虚拟仿真实验在“病毒学检验”教学中的应用

病毒学检验是一门在病毒性传染病的诊断、防治中发挥重要作用的课程。作为卫生检验与检疫专业的主干课程,是提升学生综合职业能力和职业素养的关键。针对该课程的学习,不仅是在向学生传授理论知识,更重要的是在教学过程中帮助学生提升专业综合能力,其根本目标是帮助学生运用所学的理论知识解决实际问题。然而传统教学中,学生分析问题和解决问题的综合能力普遍不足。针对这一问题,浙江中医药大学始终坚持“学生中心、问题导向”的实验教学理念和“虚实结合、手脑共训”的教学设计,不断探索改进教学方式,以满足应用型人才专业综合能力的培养。通过分析虚拟仿真实验在病毒学检验教学中的开展情况,探讨虚拟仿真实验应用于病毒学检验课程教学的可行性。

“产教融合、岗位胜任”目标下卫生检验与检疫专业应用型人才培养模式探讨

以浙江中医药大学2015年以来卫生检验与检疫专业学生为研究对象,通过与浙江省疾病预防控制中心合作,从共同制定学生培养方案、重塑课程教学、师资队伍建设、建立实践教学体系、课程思政体系建设和优化考核评价体系等六个方面进行实践探索,成效显著。自改革以来,浙江中医药大学技术与信息工程学院的“免疫学检验”等多门课程被评为省级一流课程并建立虚拟仿真项目,发挥引领示范作用。截止最新一届毕业生调研表明,卫生检验与检疫专业毕业生的就业率居于全院首位,从事的工作与专业相关度达93%,就业岗位适应性达96%,就业满意度高达100%。毕业生对教学质量的各项评价满意度均在90%以上。此外,卫生检验与检疫专业成功实现从“以知识为中心的学科本位、能力本位的模式”向应用型模式进行转型。

中药防治脓毒症研究进展

脓毒症作为临床常见危重症,在临床仍缺乏非常有效的治疗方法和治疗药物。近年来在中医理论指导及现代药物研究方法的不断更新下,中药在治疗脓毒症方面的研究取得了显著成果。本文分别从单味中药、中药复方汤剂、中成药三个方面研究并总结了中药类药物对脓毒症引起的相关损害的治疗效果,为脓毒症临床治疗提供新思路。

黄芪甲苷减轻异丙肾上腺素诱导H9c2细胞肥大损伤的机制研究

目的:探讨黄芪甲苷减轻异丙肾上腺素(ISO)诱导H9c2心肌细胞肥大损伤的保护作用及潜在机制。方法:以100μmol/L ISO作用H9c2细胞建立细胞肥大损伤模型。将细胞分为正常对照组、模型组及黄芪甲苷6.25、12.5、25μmol/L组,黄芪甲苷预给药2 h,ISO作用24 h。CCK-8法检测细胞活力,荧光染色测定细胞表面积,Hoechst 33342和TUNEL染色测定细胞凋亡率。比色法检测乳酸脱氢酶(LDH)活性,荧光探针DCFH-DA检测活性氧(ROS)水平,WST-8法测定超氧化物歧化酶(SOD)水平。qRT-PCR检测Bcl-2、Bax、P62、LC3 mRNA水平。Western Blot检测Sirt1、P62、Caspase-3、Beclin、P53蛋白表达及LC3Ⅱ/LC3Ⅰ水平。结果:黄芪甲苷能显著减轻ISO诱导的H9c2细胞肥大损伤,减少心肌细胞表面积及LDH的释放,降低细胞凋亡率及细胞内ROS水平,升高SOD水平,上调自噬相关mRNA及蛋白的表达,下调凋亡相关mRNA及蛋白的表达。结论:黄芪甲苷能有效抑制ISO诱导的H9c2细胞肥大及凋亡,其机制可能与减少氧化应激,促进细胞自噬有关。

