基因转导及组织工程重建涎腺功能

涎腺功能低下或丧失在临床上很常见,目前尚无较理想有效的治疗方法。近年来随着涎腺基因转导及组织工程等新技术方法的应用,涎腺功能重建取得了可喜的进展。通过传导腺病毒介导的水通道基因治疗涎腺放射损伤,已在美国获批进入临床实验,长期稳定的载体介导的水通道基因在大型动物的临床前研究正在进行中。

5种哺乳动物和人涎腺组织学及超微结构观察

目的研究5种动物涎腺组织形态学及超微结构特点。方法选用成年小型猪5只,猕猴2只,新西兰白兔7只、Wistar大鼠7只和昆明小鼠7只及人类正常腮腺和颌下腺组织各一例,行腮腺和颌下腺组织学、组织化学及超微结构观察。结果5种动物的腮腺组织学表现差异不明显,均为浆液性腺体。5种动物的颌下腺组织学差异较大,人、小型猪、猕猴颌下腺均为混合性腺体,而大、小鼠和兔颌下腺为浆粘液性腺体。组化染色结果表明形态相似的腺泡细胞,其合成产物不尽相同。5种动物腮腺和颌下腺腺泡细胞在超微结构方面除分泌颗粒表现出明显的差异外,其余结构差异不明显。结论在小型猪、猕猴、兔、大鼠和小鼠5种动物的涎腺组织学及超微结构上,猕猴和小型猪与人类最接近。

富血小板血浆及其在口腔颌面骨修复中的应用

1984年，Assoion等发现了人血浆中提取的富血小板血浆（platelet—rich plasma，PRP）中含有多种生长因子，当PRP与氯化钙以及凝血酶混合后，各种生长因子即从血小板中的仪颗粒中释放出来^[1]。这些生长因子包括血小板源性生长因子（platelet—derived growth factor，PDGF）、转化生长因子β（transforming growth factor—β，TGF—β）、

5种哺乳动物涎腺造影及解剖比较研究

目的 :研究 5种动物涎腺造影及解剖形态学特点。方法 :选用成年小型猪 5只 ,猕猴 2只 ,新西兰白兔、Wistar大鼠和昆明小鼠各 7只 ,行腮腺和颌下腺造影、解剖学观察 ,并进行比较分析。结果 :5种动物腮腺腺体在大小、重量上有较大差异 ,腮腺的重量依次为小型猪、人、猕猴、兔、大鼠和小鼠。 5种动物的颌下腺差异较大 ,其中小型猪颌下腺在大小、重量、导管直径及造影表现上较其它动物更接近于人类。结论 :在小型猪、猕猴、兔、大鼠和小鼠 5种动物中 ,小型猪的腮腺、颌下腺在重量、大小、导管直径及造影表现上较其它

小型猪腮腺放射损伤唾液流率和血常规及生化动态观察

目的 :动态观察小型猪腮腺放射损伤前后腮腺流率、血常规及血生化变化 ,为建立小型猪腮腺放射损伤动物模型 ,及基因治疗涎腺放射损伤奠定基础。方法 :试验组 8只小型猪 ,1 5Gy单侧腮腺放射损伤 ,对侧腮腺做对照 ,2只 0Gy放射做空白对照。放疗前、放疗后 4周、8周和 1 6周 ,用吸盘法收集唾液 ,前腔静脉取血 ,观察唾液流率、血常规和血生化改变。结果 :放疗后 8周唾液流率下降 ,1 6周唾液流率下降明显并与放疗前有显著性差别。随着放射后的时间延长 ,白细胞计数下降越来越明显 ,第 8周和 1 6周与放疗前有显著性差别。红细胞在放疗后第 8周及第 1 6周稍有增加但没有显著性差别 ,血小板在 4周下降 ,第 8周及第 1 6周增高超出放射前水平。乳酸脱氢酶血清含量放疗后呈持续下降趋势 ,与放疗前有显著性差别(P <0 0 5 )。血清淀粉酶在放疗后 1周增高 ,第 4周显著下降 ,与放疗前相比差别有显著性 ,随后缓慢回升。结论 :1 5Gy放疗1 6周时放疗侧腮腺唾液流率明显下降 ,血液常规白细胞计数和血清乳酸脱氢酶。

小型猪腮腺细胞体外原代培养的研究

目的 :探讨实验用小型猪腮腺细胞在体外原代培养条件及观察其生物学特征。方法 :摘取 4月龄实验用小型猪的腮腺组织 ,应用混合胶原酶多步消化、分离腮腺细胞 ,在含有 5 0ml/L胎牛血清、表皮生长因子、转铁蛋白等的HamF12培养基中培养。通过光镜、电镜、免疫组织化学方法鉴定所得细胞 ,并对其蛋白分泌与调节功能进行初步研究。结果 :首次在体外成功培养小型猪腮腺细胞 ,细胞在体外存活 3周以上。在培养液中加入 5 0ml/L胎牛血清最适于腮腺细胞的生长。培养液中加入异丙肾上腺素能促进培养腮腺细胞的蛋白合成与分泌。结论 :成功建立了小型猪腮腺细胞体外培养方法。体外培养的小型猪腮腺细胞具有蛋白合成及分泌功能。

