群中H5亚型流感病毒抗体阳性率显著高于H9亚型流感病毒抗体阳性率。

鸡胚接毒量对新城疫病毒LaSota株增殖的探究

本研究旨在生产鸡新城疫低毒力活疫苗时,获得高效价、高收量的制苗用抗原。本研究从SPF鸡胚接种新城疫病毒LaSota株种毒用量方面进行探索试验,研究鸡胚接毒量对新城疫病毒LaSota株增殖的影响,从而确定SPF鸡胚生产新城疫病毒LaSota株抗原的理想接毒量。结果显示,使用SPF鸡胚增殖新城疫病毒LaSota株抗原,鸡胚尿囊腔接种种毒量为10000EID;/胚时,能达到满意的效果。这为SPF鸡胚高效生产新城疫病毒LaSota株抗原,提供了科学的指导与方法。

不同佐剂对猪流行性腹泻灭活疫苗免疫效果的影响

为了探究不同佐剂对猪流行性腹泻灭活疫苗免疫效果的影响,本试验用水包油佐剂Merckinade SDA 25、油包水佐剂Montanide ISA 61 VG和双向佐剂Montanide ISA 2063种不同佐剂制成猪流行性腹泻灭活疫苗,然后用疫苗免疫动物,于免疫后21日测定中和抗体,并于免后21日攻毒,攻毒10日后观察猪的临床症状、检测排毒情况并于剖检后观察脏器变化情况,综合评定免疫效果。结果显示,用双向佐剂Montanide ISA 206制成的疫苗免疫效果优于其他两种佐剂制成的疫苗。这为商品化生产高效价猪流行性腹泻灭活疫苗时佐剂的选择提供了重要的依据,具有现实指导意义。

温箱和水浴加热法中和新城疫病毒、传染性支气管炎病毒的效果比较

为明确“鸡新城疫、传染性支气管炎二联活疫苗”效力检验项病毒中和的条件参数,使检验数据能真实反映疫苗效价的目的。该研究对“鸡新城疫、传染性支气管炎二联活疫苗”的两种类型LaSota株+H120株和LaSota株+H52株进行效力检验,采用温箱、水浴两种方法在不同温度下进行病毒与对应阳性血清中和。结果显示,阳性血清在25℃以上水浴法及30℃以上温箱法均可完全中和病毒,但30℃的水浴法及温箱法中和会对另一种不予中和的待测病毒带来损伤,导致检验数据不可靠。可见,“鸡新城疫、传染性支气管炎二联活疫苗”效力检验时,病毒与阳性血清的中和宜采用25℃水浴法1h。

温度对鸡传染性支气管炎病毒增殖的影响

为了在生产鸡传染性支气管炎活疫苗时,获得高效价的制苗用病毒液,该文从无特定病原体(SPF)鸡胚接种后的孵育温度方面进行探索,研究温度对鸡传染性支气管炎病毒增殖的影响。结果显示,在用SPF鸡胚增殖鸡传染性支气管炎病毒H120株、H52株时,以鸡胚液病毒含量指标衡量,接种后的鸡胚在35~37℃孵育为宜,在35.5~36.5℃孵育为佳,超过37℃或低于35℃孵育,不论接毒量大小或孵育时间长短,其鸡胚液的病毒含量均不达标,且37℃以上对鸡传染性支气管炎病毒的增殖更不利。鸡传染性支气管炎病毒对温度比较敏感,鸡胚增殖时,应尽量控制接种鸡胚在35.5~36.5℃孵育,不要超过37℃,为鸡传染性支气管炎鸡胚病毒液的高效生产提供了方法与指导。