基于16S rRNA测序探讨银屑病1号方对银屑病患者皮肤微生态的影响

[目的]采用16S rRNA基因测序技术,观察银屑病1号方对银屑病患者治疗前后皮肤微生态的影响。[方法]选取在杭州市第三人民医院接受治疗的30例寻常型银屑病患者,口服银屑病1号方治疗后,取治疗前后皮肤样本,同时选取健康对照组30例,采用16S rRNA基因测序技术,分析治疗前后菌群多样性及菌群分布差异。[结果]银屑病1号方治疗后患者组操作分类单元(operational taxonomic units,OTUs)数目较治疗前患者组显著减少(P<0.05)。在门水平上,治疗后患者厚壁菌门、放线菌门增加,变形菌门、拟杆菌门含量减少;在属水平上,治疗后患者痤疮丙酸杆菌属、葡萄球菌属、棒状杆菌属丰度增加,链球菌属丰度下降。秩和检验显示,治疗前患者组中相对丰度较高(>1%)的差异物种有厚壁菌门、变形菌门、拟杆菌门、葡萄球菌属、金黄杆菌属、鞘氨醇单胞菌属。功能预测分析,患者组的皮肤微生态功能与糖代谢、辅因子及维生素代谢和氨基酸生物合成的相关基因通路与健康对照组比较差异有统计学意义(P<0.01)。[结论]银屑病1号方可通过改善皮肤微生态治疗银屑病。

姜黄素具有抑制血管生成与诱导肿瘤细胞凋亡双重作用

目的 探讨姜黄素的抗肿瘤机制。方法 采用鸡胚绒毛尿囊膜模型观察姜黄素对血管生成的影响 ;利用培养的肿瘤细胞SMMC 772 1,采用电子显微镜及流式细胞仪观察姜黄素诱导SMMC 772 1细胞凋亡的作用。结果 姜黄素能明显抑制鸡胚绒毛尿囊膜内的血管生成 ,2 0 μmol·L-1的姜黄素即可诱导SMMC 772 1细胞凋亡。结论 姜黄素的抗肿瘤机制是多方面的 。

血府逐瘀汤对心肌成纤维细胞增殖和胶原合成的影响

目的:探讨血府逐瘀汤对心肌成纤维细胞增殖与胶原合成的影响,为血府逐瘀汤防治多种由于心肌成纤维细胞增殖而导致的心脏疾病提供理论依据。方法:采用直接加药和血清药理学方法观察血府逐瘀汤对心肌成纤维细胞增殖与胶原合成的影响。结果:1:80稀释的1 g/ml血府逐瘀汤与含10％血府逐瘀汤鼠血清已经对心肌成纤维细胞增殖有抑制作用,同对照组比较具有显著性差异(P<0.05);1:80稀释的1 g/ml血府逐瘀汤能显著抑制心肌成纤维细胞分泌胶原,达17.9％。结论:血府逐瘀汤不仅能够抑制心肌成纤维细胞增殖,而且具有抑制心肌成纤维细胞分泌胶原的作用,血府逐瘀汤具有抗心肌纤维化的作用。

血府逐瘀汤对牛内皮细胞增殖和迁移的影响

目的 :探讨血府逐瘀汤对牛内皮细胞增殖和迁移的影响。方法 :采用MTT法检测含血府逐瘀汤鼠血清对牛内皮细胞增殖的影响 ,琼脂糖刮除法检测含血府逐瘀汤鼠血清对牛主动脉内皮细胞迁移的影响。结果 :含血府逐瘀汤鼠血清对牛内皮细胞增殖和迁移均有显著抑制作用 ,且呈剂量依赖性 ,对迁移的影响要大于增殖。结论 :血府逐瘀汤对牛内皮细胞增殖和迁移有抑制作用 ,具有抑制血管生成的作用。

槲寄生内生真菌在槲寄生寄生过程中的作用

目的:研究槲寄生内生真菌在槲寄生寄生过程中的作用。方法:将槲寄生8个不同部位的组织进行外植体培养,分离纯化其内生真菌,利用CMC平板培养和DNS法筛选出具有较高纤维素酶活性的菌株;将槲寄生寄生的膨大部位进行组织切片,染色观察其内生真菌的组织分布。结果:槲寄生体内分布着丰富的真菌菌丝;从槲寄生各组织部位共分离出83株内生真菌;初步筛选得到38株可降解纤维素的菌株,19株降解纤维素能力较强,其中10株分离自槲寄生寄生的膨大部位。结论:内生真菌分泌纤维素酶可降解枫杨树的细胞壁及细胞间隙组织,协助槲寄生的吸器穿透枫杨树组织,帮助槲寄生在枫杨树上寄生。