牙髓干细胞研究现状

牙髓干细胞是一种具有高度增生、自我更新能力和多相分化潜能的成体干细胞,在牙髓修复和牙齿再生中发挥重要作用。近年来对牙髓干细胞的培养、细胞表型和功能等方面已进行了大量研究,本文就牙髓干细胞的研究现状作一综述。

牙髓干细胞诱导iPS细胞的无饲养细胞培养条件研究

目的研究适合牙髓干细胞诱导iPS细胞的无饲养细胞培养条件与方法。方法分离牙髓干细胞,慢病毒介导Lin28、Nanog、Oct4和Sox2因子重编程获得iPS细胞。在不同浓度及不同处理时间的基质胶(Matrigel)上传代培养iPS,检验iPS的单细胞生长密度,比较不同基质胶培养方法对iPS生长的影响。结果 DPSC iPS在60ug/cm2浓度的基质胶上生长密度最高;基质胶覆盖2小时后应用可以获得最好的DPSC iPS生长密度。。结论应用60ug/cm2浓度的基质胶覆盖培养板2小时是DPSC iPS无饲养细胞培养的最佳条件。

小鼠颌下腺器官体外培养研究

目的建立小鼠颌下腺器官半固态体外培养系统,观察培养效果,初步研究小鼠颌下腺器官体外培养和体内生长差异。方法利用DMEM-F12和明胶建立半固态体外培养系统,选用出生后1天的C57小鼠颌下腺在该培养系统中进行培养,分别于培养后1、2、3天取出颌下腺,进行形态学观察,通过HE染色和AB-PAS染色观察组织学以及进行细胞培养,与体内生长的同期小鼠颌下腺进行比较。结果体外培养的小鼠颌下腺体积逐渐增大,组织进一步成熟,培养后的细胞能够正常生长,形态正常。与体内生长的同期小鼠颌下腺进行比较,其体积增大稍慢,在组织成熟,细胞形态上无明显差异。结论首次应用该半固态培养系统进行出生后小鼠颌下腺器官培养,与体内生长的同期小鼠颌下腺相比,形态学、组织学和细胞形态上无明显差异,但体积增长速度稍慢,可用于模拟体内环境进行相关研究。

小型猪双侧腮腺萎缩后唾液流率及口腔细菌变化的观察

目的观察小型猪腮腺萎缩后混合唾液流率的变化以及对口腔主要致病菌的影响。方法10只小型猪分成两组,每组5只,其中一组双侧腮腺注入甲紫致腺体萎缩,另5只作为健康对照组。分别在萎缩后第12、24个月收集混合唾液并观察唾液流率的变化;同时检测小型猪龈下菌斑和混合唾液中口腔主要致病菌数量并与健康对照组比较。结果腮腺萎缩后第12个月混合唾液流率自(1.36±0.74)ml/min下降到(1.32±0.65)ml/min,第24个月唾液流率自(0.72±0.34)ml/min上升到(0.86±0.57)ml/min;龈下菌斑中的核梭杆菌、后牙龈下菌斑中厌氧菌总数、产黑菌数量均明显高于健康对照组;第12个月前牙和第24个月后牙的龈下菌斑中变形链球菌有短暂升高,而需氧菌总数、乳酸菌和放线菌数量无明显变化。唾液中除变形链球菌和产黑菌在腮腺萎缩早期有轻度上升外,其余细菌数量均无明显变化。结论双侧腮腺萎缩后明显降低口腔中唾液总量,导致牙菌斑中的致龋菌和牙周致病菌数量上升。

小型猪与小鼠腮腺、泪腺、垂体超微结构的观察与比较

目的研究小型猪及小鼠腮腺的超微结构特点，并将腮腺与泪腺、垂体的超微结构对比观察，旨为涎腺基因治疗转基因表达的生物学特性提供腺体形态学的依据。方法选用成年小型猪、昆明种小鼠各5只，分别取腮腺、泪腺、垂体进行超微结构观察。结果小型猪较小鼠的腮腺腺泡细胞内分泌颗粒密度大，质地均匀，细胞器少见，血管内皮细胞内有较多分泌颗粒存在。小型猪与小鼠泪腺超微结构均与各自腮腺相似，小型猪与小鼠垂体结构特点为细胞排列散在，细胞闻充满血窦及毛细血管。结论小型猪腮腺腺泡细胞分泌颗粒多，其毛细血管内皮细胞中也可见较多分泌颗粒，提示这些分泌颗粒可能进入血液发挥内分泌功能。