参麦注射液对内皮细胞增殖和迁移的影响

目的 :探讨参麦注射液对血管生成的影响 ,方法 :采用MTT法检测参麦注射液对牛血清和肿瘤细胞条件培养液促进的牛主动脉内皮细胞增殖的影响 ,采用琼脂糖刮除法检测参麦对牛血清和肿瘤条件培养液促进的牛内皮细胞迁移的影响。结果 :在含 10 %新生小牛血清培养液中和在肿瘤细胞条件培养液中 ,参麦都能明显抑制牛主动脉内皮细胞增殖 ,且呈量效关系 ,对肿瘤细胞条件培养液诱导的内皮细胞迁移抑制作用显著。结论 :参麦能抑制牛内皮细胞增殖和迁移 ,具有抑制血管生成的作用。

姜黄素对动物实验性胃溃疡的影响研究

目的:观察姜黄素对实验性小鼠和大鼠胃黏膜损伤的影响。方法:将姜黄粉末用70%乙醇提取,石油醚脱脂的方法制备出姜黄醇提取物,采用硅胶吸附的方法从姜黄醇提物中制备得到姜黄素。采用冷水应激小鼠,乙醇诱导、幽门结扎等方法制作大鼠胃溃疡动物模型。按随机抽签法将动物各分为5组:姜黄乙醇提取物低剂量组、姜黄乙醇提取物中剂量组、姜黄乙醇提取物高剂量组、对照组和模型组,连续给药3天,处死动物后观察胃溃疡指数。结果:姜黄素对冷水应激小鼠胃黏膜损伤没有显著保护作用;姜黄素对乙醇诱导的小鼠胃黏膜损伤及结扎型大鼠胃黏膜损伤具有保护作用。结论:姜黄素对实验性动物胃溃疡具有保护作用,其机理可能是通过抗氧化实现的。

超声波的生物学效用及其在转基因中的应用

超声波主耍引起空化现象。超声波的生物学效用是多方面的，既可引起生物大分子以至于细胞的损伤；又可促进生物大分子的合成，加速生化反应。超声波诱导基因转移是目前发展起来的一种比较理想的转基因技术。

血府逐瘀汤对大鼠缺血再灌注心肌损伤及心肌细胞凋亡的干预作用

目的:现察血府逐瘀汤对缺血再灌注致大鼠心肌损伤与细胞凋亡的干预作用。方法:采用结扎冠状动脉左前降支后再通的方法,复制家兔心肌缺血再灌注的动物模型,观察心肌的病变程度;DNA电泳及原位末端标记法检测心肌细胞凋亡。结果:血府逐瘀汤治疗组的梗死面积小于再灌注组;DNA电泳发现再灌注组是凋亡的典型表现,血府逐瘀汤治疗组梯形条带中DNA含量较心肌缺血再灌注组明显减少TUNEL染色发现再灌注组有大量的阳性标记,且积聚成团,血府逐瘀汤治疗组较再灌注组明显减少。结论:缺血再灌注可诱导心肌细胞凋亡,血府逐瘀汤可抑制缺血再灌注诱导的心肌细胞凋亡发生。

姜黄醇提取物对实验性胃溃疡的影响

目的:研究姜黄醇提取物对小鼠和大鼠胃黏膜损伤的影响及对大鼠胃黏膜超氧化物歧化酶活性和丙二醛含量的影响。方法:姜黄70%乙醇浸提得姜黄醇提物。冷水应激制作胃溃疡模型,镜检小鼠胃黏膜损伤作为溃疡指标。大鼠行幽门结扎术制作胃溃疡模型,镜检测量胃黏膜出血损伤指数作为溃疡指标;检测胃黏膜超氧化物歧化酶活性与丙二醛含量。结果:与冷水应激组比较,姜黄醇提取物各组小鼠胃黏膜损伤明显减轻。同幽门结扎组比较,姜黄醇提取物各组大鼠胃黏膜损伤明显减轻,胃黏膜超氧化物歧化酶活性升高,丙二醛含量降低。结论:姜黄醇提取物能具有良好的抗胃溃疡作用,其抗胃溃疡机制可能与抑制丙二醛升高、提高超氧化物歧化酶活性有关。

细胞调亡与动脉粥样硬化

平滑肌细胞、内皮细胞和巨噬细胞与动脉粥样硬化的发生发展密切相关。在动脉粥样硬化斑块中，巨噬细胞、平滑肌细胞与内皮细胞都经历着凋亡与坏死，调亡占主导地位，参与了粥样硬化的形成过程。氧自由基、某些生长因子、一氧化氮、内毒素以及氧化型低密度脂蛋白等可诱导细胞调亡。细胞调亡具有复杂的分子调控机制，多种基因参与了凋亡的发生。

超声波法转化酵母原生质体

本文报告了用超声波将外源ＤＮＡ导入酿酒酵母原生质体。我们以酿酒酵母Ｙ１６２作为质粒ＹＥＰ２４的受体菌，用２４ＫＨｚ、２０Ｗ的超声波处理酵母原生质体。上述超声处理对质粒ＤＮＡ没有明显破坏作用。随着作用时间的延长，酵母原生质体的存活率与转化率迅速下降。获得的最高转化率为１０３转化子／μｇＤＮＡ。用２０Ｗ或更高的功率及更长的时间处理完整酵母细胞没有获得转化子。

参麦注射液对内皮细胞增殖和迁移的影响(英文)

背景:有报道参麦注射液具有治疗冠心病与抗肿瘤作用,但其作用机制如何?目的:从对血管生成影响角度探讨参麦抗肿瘤的作用机制。设计:设立对照的实验研究。地点和材料:浙江中医学院分子医学研究所。人癌细胞株购自中国科学院细胞生物学研究所。参麦注射液(10mL/2g):正大青春宝公司。干预:采用MTT法检测参麦注射液对牛血清和肿瘤细胞(SMMC-7721)条件培养液促进的牛主动脉内皮细胞增殖的影响;采用琼脂糖刮除法检测参麦对牛血清和肿瘤细胞(SMMC-7721)条件培养液促进的牛内皮细胞迁移的影响。培养细胞分为对照组、条件培养液组、不同浓度参麦注射液组。主要观察指标:参麦注射液对牛内皮细胞增殖和迁移的影响,参麦对条件培养液促牛内皮细胞迁移的影响。结果:无论是在含100mL/L新生小牛血清培养液中还是在肿瘤细胞条件培养液中,参麦均能明显抑制牛主动脉内皮细胞增殖,且随着剂量增加,抑制作用增强。当参麦的浓度为40mL/L时即可显著抑制牛血清促进的内皮细胞增殖,与对照组相比,差异有显著性意义(t=4.83,P<0.01),20mL/L的参麦即可明显地抑制由条件培养液促进的内皮细胞增殖,与对照组相比,差异有显著性意义(t=5.32,P<0.01)。经20mL/L参麦处理48h后,对内皮细胞迁移的抑制率为58%,与对照组相比差异有显著性意义(t=8.

姜黄对小鼠腹腔巨噬细胞mRNA合成的影响

小鼠巨噬细胞用姜黄、LDL、OX－LDL、姜黄＋LDL和姜黄＋OX-LDL共孵育培养后加入H3－Urd，测定每组的CPM值，以此反应巨噬细胞mRNA合成。实验证明姜黄非常显著地抑制巨噬细胞mRNA合成，而LDL和OX－LDL能促进巨噬细胞mRNA合成，当LDL-和OX-LDL。与姜黄共孵育时，姜黄对巨噬细胞mRNA合成亦出现明显的抑制作用。因此推测姜黄可能通过抑制巨噬细胞mRNA合成使泡沫细胞形成减少，起到预防动脉粥样硬化作用。